Virologiens historie. Prinsipper for klassifisering av virus Virologi er vitenskapen som studerer morfologi, fysiologi, genetikk, økologi og evolusjon av virus

SPØRSMÅL nr. 1 “VIRUSOLOGIENS HISTORIE. VIRUS ROLLE I INFEKTIØS PATOLOGI HOS MENNESKER."

I den første perioden visste folk ikke essensen av sykdommen, de beskrev den bare. På 1700-tallet utviklet legen Gener en vaksine mot kopper, som den ble behandlet med. Ytterligere ære går til Pasteur; rabies eksisterte på hans tid. Han beviste at rabies overføres ved å bite. Ingenting vokste på næringsmedier. Etter Pasteurs arbeid ble det funnet at infeksjonssykdommer er forårsaket av bittesmå organismer (mikrober). Ikke en eneste metode for bakteriell forskning gjorde det mulig å isolere mikrober hvis tilstedeværelse er assosiert med kopper, munn- og klovsyke og pest.

I 1931 ble det foreslått en metode for å dyrke kyllingembryoer. Denne metoden er svært sensitiv; infeksjon med spontane virus er utelukket. Den raskeste utviklingen av virologi begynte etter 1948. Enders foreslo en metode for enkeltlags celle- og vevskulturer. Denne metoden gjorde det mulig å studere mange virus og få vaksiner. Studiet av virus ble dannet til den uavhengige vitenskapen om virologi, som studerer virus og sykdommene forårsaket av dem. Generell virologi studerer naturen og opprinnelsen til virus, struktur og kjemisk sammensetning, resistens mot fysisk-kjemiske faktorer er også interaksjonen mellom virus og celle, genetikk av virus, egenskaper ved dannelsen av immunitet mot virus, generelle prinsipper for diagnose og forebygging; . Hun studerer de samme problemstillingene som generell virologi. Virus som objekter har måleenheter.

SPØRSMÅL nr. 2 «EMNE OG OPPGAVER FOR GENERELL OG PRIVAT VETERINÆR VIRUSOLOGI. HISTORIE OM OPPFINNELSEN AV VIRUS. RESULTATER AV INNENLANDS VIRUSOLOGI".

Virologi er en vitenskap som studerer naturen og opprinnelsen til virus og sykdommene de forårsaker. Generell virologi studerer naturen og opprinnelsen til virus, struktur og kjemisk sammensetning, resistens mot fysisk-kjemiske faktorer er også interaksjonen mellom virus og celle, genetikk av virus, egenskaper ved dannelsen av immunitet mot virus, generelle prinsipper for diagnose og forebygging; . Hun studerer de samme problemstillingene som generell virologi. Virus som objekter har måleenheter. Periode - folk visste ikke essensen av sykdommen, de beskrev den bare. På 1700-tallet utviklet legen Gener en vaksine mot kopper, som den ble behandlet med. Ytterligere æren går til Pasteur; rabies eksisterte på hans tid. Han beviste at rabies overføres ved å bite. Ingenting vokste på næringsmedier. Etter Pasteurs arbeid ble det funnet at infeksjonssykdommer er forårsaket av bittesmå organismer (mikrober). Ikke en eneste metode for bakteriell forskning gjorde det mulig å isolere mikrober hvis tilstedeværelse er assosiert med kopper, munn- og klovsyke og pest.

Ideen om eksistensen av et patogen som er forskjellig i naturen fra mikrober, oppsto ikke for Pasteur. Det første viruset som ble oppdaget påvirket tobakksplanter (tobakksmosaikk). På den tiden forårsaket dette viruset stor økonomisk skade. Forskere forsøkte å finne ut årsaken til denne sykdommen. Dette arbeidet ble betrodd D.I. Ivanovsky.

Som et resultat av observasjoner antydet D.I. Ivanovsky og V.V. Polovtsev først at tobakkssykdommen, beskrevet i 1886 av A.D. Mayer under navnet mosaikk, ikke er én, men to helt forskjellige sykdommer av samme plante: en av dem er hassel. rype, hvis årsak er en sopp, og den andre er av ukjent opprinnelse. D.I. Ivanovsky fortsetter sin studie av tobakksmosaikksykdom i Nikitin botaniske hage (nær Jalta) og det botaniske laboratoriet til Vitenskapsakademiet og kommer til den konklusjon at tobakksmosaikksykdom er forårsaket av bakterier som passerer gjennom Chamberlant-filtre, som imidlertid er ikke i stand til å vokse på kunstige underlag. Årsaken til mosaikksykdom kalles av Ivanovsky enten "filtrerbare" bakterier eller mikroorganismer, siden det var veldig vanskelig å umiddelbart formulere eksistensen av en spesiell verden av virus. Understreker at årsaken til tobakksmosaikksykdom ikke kunne påvises i vevet til syke planter ved hjelp av et mikroskop og ikke ble dyrket på kunstige næringsmedier.

Han grunnla virologi. Økt interesse for virologi ble forårsaket av det faktum at virussykdommer er av ledende betydning. 75 % av sykdommene er forårsaket av virus. De forårsaker enorm økonomisk skade. Etter Ivanovskys oppdagelse gjentok den danske forskeren Beyering Ivanovskys eksperimenter og bekreftet at mosaikkpatogenet passerer gjennom porselensfiltre og beviste at det er et flytende levende smittestoff. Viruset ga den navnet sitt. I 1903 ble årsakene til svinepest og smittsom anemi oppdaget. I 1915-1917 var bakterievirus bakteriofager på slutten av 40-tallet, mer enn 40 virus hadde blitt oppdaget, og i løpet av de siste 40 årene har mer enn 500 virussykdommer blitt kjent. Forskere forsøkte å få tak i virale midler.

I 1931 ble det foreslått en metode for å dyrke kyllingembryoer. Denne metoden er svært sensitiv; infeksjon med spontane virus er utelukket. Den raskeste utviklingen av virologi begynte etter 1948. Enders foreslo en metode for enkeltlags celle- og vevskulturer.

SPØRSMÅL nr. 3 "PRINSIPPER FOR MODERNE KLASSIFISERING AV VIRUS, HOVEDGRUPPER AV VIRUS."

Den moderne klassifiseringen av virus er universell for virus fra virveldyr, virvelløse dyr, planter og protozoer. Den er basert på de grunnleggende egenskapene til virioner, hvorav de ledende er de som karakteriserer nukleinsyre, morfologi, genomstrategi og AG-egenskaper. Fundamentale egenskaper er plassert på 1. plass, siden virus med lignende AG-egenskaper også har en lignende type nukleinsyre, lignende morfologiske og biofysiske egenskaper. En viktig funksjon for klassifisering, som tas i betraktning med strukturelle egenskaper, er strategien til det virale genomet, som forstås som metoden for reproduksjon som brukes av viruset, bestemt av egenskapene til dets genetiske materiale. AG og andre biologiske egenskaper er egenskaper som ligger til grunn for dannelsen av en art og har betydning innenfor slekten. Den moderne klassifiseringen er basert på følgende hovedkriterier: 1) type nukleinsyre (RNA eller DNA), dens struktur (antall tråder); 2) tilstedeværelsen av en lipoproteinmembran; 3) viral genomstrategi; 4) størrelse og morfologi av virion, type symmetri, antall kapsomerer; 5) fenomener med genetiske interaksjoner; 6) utvalg av mottakelige verter; 7) patogenisitet, inkludert patologiske endringer i celler og dannelse av intracellulære inneslutninger; 8) geografisk fordeling; 9) metode for overføring; 10) AG-eiendommer. Basert på de oppførte egenskapene er virus delt inn i familier, underfamilier, slekter og typer. En rekke regler er utviklet for å organisere navn på virus. Familienavnene ender på "viridae", "virinae" "virus". Navnet tillater de vanlige latiniserte betegnelsene, tall og typebetegnelser, forkortelser, bokstaver og deres kombinasjoner.

SPØRSMÅL nr. 4 "KJEMISK SAMMENSETNING OG FYSISK STRUKTUR AV VIRUS. KONSEPT AV VIRION, CAPSIDS, CAPsomeres. TYPE SYMMETRI.

Virus består av et stykke genetisk materiale, enten DNA eller RNA, som utgjør det kjerne virus, og et beskyttende proteinskall som omgir denne kjernen, som kalles kapsid. En fullt dannet smittsom partikkel kalles virion. Noen virus, som herpes eller influensavirus, har også et ekstra lipoprotein skall, som oppstår fra vertscellens plasmamembran. I motsetning til alle andre organismer har ikke virus en cellulær struktur. Skallet av virus er ofte konstruert av identiske repeterende underenheter - kapsomerer. Kapsomerer danner strukturer med høy grad av symmetri som er i stand til å krystallisere. Dette gjør det mulig å få informasjon om deres struktur ved bruk av både krystallografiske metoder basert på bruk av røntgenstråler og elektronmikroskopi. Så snart virusunderenheter dukker opp i vertscellen, viser de umiddelbart evnen til å sette seg sammen til et helt virus. Selvmontering er også karakteristisk for mange andre biologiske strukturer og er av grunnleggende betydning i biologiske fenomener. En uunnværlig komponent i den virale partikkelen er en av to nukleinsyrer, protein- og askeelementer. Disse tre komponentene er felles for alle virus uten unntak, mens de resterende lipidene og karbohydratene ikke er inkludert i alle virus. Virus, som i tillegg til protein og nukleinsyre, også inneholder lipider og karbohydrater, tilhører som regel gruppen av komplekse virus. I tillegg til proteinene som utgjør nukleoproteinet "kjernen", kan virioner også inneholde et virus - spesifikke proteiner som er bygget inn i plasmamembranene til infiserte celler og dekker viruspartikkelen når den forlater cellen eller "knopper av" fra dens overflate. I tillegg har noen innkapslede virus et submembranmatriseprotein mellom konvolutten og nukleokapsiden. Den andre store gruppen av virusspesifikke proteiner består av ikke-kapsid virale proteiner. De er hovedsakelig relatert til syntesen av virionnukleinsyrer. Den fjerde komponenten som noen ganger finnes i rensede virale preparater er karbohydrater (i en mengde som overstiger sukkerinnholdet i nukleinsyren). De elementære kroppene til influensaviruset og den klassiske fuglepest inneholder opptil 17 % karbohydrater.

I henhold til morfologiske egenskaper er alle virus delt inn i:

1) Stangformet

2) Kuleformet

3) Kuboidal

4) Kølleformet

5) Trådaktig

De viktigste er de første 4, filamentøse i mellomformen.

Konseptet med typen symmetri.

Avhengig av plasseringen av kapsomerer i proteinskallet, er alle virus delt inn i 3 grupper:

1) Spiraltype

2)Kubisk type

3) Kombinert

1 - har virus som er store i størrelse og har høy polymorfisme. Kapsomerene deres er ordnet i form av en spiral med forskjellige diametre og har derfor oftest et sfærisk skall, noen ganger er de dekket med et andre skall (peplos). Nukleinsyre er vridd som en fjær og ordnet i spoler i form av proteinmolekyler.

2 - i slike virus er kapsomerer ordnet i form av et vanlig polyeder (icosahedron). Den er vridd til en ball og er plassert i midten.

I de fleste virus har kapsomerer form av 5-6 fasetterte prismer.

3 - denne typen symmetri er karakteristisk for bakteriofager. Alle varianter av bakteriofager har et hode med kubisk symmetri og en hale med en spiralstruktur. Overflaten av hodet er dekket med et proteinskall, som består av homogene proteinunderenheter. En av nukleinsyrene er lokalisert i hulrommet i hodet. Haleenden består av en hul stang. Den avsluttes med en sekskantet plate i enden. Haleenden er omgitt av en krage, til hvilken det er festet en kappe som dekker hele skaftet.

Kjemisk sammensetning av virus.

Metoder for rensing og konsentrasjon av virus ved utsalting, adsorpsjon, ultrafiltrering og sedimentering gjorde det mulig å studere den kjemiske sammensetningen. Virus inneholder proteiner og en av nukleinsyrene. Virus av store og mellomstore størrelser inneholder også lipider, karbohydrater og noen andre organiske og uorganiske forbindelser.

Mesteparten av proteinet og tilhørende lipider og karbohydrater er membranen. Stoffene som utgjør virus har egenskaper, både kjemisk og biologisk.

Proteiner – hoveddelen (20 AA).

Betydningen av virale proteiner er deres beskyttende funksjon (kapsiddannelse).

Viruset inneholder enzymer av proteinnatur (adsorpsjon, målrettingsfunksjon) og utstyrt med immunegenskaper (bestem antigene egenskaper).

Funksjoner av virale proteiner:

1. De har egenskapen til selvmontering (ettersom de akkumuleres, aggregerer virale proteiner).

2. De har selektiv sensitivitet i forhold til fysiske og kjemiske faktorer.

3. Ikke gjennomgå hydrolyse under påvirkning av proteolytiske enzymer.

Proteiner utgjør 50-75% av massen av virioner.

Celler infisert med det virale genet koder for syntesen av 2 proteingrupper:

Strukturell===, ===ikke-strukturell===

1.Strukturell - mengden i virion, avhengig av kompleksiteten i organisasjonen av virion. Strukturelle proteiner i gruppe 2 er delt inn: a. kapsid b. superkapsid (peplomerer).

Komplekse virus inneholder begge typer proteiner. En rekke slike virus inneholder enzymer i kapsidene sine som utfører transkripsjon og replikasjon.

Superkapsidproteiner danner ryggrader (opp til 7-10 nm). Hovedfunksjonen til glykoproteiner er interaksjon med spesifikke cellereseptorer. En annen funksjon er deltakelse i syntesen av cellulære og virale membraner.

"Adressefunksjon" er utviklet i evolusjonsprosessen, det er et søk etter en sensitiv celle.

Det realiseres gjennom tilstedeværelsen av spesielle proteiner som gjenkjenner spesielle reseptorer på cellen.

Ikke-strukturelle (midlertidige) virale proteiner er forløpere for virale proteiner, DNA/RNA-polymerasesyntese-enzymer, sikrer transkripsjon og replikasjon av det virale genomet, regulatoriske proteiner, polymeraser.

Lipider - i komplekse virus finnes i superkapsiden (fra 15 til 35 prosent). Lipidkomponenten stabiliserer strukturen til viruspartikkelen.

Karbohydrater – opptil 10-13%. De er en del av glykoproteiner. Spille en viktig rolle i proteinstruktur og funksjon.

Nukleinsyrer er en konstant komponent. Komplekse polymerforbindelser. Isolert av Miescher i 1869 fra leukocytter. I motsetning til bakterier inneholder de kun 1 aminosyre. Strukturelt er nukleinsyrer forskjellige.

1.Lineær dobbel helix med åpne ender.

2. Lineær dobbel helix med lukkede ender.

3.Lineær enkeltspiral.

4.Ring single-spiral.

1.Lineær enkeltspiral.

2.Lineær fragmentert.

3. Ring enkelt spiral.

5.Lineær dobbelthelix fragmentert.

SPØRSMÅL nr. 5 “VIRURSRESISTENS MOT FYSISKE OG KJEMISKE FAKTORER. PRAKTISK BRUK AV DISSE EIENDOMMENE."

Ulike grupper av virus har ulik motstand i det ytre miljøet. De minst resistente virusene er de som har lipoproteinmembraner, de mest resistente er isometriske virus. Dermed inaktiveres ortomyxovirus og paramyxovirus på overflater i løpet av få timer, mens poliovirus, adenovirus og reovirus forblir smittsomme i flere dager. Det finnes imidlertid unntak fra denne regelen. Dermed er koppeviruset motstandsdyktig mot uttørking og vedvarer i ekskrementer i mange uker og måneder. Hepatitt B-viruset er motstandsdyktig mot uønskede ytre faktorer og beholder sin aktivitet i serum selv etter kortvarig koking. Følsomheten til virus for ultrafiolett og røntgenbestråling avhenger først og fremst av størrelsen på genomet deres. Følsomheten til virus for formaldehyd og andre kjemikalier som inaktiverer genetisk materiale, avhenger av mange forhold, inkludert tettheten av pakking av nukleinsyren i proteinkassen, størrelsen på genomet og tilstedeværelsen eller fraværet av ytre skall. Virus med lipoproteinkonvolutter er følsomme for eter, kloroform og vaskemidler, mens enkelt konstruerte isometriske og stavformede virus er motstandsdyktige mot deres virkning. Et viktig trekk ved virus er følsomhet for pH. Det finnes virus som er resistente mot sure pH-verdier (2,2-3,0), for eksempel virus som forårsaker tarminfeksjoner og kommer inn i kroppen gjennom ernæring. Imidlertid inaktiveres de fleste virus ved sure og alkaliske pH-verdier.

SPØRSMÅL nr. 6 “VIRALE NUKLEINSYRER. DERES VARIENTER, STRUKTURER, GRUNNLEGGENDE EGENSKAPER.

Virale DNA-molekyler kan være lineære eller sirkulære, dobbelttrådete eller enkelttrådete langs hele lengden, eller enkelttrådete bare i endene. De fleste nukleotidsekvenser forekommer bare én gang i det virale genomet, men det kan være repeterende eller overflødige regioner i endene. Det er også store forskjeller i størrelsen på genomet i strukturen til de terminale områdene av viralt DNA. Dyrevirus gjennomgår nesten ingen modifikasjoner av deres DNA. For eksempel, selv om DNA fra vertsceller inneholder mange metylerte baser, har virus i beste fall bare noen få metylgrupper per genom. Størrelsen på RNA-virusvirioner varierer sterkt - fra 7.106 dalton i picornavirus til >2.108 dalton i retrovirus; men størrelsen på RNA og derfor mengden informasjon det inneholder varierer i mye mindre grad. RNA av picornavirus er sannsynligvis den minste kjente, som inneholder omtrent 7500 nukleotider, og RNA fra paramyxovirus er kanskje den største, nesten 15 000 nukleotider. Tilsynelatende replikerer alle uavhengig. Nukleinsyrer er en konstant komponent. Komplekse polymerforbindelser. Isolert av Miescher i 1869 fra leukocytter. I motsetning til bakterier inneholder de kun 1 aminosyre. Strukturelt er nukleinsyrer forskjellige.

1. Lineær enkelt-helix 2. Lineær fragmentert.

SPØRSMÅL nr. 7 "VIRUSPROTEINER, DERES FUNKSJONER (KJENNSKAP FOR EGENSKAPER TIL NEURAMINIDASER OG ANTIGENE TIL MIXOVIRUSER)."

De representerer en ekstremt heterogen klasse av biologiske makromolekyler. AK er essensielle komponenter i proteiner. Alpha-AA er relativt enkle organiske molekyler. Molekylvekten til AK ligger i området 90-250D. Polypeptidet kan inneholde fra 15 til 2000 AA. De vanligste polypeptidene som veier fra 20 til 700 kDa, bestående av 100-400 AA. Virale proteiner - proteiner kodet av virusgenomet - syntetiseres i den infiserte cellen. Basert på funksjonen til lokalisering, struktur og regulering av syntese, er virale proteiner delt inn i strukturelle og ikke-strukturelle; enzymer, forløpere, histonlignende kapsidproteiner; membran, transmembran.

Strukturelle proteiner– alle proteiner som er en del av modne ekstracellulære virioner. De utfører en rekke funksjoner i virion: 1) beskyttelse av NK mot ytre skadelige påvirkninger; 2) interaksjon med membranen til sensitive celler under den første fasen av deres infeksjon; 3) interaksjon med viral NK under og etter innpakning i kapsiden; 4) interaksjon med hverandre under selvmontering av kapsid; 5) organisere penetrering av viruset inn i en sensitiv celle. Disse 5 funksjonene er iboende i de strukturelle proteinene til alle virus uten unntak. Alle funksjoner kan realiseres av ett protein. 6) evne til å bli ødelagt under frigjøringen av NK; 7) organisering av utgang fra den infiserte cellen under dannelsen av virion. 8) organisering av "smelting" og fusjon av cellemembraner.

Proteiner kan også ha evnen til å katalysere visse biokjemiske reaksjoner: 9) RNA-avhengig RNA-polymeraseaktivitet. Denne funksjonen utføres av de strukturelle proteinene til alle virus hvis virioner inneholder RNA, som ikke spiller rollen som mRNA; 10) RNA-avhengig DNA-polymeraseaktivitet - denne funksjonen utføres av spesielle retrovirale proteiner kalt reversetaser; 11) beskyttelse og stabilisering av viral NK etter frigjøring fra kapsiden i den infiserte cellen.

Avhengig av plasseringen av et bestemt protein i virion, skilles grupper av proteiner ut: A) Kapsidproteiner - i virionene til komplekst organiserte virus kan disse proteinene utføre bare 2-3 funksjoner - beskyttelse av NK, evnen til å selv. -montere og ødelegge under utgivelsen av NK. I virionene til enkle virus er funksjonene deres vanligvis mer forskjellige. B) Proteiner i det virale superkapsidskallet - deres rolle reduseres hovedsakelig til å organisere spiring av virioner, evnen til å sette sammen selv, samhandle med membranen til sensitive celler, organisere penetrasjon inn i en sensitiv celle. C) Matriseproteiner er proteiner i det mellomliggende laget av virioner, lokalisert umiddelbart under superkapsidskallet til noen virus. Deres hovedfunksjoner: organisering av spirende, stabilisering av virionstrukturen på grunn av hydrofobe interaksjoner, mediering av forbindelsen mellom superkapsidproteiner og kapsidproteiner. D) Virale kjerneproteiner - representert hovedsakelig av enzymer. Virus med flerlags kapsider kan også ha en beskyttende rolle. E) Proteiner assosiert med NK i det innerste laget av virioner.

Ikke-strukturelle proteiner– alle proteiner kodet av det virale genomet, men ikke inkludert i virionet. De har blitt studert mindre godt, noe som skyldes de uforlignelig større vanskelighetene som oppstår i deres identifikasjon og isolasjon sammenlignet med strukturelle proteiner. Ikke-strukturelle proteiner, avhengig av deres funksjon, er delt inn i 5 grupper: 1) Regulatorer av viralt genomekspresjon - påvirker direkte det virale NK, forhindrer syntesen av andre virale proteiner, eller omvendt, utløser deres syntese. 2) Forløpere av virale proteiner - er forløpere til andre virale proteiner som dannes av dem som et resultat av komplekse biokjemiske prosesser. 3) Ikke-funksjonelle peptider - dannes i en infisert celle. 4) Hemmere av cellulær biosyntese og indusere av celleødeleggelse - disse inkluderer proteiner som ødelegger cellulært DNA og mRNA, modifiserer cellulære enzymer, og gir dem virusspesifikk aktivitet. 5) Virale enzymer - enzymer kodet av det virale genomet, men ikke inkludert i virionene.

SPØRSMÅL nr. 8 “PERIODER OG STADIER AV VIRUSREPRODUKSJON. TYPER INTERAKSJON."

Interaksjon av virus med vertsceller og virusreproduksjon.

Virus går gjennom en kompleks utviklingssyklus i en celle. Morfogenese av virus representerer hovedstadiet i denne utviklingen og består av formative prosesser som fører til dannelsen av et virion som avslutningen på formen for virusutvikling. Ontogenese og reproduksjon av utviklingen av viruset reguleres av genomet.

På 50-tallet ble det slått fast at formering av viruset skjer gjennom reproduksjon, d.v.s. reproduksjon av nukleinsyrer og proteiner etterfulgt av virionsammensetning. Disse prosessene skjer i ulike deler av cellen, for eksempel i kjernen og cytoplasma (disjunktiv reproduksjonsmåte). Viral reproduksjon er en unik form for uttrykk for en fremmed infeksjon i cellene til mennesker, dyr, insekter og bakterier.

Morfogenese er regulert av morfogenetiske gener. Det er et direkte proporsjonalt forhold mellom kompleksiteten til virion-ultrastrukturen og dens morfogenese. Jo mer kompleks organisering av virion, jo lengre er utviklingsveien til viruset. Hele denne prosessen utføres ved hjelp av spesielle enzymer. Fordi Virus har ikke egen metabolisme og krever derfor enzymer. Imidlertid har over 10 enzymer, forskjellige i opprinnelse og funksjonell betydning, blitt funnet i virus.

Etter opprinnelse: virion, virusindusert, cellulær, modifisert av virus. Førstnevnte er en del av mange DNA- og RNA-virus. DNA-avhengig RNA-polymerase, proteinkinase, ATPase, ribonuklease, RNA-avhengig RNA-polymerase, eksonuklease og andre.

Virionformer inkluderer: hemoglutinin og neuraminidase, lysozym.

Virusinduserende enzymer er enzymer hvis struktur er kodet i genomet, og syntese skjer på vertsribosomet - tidlige virionproteiner.

Cellulær - inkluderer enzymer fra vertscellen, er ikke virusspesifikke, men når de interagerer med virus, kan aktiviteten modifiseres.

I henhold til deres funksjonelle betydning er enzymer delt inn i 2 grupper:

— Delta i replikering og transkripsjon;

— Neuraminidase, lysozym og ATPase, som bidrar til virusets penetrering inn i cellen og utgang av modne virioner fra cellen.

Reproduksjon av virioner er preget av en endring av stadier:

I følge moderne data er det 3 hovedperioder i reproduksjonssyklusen:

1. Innledende (forberedende) 2. Midt (latent) 3. Finale (finale)

Hver periode inkluderer en rekke stadier:

Første etappe

1.Adsorpsjon av viruset på cellen.

2. Penetrering inn i cellen.

3.Deproteinisering (frigjøring av nukleinsyre).

Andre trinn

1.Biosyntese av tidlige virale proteiner

2.Biosyntese av virale komponenter

Tredje trinn

1. Dannelse av modne virioner

2. Utgang av modne virioner fra cellen.

1.Adsorpsjon er en fysisk og kjemisk prosess som er en konsekvens av forskjellen i ladninger. Dette stadiet er reversibelt, dets utfall påvirkes av surheten i miljøet, temperaturen og andre prosesser.

Hovedrollen i virusadsorpsjon spilles av interaksjonen mellom viruset og komplementære cellereseptorer. Av kjemisk natur tilhører de mukopolyproteiner. Adsorpsjonshastigheten påvirkes av hormoner som virker på reseptorene. Adsorpsjon av viruset kan ikke forekomme, noe som skyldes forskjellig følsomhet av celler for virus. Følsomhet på sin side bestemmes av:

Tilstedeværelsen i cellemembranen og cytoplasmaet av enzymer som kan ødelegge membranen og frigjøre nukleinsyre.

Tilstedeværelsen av enzymer, materiale som sikrer syntesen av virale komponenter.

2. Viruspenetrasjon inn i cellen:

Viruset trenger inn på 3 måter - ved direkte injeksjon (typisk for fager); ved å ødelegge cellemembranen (fusjonsvei - typisk for plantevirus); ved pinocytose (karakteristisk for virveldyrvirus).

3. Reproduksjon av DNA-holdige virus.

4. Utgang av virion fra cellen:

1. De lekker gjennom cellemembranen og er dekket med en superkapsid, som inkluderer cellekomponenter: lipider, polysakkarider. I dette tilfellet beholder cellen sin vitale aktivitet og dør deretter. I noen tilfeller, under reproduksjonsprosessen, kan prosesser skje over flere år, men vital aktivitet opprettholdes. Med denne metoden forlater modne virioner cellen gradvis og over en relativt lang periode. Denne banen er typisk for komplekse virus som har et dobbelt skall.

Unormale virus.

Under reproduksjonsprosessen dannes ulike unormale virus. Gjennom innsatsen til akademiker Zhdanov har det de siste årene blitt oppdaget pseudovirus, bestående av et RNA-virus og celleproteiner som danner kapsiden. De har smittsomme egenskaper, men på grunn av kapsidens særegenhet er de ikke mottakelige for virkningen av antistoffer som danner en respons på dette viruset.

Dannelsen av slike virus forklares av langvarig virustransport i nærvær av spesifikke antistoffer i kroppen.

Årsakene til dannelsen av slike virioner er:

1.Høy multiplisitet, som et resultat av at cellen ikke er i stand til å gi alle sine avkom energimateriale.

2. Virkningen av interferon - det påvirker syntesen av DNA- og RNA-virus.

SPØRSMÅL nr. 9 “SÆRLIGHETER VED BIOSYNTESE AV DNA-INHOLDENDE VIRUS. KONSEPTET TRANSKRIPSJON OG KRINGKASTING.»

Transkripsjon - omskrivning av DNA til RNA - utføres ved hjelp av enzymet RNA-polymerase, hvis produkter er biosyntesen av mRNA. DNA-virus som formerer seg i kjernen bruker cellulær polymerase for transkripsjon. RNA-holdige virus produseres av genomet selv. I noen RNA-holdige virus utføres overføringen av genetisk informasjon i henhold til RNA-RNA-proteinformelen. Denne gruppen av virus inkluderer picornovirus og cornovirus.

Proteinsyntese skjer som et resultat av oversettelse til RNA.

Under påvirkning av enzymer i DNA-holdige virus syntetiseres mRNA, og mRNA sendes til ribosomene til den sensitive cellen. Syntesen av tidlige virionproteiner begynner på ribosomer av cellen (utstyrt med egenskapene til enzymer, blokkerer cellulær metabolisme).

Tidlige virionproteiner gir opphav til dannelsen av tidlige virionsyrer.

Ettersom tidlige virionproteiner akkumuleres, blokkerer de seg selv og prosessen omorganiseres på det ribosomale apparatet. Virioner settes sammen og de nydannede virionene forlater modercellen.

SPØRSMÅL nr. 10 "TYPER SAMMENSAKSJON, HOVEDRESULTATER AV VIRUS SAMMENHANDLING MED EN CELLE."

1) Produktiv interaksjon - når virus som formerer seg i en celle danner en ny generasjon 2) Abort - når reproduksjonssykluser avbrytes på et tidspunkt. 3) Lytisk reaksjon - når cellen dør etter dannelsen av viruset. 4) Latent reaksjon - når en infisert celle beholder sin levedyktighet i lang tid. 5) Integrasjon - når genomene til virus og celler kombineres. I dette tilfellet skjer reproduksjon av genomer i celler og er underlagt generell regulering. Reproduksjon av virus forårsaker patologiske endringer i de berørte cellene, uttrykt av funksjonelle og morfologiske forstyrrelser i cellene. Mulige utfall av prosessene for interaksjon mellom ulike virus og celler kan deles inn i 5 typer: 1) Degenerasjon av celler - fører til deres død. I dette tilfellet får cellen en uregelmessig rund form, blir avrundet, blir tettere, granularitet vises i cytoplasma, rynker og fragmentering av kjernene. 2. Dannelsen av symplaster er multinukleat. ansamlinger utenfor cellen. stoffer. 3) Celletransformasjon – dvs. dannelse av foci av tilfeldig tredimensjonal vekst. Celler i disse fociene får nye arvelige egenskaper, og hoper seg kontinuerlig opp på hverandre (svulster). 4. Arr. ekstracellulære inneslutninger, som er produkter av cellereaksjonen til den virale partikkelen. 5) Latent infeksjon er en slags tilstand. likevekt mellom viruset og cellen., når infeksjonen ikke viser seg på noen måte. Ubetydelig produksjon av viruset er observert, uten celleskade.

SPØRSMÅL nr. 11 "FASER AV SAMSPILLING AV RNA-INNHOLDENDE VIRUS MED EN CELLE."

Se spørsmål nr. 8

SPØRSMÅL nr. 12 «PATOGENESE AV VIRALE INFEKSJONER

Tropisme er tendensen til et virus til et eller annet infeksjonssted. For luftveisinfeksjoner er viruset lokalisert i nasopharynx, luftrør og lunger; for enterovirus - i avføring; for nevrotrope - i GM eller SM; med dermotropic - i huden.

Patogenese av virusinfeksjoner.

Patogenese er forstått som et sett med prosesser som forårsaker en sykdom, dens utvikling og utfall.

Patogenese bestemmes av:

1. Tropisme av viruset

2.Antall smittefarlige partikler

3. Cellerespons på infeksjon.

4. Kroppens respons på endringer i celler og vev.

5. Reproduksjonshastighet.

Tropismen til virus er basert på følsomheten til visse celler for viruset.

Patogenese bestemmes av hovedmekanismene for interaksjon mellom virus og celler:

Atrofi eller dystrofi (CPD)

Dannelse av inkluderingsorganer

Dannelse av symplaster og syncytier

Transformasjon

Latent (kronisk) infeksjon.

Patogenese på cellulært nivå - dette inkluderer CPD (synlige morfologiske endringer i celler under påvirkning av et bestemt viralt middel). Naturen til CPP er forskjellig og avhenger av:

1. Type celle

2.Biokjemiske egenskaper ved viruset

3. Infeksiøs dose

Naturen til CPP vurderes ved hjelp av et 4-punkts krysssystem og endringer tas i betraktning når cellekulturer brukes til titrering (dvs.).

Patogenese på organismenivå.

Infeksjonstilstanden er som enhver biologisk prosess dynamisk. På den ene siden inkluderer den smittsomme prosessen: introduksjon, reproduksjon og spredning av patogenet i kroppen, så vel som den patogene virkningen, og på den annen side kroppens reaksjon på denne handlingen.

Den patogene effekten av patogenet kan være annerledes. Det manifesterer seg i form av en smittsom sykdom av varierende alvorlighetsgrad, hos andre uten uttalte kliniske tegn, hos andre manifesterer den seg bare ved endringer identifisert av virologiske, biokjemiske og immunologiske metoder. Det avhenger av:

Mengden og kvaliteten på patogenet som har trengt inn i en mottakelig organisme, forholdene i det indre og ytre miljøet som bestemmer motstanden til dyret og er preget av samspillet mellom mikro- og makroorganismer. Basert på arten av interaksjonen mellom patogenet og organismen, er det 3 former:

1.en infeksjonssykdom er en infeksjonsprosess preget av visse kliniske tegn, samt lidelser, funksjonelle forstyrrelser og morfologisk vevsskade.

2. Mikrobiell bærer er en immunologisk subinfeksjon. En differensiert tilnærming til ulike smitteformer gjør det mulig å diagnostisere infeksjonen korrekt og identifisere infiserte dyr i en dysfunksjonell besetning. Patogenesen til enhver infeksjonssykdom bestemmes av patogenets spesielle virkning og kroppens responser, avhengig av forholdene der interaksjonen mellom mikro- og makroorganismer oppstår. I dette tilfellet er rutene for penetrering og distribusjon av patogenet av ingen liten betydning. Patogenporter: hud, slimhinner, genitourinary system, placenta.

Hver type patogen har evolusjonært tilpasset seg slike introduksjonsveier, som gir gunstige forhold for reproduksjon og spredning - inngangsporten for hver infeksjon er preget av spesifisitet. For å utføre forebygging er det nødvendig å ta hensyn til spesifisiteten til infeksjonsporten. For eksempel, med INAN, trenger patogenet inn i huden gjennom et insektbitt. Ved munn- og klovsyke er hovedveien ernæringsmessig ved rabies, er det gjennom et bitt.

Klassifisering av virusinfeksjoner.

Det er autonome og integrerte infeksjoner. Autonom - i dette tilfellet replikerer det virale genomet uavhengig av det cellulære genomet. Autonom infeksjon er typisk for de fleste virus.

Integrerte infeksjoner - virusgenomet inngår i cellegenomet, dvs. integrert i det cellulære genomet og replikert med det. I dette tilfellet replikerer det virale genomet og fungerer som en integrert del av det cellulære genomet. Det kan integrere både hele genomet og en del. Ved integrerte infeksjoner er det ingen samling av virale partikler eller utgang.

Autonom infeksjon - en celle får noen ganger evnen til å dele seg ubegrenset som et resultat av forstyrrelse av reguleringsmekanismene som kontrollerer deling. Dette er oftere observert ved onkogene infeksjoner.

Produktive og abortive infeksjoner:

1. Produktiv – ender med utgivelsen av smittsomt avkom.

2. Mislykket – det dannes ikke smittsomme avkom, eller det er få av dem.

Kursformer - både produktive og abortive - kan forekomme i akutte og kroniske former. En akutt infeksjon er en infeksjon som resulterer i at cellen enten blir frisk eller dør. Akutt infeksjon på cellenivå kan være cytolytisk (når celledød inntreffer).

En kronisk infeksjon er en infeksjon der en celle fortsetter å produsere viruspartikler i lang tid og overfører denne evnen til datterceller. Oftere tar en abortiv infeksjon en kronisk form fordi viralt materiale akkumuleres og overføres til dattercellen.

Blandet infeksjon - en celle er infisert med to eller flere forskjellige virus, som et resultat av at to eller flere smittsomme prosesser kan kombineres i cellen. Det er flere mulige alternativer for virusinteraksjon under en blandet infeksjon:

1. Interferens - ett virus undertrykker handlingen til et annet.

2. Komplementering (opphøyelse) - ett virus forsterker effekten av et annet.

Klassifisering av virusinfeksjoner på organismenivå.

Klassifiseringen er basert på:

1. Generalisering av viruset

2. Varighet av infeksjon

3. Manifestasjon av kliniske symptomer

4. Utslipp av virus i miljøet

En av formene kan forvandles til en annen (for eksempel fokal til generalisert, akutt til kronisk).

Fokal infeksjon.

Viruset virker nær infeksjonens inngangsport på grunn av lokal reproduksjon. De har en kortere latent periode sammenlignet med generaliserte.

Generaliserte infeksjoner.

Etter en begrenset periode med reproduksjon i primære foci, oppstår generalisering av infeksjoner - virus trenger inn i andre systemer, for eksempel munn- og klovsyke, polio og kopper.

Akutt infeksjon.

Det varer i en kort periode og slippes ut i miljøet. Ender med død eller bedring.

Vedvarende infeksjon.

Med langvarig interaksjon av viruset med kroppen. Det kan være latent, kronisk, sakte.

Latent infeksjon - er ikke ledsaget av frigjøring av viruset i miljøet under visse forhold kan det bli akutt og kronisk.

For influensa, sepsis, AIDS, etc.

Kronisk infeksjon.

Dette er en langsiktig prosess. Karakterisert av perioder med remisjon (adenovirus, herpes).

Langsomme infeksjoner er en slags interaksjon mellom et virus og en fag og er preget av lange inkubasjonsperioder.

Smittekilder.

Når du studerer en smittsom sykdom, er det viktig å vite kilden, stedet for permanent opphold og reproduksjon, spredningsveier, sted og tidspunkt for bevaring, forekomst i det ytre miljø, metoder for overføring fra syk til frisk.

Naturmiljøet er en levende organisme, her finner den alle forutsetninger for eksistens. Varigheten av virusoppholdet varierer mye og avhenger av kroppens biologiske egenskaper og reaktivitet. Fra forholdene for patogenese. Smittekilder er kun infiserte organismer. De spiller bare en rolle i overføringsprosessen. De fleste dyr skiller ut virus i ekskrementer, sekreter, blod, avløp og sputum. Ved de fleste virusinfeksjoner er patogenesen basert på viremi (munn- og klovsyke, pest osv.). Ved disse sykdommene frigjøres viruset på alle mulige måter. I kroniske tilfeller er viral utskillelse mindre intens, men kan bli langvarig. For virussykdommer er lokalisering begrenset til en måte: lungebetennelse - med dråper sputum. Den mest intense frigjøringen av viruset til det ytre miljøet observeres i den akutte perioden av sykdommen, men i en rekke sykdommer forekommer det også i inkubasjonsperioden. Asymptomatiske infeksjoner oppstår ved vaksinering med levende vaksiner.

SPØRSMÅL nr. 13 «REGLER FOR INNSAMLING AV SYKEMATERIALE FRA SYKE OG DØDE DYR VED MENSTENTE VIRALE SYKDOMMER. TRANSPORT OG FORBEREDELSE AV DET FOR VIRUSOLOGISKE STUDIER.

Materiale til forskning fra syke, døde eller tvangsdrepte dyr bør tas så raskt som mulig etter at det har vist seg tydelige tegn på sykdommen eller senest 2-3 timer etter klinisk død eller slakt. Dette skyldes det faktum at umiddelbart etter sykdommen eller i løpet av de første 1-2 dagene er tarmens barriererolle betydelig svekket, noe som sammen med økt permeabilitet av blodkar bidrar til spredning av tarmfloraen. I tillegg, ettersom den smittsomme prosessen fortsetter og til og med blir dypere, kan mengden virus reduseres som følge av påvirkningen fra kroppens forsvarsmekanismer. Når man tar materiale for virusisolering, bør man gå ut fra patogenesen til infeksjonen som studeres (inngangsport, spredningsveier for viruset i kroppen, steder for dets reproduksjon og utskillelsesveier). For luftveisinfeksjoner tas nasofaryngeale vattpinner, nasale og faryngeale vattpinner for å isolere virus; for enterovirus - avføring; med dermotropiske - friske hudlesjoner. Ulike ekskrementer og sekreter, deler av organer, blod og lymfe kan tjene som materialer for å isolere viruset. Blod tas fra halsvenen hos griser, fra halespissen eller øret. Vasking fra konjunktiva, fra neseslimhinnen, fra den bakre veggen av svelget, rektum og cloaca hos fugler tas med sterile bomullspinner og senkes ned i penicillinampuller. Når du tar materiale fra nasopharynx, kan du bruke enheten designet av Thomas og Scott. Spytt som strømmer fra munnen kan samles direkte inn i et reagensrør. Urin samles opp ved hjelp av et kateter i en steril beholder. Avføring fjernes fra endetarmen med en slikkepott eller pinne og legges i et sterilt rør. Vesikulær væske kan samles opp med en sprøyte eller Pasteurpipette i et sterilt rør. Veggene til kreftsår og skorper fra overflaten av huden fjernes med en pinsett. Etter dyrets død er det viktig å ta organbiter så raskt som mulig, fordi... Med mange virusinfeksjoner observeres fenomenet post-mortem autosterilisering, som et resultat av at viruset kanskje ikke blir oppdaget i det hele tatt eller mengden vil være veldig liten. Deretter plasseres det patologiske materialet i lave temperaturer (tørris + alkohol; snø + salt) eller glyserin på ICH. Patentmateriale skal være utstyrt med en pålitelig og tydelig etikett. Du må skrive ned hvilket materiale som ble hentet fra hvilket dyr. På termosen henges en merkelapp av papp eller kryssfiner med PM-prøver, som angir gård, type dyr, type materiale og dato. Termosen skal forsegles og leveres med ekspress. Det anbefales at prøver levert til laboratoriet brukes umiddelbart for virusisolering. I laboratoriet blir det resulterende patologiske materialet frigjort fra konserveringsmidler, tint, vasket fra glyserin, veid og målt. Noen blir tatt for forskning, noen i kjøleskapet. Forberedelsen av organer og vev utføres som følger: viruset frigjøres fra cellene i organer og vev - materialet knuses grundig og males i en morter med steril kvartssand. En 10 % suspensjon tilberedes vanligvis fra det malte materialet i Hanks eller fosfatbuffer. Suspensjonen sentrifugeres ved 1500-3000 rpm, supernatanten suges av og frigjøres fra mikroflora ved behandling med antibiotika (penicillin, nystatin). Suspensjonen eksponeres for AB i minst 30-60 minutter ved romtemperatur, deretter utsettes materialet for bakteriologisk kontroll ved inokulering på MPA, MPB, MPPB, Sabourauds medium. Suspensjonen lagres ved minus 20-minus 70 C.

SPØRSMÅL nr. 14 "METODER FOR BEVARING AV VIRUS OG DERES PRAKTISKE BETYDNING."

Følgende metoder for bevaring av virus brukes:

1) ved oppbevaring av viralt materiale (biter av organer eller vev) brukes ofte glyserin (50 % løsning i ICN), som har en bakteriostatisk effekt og samtidig beskytter virus. I dette tilfellet kan den lagres i flere måneder ved 4C.

2) virus oppbevares oftest i kjøleskap som gir temperaturer på -20, -30, -70C. Ved denne temperaturen mister noen virus sin smitteevne relativt raskt uten tilsetning av beskyttende stoffer. Tilsetning av inaktivert blodserum eller skummet melk eller 0,5-1,5 % gelatin har god beskyttende effekt ved frysing og lagring av virus.

3) Hurtigfrysing til minus 196C med flytende nitrogen. Virus følsomme for lave pH-verdier bør fryses i væsker som ikke inneholder monobasiske fosfater.

4) Lyofilisering - frysetørking under vakuumforhold - er en veldig god hermetikkmetode. I lyofilisert form kan virus lagres i flere år.

SPØRSMÅL nr. 15 «ARBEIDSREGLER I ET VIRUSOLOGILABORATORIUM. SIKKERHETSFORANSTALTNINGER NÅR DU ARBEID MED VIRUSINNHOLDENDE MATERIALE."

Alt laboratoriepersonell er instruert og opplært i sikre arbeidsmetoder, utstyrt med kjeledress, vernefottøy, sanitærbeskyttelse og verneutstyr i henhold til gjeldende standarder. De grunnleggende arbeidsreglene er som følger: 1) inntreden av uautoriserte personer i produksjonslokalene, samt adgang for ansatte til laboratoriet uten kjole og reservesko er strengt forbudt; 2) det er forbudt å forlate laboratoriet i kjoler og spesialsko eller å ta på seg yttertøy over kjolen, røyke, spise og oppbevare mat i laboratoriet. I boksing bruker de en steril kjole, maske, caps, og om nødvendig bruker de gummihansker og briller. Sørg for å bytte sko. 3) alt materiale som kommer inn i laboratoriet for testing må anses som infisert. Den må håndteres veldig forsiktig når du pakker ut glassene, utsiden bør tørkes med en desinfiserende løsning og legges på et brett eller i grøfter. Arbeidsområdet på bordet er dekket med flere lag gasbind fuktet med en 5% kloraminløsning. Når du arbeider med pipetter, bruk gummipærer. Pipetter, objektglass og dekkglass og annet brukt glass desinfiseres ved å dyppe dem ned i 5 % kloramin, fenol, lysol, svovelsyre. 4) ved avsluttet arbeid ryddes arbeidsplassen og desinfiseres grundig. Virusholdig materiale som er nødvendig for videre arbeid oppbevares i kjøleskap og forsegles. 5) hendene vaskes grundig med 5 % kloramin, hansker fjernes, desinfiseres en gang til, desinfiseres og vaskes. Når de jobber i et virologisk laboratorium, må ansatte følge strenge metoder og regler for asepsis og antisepsis. Asepsis er et system av tiltak og arbeidsmetoder som hindrer inntrengning av mikroorganismer og virus fra miljøet til menneskekroppen, samt materialet som studeres. Det innebærer bruk av sterile instrumenter og materialer, desinfeksjon av ansattes hender og overholdelse av spesielle sanitære og hygieniske regler og arbeidspraksis. Antiseptika er et sett med tiltak rettet mot å ødelegge mikroorganismer og virus som kan forårsake en smittsom prosess når de kommer i kontakt med skadede eller intakte områder av hud og slimhinner. Etylalkohol (70%), alkoholløsning av jod, strålende grønt og andre brukes som antiseptiske midler. Desinfeksjon er desinfeksjon av miljøgjenstander ved å ødelegge sykdomsfremkallende mikroorganismer og virus for mennesker og dyr med fysiske midler og ved hjelp av kjemikalier. Sterilisering – sterilisering, fullstendig ødeleggelse av mikroorganismer og virus i ulike materialer. Det utføres ved hjelp av fysiske og kjemiske metoder.

SPØRSMÅL nr. 16 "SKEME FOR LABORATORIEDIAGNOSTIKK AV VIRALE INFEKSJONER."

Laboratoriediagnostikk er et system med tiltak for å oppdage og indikere et virus. Det inkluderer: mottak av tilsendt patologisk materiale, undersøkelse av patologisk materiale ved bruk av hurtigdiagnosemetode, forskning ved bruk av langsiktige metoder (retrospektiv diagnose, undersøkelse av parrede sera ved seroreaksjoner).

Laboratorieforskning. I. Indikasjon på viruset i patologisk materiale. 1. Deteksjon – lysmikroskopi av store virus (Poxviridae), elektronmikroskopi. 2. Påvisning av inkluderingslegemer. (Babes-Chenegri kropper i rabies) 3. Påvisning av virale antigener: serologiske reaksjoner. 4. Påvisning av viralt NK (DNA-prober og PCR - polymerasekjedereaksjon). 5. Påvisning av den aktive formen av viruset ved bioassay (forsøksdyr, kyllingembryoer, cellekultur). 6. Påvisning av hemagglutininer i hemagglutinerende virus (foreløpig praktisk talt ikke brukt på grunn av tilgjengeligheten av mer nøyaktige metoder). II. Isolering (isolering) av viruset fra patologisk materiale. Minst tre blindpassasjer utføres, og en bioassay utføres. A) Laboratoriedyr (klinikk, død, patologiske forandringer) B) Kyllingeembryoer (død, patologiske forandringer, RGA) C) Cellekultur (CPD, RGAd, plakkmetode) III. IV. Bevis for etiologisk rolle. Noen ganger er det nødvendig å bevise den etiologiske rollen til det isolerte viruset. For dette formål brukes parede blodsera i serologiske reaksjoner. Et isolert virus brukes som AG, og parrede sera brukes som AT. En økning i antistofftiter i det andre serumet med 4 eller flere ganger indikerer den etiologiske rollen til det isolerte viruset.

SPØRSMÅL nr. 17 "KLINISK-EPIZOOTOLOGISK DIAGNOSTIKK AV VIRALE SYKDOMMER HOS DYR, ESSENS, BETYDNING."

Klinisk-epidemiologisk eller pre-laboratoriediagnostikk - utføres på gårder og tillater kun å gjøre en foreløpig diagnose basert på innsamling, sammenligning av analyse av syke dyr (kliniske symptomer på sykdommen, patologiske endringer i organer). Innsamling av epidemiologiske data er svært viktig, det lar oss få data om hvordan sykdommen utvikler seg og informasjon om gårder. Hvis gårdene ikke er velstående, så bekrefter dette nok en gang diagnosen. En klinisk undersøkelse fokuserer veterinæren på kun noen få typer sykdommer. Laboratoriediagnostikk er fortsatt av primær betydning.

SPØRSMÅL nr. 18 "METODER FOR OPPVISNING AV VIRUS I MØNSTERMATERIALE."

I. Indikasjon på viruset i patologisk materiale. 1. Deteksjon – lysmikroskopi av store virus (Poxviridae), elektronmikroskopi. 2. Påvisning av inklusjonslegemer (Babes-Chenegri-legemer i rabies) 3. Påvisning av virale antigener: serologiske reaksjoner. 4. Påvisning av viralt NK (DNA-prober og PCR - polymerasekjedereaksjon). 5. Påvisning av den aktive formen av viruset ved bioassay (forsøksdyr, kyllingembryoer, cellekultur). 6. Påvisning av hemagglutininer i hemagglutinerende virus (foreløpig praktisk talt ikke brukt på grunn av tilgjengeligheten av mer nøyaktige metoder). Serologiske tester brukes for å identifisere det isolerte viruset. 1.RIF – immunfluorescensreaksjon. AG + AT merket med fluorokrom. Kontakt tillates i 30 minutter ved 37 C, deretter utføres en grundig vask i laboratoriet. Deteksjonsmetode: fluorescerende lys under et mikroskop. 2.ELISA – enzymkoblet immunosorbentanalyse. AG + AT med enzym. Kontakt, vask, tilsett deretter et substrat, som ved kontakt med AT-enzymkomplekset gir en fargereaksjon. 3.RSK – komplementfikseringsreaksjon. AG + AT + komplement. Kontakt. Deretter tilsettes hem-systemet (hemolysin + røde blodceller fra sau). Kontakt. Hvis hemolyse ikke oppstår, så har AG og AT fast komplement. Forsinket hemolyse er en positiv reaksjon. Hvis hemolyse oppstår, er komplement bundet av hemesystemet - reaksjonen er negativ. 4.RDP – diffus nedbørsreaksjon. AG + AT (diffusjon i agargel). Deteksjonsmetoden er dannelsen av en nedbørkontur. 5.RNHA – indirekte hemagglutinasjonsreaksjon. Erytrocytter er lastet med antigen, og når antigen-antigen-komplekset dannes, oppstår agglutinasjon av erytrocytter. 6.RTGA – h7.RTGAd – h8.RN – nøytraliseringsreaksjon. Virus + AT. Kontakt. Gå inn i et virussensitivt system. Påvisningsmetoden er å nøytralisere den smittsomme aktiviteten til viruset.

SPØRSMÅL nr. 19 "PRINSIPPET OM RETROSPEKTIV DIAGNOSTIKK, DETTE FORDELER OG MULLER."

Retrospektiv diagnostikk - målet er å oppdage dynamikken i økningen i AT, basert på studiet av parede sera, som tas to ganger, i begynnelsen av sykdommen og på slutten. De er testet i en av seroreaksjonene. Hvis økningen i AT er 4-5 ganger større, er diagnosen 100 %.

Rolle - metoden lar deg stille en pålitelig diagnose i de fleste tilfeller.

Rollen er varigheten av retrospektiv diagnose.

SPØRSMÅL nr. 20 "AUJESKYS SYKDOMSVIRUS."

Aujeszkys sykdom (pseudorabies, kløepest, rabiat skabb, smittsom bulbar parese) er en akutt sykdom hos alle typer husdyr, pelsdyr og gnagere. Det er preget av tegn på skade på hjernen og ryggmargen, alvorlig kløe og riper.

AD forårsaker særlig skade i svineoppdrett og pelsdyroppdrett. Dette er en akutt matinfeksjon hos pelsdyr. Årsaken er mat, som ofte er slakteriavfall og slakteavfall hentet fra syke dyr eller virusbærende dyr.

Klinikk. Inkubasjonsperioden er 1,5 dager - 10-12 dager, avhengig av infeksjonsmetoden, virulensen til viruset og motstanden til dyret. Viruset er pantropisk.

Hos griser fortsetter det kliniske forløpet uten tegn til kløe. Suge- og avvenningsunger er alvorlig syke. Sykdommen er septisk i naturen. Smågris dør vanligvis innen 4-12 timer. Hos smågriser fra 10 dager til 3 måneder er de første tegn på sykdommen feber (40-42), depresjon, slimete utflod fra nesen. Senere dukker det opp tegn på skade på sentralnervesystemet: rastløshet, manøvreringsbevegelser, tap av orientering, kramper, buet rygg, lammelse av svelget, strupehodet, lemmer, lungeødem, salivasjon. Sykdommen varer fra flere timer til 3 dager. Dødelighet: 70–100 %

Hos purker viser det seg som et influensalignende syndrom med bedring etter 3-4 dager.

Hos storfe stiger temperaturen til 42 C, tyggingen stopper, kraftig kløe i neseborene, leppene, kinnene, matvegring, sløvhet, angst, frykt, rask pust, svette, kramper i tygge- og nakkemuskulaturen. Døden inntreffer med økende sløvhet etter 1-2 dager. Gjenoppretting er ekstremt sjelden.

Kjøttetende dyr opplever matvegring, frykt, rastløshet og sterk kløe. Noen ganger viser hunder og katter tegn på rabies. Da oppstår lammelse av svelget. Død om 2-3 dager. Dyr er ikke kilden til viruset og skiller det ikke ut, da det er en økologisk blindvei.

Aujeszkys sykdom kan mistenkes basert på karakteristiske kliniske symptomer og patologiske endringer (klinisk, epizootologisk og patologisk diagnostikk).

Materiale for forskning: vattpinner fra nesehulen og blod (fortrinnsvis sammenkoblede sera), fra lik - deler av hjernen, lungene, leveren, milten.

Ekspressmetode - påvisning av viralt antigen i RIF. Virologisk metode: a) isolering av viruset på en kultur av nyreceller fra smågris: b) bioassay på kaniner (karakteristisk kløe og riper på infeksjonsstedet).

Identifikasjon: RIF, RN.

Retrospektiv diagnose: basert på økningen i antistofftiter i parede serumprøver.

Det er nødvendig å skille Aujeszkys sykdom fra rabies, svinepest, influensa, erysipelas og bordsaltforgiftning.

Levende VGNKI-virusvaksine og inaktivert kulturvaksine brukes - immunitet i 6-10 måneder Underenhet og rekombinante vaksiner brukes i utlandet.

SPØRSMÅL nr. 21 "BETYDNING OG EGENSKAPER AV VIRALE PROTEINER."

Se spørsmål nummer 7

SPØRSMÅL nr. 22 "GENERELLE PRINSIPPER FOR SEROLOGISKE REAKSJONER OG DERES BRUK I DIAGNOSE AV VIRALE SYKDOMMER."

For å bestemme typen av et gitt virus, brukes serologiske metoder når man studerer beskyttelsesprosesser i kroppen til en syk person eller et infisert dyr. Serologi (fra latin Serum - serum, flytende komponent av blod) er en gren av immunologi som studerer antigenreaksjoner med spesifikke beskyttende stoffer, antistoffer, som finnes i blodserum. Antistoffer nøytraliserer effekten av viruset. De binder seg til visse antigene stoffer som ligger på overflaten av virale partikler. Som et resultat av bindingen av antistoffmolekyler til overflatestrukturen til viruset, mister sistnevnte sine patogene egenskaper. For å fastslå nivået (mengden) av antistoffer i serumet eller bestemme typen av et gitt virus, utføres en virusnøytraliseringsreaksjon. Det kan utføres både i dyr og i cellekultur.

Minimumskonsentrasjonen av serum som inneholder antistoffer som er tilstrekkelig til å nøytralisere viruset og hindre det i å utvikle CPE kalles titeren av virusnøytraliserende serum. Denne konsentrasjonen kan også påvises ved hjelp av plakkmetoden.

For å oppdage antistoffer brukes metoden for hemagglutinasjon (liming av røde blodlegemer under påvirkning av et virus) og metoden for komplementfiksering. Av metodene som brukes i virologi til ulike forskningsformål, kan vi også nevne metodene for fremstilling av virologisk materiale for fysiske og kjemiske analyser som letter studiet av finstruktur og sammensetning av virus. Disse testene krever store mengder helt rent virus. Virusrensing er en prosess der alle fremmede partikler som forurenser det elimineres fra en suspensjon med et virus. Dette er hovedsakelig biter og "fragmenter" av vertsceller. Samtidig med rensing oppstår vanligvis fortykning av suspensjonen, noe som øker konsentrasjonen av viruset. Dette gir kildemateriale til mange studier.

Ved hjelp av en serologisk reaksjon kan du: bestemme antistofftiteren mot det hemagglutinerende viruset i serum; identifisere et ukjent hemagglutinerende virus fra kjente sera; etablere graden av antigen-relaterthet til 2 virus, bestemme titeren av virusnøytraliserende antistoffer i serum, eller nøytraliseringsindeksen, identifisere et ukjent virus ved å teste det med forskjellige kjente sera.

Serologiske reaksjoner.

1. RIF – immunfluorescensreaksjon.

AG + AT merket med fluorokrom. Kontakt tillates i 30 minutter ved 37 C, og vaskes deretter grundig i saltvannsløsning. Deteksjonsmetode: fluorescerende lys under et mikroskop.

2. ELISA – enzymkoblet immunosorbentanalyse.

AG + AT med enzym. Kontakt, vask, tilsett deretter et substrat, som ved kontakt med AT-enzymkomplekset gir en fargereaksjon.

3. RSK – komplementfikseringsreaksjon.

AG + AT + komplement. Kontakt. Deretter tilsettes hem-systemet (hemolysin + røde blodceller fra sau). Kontakt. Hvis hemolyse ikke oppstår, så har AG og AT fast komplement. Forsinket hemolyse er en positiv reaksjon. Hvis hemolyse oppstår, er komplement bundet av hemesystemet - reaksjonen er negativ.

4. RDP – diffus nedbørsreaksjon.

AG + AT (diffusjon i agargel). Deteksjonsmetoden er dannelsen av en nedbørkontur.

5. RNHA – indirekte hemagglutinasjonsreaksjon.

Erytrocytter er lastet med antigen, og når antigen-antigen-komplekset dannes, oppstår agglutinasjon av erytrocytter.

6. RTGA –n

7. RTGAd – hemadsorpsjonshemmingsreaksjon

8. RN – nøytraliseringsreaksjon.

Virus + AT. Kontakt. Gå inn i et virussensitivt system. Påvisningsmetoden er å nøytralisere den smittsomme aktiviteten til viruset.

SPØRSMÅL nr. 23, 25 «RTGA OG DENS BRUK I VIRUSOLOGI. FORDELER OG ULEMPER."

En av de enkleste serologiske reaksjonene ernen. Det er basert på det faktum at antistoffer, når de møter et homologt antigen, nøytraliserer ikke bare dets smittsomme, men også hemagglutinerende aktivitet, fordi blokkerer virionreseptorer som er ansvarlige for hemagglutinering, og danner et "AG + AT"-kompleks med dem. Prinsippet for RTGA er at like store mengder blodserum og virussuspensjon blandes i et reagensglass, og etter eksponering bestemmes det om viruset er bevart i blandingen ved å tilsette en suspensjon av røde blodlegemer. Agglutinasjon av erytrocytter indikerer tilstedeværelse, og fravær av hemagglutinasjon indikerer fravær av virus i blandingen. Forsvinningen av viruset fra virus + serumblandingen betraktes som et tegn på interaksjon mellom serum og virus AT. RTGA lar deg løse følgende problemer: bestemme titeren av antistoffer mot det hemagglutinerende viruset i serum; identifisere et ukjent hemagglutinerende virus fra kjente sera; etablere graden av AG-forhold mellom de to virusene. Fordeler med RTGA: enkel teknikk, hastighet, ingen sterilt arbeid nødvendig, spesifisitet, lav kostnad. Ulempe med RTGA: kun mulig med hemagglutinerende virus.

Prinsippet for AT-titrering i RTGA er som følger: klargjør en serie suksessive (vanligvis 2 ganger) fortynninger av testserumet i like volum (vanligvis 0,25 eller 0,2 ml); til hver fortynning tilsett de samme volumene av homologt virus i en titer på 4 HAE; blandingene holdes i en viss tid ved en viss temperatur, like store volumer av en 1% suspensjon av vaskede erytrocytter tilsettes til alle blandinger; Etter eksponering vurderes hemagglutinasjon i hver blanding i kryss.

SPØRSMÅL nr. 26 «RDP. IMMUNOLOGISK GRUNNLAG FOR METODEN, OPPLYSNINGER OG REGNSKAP AV RESULTATER. FORDELER OG ULEMPER."

RDP i gelen er basert på evnen til diffusjon i geler av AT og løselig AG og fraværet av slik evne i "AG + AT" komplekset. Dette komplekset dannes ved kontakt mellom homologe AG og AT som diffunderer mot hverandre. Det avsettes på dannelsesstedet i tykkelsen av gelen i form av et utfellingsbånd. Stivelse, gelatin, agar-agar og mer brukes som geler. Agar gel brukes ofte i laboratoriepraksis. Serumantistoffer er Ig-molekyler, som til tross for deres ganske store størrelse. Kan diffundere i agargel. Virale Ags er virale proteiner. De kan finnes i virioner, som representerer såkalte corpuscular AGs. Store størrelser som ikke lar dem diffundere i agargelen. Men virale proteiner kan også være i form av frie molekyler dannet som et resultat av ødeleggelsen av virioner og (eller) ødeleggelsen av cellene de ble dannet i. Dette er løselige antigener. De er i stand til å spre seg i en agargel. Teknikken for å sette opp RDP i en gel er å lage flere fordypninger i et lag med agargel og helle AG og serum i dem. Slik at AG og serum er i tilstøtende brønner. Fra brønnene begynner AG og serum å diffundere inn i gellaget. Diffusjonen rettes i alle retninger fra hver brønn. I rommet mellom brønnene som inneholder AG og serum, diffunderer sistnevnte mot hverandre. Hvis de viser seg å være homologe, dannes et "AG + AT" kompleks, som ikke er i stand til diffusjon på grunn av sin større størrelse. Den legger seg på dannelsesstedet i form av en hvitaktig nedbørstripe. RDP løser følgende problemer: 1) påvisning av antistoffer homologe med antigener i blodserum; 2) påvisning i materialet av et antigen homologt med kjente serumantistoffer 3) identifikasjon av et ukjent virus; 4) titrering av serum AT. Her fungerer den høyeste serumfortynningen, som fortsatt gir utfelling med homologt antigen, som en indikator på antistofftiteren i serumet. RDP brukes ofte til å diagnostisere bovin leukemi og infeksiøs anemi hos heste. Reaksjonen kan utføres i petriskåler, på glass, kapillærer (sjelden). For å utføre RDP på ​​glassbilder trenger du: avfettede glassplater, graderte pipetter (2-5 ml), Pasteur-pipetter; et rør med en diameter på 5 mm eller et stempel, et våtkammer, et verktøy for å trekke ut gel, agar, AG, serum fra brønnene. Sette opp RDP: Glassglassene plasseres på en kald overflate. Hell agar fra en pipette (lag 1,5-2 mm), la avkjøles i 5-10 minutter. Hull kuttes og loddes. RDP-komponentene helles i brønnene og plasseres i et fuktig kammer (hvor de blir stående i romtemperatur eller plassert i en termostat). RDP-preparatet på objektglass kan tørkes etter 48-72 timer og farges med amidsvart løsning. Dette gjør at preparatet kan lagres på ubestemt tid og forbedrer muligheten til å fotografere nedbørsbånd. Fordeler med RDP: enkel teknikk, rask respons, lite krevende for komponentenes renhet, ingen sterilt arbeid kreves, minimalt behov for komponenter, egnethet til å arbeide med eventuelle løselige antigener, muligheten til å dokumentere resultatet ved å fotografere. Ulemper med RDP: lav følsomhet. Reaksjonen brukes til å oppdage rabiesvirus, infeksiøs bovin rhinotracheitt, afrikansk svinepest, hundepest og andre i patologisk materiale; Og også for identifikasjon av infeksiøse anemivirus hos heste, adenovirus, respiratorisk syncytialvirus, bovint diarévirus, for påvisning i blodserum av antistoffer mot infeksiøse anemivirus hos heste, bovint respiratorisk syncytialvirus og i mange andre tilfeller.

SPØRSMÅL nr. 27 «RSK. IMMUNOLOGISK GRUNNLAG OG KARAKTERISTIKKER TIL REAKSJONSKOMPONENTER."

Komplementfikseringstesten (FFR) er en av de tradisjonelle serologiske testene som brukes for å diagnostisere mange virussykdommer. Selve navnet gjenspeiler i stor grad essensen av metoden, som består av to separate stadier. Den første fasen involverer et antigen og et antistoff (en av disse ingrediensene er kjent på forhånd), i tillegg til en viss mengde forhåndstitrert komplement. Hvis antigenet og antistoffet samsvarer, binder komplekset deres komplement, som oppdages i andre trinn ved hjelp av et indikatorsystem (en blanding av røde blodceller fra sauer og antiserum til dem - hemolysin). Hvis komplement er bundet av interaksjonen mellom antigen og antistoff, skjer ikke lysis av røde blodceller (positiv RBC). Med negativ RSC fremmer ubundet komplement hemolyse av erytrocytter (fig. 80).

RSC-er brukes ofte i diagnostisk praksis for påvisning og identifisering av virus, påvisning og titrering av antistoffer i blodserum.

Hovedkomponentene i RSC er antigener (kjente eller påvisbare), antistoffer (kjente antisera eller testsera), komplement, hemolytisk serum og røde blodceller fra sau; Isotonisk natriumkloridløsning (pH 7,2-7,4) eller ulike bufferløsninger brukes som fortynningsmiddel. Antigener og serum kan ha anti-komplementaritet, dvs. evnen til å adsorbere komplement, noe som forsinker hemolyse og forvrenger resultatene av reaksjonen. For å kvitte seg med antikomplementaritet renses antigener ved forskjellige metoder: aceton, freon, eter, kloroform, etc., avhengig av typen vev som brukes som antigen og virus. Serum frigjøres fra antikomplementaritet ved oppvarming, behandling av komplement og andre metoder.

Antigener for CSC fremstilles fra organene til infiserte dyr, fra allantois- eller fostervannet fra infiserte kyllingembryoer, samt fra det flytende mediet fra infiserte cellekulturer.

skiller seg betydelig fra dens forberedelse for bakterielle infeksjoner. Dette skyldes en rekke spesifikke egenskaper ved virus.

For det første, for å frigjøre viralt antigen fra en celle, er det ofte nødvendig å viderebehandle det smittsomme materialet for å ødelegge cellene og frigjøre antigenet.

For det andre, den større termolabiliteten til virale antigener sammenlignet med bakterielle. I de fleste virus er det komplementfikserende antigenet assosiert med den smittsomme partikkelen, og dens ødeleggelse skjer parallelt med tapet av den smittsomme. Derfor må materialer for å oppnå antigenet tas fra døde dyr bare de første timene etter deres død, eller enda bedre, i løpet av livet. Bevaring av virusholdig materiale med forskjellige desinfeksjonsmidler gir ofte ikke positive resultater, siden mange av dem forårsaker ødeleggelsen av det virale antigenet.

For det tredje ujevnheten i komplementfiksering når de bæres annerledes; med et overskudd av antistoffer avtar komplementfikseringen kraftig, siden det aktive antigen + antistoffkomplekset presenteres hovedsakelig i form av antistoffer og den aktive komplementoverflaten er ubetydelig. Det samme observeres i sonen med overflødig antigen, hvor undertrykkelsen av komplementfiksering skjer enda raskere. Derfor, for å etablere den optimale sonen for komplementfiksering, er foreløpig titrering av antigen og antistoffer nødvendig.

For det fjerde er volumet av antigen + antistoffkomplekset ubetydelig. Størrelsen på de virale partiklene som kommer inn i komplekset er svært liten, og derfor er området med komplementfiksering ubetydelig. Med en økning i volumet av antigen + antistoffkomplekset ved å forlenge perioden med komplementfiksering (opptil 18 timer ved 4 ° C), øker følsomheten til reaksjonen, men dens spesifisitet reduseres, siden med en lang fikseringsperiode, fikseringen av komplement av uspesifikke antigener (vev) øker.

Og til slutt, for det femte, den høye komplementære aktiviteten til det virale antigenet. For å utelukke uspesifikk komplementfiksering er mer fullstendig rensing av virusantigenet fra vevsfragmenter nødvendig.

En stor hindring for bruk av RSC i diagnostisering av virussykdommer hos dyr og mennesker er ujevn akkumulering av viralt antigen under forskjellige perioder av sykdommen og spesielt under forskjellige infeksjoner.

RSC brukes til å bestemme typer og undertyper (varianter) av munn- og klovsykeviruset som forårsaker sykdom hos dyr, for å teste produksjonsstammer av munn- og klovsykeviruset ved produksjon av vaksiner og laboratoriestammer i forskning arbeid.

SPØRSMÅL nr. 28 "TITER AV VIRUS OG PRINSIPPER FOR DETES BESTEMMELSE I ENHETER PÅ 50 % SMITTSAMMEHANDLING."

Titeren er mengden virus som finnes i en enhetsvolum av materiale. Av de lokale skadene forårsaket av virus, er de mest kjente plakk og pockmarks på XAO EC. Hvis det er bevis på det motsatte, kan virusets infeksjonsaktivitet måles i plakkdannende enheter (PFU) eller koppedannende enheter (PFU) 1 PFU = dose virus som er i stand til å forårsake dannelse av en plakk, og en PFU - en lomme. Metoder: flere CC-er eller EC-er er infisert ved KhAO. Det aritmetiske gjennomsnittlige antall pockmarks eller plaketter beregnes. Det = PFU eller OFU av viruset. Beregn hvor mange PFU eller PFU som er per volumenhet virusholdig materiale. Dette er tittelen. T=n/Va, hvor n er det aritmetiske gjennomsnittet av plakk eller pockmarks, og er fortynningen av materialet, V er den administrerte dosen. Metode med 50 % smittsom virkning. En enhet av virusmengden er en dose som kan gi en smittsom effekt hos 50 % av de smittede. Antallet slike doser per materialenhet vil uttrykke titeren til viruset i dette materialet. En 10 gangers fortynning av testmaterialet tilberedes, deretter infiseres like grupper av levende testobjekter med like doser. De tar hensyn til resultatet av handlingen og finner i hvilken fortynning viruset viste sin effekt med 50%. Hvis en slik fortynning ikke umiddelbart blir funnet, beregnes den ved å bruke formelen T=lgB – (b-50)/(b-a) *lgd, hvor B er fortynningen som gir en smittsom effekt på mer enn 50 %, b er prosent som gir en infeksjonseffekt på mer enn 50 %, en – mindre enn 50 % d – fortynningsfaktor. 1HAE antas å være en dose av viruset som er i stand til å agglutinere omtrent 50 % av de røde blodcellene i samme volum som viruset, 1 % av en suspensjon av vaskede røde blodlegemer. En rekke påfølgende multiple fortynninger av materialet fremstilles og en 1% suspensjon tilsettes til hver fortynning. Reaksjonen scores i kryss. 2-kryssreaksjonen inneholder 1GAE, som multipliseres med fortynningsfaktoren.

SPØRSMÅL nr. 29 “BIOLOGISKE KARAKTERISTIKKER AV MOT- OG KLØVVIRUS. DIAGNOSTISK PRINSIPP"

Munn- og klovsyke er en akutt, svært smittsom sykdom hos artiodactyler, manifestert ved feber, vesikulære lesjoner i slimhinnene i munnen, huden på kronen og juret, hos unge dyr ved lesjoner i munnens slimhinner, hud på kronen og juret, og hos unge dyr ved skade på myokard- og skjelettmuskulaturen. Munn- og klovsyke er registrert i mange land rundt om i verden. Inkubasjonsperioden varer 1-3 dager. Noen ganger opptil 7-10 dager. Det mest karakteristiske tegnet på denne sykdommen hos dyr er vesikulære lesjoner i slimhinnene i munnen og huden på kronen og juret. Hos storfe - det er akutt, godartet hos voksne. Til å begynne med noteres en svekkelse av appetitten, økt salivasjon og en økning i kroppstemperatur. På 2-3 dager vises afte på den indre overflaten av leppene og tungen (i noen, i området mellom hovgapet, på juret). Etter en dag dannes erosjoner. Etter 2-3 uker gror erosjonene og dyret kommer seg. Viruset tilhører Picornaviridae-familien, slekten Aphthovirus, RNA-holdig, har ikke et superkapsidskall. Virioner er små partikler med ikosaedrisk form. Viruset er ganske motstandsdyktig mot miljøpåvirkninger. Tame og ville artiodactyler er mottakelige. Viruset kan isoleres allerede under inkubasjonstiden. Tilbakefall kan være ledsaget av langvarig virustransport. Omtrent 50 % av gjenvunnet storfe kan kaste viruset i 8 måneder, og noen i opptil 2 år. Viruset dyrkes på naturlig mottakelige dyr og laboratoriedyr: nyfødte mus, kaniner og marsvin. Sprer seg godt i knoppceller. Den har ikke hemagglutinerende egenskaper. Det er 7 kjente typer MKS: A, O, C, Sat-1, Sat-2, Sat-3, Asia-1. I kroppen til naturlig mottakelige dyr induserer viruset dannelsen av virusnøytraliserende, komplementbindende og utfellende antistoffer.

Munn- og klovsykevirus bestemmes vanligvis i RSC. Hovedkomponentene i RSC er AG, AT, komplement, hemolytisk serum og saueerytrocytter; ICN eller ulike bufferløsninger brukes som fortynningsmiddel. AG og serum kan ha antikomplementaritet - evnen til å adsorbere komplement, noe som forsinker hemolyse og forvrenger resultatene av reaksjonen. For å bli kvitt antikomplementaritet renses AG ved hjelp av ulike metoder: aceton, freon, eter, kloroform, avhengig av typen vev som brukes som AG og virus. AG for RSC er fremstilt fra organene til infiserte dyr, fra allantois- og fostervannet fra infisert EC, samt fra det flytende mediet fra infisert EC. RSC brukes til å bestemme typer og undertyper av munn- og klovsykevirus som forårsaker sykdom hos dyr, for å teste produksjonsstammer av munn- og klovsykevirus ved fremstilling av vaksiner og laboratoriestammer i forskningsarbeid.

SPØRSMÅL nr. 30 “LUMINESTENSMIKROSKOPI. GRUNNLEGGENDE OM IMMUNOFLUORESCENS".

Metoden er basert på fenomenet luminescens, hvis essens er at ved å absorbere ulike typer energi (lys, elektrisk), går atomer av visse stoffer inn i en eksitert tilstand, og deretter, tilbake til sin opprinnelige tilstand, frigjør det absorberte energi i form av lysstråling. Luminescens observeres i form av fluorescens - en glød som oppstår i øyeblikket av bestråling med spennende lys og stopper umiddelbart etter at den er fullført. Fosforescens er en glød som fortsetter i lang tid selv etter slutten av eksitasjonsprosessen.

SPØRSMÅL nr. 31 “RABIS-VIRUS, DETS EGENSKAPER. PATOGENISITET. PRINSIPPER FOR DIAGNOSTIKK».

Rabies er en akutt infeksjonssykdom som oppstår med alvorlig skade på nervesystemet, vanligvis med dødelig utgang. Mennesker og alle pattedyr er mottakelige. Rabies er utbredt. Patogenet overføres av hunder, katter, ville gnagere og rovdyr, samt blodsugende vampyrflaggermus. Varigheten av inkubasjonsperioden avhenger av stedet, styrken til bittet, mengden og virulensen til viruset som har kommet inn i såret, og motstanden til det bitt dyr. Inkubasjonstiden varer fra 1-3 uker til et år eller mer. Sykdommen er akutt. Kliniske tegn på et atypisk forløp er tap av appetitt, vom atoni, svelg lammelse, sikling. Det kan også være et voldsomt og stille sykdomsforløp. Rabiesviruset (RV) har uttalt nevroprobasi. Penetrerer fra periferien langs nervestammene inn i sentralnervesystemet sentripetalt, sprer den seg sentrifugalt i kroppen langs de perifere nervene og går inn i ulike organer, inkludert spyttkjertlene.

Viruset tilhører familien Rhabdoviridae, slekten Lyssavirus. Virioner har form som en stang med en hakket ende. Virusvirionet er RNA-holdig med en spiralformet type symmetri og har en lipoproteinkonvolutt. Lave temperaturer bevarer viruset. VB virion inneholder glykoprotein og nukleokapsid Ag. Den første induserer dannelsen av virusnøytraliserende antistoffer, og den andre - komplementfikserende og utfellende antistoffer. I kroppen er viruset lokalisert hovedsakelig i sentralnervesystemet, i spyttkjertlene og spytt. Dyrkes i mus, kaniner, marsvin og i primære cellekulturer. Reproduksjon av viruset i CC viser seg ikke alltid som CPE. Smittekildene er syke dyr. De overfører viruset gjennom et bitt. Diagnosen rabies stilles på grunnlag av epidemiologiske, kliniske data og laboratorietestresultater, som er av kritisk betydning. For forskning sendes ferske lik av små dyr til laboratoriet som helhet, og fra store og mellomstore dyr - hodet med 2 nakkevirvler. Likene av små dyr behandles med insektmidler før de sendes til forskning. Laboratoriediagnostikk inkluderer: påvisning av viral hypertensjon i RIF og RDP, Babes-Negri-kropper og bioassays på hvite mus. RIF - for denne reaksjonen produserer bioindustrien fluorescerende gammaglobulin mot rabies. Prinsipp – 1) Lag utskrifter eller utstryk fra ulike deler av venstre og høyre side av GM på glassbilder (minst 2 preparater fra hver seksjon); 2) De tørkes og fikseres i kjølt aceton; 3) Tørk, påfør fluorescerende gammaglobulin; 4) Plasser i et fuktig kammer; 5) Jeg vasker ICN grundig, skyller den med vann, tørker den i luft, påfører ikke-fluorescerende nedsenkingsolje og ser den under et fluorescerende mikroskop. I preparater som inneholder antigen WB, observeres gulgrønne fluorescerende granuler av forskjellige størrelser og former i nevroner, men oftere utenfor celler. RDP – 1) Agar gel helles på glassplater 2) Brønner lages (D = 4-5 mm); 3) Brønnene fylles med en pastalignende masse fra GM-seksjonene. 4) Kontroller med "+" og "-" AG plasseres på et separat glass med samme sjablong; 5) Etter fylling av brønnene plasseres preparatene i et fuktig kammer og plasseres i en termostat ved 37C i 6 timer, deretter ved romtemperatur i 18 timer. Reaksjonen anses som positiv når en eller 2-3 linjer med utfelling av en hvilken som helst intensitet vises mellom brønnene som inneholder hjernesuspensjonen og rabiesgammaglobulin. DETEKSJON AV KROPP - tynne utstryk eller avtrykk er laget på glassbilder fra alle deler av GM og farget i henhold til Sellers eller Muromtsev eller Mann eller Lenz. BIOPEST - hvite mus (16-20 gram) velges, nervevevet fra alle deler av GM males i en morter med steril sand, ICN tilsettes en 10 % suspensjon, la stå i 30-40 minutter og supernatanten brukes til infeksjon for å infisere valpene. Infiser 10-12 stykker: halvparten intracerebralt med 0,03 ml, halvparten subkutant i neseområdet eller i overleppen med 0,1-0,2 ml. Observert i 30 dager. I nærvær av VD i det patologiske materialet, fra 7-10 dager etter infeksjon, viser mus symptomer: rynket pels, en særegen pukkelrygg, nedsatt koordinering av bevegelser, lammelse av bakdelen, deretter forlemmer og død. Hos døde mus blir GM undersøkt i RIF for påvisning av Babes-Negri-kropper og en RDP blir diagnostisert. En bioassay for rabies anses som positiv hvis Babes-Negri-kropper finnes i preparater fra hjernen til infiserte mus eller hvis AG påvises ved RIF- eller RDP-metoder. En negativ diagnose er fravær av død hos mus innen 30 dager.

SPØRSMÅL nr. 32 «MODERN KLASSIFISERING AV IMMUNITET. VED STRUKTUR KARAKTERISTIKA FOR ULIKE KLASSER AV IMMUNOGLOBULINER OG DERES STRUKTUR.»

Immunitet er en tilstand av kroppens immunitet mot virkningene av patogene mikrober, deres giftstoffer og andre fremmede stoffer av biologisk natur.

Kroppens immunsystem er et system av organer og celler som reagerer mot fremmede stoffer.

Medfødt immunitet er immunitet mot smittsomme stoffer, lokalisert i genomet og manifestert ved antall og rekkefølge av arrangement av gangliosider av en viss type på overflaten av cellemembraner. Den er veldig slitesterk, men ikke absolutt.

Ervervet immunitet er kroppens motstand kun mot et spesifikt patogen. Denne immuniteten er delt inn i naturlig og kunstig. Naturlig er delt inn i 1. aktiv - det dannes etter at dyret har naturlig kommet seg fra sykdommen, noen ganger etter eksponering for gjentatte små doser av patogenet (immuniserende subinfeksjon). 2.passiv – immunitet til nyfødte ervervet på grunn av mottak av antistoffer mot fosteret fra moren gjennom morkaken eller etter fødselen gjennom tarmene med råmelk. Det er naturlig og kunstig colostral immunitet i det første tilfellet, immunitet oppstår på grunn av antistoffer naturlig produsert i mors kropp under påvirkning av ulike miljøantigener. I det andre tilfellet, gjennom målrettet immunisering av mors kropp. Naturlig ervervet aktiv immunitet kan vare 2 år, noen ganger for livet, kan kunstig ervervet immunitet gi en tilstand av immunitet fra flere uker til flere måneder.

Kunstig ervervet immunitet er også delt inn i 1.aktiv - oppstår som et resultat av immunisering av dyr med vaksiner (utvikler seg etter 7-14 dager og varer opptil flere måneder til 1 år eller mer) og passiv - opprettes når immunserum som inneholder spesifikke antistoffer mot et spesifikt patogen.

Det finnes også typer immuniteter: 1. Antibakteriell immunitet - beskyttelsesmekanismer er rettet mot den patogene mikroben. 2. Antiviral - kroppen produserer antivirale antistoffer. 3. Antitoksisk immunitet - under dannelsen blir ikke bakterier ødelagt, men det produseres antistoffer som effektivt nøytraliserer giftstoffer i pasientens kropp.

4.Lokal immunitet. 5. Steril immunitet - hvis kroppen etter en sykdom blir frigjort fra patogenet, samtidig som den opprettholder en tilstand av immunitet. 6. Ikke-steril - når immuniteten opprettholdes bare så lenge patogenet er i kroppen. 7. Humoral immunitet - produksjon av spesifikke antistoffer i den infiserte kroppen. 8. Cellulær – sikret ved dannelse av T-lymfocytter som spesifikt reagerer med patogenet.

Uspesifikke faktorer for kroppens forsvar.

De fungerer som den første beskyttelsesbarrieren og trenger ikke å bygges om.

Huden er en kraftig barriere for penetrasjon av mikroorganismer, og mekaniske faktorer er viktige.

Slimhinner - i luftveiene ved hjelp av ciliert epitel (flytter en slimhinne sammen med mikroorganismer mot naturlige åpninger), i munnen til nesegangene (hosting og nysing). Disse membranene skiller ut sekreter som har bakteriedrepende egenskaper, spesielt på grunn av lysozym og IgA. Sekresjonene i fordøyelseskanalen har evnen til å nøytralisere mange patogene mikrober. Spytt inneholder lysozym, amylase og fosfatase. Galle forårsaker pasteurellas død. Tarmslimhinnen inneholder kraftige antimikrobielle faktorer.

Lymfeknuter - betennelse utvikler seg i dem, i sin sone fikseres mikrober av fibrintråder. Komplementsystemet og endogene mediatorer er involvert i betennelse.

Fagocytose er prosessen med aktiv absorpsjon av cellene i kroppen av patogene levende eller drepte mikrober og andre fremmede partikler som kommer inn i den, etterfulgt av fordøyelse ved hjelp av enzymer.

Antistoffer kan eksistere i millioner av varianter, hver med sitt eget unike antigenbindingssted. Samlet kalt immunoglobulin (Ig), danner AT-proteiner en av hovedklassene av blodproteiner, og utgjør omtrent 20 % av totalt plasmaprotein etter vekt. Når Ag binder seg til de membranantigenspesifikke reseptorene til B-cellen, skjer celleproliferasjon og differensiering for å danne celler som skiller ut Ab. AT-er har 2 identiske Ag-bindingsseter. De enkleste AT-molekylene er skjematisk formet som bokstaven gamma med to identiske Ag-bindingssteder, ett på slutten av hver av de to "grenene". Siden det er 2 slike steder, kalles disse AT-ene bivalente. Den beskyttende effekten av antigener er ikke bare forklart av deres evne til å binde antigener. De utfører også en rekke andre funksjoner der "halen" er involvert, de kalles effektorfunksjoner og bestemmes ikke av deltakelsen av "halen" i dem, men av strukturen til Fc-fragmentet. Denne regionen av molekylet bestemmer hva som skjer med AG hvis den er bundet. Antistoffer med samme antigenbindende regioner kan ha svært forskjellige "hale"-regioner, og derfor forskjellige funksjonelle egenskaper. Ig G, D, E og serum IgA-molekylet består av 4 polypeptidkjeder - 2 lette og 2 tunge. Hos høyere vertebrater er det 5 forskjellige klasser av antistoffer - IgA, IgD, IgE, IgG, IgM, hver med sin egen klasse av tunge kjeder. IgG-antistoffer utgjør hovedklassen av Ig som finnes i blodet. De produseres i store mengder under den sekundære responsen og er de eneste antistoffene som kan gå fra mor til foster. Dette er den dominerende klassen av antistoffer som produseres i de fleste sekundære immunresponser, i de tidlige stadiene av den primære immunresponsen, kommer hovedsakelig IgM-antistoffer inn i blodet - de er også den første klassen av antistoffer som produseres ved å utvikle B-celler. IgA er hovedklassen av antistoffer i melkesekret, spytt, tårer, sekret i luftveiene og tarmkanalen. AT-er beskytter virveldyr mot infeksjoner ved å inaktivere virus, mobilisere komplement og ulike celler som dreper og oppsluker invaderende MO-er.

SPØRSMÅL NR. 33 "SÆRLIGHETER VED ANTI-VIRAL IMMUNITET."

1. Antiviral immunitet er assosiert med unike beskyttelsesmekanismer, fordi Virus er ikke i stand til å utvikle seg og formere seg i en ikke-levende celle. Kroppens beskyttende tilpasning er rettet mot 2 former for eksistens av viruset. På de ekstracellulære virale uspesifikke og spesifikke immunitetsfaktorene, på den intracellulære formen - prosessen med fagocytose. Under virusinfeksjoner er det alltid ufullstendig, interferon har en eksogen effekt på den ekstracellulære formen, virus mister sin evne til å adsorbere, endogent interferon syntetiseres i celler som respons på viral Ag.

2. Midler og metoder for å påvirke virus kan være effektive bare i visse stadier av virusets eksistens, noe som tydeligst kommer til uttrykk ved behandling av pasienter med immunmedisiner, fordi Abs er ikke i stand til å trenge inn i cellene.

3. Antiviral immunitet er lengre varig enn bakteriell immunitet, og ved noen virusinfeksjoner er den livslang (rinder, hund, blåtunge, kopper).

SPØRSMÅL nr. 34 "LYMFOIDCELLENS ROLLE I ANTI-VIRAL IMMUNITET (KARAKTARISTIKA PÅ T- OG B-LYMFOCYTER)."

T-lymfocytter. Thymus-avhengige lymfocytter dannes fra stamceller fra hematopoetisk vev. Forløperne til T-lymfocytter går inn i thymus, gjennomgår differensiering i den og dukker opp som celler med forskjellige funksjoner, med karakteristiske markører. Det er flere underpopulasjoner av T-lymfocytter avhengig av deres biologiske egenskaper.

T-hjelpeceller (hjelpere) tilhører kategorien regulatoriske støtteceller. Stimuler spredning av B-lymfocytter og differensiering til antistoffdannende celler (plasmaceller). Det er fastslått at responsen til B-lymfocytter på påvirkning av de fleste proteinantigener er helt avhengig av hjelpen fra T-hjelpeceller, som utføres på to måter. Den første krever direkte virkning av en hjelpe-T-celle og en responderende B-celle. Det antas at T-cellen gjenkjenner determinantene til det antigene molekylet som allerede er fiksert på B-cellen av cellereseptorer: I det andre tilfellet kan hjelpefunksjonen til T-cellene for å aktivere B-lymfocytter også utføres gjennom dannelsen av løselige uspesifikke hjelpefaktorer - lymfokiner (cytokiner).

T-drepere (mordere) utfører effektorfunksjoner, og utfører cellulære former for immunresponsen. De gjenkjenner og lyserer celler på overflaten som det er fremmede antigener for en gitt organisme (tumor, viral og histokompatibilitet). Spredning og differensiering av T-drepere skjer med deltakelse av T-hjelpere, hvis handling utføres hovedsakelig ved hjelp av løselige faktorer, spesielt interleikin. Det er fastslått at morder-T-celler utfører en forsinket overfølsomhetsreaksjon.

T-y s i l og t e l og aktiverer immunresponsen innenfor T-subsystemet av immunitet, og T-hjelpere gir mulighet for dens utvikling i B-koblingen av immunitet som respons på tymusavhengige antigener.

T-suppressorer (suppressorer) gir intern selvregulering av immunsystemet på to måter: suppressorceller begrenser immunresponsen mot antigener; forhindre utvikling av autoimmune reaksjoner. T-suppressorer hemmer produksjonen av antistoffer og utviklingen av forsinket overfølsomhet; dannelsen av T-drepere sikrer dannelse og vedlikehold av immunologisk toleranse.

Immunminne T-celler gir en sekundær type immunrespons i tilfelle gjentatt kontakt av kroppen med dette antigenet. Antigenbindende reseptorer og Fe-reseptorer, IgA eller IgM finnes på membranene til T-celler. Nulllymfocytter har ikke karakteristiske markører for T- og B-lymfocytter. De er i stand til å utføre antistoffavhengig, komplementfri, lysis av målceller i nærvær av antistoffer spesifikke mot disse cellene. K-lymfocytter er en type null-lymfocytter. For dem er målcellene tumorceller, T- og B-lymfocytter modifisert av virus, monocytter, fibroblaster og erytrocytter.

B-lymfocytter. I likhet med T-lymfocytter er de dannet fra stamceller fra hematopoetisk vev. Forløperne til B-lymfocytter i bursaen til Fabricius gjennomgår differensiering og migrerer deretter til lymfeknuter og milt, hvor de utfører sine spesifikke funksjoner.

Tilstedeværelsen av to klasser av B-celler er etablert: B-effektorer og B-regulatorer. Effektorcellene til B-lymfocytter er antistoffdannende celler (plasma), som syntetiserer antistoffer med én spesifisitet, dvs. mot én antigen determinant. B-regulatorer er på sin side delt inn i suppressorer og forsterkere (forsterkere). Funksjonen til regulatorene er å frigjøre mediatorer som hemmer DNA-produksjonen i T- og B-lymfocytter kun innenfor benmargen, samt å forsterke B-effektorer. B-lymfocytter er større enn T-lymfocytter (henholdsvis 8 og 5 µm). Takket være elektronmikroskopi ble det funnet at overflaten til B-lymfocytter er dekket med mange villi og foldet, mens overflaten til T-lymfocytter er glatt.

SPØRSMÅL nr. 35 "ROLLEN TIL CELLULÆRE FAKTORER I ANTI-VIRAL IMMUNITET."

Det skiller seg fra humoral ved at effektorelementene for cellulær immunitet er T-lymfocytter og humorale - plasmaceller. Det er spesielt viktig for infeksjoner forårsaket av mange virus, bakterier og sopp.

Dannelse av cytotoksiske T-celler (TCC) - blant celleoverflate-Ags som kan forårsake dannelsen av TTC-syklusen - MHC-produkter (mononukleært system), virus, tumorspesifikke Ags. TCA-sykluser har reseptorer som antigen binder seg gjennom og prosesser som utløser cellelyse utløses. Den lytiske aktiviteten til T-cellene begynner med et nært samspill mellom mordercellen og målcellen, det oppstår en endring i membranpermeabiliteten til målcellen, som ender med brudd på cellemembranen.

PC-er har evnen til å lysere et bredt spekter av målceller, spesielt tumorceller, de kan lysere celler uavhengig av MHC-produkter (interferon og IL-2 øker den lytiske aktiviteten til PC-er).

HRT er en T-celleavhengig immunologisk respons som manifesterer seg som betennelse på stedet der Ag kommer inn i kroppen, vanligvis huden. Lymfocytter som kan tolerere HRT er T-celler og kalles TGRT-lymfocytter (de kan aktiveres og reagere på protein Ags, alloantigener, tumorantigener, på Ags av virus, bakterier, sopp, protozoer.

Makrofager spiller en viktig rolle i cellulær immunitet. Når patogener formerer seg inne i fagocytter, skjer intracellulær ødeleggelse først etter at makrofager mottar en stimulus fra spesielt sensibiliserte T-lymfocytter. T-lymfocytter aktiverer makrofager ved å frigjøre lymfokiner.

SPØRSMÅL nr. 36 "HUMORALE FAKTORERS ROLLE I ANTI-VIRAL IMMUNITET"

I tillegg til AT - en spesifikk faktor for antiviral immunitet - produserer kroppen spesielle virus-tropiske stoffer - hemmere som kan samhandle med virus og undertrykke deres aktivitet. Serumhemmere har et bredt spekter av virkning: noen undertrykker de hemagglutinerende egenskapene til virus, andre undertrykker deres cytopatogene effekt, og andre undertrykker deres infeksjonsaktivitet. Varmelabile inhibitorer finnes i normale sera fra mennesker og dyr. De har et bredt spekter av virusnøytraliserende effekter, er i stand til å blokkere den hemagglutinerende aktiviteten til influensavirus, New Castle sykdom, meslinger, arbovirus og andre og nøytraliserer de smittsomme og immunogene egenskapene til inhibitorsensitive virus. Varmestabile gammahemmere er svært aktive mot moderne varianter av influensaviruset. Varmestabile alfa-hemmere blokkerer den hemagglutinerende, men ikke den smittsomme, aktiviteten til viruset.

SPØRSMÅL nr. 37 "ANTIVIRAL VED, DERES EGENSKAPER, BIOLOGISKE ROLLE, DETEKSJON OG TITRERINGSMETODER."

AT er proteiner som dannes i kroppen ved parenteral administrering av høymolekylære stoffer med tegn på genetisk fremmedhet for den gitte organismen. Antistoffer er i stand til å interagere med antigen som respons på det ble dannet og nøytralisere dets biologiske aktivitet. Den vanlige kilden til AT er blodserum. Når du møter et antigen, nøytraliserer AT ikke bare dets smittsomme, men også dets hemagglutinerende aktivitet, fordi blokkerer virionreseptorer som er ansvarlige for hemagglutinering, noe som resulterer i dannelsen av "AG + AT"-komplekset.

Antistoffer kan eksistere i millioner av varianter, hver med sitt eget unike antigenbindingssted. Samlet kalt immunoglobulin (Ig), danner AT-proteiner en av hovedklassene av blodproteiner, og utgjør omtrent 20 % av totalt plasmaprotein etter vekt. Når Ag binder seg til de membranantigenspesifikke reseptorene til B-cellen, skjer celleproliferasjon og differensiering for å danne celler som skiller ut Ab. AT-er har 2 identiske Ag-bindingsseter. De enkleste AT-molekylene er skjematisk formet som bokstaven gamma med to identiske Ag-bindingssteder, ett på slutten av hver av de to "grenene". Siden det er 2 slike steder, kalles disse AT-ene bivalente. Den beskyttende effekten av antigener er ikke bare forklart av deres evne til å binde antigener. De utfører også en rekke andre funksjoner der "halen" er involvert, de kalles effektorfunksjoner og bestemmes ikke av deltakelsen av "halen" i dem, men av strukturen til Fc-fragmentet. Denne regionen av molekylet bestemmer hva som skjer med AG hvis den er bundet. Antistoffer med samme antigenbindende regioner kan ha svært forskjellige "hale"-regioner, og derfor forskjellige funksjonelle egenskaper. Ig G, D, E og serum IgA-molekylet består av 4 polypeptidkjeder - 2 lette og 2 tunge. Hos høyere vertebrater er det 5 forskjellige klasser av antistoffer - IgA, IgD, IgE, IgG, IgM, hver med sin egen klasse av tunge kjeder. IgG-antistoffer utgjør hovedklassen av Ig som finnes i blodet. De produseres i store mengder under den sekundære responsen og er de eneste antistoffene som kan gå fra mor til foster. Dette er den dominerende klassen av antistoffer som produseres i de fleste sekundære immunresponser, i de tidlige stadiene av den primære immunresponsen, kommer hovedsakelig IgM-antistoffer inn i blodet - de er også den første klassen av antistoffer som produseres ved å utvikle B-celler. IgA er hovedklassen av antistoffer i melkesekret, spytt, tårer, sekresjoner i luftveiene og tarmkanalen. AT-er beskytter virveldyr mot infeksjoner ved å inaktivere virus, mobiliserende komplement og ulike celler som dreper og oppsluker

implementerte MO-er.

SPØRSMÅL nr. 38 "INTERFERON OG DETS ROLLE I ANTI-VIRAL IMMUNITET."

Menneskeceller har 27 genetiske loki for interferoner (heretter referert til som I) – 14 er funksjonelle. Og kodet i cellens genetiske apparat. Det er alfa, beta, gamma - I. Systemet har ikke et sentralt organ, alle celler har evnen til å syntetisere det. For dannelsen er det nødvendig med induktorer (virus, bakterielle toksiner, ekstrakter fra bakterier og sopp, dobbelttrådet RNA (det mest effektive) og andre). Virusinfisert I – alfa og beta; Gamma-I dannes under påvirkning av fytohemagglutinin med SEA. Under induksjon av I syntetiseres 2 eller flere av dens typer. De mest aktivt induserende virusene er myxo- og arbovirus. Interferonogenisiteten til virus øker med en reduksjon i deres virulens for kroppen. Induktorer av ikke-viral natur stimulerer en raskere og kortvarig akkumulering av "tung" I (med høy molekylvekt) i kroppen. Og kan fås 4 timer etter intravenøs administrering av Ig. Og det påvirker ikke adsorpsjon, viropexis, deproteinisering av virioner, det undertrykker produksjonen av viruset. Det virker ikke på noe spesifikt virus, men på mange typer generelt. Og det er i stand til å forbedre fagocytisk aktivitet (makrofager, når de utsettes for I, har betydelig flere vakuoler, fester seg raskere til glass og fanger mer aktivt bakterier). Interferonmedisiner hemmer cellevekst og undertrykker veksten av tumorceller. Og det hemmer AT-dannelse og har en direkte effekt på B-lymfocytter. Og det bidrar til å øke morderaktiviteten til T-celler. Forbehandling av celler eller dyr med små doser And fører til en økning i produksjonen av And som svar på siste induksjon av syntesen (priming). Ved prosessering av produsenter, Og øker i mengder And, blir blokkering observert (motsatt effekt). Produksjonen av I påvirkes av ytre forhold (vær, lufttemperatur). Ioniserende stråling reduserer produksjonen av I. Når kroppen vokser, reduseres mengden av I-hemmere. Og unge dyr viser en redusert antiviral effekt sammenlignet med Og et voksent dyr, fordi produksjonen av mononukleære fagocytter reduseres. Under dannelsen av I i cellene til nyfødte, aktiveres og frigjøres cathepsin D fra lysosomer, noe som fører til proteolytisk nedbrytning av I. Etter hvert som veksten skjer, avtar komponentene som bidrar til frigjøringen av cathepsin D fra lysosomer. De mest følsomme for I er virus som har et ytre skall og inneholder lipider (myxovirus, koppegruppe, arbovirus). For medisinske og veterinære formål brukes hovedsakelig induktorer av endogen I, men eksogen I brukes også. I likhet med hormoner skilles I-ins ut av noen celler og overfører et spesifikt signal gjennom det intercellulære rommet til andre celler. Og - "proteinfaktor", som ikke har virusspesifisitet og dens antivirale aktivitet utføres med deltakelse av cellulær metabolisme, som involverer syntese av RNA og protein.

SPØRSMÅL nr. 39 “PRINSIPP FOR Å skaffe bakteriofager. BESTEMMELSE AV AKTIVITET OG PRAKTISK BRUK AV PHAGES."

Fagen oppnås ved å tilsette en spesiell fag til MO-kulturen, holdes i 24 timer ved en temperatur på 37 grader, filtreres gjennom bakteriefiltre, og filtratet kontrolleres for renhet ved inokulering; harmløshet og aktivitet, fagtiter.

Bestemmelse av fagaktivitet.

Bruk kvalitative og kvantitative metoder. Mengden fag bestemmes ved titrering på flytende eller fast næringsmedium. For å gjøre dette fortynnes fagen ti ganger. Samme mengde daglig bakteriebuljongkultur tilsettes til hver fortynning. Deretter legges de i en termostat og resultatet tas med i betraktning. Titeren bestemmes etter separering av blandingen på 1 dag i en termostat.

Fagtiteren anses å være dens høyeste fortynning, som er i stand til å forsinke veksten av MO. Uttrykt ved graden av fortynning. Bare virulente fager forårsaker fullstendig ødeleggelse av cellen og dannelse av fagpartikler.

SPØRSMÅL nr. 40 «PASSIV SPESIFIK FOREBYGGING AV VIRALE SYKDOMMER. PRINSIPPET OM MOTTA."

Forberedelser for passiv IP– for parenteral og oral administrering av AT eller Ig. For å utføre IP brukes immunsera, hyperimmune sera, rekonvaleserende og allogene sera.

Rekonvaleserende serum– serum fra donorer av friske eller infiserte dyr. Det brukes når det ikke er mer effektive midler ved en dose på 1 ml/kg kroppsvekt.

Hyperimmune serum– donorserum, som oppnås som et resultat av en enkelt administrering av massive doser antigen i henhold til et bestemt skjema. En frisk donor som ikke tidligere har lidd av denne sykdommen velges. Han er vaksinert og etter 2-3 uker begynner de å administrere det i henhold til et bestemt opplegg i økende doser, noe som bringer det til toppen av økningen i AT. Toppen bestemmes ved å sette en serologisk reaksjon til AT-titeren (serum sjekkes for sterilitet, aktivitet og ufarlighet. Dose 2 ml/kg (terapeutisk), 1-1,5 ml/kg (forebyggende). Administreres fraksjonert. Først en sensibilisert dose gis, og etter 2-3 timer er den tillate dose for å unngå anafylaktisk sjokk.

Allogen myse– kombinert myse, som er hentet fra forskjellige dyr på samme gård. Den inneholder et stort sett med AT-er og forskjellige AG-er.

SPØRSMÅL nr. 41 «SPESIFIK FOREBYGGING AV VIRALE SYKDOMMER. TYPER VAKSINER OG ADMINISTRASJONSMÅTER.

1. I praksisen med epizootologi øker en økning i størrelsen og tettheten av dyrepopulasjoner risikoen for epizootier. Hovedprinsippet i kampen mot dem er å bryte den smittsomme kjeden på alle områder eller stoppe overgangen av den epizootiske prosessen til en latent tilstand. Et av hovedverktøyene for å bryte kjeden er rettidig forebygging. For husdyrhold, utvikling på industriell basis, kampen mot alle faktorer, inkl. med patogene MO og virus er en av de viktigste betingelsene for et sunt husdyr. IP (immunforebygging), når det er riktig inkludert i strategien for å bekjempe smittsomme sykdommer, reduserer faren betydelig.

Målet med IP er ikke bare utryddelse av smittsomme sykdommer, men også bevaring av produktivitet, derfor er det nødvendig å strebe etter å lage vaksiner som kan gi en høy grad av beskyttelse for hele husdyrene umiddelbart etter vaksinasjon, uavhengig av alder på dyrene.

IP har en rekke fordeler:

1. Virkningsprinsippet til IP er basert på en spesifikk endring i dyrets kropp i retning av maksimalt å redusere muligheten for patogenet til å forårsake en smittsom sykdom.

2. IP virker kontinuerlig og over lang tid, noen ganger gjennom hele livet.

3.IP endrer ikke bare reaktiviteten til dyrets kropp, men øker også evnen til immunforsvar i hele husdyrene.

4. Effekten av IP på den epizootiske prosessen kan beregnes nøyaktig.

5. Med passende utvalg av vaksinasjonsmomenter gir PIer maksimal beskyttelse under de farligste periodene av livet for infeksjon.

6.IP kan knyttes til den teknologiske prosessen i dyrehold.

7. Legemidlene som brukes til IP kan doseres, brukes i ulike kombinasjoner og standardiseres.

8. I motsetning til AB og kjemiske legemidler, forårsaker ikke PI resistens i MO.

9. IP krever lavere økonomiske kostnader og kostnader for råvarer.

10. IP har ingen innvirkning på kvaliteten på animalske produkter.

Negativer:

1.Evaluering av den enkelte gründers evner. Eieren av dyret er ofte overbevist om at alt allerede er gjort for beskyttelse med vaksinasjon, noe som fører til en svekkelse av sanitære og hygieniske tiltak.

2.For stor økning i de endelige produksjonskostnadene.

3. Reaksjoner etter vaksinasjon, som i en viss tid reduserer produktiviteten dersom en utilstrekkelig testet vaksine brukes.

4. For hyppig forstyrrelse av dyr, noe som fører til redusert produktivitet.

5. Fremveksten av diagnostiske problemer og økende vanskeligheter i kampen mot sykdommer hvis vaksine og patogene stammer under normale forhold ikke skiller seg ut eller skilles med store vanskeligheter.

Upassende bruk av vaksiner kan forårsake skade, derfor, for hver spesifikk infeksjonssykdom og epizootisituasjon, er det nødvendig å nøye velge en vaksine og muligheten for bruk, tatt i betraktning økonomiske kostnader og effektivitet, for å sikre det høyeste resultatet av massevaksinasjoner.

Immunprofylakse ble utviklet på grunnlag av menneskehetens langvarige erfaring, ifølge hvilken mennesker som hadde infeksjonssykdommer ikke ble syke med dem en gang til. Da det var menneskelig pest i Athen. Thukydides rapporterte at de syke ble stående uten hjelp hvis de ikke ble tatt hånd om av folk som var i bedring. I Kina på 1500-tallet, da man hadde å gjøre med menneskelige kopper, var det en skikk: å inhalere tørkede knuste koppeskorper gjennom nesen. Jenner oppfant koppevaksinen. Pasteur foreslo en metode for vaksinasjon mot rabies.

Forebygging av virussykdommer er basert på de samme prinsippene som forebygging av andre smittsomme sykdommer:

1. Gjennomføring av organisatoriske aktiviteter.

3. Kjemoprofylakse.

Spesifikk forebygging av virussykdommer sikres ved bruk av levende, inaktiverte, poly- og monovalente sera.

Klassifisering og karakteristikker av immunopreparater:

Biologiske produkter er produkter av biologisk opprinnelse som brukes til aktiv og passiv IP.

Preparater for passiv IP – for parenteral og oral administrering av AT eller Ig. For å utføre IP brukes immunsera, hyperimmune sera, rekonvaleserende og allogene sera.

Rekonvalescent serum er serum fra donorer av friske eller infiserte dyr. Det brukes når det ikke er mer effektive midler ved en dose på 1 ml/kg kroppsvekt.

Hyperimmune sera er donorsera som er oppnådd som et resultat av en enkelt injeksjon av massive doser antigen i henhold til et bestemt skjema. En frisk donor som ikke tidligere har lidd av denne sykdommen velges. Han er vaksinert og etter 2-3 uker begynner de å administrere det i henhold til et bestemt opplegg i økende doser, noe som bringer det til toppen av økningen i AT. Toppen bestemmes ved å sette en serologisk reaksjon til AT-titeren (serum sjekkes for sterilitet, aktivitet og ufarlighet. Dose 2 ml/kg (terapeutisk), 1-1,5 ml/kg (forebyggende). Administreres fraksjonert. Først en sensibilisert dose gis, og etter 2-3 timer er den tillate dose for å unngå anafylaktisk sjokk.

Gamma-globuliner oppnås fra hyperimmune sera ved å frigjøre ballastproteiner. De administreres subkutant eller intramuskulært i en dose på 0,5-2 ml/kg. Først administreres sensibilisering, deretter en oppløsende dose.

Allogen myse er en kombinert myse som er hentet fra forskjellige dyr på samme gård. Den inneholder et stort sett med AT-er og forskjellige AG-er.

Forberedelser for aktiv immunisering - vaksiner. Det finnes levende og inaktiverte vaksiner.

Vaksiner klassifiseres også etter: 1) Initialt virusholdig materiale - vev, embryovirusvaksiner, dyrkede virusvaksiner; 2) ved dempningsmetoden - lapinisert (mot munn- og klovsyke, kvegpest og andre, bruk kaniner), kaprinisert (gjennom kroppen til en geit, mot sauekopper ved å passere gjennom flere geiter, mot storfe), ovinisert (gjennom sau - mot kvegpest, munn- og klovsyke).

Metoder for administrasjon av vaksine:

1.Subkutant

2. Intramuskulært

3. Aerosol

4. Rektal metode

5. Intranasal

SPØRSMÅL nr. 42 "INAKTIVERTE ANTIVIRALE VAKSINER, DERES OPNÅELSE, EGENSKAPER, ANVENDELSE, FORSKJELL FRA LEVENDE VAKSINER."

Inaktiverte vaksiner er komplekse preparater. Produksjonen deres krever en stor mengde virus. Hovedkravet for drepte vaksiner er fullstendig og irreversibel inaktivering av genomet med maksimal bevaring av antigendeterminanten og immunbeskyttelse av vaksinerte dyr. For å oppnå inaktiverte vaksiner er formalin, kloroform, tiomersal, hydroksylamin, etanol, beta-propiolakton, etylenimin, UV- og gammabestråling, og temperatur mye brukt som inaktiveringsmidler. Inaktiverte vaksiner brukes kun parenteralt. De inkluderer nødvendigvis adjuvanser - uspesifikke stimulatorer av immunogenese. En større dose er nødvendig og som regel gjentatt administrering. De skaper mindre intens, kortvarig immunitet enn med levende vaksiner.

SPØRSMÅL nr. 43 "FAKTORER AV ANTI-VIRAL IMMUNITET, DERES KARAKTERISTIKKER."

Spesiell

1) Assosiert med kvalitativt unike beskyttelsesmekanismer, fordi virus er ikke i stand til å utvikle seg utenfor en levende celle 2) Beskyttelse er rettet mot 2 former for substantiv. virus: utenfor og inne i celler. Hvileformen påvirkes av spesifikke og uspesifikke faktorer, humorale og cellulære beskyttende faktorer. Vegetative former – interferon, som forhindrer syntesen av viralt mRNA. 3) Virusnøytraliserende antistoff reagerer ikke med virusinformasjon NK. 4) Metoder og midler for å nøytralisere viruset er effektive bare på et visst stadium. 5) Spesielle beskyttelsesfaktorer: dannelsen av ekstracellulære oksyfile og basofile granuler og tilstedeværelsen av antivirale hemmere. 6) Denne immuniteten er langvarig, og noen ganger livslang.

Uspesifikke cellulære og generelle fysiologiske reaksjoner.

Temperatur

Hormoner reduserer motstanden, men somatotrope hormoner øker motstanden og forsterker den inflammatoriske responsen.

Et drektig dyr blir raskere syk og sykdommen er mer alvorlig.

Den fysiologiske tilstanden til ekskresjonssystemet er hastigheten for virusfrigjøring fra kroppen.

Humorale faktorer - tilstedeværelsen av serumhemmere (varmestabile eller varmelabile). Hver art har sin egen dominerende type.

SPØRSMÅL nr. 44 "LEVENDE ANTI-VIRALE VAKSINER, DERES EGENSKAPER, ANVENDELSE OG FORSKJELLER FRA INAKTIVERTE VAKSINER."

Levende antivirale vaksiner er lyofiliserte suspensjoner av vaksinestammer av virus dyrket i ulike biologiske systemer (EC, CC, laboratoriedyr) eller bruker naturlig svekkede stammer av patogenet som skapes under en langvarig epizooti. Hovedegenskapen er det vedvarende tapet av evnen til å forårsake en typisk smittsom sykdom i kroppen til et vaksinert dyr, de har også evnen til å "slå rot" i dyrets kropp, det vil si å formere seg. Opphold og reproduksjon av vaksinestammen varer vanligvis 5-10 dager. opptil flere uker og er ikke ledsaget av kliniske manifestasjoner som er karakteristiske for denne sykdommen, fører til dannelse av immunitet mot infeksjonssykdommen. Fordeler: høy intensitet og varighet av immuniteten de skaper, nærmer seg post-infeksiøs immunitet. Mulighet for de fleste enkeltadministrasjon. Administrering er ikke bare subkutan, men også oralt og internt. Ulemper: følsomhet for uheldige faktorer. Strenge lagrings- og transportgrenser - temperatur - 4-8C. Det er uakseptabelt å bryte vakuumet i vaksineampuller. Streng overholdelse av asepsis regler. Kvalitetskontroll: 1) omfattende undersøkelse av givere. 2) vurdering av kvaliteten på næringsmediet og QC for sterilitet. 3) Tilsyn med kvaliteten på produksjonsvirusstammer. 4) Skape optimale forhold for bevaring av biomaterialer.

Inaktiverte vaksiner skaper mindre intens og langvarig immunitet de må administreres gjentatte ganger.

SPØRSMÅL nr. 45 "BAKTERIOFAGER, DERES BETYDNING OG GRUNNLEGGENDE EGENSKAPER."

Bakteriofager (fra lat. Bacteriophaga) – ødelegger bakterier. Dette er virus som har evnen til å trenge inn i bakterieceller, formere seg i dem og forårsake deres død.

Historien om oppdagelsen av bakteriofagen er assosiert med akademiker Gamaley, som observerte utilsiktet lysis av miltbrannbakterier.

Tvort - beskrev degenerasjonen av stafylokokker (1915). D'Herelle (1917) studerte i detalj samspillet mellom fagen og bakteriene til dysenteribasillen og ga midlet navnet "bakteriofag". Deretter ble virus av sopp, mykoplasma og andre mikroorganismer isolert. Derfor, for å referere til disse virusene, brukes begrepet "fag" - eater.

Fagstruktur og morfologi.

Fager består av DNA/RNA-nukleinsyre omgitt av et kapsid som inneholder strengt orienterte kapsomerer. Store fager har en rumpetroll-lignende struktur, har et hode, en krage og en haleprosess som ender i en sekskantet basalplate som fibriller er festet til. Hodet har 2 skall: en ytre membran og en indre membran som AK er innelukket i. Gjennomsnittlig størrelse på hodet er 60-100 nm, halen er 100-200 nm. I følge morfologi er fager delt inn i 6 grupper:

Fager med en lang prosess, hvis kappe trekker seg sammen - T-jevne fager.

Fager med en lang prosess, hvis kappe ikke trekker seg sammen.

Fager med en prosessanalog.

Fager med kort prosess.

Filamentøse fager.

Fager uten prosess.

Kjemisk sammensetning av fagen.

Faghodet inneholder en av nukleinsyrene. Skallet inneholder også lipider og karbohydrater. Fager tåler trykk på opptil 6 tusen atmosfærer. De er motstandsdyktige mot miljøpåvirkninger og beholder sin aktivitet i reserveampuller i opptil 13 år.

De dør raskt under påvirkning av koking, UV-lys og visse kjemikalier (1% fenol, alkohol, kloroformeter endrer ikke fagen). Noen stoffer: tymol, kloroform, dinitrofenol har ingen effekt på fager, men dreper bakterier.

En 1% formalinløsning inaktiverer fagen. Fager skilles: polyfager (lyserelaterte bakterier), monofager (lyserelaterte bakterier), monofager (lysebakterier av samme art), fager som forårsaker lysis av en spesifikk serotype av 1. art. Basert på deres typespesifikke egenskaper er fager delt inn i serotyper. Spesielle fager kan enkelt tilpasses beslektede bakterier ved å ri på bakterier av samme art. Fenomenet bakteriofagi kan lett observeres i både flytende og faste næringsmedier. Hvis du inokulerer en kultur i en tallerken med et næringsmedium og påfører noen få dråper høykonsentrasjonsfag, vil det ikke være noen vekst på dette stedet - sterile flekker. I henhold til mekanismen for interaksjon med celler er fager delt inn i virulente og moderate.

Fenomenet bakteriofagi forårsaket av tempererte fager manifesterer seg bare i form av faser av adsorpsjon, penetrering i celler, reproduksjon og frigjøring av fagen. Hele reproduksjonsprosessen følger mønsteret til DNA-virus. Virulente fager sørger for dannelse av nye fager og lysis av bakterieceller. Det er fastslått at 7-8 fagpartikler vises i faginfiserte bakterier i løpet av 1 minutt.

Reproduksjonsdiagram.

1. Adsorpsjon av fag på MO-skallet og dets oppløsning. Fager adsorberes av flagellene deres, disse flagellene kobler seg fast til reseptorene i celleveggen, som et resultat av at fagpartikkelen trekker seg sammen og slutten av prosessen fester seg i bakteriecellemembranen og samtidig skiller fagen ut et lysozym -lignende enzym som løser opp cellemembranen.

2. Injeksjon av nukleinsyre i den mikrobielle cellen. All nukleinsyren og en del av proteinene injiseres i den mikrobielle cellen.

3.Latent fase – formørkelsesfase. Fasen fremmer utviklingen av DNA-virus. I begynnelsen syntetiseres mRNA, det gir opphav til syntesen av tidlige virale proteiner, som stopper cellulær metabolisme og gir opphav til dannelsen av datternukleinsyrer.

4. Dannelse av nye fagpartikler. Koblingen av to hovedfagpartikler ved å fylle fagproteinskallet med nukleinfagpartikler.

5. Oppløsning av bakteriecellemembranen og frigjøring av nydannede partikler utenfor cellen. Bruddet av celleveggen lettes av: en sterk økning i intracellulært trykk, og på den annen side virkningen av enzymatiske prosesser forårsaket av fager. Antallet oppfattede fager varierer og varierer fra 1 til 1000 eller mer.

Hele reproduksjonsprosessen tar fra 3 til 10 timer.

Lysogeni - sammen med virulente fager, er det også tempererte fager som er forskjellige i naturen av deres interaksjon med bakteriecellen. Hovedtrekket deres er at de er i stand til å forvandle seg fra en vegetativ tilstand til en ikke-smittsom form kalt en profag, som ikke er i stand til å forårsake bakteriell lysis. Bakterieceller som inneholder en profag på kromosomet kalles lysogene, og fenomenet er lysogeni. I dette fenomenet lyseres ikke bakterier infisert med fagen. Men kunstig lyse kan frigjøre en fag som kan infisere bakterier av en gitt art. Overgangen av en profag til en vegetativ fag skjer ikke ofte. Når infisert med tempererte fager, lyseres en del av cellene for å danne en vegetativ fag, og den andre delen overlever og blir lysogen.

I lysogene bakterier integreres fag-DNAet i cellens DNA og den tempererte fagen omdannes til en profag, som ikke har lytiske egenskaper.

Lysogene bakterier dannet som et resultat av lysogenisering blir bærere av fagen og får immunitet i lang tid. Denne forbindelsen er sterk og forstyrres når bakterien utsettes for induserende midler. Dette er UV-stråler, ioniserende stråling, kjemiske mutagener. Under påvirkning av disse faktorene overføres profeten til en autonom tilstand og oppløsning oppstår.

Lysogenisering av bakterier er ledsaget av en endring i deres egenskaper (morfologiske, kulturelle og biologiske egenskaper). Ikke-giftige stammer blir giftige. Endre egenskapene til bakterier - fagomdannelse. Lysogene bakterier er de mest praktiske modellene for å studere interaksjonen mellom virus og celler.

For tiden er tempererte fager mye brukt til å studere spørsmål om genetikk, ved hjelp av hvilke det er mulig å differensiere variasjonsprosessene mer nøyaktig. Under påvirkning av stråling øker antallet fagpartikler produsert av cellene til lysogene bakterier.

Praktisk bruk av fager - fager brukes til å titrere bakterier, behandle og forebygge en rekke infeksjonssykdommer, og brukes til å bestemme strålingsdosen på romfartøy.

SPØRSMÅL nr. 46 "LABORATORIEDYR, MÅL OG METODER FOR BRUK AV DERES I VIRUSOLOGI."

På grunn av det faktum at virus bare kan reprodusere i levende celler, i de tidligste stadiene av utviklingen av virologi, ble dyrking av virus i kroppen til laboratoriedyr, spesielt oppdratt for forskning på dem, mye brukt.

Brukes: 1) for å påvise viruset i PM 2) primær isolasjon av viruset fra PM 3) akkumulering av virusmassen 4) opprettholdelse av viruset i laboratoriet i aktiv tilstand. 5) titrering av viruset 6) som et testobjekt i pH 6) oppnå hyperimmune sera. Dyr som brukes: hvite mus (rabies, munn- og klovsyke), hvite rotter (svineinfluensa, Aujeszkys sykdom), marsvin (rabies, munn- og klovsyke, hundevalpe). Kaniner (rabies, kanin myxomer).

Krav til laboratoriedyr - dyret må være følsomt for dette viruset; dens alder er av stor betydning for dyrking av mange virus. De fleste virus formerer seg bedre i kroppen til unge og til og med nyfødte dyr; standard følsomhet oppnås ved å velge dyr med en viss alder og samme vekt. Når det gjelder følsomhet, har de såkalte lineære dyrene som er oppnådd som følge av innavl over en rekke generasjoner størst standard; forsøksdyr må være friske. Dyr som kommer inn i vivariumet til virologilaboratoriet må bringes fra en gård fri for smittsomme sykdommer. De holdes i karantene og gjennomgår klinisk observasjon. Hvis det er en sykdom, blir de ødelagt.

Dyr plasseres på en slik måte at på den ene siden sikres funksjon av alle kroppssystemer innenfor fysiologiske normer, og på den annen side utelukkes gjensidig reinfeksjon og smittespredning utover vivarium. Ulike metoder for individuell merking brukes for dyr av forskjellige arter. For store dyr og kyllinger brukes metallmerker med stemplet nummer. Ved bruk av en liten gruppe dyr i et forsøk og i en kort periode kan håret trimmes med merker på rygg og hofter. Merking av hvite mus og hvite rotter kan utføres ved amputasjon av individuelle fingre på for- eller baklemmer. Metoden for å påføre fargede flekker på upigmentert ull brukes ofte. Infeksjon av forsøksdyr.

1. subkutant - tilbake.

2. Intradermal – hæl

3. Intramuskulært – lår

4. Intravenøst ​​- inn i halen (foreløpig gnidd med varmt vann og klem)

5. Intranasalt - en dråpe i nesen (en svak eterbedøvelse gis først for å forhindre nysing)

6. Interocerebral - skallen er forsiktig boret med en nål, ikke trykk, dråpen går bort av seg selv.

Alle overflater er forhåndssmurt med iodisert alkohol.

Forberedelseslaboratorium. dyr (ved å bruke eksemplet med en hvit mus)

Huden smøres med et desinfeksjonsmiddel.

Et snitt gjøres langs linea alba.

Åpning av brystbenet - lungene tas og legges i rør nr. 1

Åpning av bukhulen - leveren, milten, nyrene tas og legges i rør nr. 2.

Hodeskallen er åpnet. Hjernen tas, seksjoner av 4 lag lages, bitene legges på filterpapir og trykk lages på glass.

SPØRSMÅL nr. 47 “STRUKTUR AV ET UTVIKLENDE KYLLINGEMBRYO. HOVEDPROBLEMER LØST VED SMITTEMETODEN VED TBE OG FORDELENE OVER DYRKING AV VIRUS PÅ LABORATORIEDYR.

CE brukes i virologi hovedsakelig til samme formål som LV: påvisning av aktivt virus ved bioassay i patologisk materiale; primær isolasjon av viruset; vedlikehold av virus i laboratoriet; virustitrering; akkumulering av viruset for laboratorieforskning og innhenting av vaksiner; som testobjekt i nøytraliseringsreaksjonen.

Struktur: 1. Skall 2. Underskallmembran 3. Luftkammer 4. Allantoisk hulrom 5. Plommesekk 6. Albuminsekk 7. CHAO - chorion-allantoisk membran 8. Fosterhule 9. Embryo 10. Snor (forbindelse til plommesekken) navlestrengen). Fra 5-12 dager kan EC brukes ved infeksjon

1) Skallet og underskallmembranen tjener som god beskyttelse mot miljøfaktorer. 2) EC inneholder et substrat for dyrking av viruset. 3) CE er motstandsdyktige mot påvirkninger forbundet med frigjøring av materialet som studeres. 4) EC-er er lett tilgjengelige, miljøvennlige, krever ikke stell eller fôring, og danner ikke AT.

6 infeksjonsmetoder med TBE: 1) Infeksjon i allantoishulen (influensa, Newcastle disease). EC festes vertikalt med den butte enden opp, og det lages et 1 mm hull på siden av embryoet 5-6 mm over grensen til luftkammeret. Nålen settes inn parallelt med lengdeaksen til en dybde på 10-12 mm. 2) for CAO (kopper, hundepest): a) S/h naturlig luftkammer. FE inn i et stativ med den butte enden opp, et 15-20mm vindu i skallet motsatt midten av luftkammeret. Fjern skallmembranen. 0,2 mm suspensjon påføres XAO. Hull selvklebende gips. b) S/h kunstig luftkammer. Stativet er horisontalt med knoppen opp. Lag 2 hull: over midten av luftkammeret, ytterligere 0,2-0,5 cm på siden, på siden av embryoet. Luften suges ut av det første embryoet, det dannes et kunstig luftkammer, hvis bunn er CAO, en smittsom væske påføres den, og den er forseglet med et klebende plaster. 3) I plommesekken (chlamydia, Mareks b.): a) EC plasseres vertikalt i et stativ. Et hull over midten av luftkammeret, en nål 3,5-4 cm i en vinkel på 45, motsatt av plasseringen av embryoet. b) en lignende smittevei utføres på et horisontalt forsterket CE-stativ; i dette tilfellet er embryoet nederst, og eggeplommen er over det. 4) Inn i fostervannet (influensa, Newcastle sykdom): metoden er lukket - embryoet. opp. Nålen settes inn med en butt ende mot det åpne embryoet. metode - et hull på 1,5-2,5 cm over lufthulen. Underskallmembranen fjernes. Pinsett skyver XAO mot embryoet. Deretter trekkes fosterhinnen sammen med CAO til vinduet, og suspensjonen introduseres der. De lar deg gå. Plaster. 5) Infeksjon i embryoets kropp. 6) inn i blodårene.

SPØRSMÅL nr. 48 «TYPER AV CELLEKULTURER OG DERES BRUK I VIRUSOLOGI. KORT KARAKTERISTIKK FOR HVER ART.»

Cellekultur (CC) er cellene til en flercellet organisme som lever og formerer seg under kunstige forhold utenfor kroppen. Dyrkingsteknikken begynte å utvikle seg spesielt vellykket etter 40-tallet. Dette ble tilrettelagt av følgende hendelser: oppdagelsen av antibiotika som forhindrer bakteriell infeksjon av CC, oppdagelsen av Hang og Enders av virusets evne til å forårsake spesifikk celleødeleggelse. Dulbecco og Vogt (1952) foreslo en metode for trypsinisering av vev og oppnåelse av enkeltlags CC-er. Følgende CC-er brukes: 1) PTCC – celler hentet direkte fra organer eller vev i kroppen, vokser in vitro i ett lag. CC kan fås fra nesten alle menneskelige eller dyreorganer eller vev. Det er bedre å gjøre dette fra embryonale organer, fordi embryonale celler har et høyere vekstpotensial. Oftest er de hentet fra nyrene, lungene, huden, thymus og testiklene. For å få primærceller fra et friskt dyr, senest 2-3 timer etter slakting, tas de tilsvarende organene eller vevet, knuses og behandles med trypsin, pankreatin og kollagenase. Enzymer ødelegger intercellulære stoffer, og de resulterende individuelle cellene suspenderes i et næringsmedium og dyrkes på den indre overflaten av reagensrør eller madrasser i en termostat ved 37C. Cellene fester seg til glasset og begynner å dele seg. Det dannes et lag en celle tykt på glasset, vanligvis etter 3-5 dager. Næringsmediet endres når det blir forurenset med celleavfallsprodukter. Monolaget vil forbli levedyktig i 7-21 dager. Ved dyrking av virus i CC er det mulig å få til preparater med høy titer av viruset, noe som er viktig når man skal skaffe antigener og vaksiner. 2) Subkulturer - de brukes ofte og hentes fra primærceller dyrket i madrasser ved å fjerne dem fra glasset med en løsning av versene eller trypsin, resuspendere dem i et nytt næringsmedium og så dem på nye madrasser eller reagensrør. Etter 2-3 dager dannes et monolag. De er ikke dårligere i følsomhet for PTCA og er mer økonomiske. 3) Transplanterbare CC-er er celler som er i stand til å formere seg utenfor kroppen i uendelig lang tid. De vedlikeholdes i laboratoriet ved subkultur fra ett kar til et annet (med forbehold om utskifting av næringsmediet). De er hentet fra primære CC-er med økt vekstaktivitet gjennom langsiktige subkulturer i en viss dyrkingsmodus. Cellene i transplanterte kulturer har samme form, et heteroploid sett av kromosomer, er stabile under in vitro vekstforhold, og noen av dem har onkogen aktivitet. "+" før de primære - det er lettere å forberede, du kan sjekke på forhånd for tilstedeværelsen av latente virus og mikroflora; klonale linjer gir flere standardbetingelser for virusutbredelse enn primærlinjer. De fleste transplanterte celler har et bredere spekter av følsomhet for virus enn de tilsvarende primærkulturene. Men de er utsatt for ondartet degenerasjon. 4) Diploide CC-er er en morfologisk homogen populasjon av celler, stabilisert under in vitro-dyrking, med begrenset levetid, karakterisert ved 3 vekstfaser, som bevarer karyotypen som er karakteristisk for det opprinnelige vevet under passasje, fri for forurensninger og ikke har tumorogen aktivitet ved transplantasjon til hamstere. De er også hentet fra primære celler. Derimot har de begrensede passeringsmuligheter. Maksimalt antall passasjer er 50 -\+ 10, deretter reduseres antallet delende celler kraftig og de dør. Fordeler fremfor transplanterbare CC-er - de kan være i en levedyktig tilstand i 10-12 dager uten å endre næringsmediet; når du bytter medium en gang i uken, forblir de levedyktige i 4 uker; De er spesielt egnet for langtidsdyrking av virus, de beholder følsomheten til det opprinnelige vevet for virus. 5) Suspensjon CCs – kontinuerlige cellekulturer i suspensjon.

SPØRSMÅL nr. 49 “PRIMÆRE TRYPSINISERTE CELLEKULTURER. DERES FORDELER OG ULEMPER. ANVENDELSE I VIROLOGISK FORSKNING".

PTCC er celler hentet direkte fra organer eller vev i kroppen, som vokser in vitro i ett lag. CC kan fås fra nesten alle menneskelige eller dyreorganer eller vev. Det er bedre å gjøre dette fra embryonale organer, fordi embryonale celler har et høyere vekstpotensial. Oftest er de hentet fra nyrene, lungene, huden, thymus og testiklene. For å få primærceller fra et friskt dyr, senest 2-3 timer etter slakting, tas de tilsvarende organene eller vevet, knuses og behandles med trypsin, pankreatin og kollagenase. Enzymer ødelegger intercellulære stoffer, og de resulterende individuelle cellene suspenderes i et næringsmedium og dyrkes på den indre overflaten av reagensrør eller madrasser i en termostat ved 37C. Cellene fester seg til glasset og begynner å dele seg. Det dannes et lag en celle tykt på glasset, vanligvis etter 3-5 dager. Næringsmediet endres når det blir forurenset med celleavfallsprodukter. Monolaget vil forbli levedyktig i 7-21 dager. Ved dyrking av virus i CC er det mulig å få til preparater med høy titer av viruset, noe som er viktig når man skal skaffe antigener og vaksiner. Ved å bruke QC-metoden ble noen teoretiske spørsmål løst - om interaksjonen mellom viruset og cellen, stedet for virusreproduksjon, mekanismen for antiviral immunisering. For tiden brukes QC for å isolere virus fra patogent materiale, deres indikasjon, identifikasjon, for å sette opp en nøytraliseringsreaksjon, bestemme titer av virus, for å forberede diagnostiske Ags og vaksiner, og som testobjekter i en nøytraliseringsreaksjon.

SPØRSMÅL nr. 50 “NÆRINGSMIDLER OG LØSNINGER BRUKT I VIRUSOLOGI. KRAV TIL redskaper for CC-DYRKING, BEHANDLING AV DET.”

De mest brukte løsningene når du arbeider med CC er Hanks- og Earle-løsninger, som er tilberedt ved bruk av dobbeltdestillert vann med tilsetning av forskjellige salter og glukose. Disse balanserte saltløsningene brukes til å tilberede alle kulturmedier fordi... de sikrer bevaring av pH, osmotisk trykk i cellene og passende konsentrasjon av nødvendige uorganiske stoffer. De brukes også til å vaske vekk vekstmedier, virusfortynninger osv. Ved dyrking av celler brukes dispergeringsløsninger av trypsin og versene. Trypsinløsning brukes til å separere vevsbiter i individuelle celler og for å fjerne cellelaget fra glasset. Versene-løsning - brukes til å fjerne celler fra glass. Næringsmedier (heretter kalt NS) - skille: 1) naturlige medier, som består av en blanding av saltvannsoppløsning, blodserum, vevsekstrakt, bovint fostervann osv. Antall komponenter varierer. De brukes sjelden. 2) kunstig PS - enzymatiske hydrolysater av ulike proteinprodukter: laktalbuminhydrolysat, muskelenzymatisk hydrolysat, etc. Av de syntetiske mediene er de mest brukte medium 199 og Eagles medium. Indikatoren fenolrød tilsettes alle kulturmedier og noen saltløsninger for å bestemme konsentrasjonen av hydrogenioner. For å ødelegge mikrofloraen før bruk, tilsett AB til mediet: penicillin og streptomycin, 100 enheter per ml. Alle PS er delt inn i 2 grupper: vekst – sikre liv og reproduksjon av celler; støtte - å sikre den vitale aktiviteten til cellene, men ikke deres reproduksjon (de inneholder ikke blodserum). Glass - Kvaliteten på glassvarer er viktig for vellykket dyrking av celler utenfor kroppen. Det skal være sterilt, fettfritt og ikke ha noen giftig effekt. For celledyrking brukes reagensglass, madrasser på 50, 100, 250, 500, 1000, 1500 ml, rullekolber på 500, 1000, 2000 ml, ulike pipetter, flasker for PS og løsninger, og kolber med forskjellig kapasitet. Behandlingen av glass består av flere trinn: 1) det infiserte glasset nedsenkes i en 2-3% NaOH-løsning i 5-6 timer; 2) skyll i 3-4 skift av springvann; 3) bløtlegg i en 0,3-0,5% pulverløsning; 4) vask grundig med en børste i en varm pulverløsning; 5) skyll i flere skift av springvann; 6) skyll i destillert vann inneholdende 0,5 % HCl; 7) skyll 4-5 ganger med vann fra springen og 3 bytter destillert vann; 8) tørket i et tørkeskap; 9) montert og sterilisert i en ovn eller autoklaveret.

SPØRSMÅL nr. 51 «PRINSIPPET FOR INFEKTION AV CELLEKULTURER MED VIRUSINNHOLDENDE MATERIAL. INDIKASJON PÅ VIRUS I CELLEKULTUR."

For infeksjon velges reagensrør (madrasser) med et kontinuerlig celle-monolag, og se dem under et mikroskop med lav forstørrelse. Vekstmediet dreneres, cellene vaskes 1-2 ganger med Hanks-oppløsning for å fjerne serumantistoffer og inhibitorer. 0,1-0,2 ml virusholdig materiale tilsettes hvert rør og fordeles jevnt over cellelaget ved risting. La stå i 1-2 timer ved 22-37C for virusadsorpsjon på celleoverflaten. Det virusholdige materialet fjernes fra beholderne og støttemediet helles. For indikasjon er det følgende hovedmetoder for å indikere viruset i CC: ved cytopatisk effekt eller cytopatisk effekt; ved en positiv hemadsorpsjonsreaksjon; ved plakkdannelse; for påvisning av intracellulære inneslutninger; å oppdage virus i immunfluorescensreaksjoner; å oppdage virusinterferens; å undertrykke cellemetabolisme (fargetest); elektronmikroskopi. Påvisning av spesifikk celledegenerasjon (ved CPD) - et enkelt tegn er degenerative endringer i celler (manifestation av CPD). Synlige endringer i cellen kalles cytopatiske endringer. Disse endringene i infiserte celler avhenger av dosen og de biologiske egenskapene til viruset som studeres, og manifestasjonen av CPE og dets egenskaper tillater noen ganger identifikasjon av de isolerte virusene. Når KK er infisert med middels doser av viruset, er arten av disse endringene spesifikke og kan klassifiseres i grupper: fokal finkornet degenerasjon, finkornet degenerasjon gjennom hele monolaget, fokal klyngeformet akkumulering av runde celler, ensartet granularitet, assosiasjon av celler til gigantiske multinukleære symplaster og syncytia. Graden av degenerasjon vurderes ved hjelp av et 4-punktssystem.

Noen ganger observeres fravær av CPD, men dette anses ikke å være fravær av virus, og derfor utføres 2-3 blindpassasjer og ved 2-3 passasje kan virusene vise de ønskede egenskapene.

SPØRSMÅL nr. 52 "METODER FOR OPPVISNING AV VIRIONER OG VIRALE INKLUSJONSORGANER, DERES PRAKTISKE BETYDNING."

Det er vanligvis mulig å undersøke virusvirioner og etablere deres struktur ved hjelp av elektronmikroskopi, som gjør at man kan skille gjenstander opp til 0,2-0,4 nm i størrelse. Påvisning av virioner i materiale fra syke dyr ved hjelp av elektronmikroskopi kan tjene som bevis på tilstedeværelsen av virus i dette materialet og brukes i noen tilfeller til å diagnostisere virussykdommer. Men denne metoden er teknisk kompleks og kostbar, og tillater ikke nøyaktig identifisering av det oppdagede viruset. Med et lysmikroskop er det mulig å se kun virioner av koppevirus på grensen av synlighet. Evnen til å bli farget med visse fargestoffer, størrelsen, formen, strukturen, plasseringen i cellen av inklusjonslegemer dannet av forskjellige virus er ikke den samme, men er spesifikke for hvert virus. Derfor lar påvisningen av intracellulære inklusjonslegemer med visse egenskaper i materiale fra syke dyr oss bedømme hva slags virus de ble dannet, og derfor tilstedeværelsen av dette viruset i materialet som studeres. For å oppdage inklusjonslegemer, utarbeides utstryk eller utskrifter (posthumt eller intravitalt), som utsettes for spesielle fargingsmetoder etterfulgt av mikroskopi. For inklusjonslegemer dannet av forskjellige virus, er fargingsmetoder forskjellige. Mange fargeoppskrifter er utviklet. Blant dem er det også universelle, som inkluderer hematoxylin-eosin-farging.

Virologi.

Andre mykoplasmer som er patogene for mennesker.

Mycoplasma lungebetennelse.

Mycoplasma pneumoniae.

M. pneumoniae skiller seg fra andre arter ved serologiske metoder, så vel som ved egenskaper som b-hemolyse av røde blodceller fra sau, aerob reduksjon av tetrazolium og evnen til å vokse i nærvær av metylenblått.

M. pneumoniae er den vanligste årsaken til ikke-bakteriell lungebetennelse. Infeksjon med denne mykoplasmaen kan også ta form av bronkitt eller mild luftveisfeber.

Asymptomatiske infeksjoner er vanlige. Familieutbrudd er vanlig, og store utbrudd har forekommet i militære treningssentre. Inkubasjonstiden er omtrent to uker.

M. pneumoniae kan isoleres ved dyrking av sputum og svelgprøver, men diagnosen stilles lettere ved serologiske metoder, vanligvis komplementfikseringstesten. Diagnosen mykoplasma lungebetennelse blir hjulpet av det empiriske funnet at det hos mange pasienter dannes kalde agglutininer til menneskelige røde blodceller i gruppe 0.

Mycoplasmas er normalt innbyggere i reproduktive kanalen til menn og kvinner. Den vanligste arten er M. hominis, som er ansvarlig for noen tilfeller av vaginal utflod, uretritt, salpingitt og bekkensepsis. Det er den vanligste årsaken til postpartum sepsis.

Mikroorganismen kan komme inn i mors blod under fødsel og lokaliseres i leddene. En gruppe mykoplasmer (ureaplasmer) som danner bittesmå kolonier regnes som en mulig årsak til ikke-gonokokkuretritt hos begge kjønn. Andre arter er normale kommensaler i munnhulen og nasofarynx.

Forebygging. Det kommer ned til å opprettholde et høyt nivå av generell motstand i menneskekroppen. En vaksine laget av drepte mykoplasmer for spesifikk forebygging av atypisk lungebetennelse er oppnådd i USA

1. Pyatkin K.D., Krivoshein Yu.S. Mikrobiologi. - K: Høyere skole, 1992. - 432 s.

Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Mikrobiologi. - M: Medisin, 1983. - 312 s.

2. Borisov L.B., Kozmin-Sokolov B.N., Freidlin I.S. Veiledning til laboratorietimer i medisinsk mikrobiologi, virologi og immunologi / red. Borisova L.B. – G.: Medisin, 1993. – 232 s.

3. Medisinsk mikrobiologi, virologi og immunologi: Lærebok, red. A.A. Vorobyova. – M.: Medisinsk informasjonsbyrå, 2004. - 691 s.

4. Medisinsk mikrobiologi, virologi, immunologi / red. L.B.Borisov, A.M.Smirnova. - M: Medisin, 1994. - 528 s.

Odessa-2009

Foredrag nr. 21. Emne og oppgaver innen medisinsk virologi. Generelle egenskaper ved virus

Vi begynner å studere en ny vitenskap - virologi, vitenskapen om virus. Virologi er en uavhengig vitenskap innen moderne naturvitenskap, som inntar en fortroppposisjon innen biologi og medisin, og virologiens rolle og betydning øker stadig. Dette skyldes en rekke forhold:

1. Virale sykdommer inntar en ledende plass i menneskelig smittsom patologi. Bruk av antibiotika gjør det mulig å effektivt løse behandlingen av de fleste bakterielle sykdommer, samtidig som det fortsatt ikke finnes tilstrekkelig effektive og ufarlige legemidler for behandling av virussykdommer. Ettersom forekomsten av bakterielle infeksjoner avtar, øker andelen virussykdommer jevnt og trutt. Problemet med massevirusinfeksjoner - luftveier og tarm - er akutt. For eksempel tar den velkjente influensaen ofte form av massive epidemier og til og med pandemier, der en betydelig prosentandel av verdens befolkning blir syke.

2. Den viral-genetiske teorien om opprinnelsen til svulster og leukemi har fått anerkjennelse og bekreftes i økende grad. Derfor forventer vi at utviklingen av virologi vil føre til en løsning på det viktigste problemet med menneskelig patologi - problemet med karsinogenese.

3. For tiden dukker det opp nye virussykdommer eller tidligere kjente virussykdommer blir akutte, noe som stadig gir nye utfordringer for virologien. Et eksempel er HIV-infeksjon.

4. Virus har blitt en klassisk modell for molekylærbiologi og molekylærgenetisk forskning. Mange spørsmål om grunnleggende forskning i biologi løses ved hjelp av virus er mye brukt i bioteknologi.

5. Virologi er en grunnleggende vitenskap innen moderne naturvitenskap, ikke bare fordi den beriker andre vitenskaper med nye metoder og nye ideer, men også fordi emnet for studiet av virologi er en kvalitativt spesiell form for organisering av levende materie - virus, som er radikalt forskjellige fra alle andre levende vesener på jorden.

2. HISTORISK SKISSE OVER VIRUSOLOGIENS UTVIKLING

Æren for oppdagelsen av virus og beskrivelsen av deres hovedegenskaper tilhører den russiske forskeren Dmitry Iosifovich Ivanovsky (1864-1920). Det er interessant at Ivanovsky begynte sin forskning som 3. års student ved St. Petersburg University, da han gjorde kursarbeid i Ukraina og Bessarabia. Han studerte tobakksmosaikksykdom og fant ut at det var en smittsom plantesykdom, men dens utløsende agens tilhørte ikke noen av de da kjente gruppene av mikroorganismer. Senere, allerede en sertifisert spesialist, fortsetter Ivanovsky sin forskning ved Nikitsky Botanical Garden (Krim) og utfører et klassisk eksperiment: han filtrerer saften fra bladene til den berørte planten gjennom et bakteriefilter og beviser at den smittsomme aktiviteten til juicen gjør det. ikke forsvinne.

Deretter ble hovedgruppene av virus oppdaget. I 1898 beviste F. Leffler og P. Frosch filtrerbarheten til årsaken til munn- og klovsyke (munn- og klovsykeviruset rammer dyr og mennesker), i 1911 beviste P. Raus filtrerbarheten til forårsakende agent av tumor sykdom - kylling sarkom, i 1915, F. Twort og i 1917 Mr. D'Herelle oppdaget fager - bakterielle virus.

Slik ble hovedgruppene av virus oppdaget. For tiden er mer enn 500 typer virus kjent.

Ytterligere fremgang i utviklingen av virologi er knyttet til utviklingen av metoder for dyrking av virus. Til å begynne med ble virus kun studert når de infiserte sensitive organismer. Et betydelig skritt fremover var utviklingen av en metode for dyrking av virus i kyllingembryoer av Woodruff og Goodpasture i 1931. En revolusjon innen virologi var utviklingen av en metode for dyrking av virus i enkeltlags cellekulturer av J. Enders, T. Weller , F. Robbins, og i 1948. Ikke uten grunn i 1952 Denne oppdagelsen ble tildelt Nobelprisen.

Allerede på 30-tallet ble de første virologiske laboratoriene opprettet. For tiden har Ukraina Odessa Research Institute of Epidemiology and Virology oppkalt etter. I.I. Mechnikov, det er virologiske laboratorier i en rekke forskningsinstitutter for epidemiologi, mikrobiologi og infeksjonssykdommer. Det er virologiske laboratorier for praktisk helsehjelp, som primært er engasjert i diagnostisering av virussykdommer.

3. Komponer ultrastrukturen til virus

Først av alt må det sies at begrepet "virus" ble introdusert i vitenskapelig terminologi av L. Pasteur. L. Pasteur mottok sin vaksine for å forhindre rabies i 1885, selv om han ikke oppdaget årsaken til denne sykdommen - det var fortsatt 7 år igjen før oppdagelsen av virus. L. Pasteur kalte det hypotetiske patogenet rabiesviruset, som oversatt betyr «rabiesgift».

Begrepet "virus" brukes for å referere til ethvert stadium av virusutvikling - både ekstracellulært lokaliserte smittsomme partikler og intracellulært reproduserende virus. For å betegne en viral partikkel, begrepet " virion».

Ved kjemisk sammensetning Virus er i utgangspunktet lik andre mikroorganismer de har nukleinsyrer, proteiner, og noen har også lipider og karbohydrater.

Virus inneholder kun én type nukleinsyre - enten DNA eller RNA. Følgelig blir DNA-genomiske og RNA-genomiske virus isolert. Nukleinsyre i virion kan inneholde fra 1 til 40 %. Vanligvis inneholder virionet bare ett nukleinsyremolekyl, ofte lukket i en ring. Virale nukleinsyrer er ikke mye forskjellig fra eukaryote nukleinsyrer de består av de samme nukleotidene og har samme struktur. Riktignok kan virus inneholde ikke bare dobbelttrådet, men også enkelttrådet DNA. Noen RNA-virus kan inneholde dobbelttrådet RNA, selv om de fleste inneholder enkelttrådet RNA. Det bør bemerkes at virus kan inneholde plusstråd-RNA, som kan fungere som budbringer-RNA, men de kan også inneholde minus-tråd-RNA. Slik RNA kan utføre sin genetiske funksjon først etter at den komplementære plusstråden er syntetisert i cellen. Et annet trekk ved virale nukleinsyrer er at i noen virus er nukleinsyren smittsom. Dette betyr at dersom RNA uten proteininnblanding isoleres fra et virus, for eksempel polioviruset, og introduseres i en celle, vil det utvikles en virusinfeksjon med dannelse av nye viruspartikler.

Proteiner er inneholdt i virus i en mengde på 50-90% de har antigene egenskaper. Proteiner er en del av kappestrukturene til virion. I tillegg er det interne proteiner assosiert med nukleinsyren. Noen virale proteiner er enzymer. Men dette er ikke enzymer som sikrer omsetningen av virus. Virale enzymer er involvert i penetrasjonen av viruset inn i cellen, utgangen av viruset fra cellen, noen av dem er nødvendige for replikering av virale nukleinsyrer.

Lipoider kan være fra 0 til 50%, karbohydrater - 0 - 22%. Lipider og karbohydrater er en del av det sekundære skallet til komplekse virus og er ikke virusspesifikke. De er lånt av viruset fra cellen og er derfor cellulære.

La oss merke oss en grunnleggende forskjell i den kjemiske sammensetningen av virus - tilstedeværelsen av bare én type nukleinsyre, DNA eller RNA.

Ultrastruktur av virus- dette er strukturen til virioner. Størrelsene på virioner varierer og måles i nanometer. 1 nm er en tusendels mikrometer. De minste typiske virusene (poliomyelittvirus) har en diameter på omtrent 20 nm, de største (variolavirus) - 200-250 nm. Gjennomsnittlige virus har størrelser på 60 - 120 nm. Små virus kan bare sees i et elektronmikroskop. Individuelle virale partikler som er synlige under et lysmikroskop kalles vanligvis elementære Paschen-Morozov-legemer. E. Paschen oppdaget variola-viruset ved hjelp av en spesiell farge, og Morozov foreslo en forsølvningsmetode som gjorde det mulig å se selv mellomstore virus i et lysmikroskop.

Formen på virioner kan være forskjellig - sfærisk, kubisk, stavformet, spermlignende.

Hvert virion består av en nukleinsyre, som i virus utgjør et "nukleon". Sammenlign - kjerne i eukaryoter, nukleoid - i prokaryoter. Nukleonet er nødvendigvis assosiert med det primære proteinskallet - kapsiden, bestående av proteinkapsomerer. Som et resultat dannes et nukleoprotein - et nukleokapsid. Enkle virus består kun av et nukleokapsid (poliomyelittvirus, tobakksmosaikksykdomsvirus). Komplekse virus har også et sekundært skall - en superkapsid, som i tillegg til proteiner også inneholder lipider og karbohydrater.

Kombinasjonen av strukturelle elementer i virion kan være forskjellig. Det er tre typer symmetri av virus - spiralformet, kubisk og blandet. Når vi snakker om symmetri, understrekes symmetrien til de virale partiklene i forhold til aksen.

På spiral type symmetri individuelle kapsomerer, synlige i et elektronmikroskop, er arrangert langs nukleinsyrehelixen slik at tråden passerer mellom to kapsomerer, og dekker den på alle sider. Resultatet er en stavformet struktur, slik som det stavformede tobakksmosaikkviruset. Men virus med spiralformet symmetri trenger ikke nødvendigvis å være stavformet. For eksempel, selv om influensaviruset har en spiralformet symmetri, er nukleokapsid foldet på en bestemt måte og er dekket med en superkapsid. Som et resultat er influensavirioner vanligvis sfæriske i form.

På kubikk type symmetri, nukleinsyren folder seg på en bestemt måte i sentrum av virionet, og kapsomerer dekker utsiden av nukleinsyren, og danner en tredimensjonal geometrisk figur. Oftest dannes figuren til et ikosaeder, et polyeder med et visst forhold mellom antall hjørner og ansikter. For eksempel har poliovirus denne formen. I profil har virion formen av en sekskant. En mer kompleks form for adenovirus, også av kubisk type symmetri. Lange tråder og fibre strekker seg fra toppunktene til polyederet, og ender i en fortykkelse.

Med en blandet type symmetri, for eksempel i bakteriofager, har hodet med en kubisk type symmetri form av et ikosaeder, og prosessen inneholder en spiralvridet kontraktil fibril.

Noen virus har en mer kompleks struktur. For eksempel inneholder variolaviruset et stort nukleokapsid med en spiralformet type symmetri, og superkapsiden er kompleks og inneholder et system av rørformede strukturer.

Dermed er virus ganske komplekse. Men vi må merke oss at virus ikke har en cellulær organisasjon. Virus er ikke-cellulære skapninger, og dette er en av deres grunnleggende forskjeller fra andre organismer.

Noen få ord om stabiliteten til virus. De fleste virus inaktiveres ved 56 - 60 °C i 5 - 30 minutter. Virus tåler kjøling godt ved romtemperatur, de fleste virus inaktiveres raskt. Viruset er mer motstandsdyktig mot ultrafiolett stråling og ioniserende stråling enn bakterier. Virus er resistente mot glyserol. Antibiotika har ingen effekt på virus i det hele tatt. Av desinfeksjonsmidlene er det mest effektive 5 % Lysol; de fleste virus dør innen 1 - 5 minutter.

4. VIRUSREPRODUKSJON

Vanligvis bruker vi ikke begrepet "reproduksjon av virus", men sier heller "reproduksjon", reproduksjon av virus, siden metoden for reproduksjon av virus er fundamentalt forskjellig fra metoden for reproduksjon av alle organismer som er kjent for oss.

For bedre å studere mekanismen for virusreproduksjon, tilbyr vi deg en tabell som ikke er inkludert i lærebøker, men som hjelper deg med å forstå denne komplekse prosessen.

stadier av virusreproduksjon

Den første, forberedende perioden, begynner med stadiet av virusadsorpsjon på cellen. Adsorpsjonsprosessen utføres på grunn av den komplementære interaksjonen mellom virusfesteproteiner og cellulære reseptorer. Cellulære reseptorer kan være av glykoprotein, glykolipid, protein og lipid natur. Hvert virus krever spesifikke cellulære reseptorer.

Virale bindingsproteiner lokalisert på overflaten av kapsidet eller superkapsid fungerer som virale reseptorer.

Interaksjonen mellom virus og celle begynner med uspesifikk adsorpsjon av virion på cellemembranen, og deretter skjer spesifikk interaksjon mellom virale og cellulære reseptorer i henhold til komplementaritetsprinsippet. Derfor er prosessen med virusadsorpsjon på en celle en spesifikk prosess. Hvis kroppen ikke har celler med reseptorer for et bestemt virus, er infeksjon med denne typen virus i en slik organisme umulig - det er artsresistens. På den annen side, hvis vi kunne blokkere dette første stadiet av interaksjon mellom viruset og cellen, så kunne vi forhindret utviklingen av en virusinfeksjon på et veldig tidlig stadium.

Trinn 2 – penetrering av viruset inn i cellen – kan skje på to hovedmåter. Den første, som ble beskrevet tidligere, kalles viropexis. Denne veien ligner mye på fagocytose og er en variant av reseptorendocytose. Den virale partikkelen adsorberes på cellemembranen som et resultat av interaksjonen av reseptorer, tilstanden til membranen endres, og den invaginerer, som om den strømmer rundt viruspartikkelen. Det dannes en vakuole, avgrenset av en cellemembran, i sentrum av hvilken viruspartikkelen befinner seg.

Når et virus kommer inn membranfusjon gjensidig penetrasjon av elementene i virusskallet og cellemembranen oppstår. Som et resultat ender "kjernen" av virionet i cytoplasmaet til den infiserte cellen. Denne prosessen skjer ganske raskt, så det var vanskelig å registrere den på elektrondiffraksjonsmønstre.

Deproteinisering - frigjøring av det virale genomet fra superkapsiden og kapsiden. Denne prosessen kalles noen ganger "avkledning" av virioner.

Frigjøring fra membranene begynner ofte umiddelbart etter at virion fester seg til cellulære reseptorer og fortsetter inne i cellens cytoplasma. Lysosomale enzymer deltar i dette. I alle fall, for at ytterligere reproduksjon skal skje, er deproteinisering av den virale nukleinsyren nødvendig, siden uten dette er det virale genomet ikke i stand til å indusere reproduksjon av nye virioner i den infiserte cellen.

Gjennomsnittlig reproduksjonstid ringte latent, skjult, siden viruset etter deproteinisering ser ut til å "forsvinne" fra cellen, kan det ikke oppdages på elektrondiffraksjonsmønstre. I løpet av denne perioden oppdages tilstedeværelsen av viruset bare ved endringer i vertscellens metabolisme. Cellen gjenoppbygges under påvirkning av det virale genomet på biosyntesen av komponentene i virion - dets nukleinsyre og proteiner.

Første fase av mellomperioden, t transkripsjon virale nukleinsyrer, omskriving av genetisk informasjon gjennom syntese av messenger-RNA er en nødvendig prosess for å starte syntesen av virale komponenter. Det oppstår forskjellig avhengig av typen nukleinsyre.

Viralt dobbelttrådet DNA transkriberes på samme måte som cellulært DNA av DNA-avhengig RNA-polymerase. Hvis denne prosessen utføres i cellekjernen (i adenovirus), brukes cellulær polymerase. Hvis i cytoplasma (koppevirus), så ved hjelp av RNA-polymerase, som trenger inn i cellen som en del av viruset.

Hvis RNA er minus-tråd (i influensa, meslinger, rabiesvirus), må informasjon RNA først syntetiseres på den virale RNA-matrisen ved hjelp av et spesielt enzym - RNA-avhengig RNA-polymerase, som er en del av virionene og trenger inn i cellen langs med viralt RNA. Det samme enzymet finnes også i virus som inneholder dobbelttrådet RNA (reovirus).

Regulering av transkripsjonsprosessen utføres ved sekvensiell omskrivning av informasjon fra "tidlige" og "sene" gener. "Tidlige" gener inneholder informasjon om syntesen av enzymer som er nødvendige for gentranskripsjon og deres påfølgende replikasjon. I de "sene" er det informasjon for syntese av viruskappeproteiner.

Kringkaste- syntese av virale proteiner. Denne prosessen er fullstendig analog med det kjente skjemaet for proteinbiosyntese. Virusspesifikt messenger-RNA, cellulært overførings-RNA, ribosomer, mitokondrier og aminosyrer er involvert. Først syntetiseres enzymproteiner som er nødvendige for transkripsjonsprosessen, så vel som for delvis eller fullstendig undertrykkelse av metabolismen til den infiserte cellen. Noen virusspesifikke proteiner er strukturelle og er inkludert i virion (for eksempel RNA-polymerase), andre er ikke-strukturelle, som bare finnes i den infiserte cellen og er nødvendige for en av prosessene for virionreproduksjon.

Senere begynner syntesen av virale strukturelle proteiner - komponenter av kapsid og superkapsid.

Etter syntesen av virale proteiner på ribosomer, kan deres post-translasjonelle modifikasjon oppstå, som et resultat av at de virale proteinene "modnes" og blir funksjonelt aktive. Cellulære enzymer kan utføre fosforylering, sulfonering, metylering, acylering og andre biokjemiske transformasjoner av virale proteiner. Prosessen med proteolytisk kutting av virale proteiner fra store molekylære forløperproteiner er avgjørende.

Replikering viralt genom - syntese av virale nukleinsyremolekyler, reproduksjon av viral genetisk informasjon.

Replikering av viralt dobbelttrådet DNA skjer ved hjelp av cellulær DNA-polymerase på en semi-konservativ måte på samme måte som cellulær DNA-replikasjon. Enkeltrådet DNA replikerer gjennom en mellomliggende dobbelttrådet replikativ form.

Det er ingen enzymer i cellen som kan utføre RNA-replikasjon. Derfor utføres en slik prosess alltid av virusspesifikke enzymer, informasjon om syntesen av disse er kodet i det virale genomet. Under replikasjonen av enkelttrådede RNA-genomer syntetiseres først en RNA-tråd komplementær til den virale, og deretter blir denne nydannede RNA-strengen malen for syntesen av genomkopier. Dessuten, i motsetning til transkripsjonsprosessen, hvor det ofte bare syntetiseres relativt korte RNA-kjeder, dannes det umiddelbart under replikasjon en komplett RNA-streng. Dobbelttrådet RNA replikerer på samme måte som dobbelttrådet DNA, men ved hjelp av det tilsvarende enzymet - RNA-polymerase av viral opprinnelse.

Som et resultat av prosessen med viral genomreplikasjon akkumuleres midler av virale nukleinsyremolekyler som er nødvendige for dannelsen av modne virioner i cellen.

Således er syntesen av individuelle komponenter av virion separert i tid og rom, og forekommer i forskjellige cellulære strukturer og til forskjellige tider.

I siste periode Under reproduksjonen samles virioner og viruset forlater cellen.

Virion forsamling kan forekomme på forskjellige måter, men den er basert på prosessen med selvmontering av virale komponenter transportert fra syntesestedene til samlingsstedet. Den primære strukturen til virale nukleinsyrer og proteiner bestemmer rekkefølgen av konformasjonen av molekylene og deres tilknytning til hverandre. For det første dannes et nukleokapsid på grunn av den strengt orienterte forbindelsen av proteinmolekyler til kapsomerer og kapsomerer med nukleinsyre. For enkle virus er det her samlingen slutter. Sammenstillingen av komplekse virus med en superkapsid er flertrinns og ender vanligvis under prosessen med virioner som forlater cellen. I dette tilfellet er elementer av cellemembranen inkludert i superkapsiden til viruset.

Utgang av viruset fra cellen kan skje på to måter. Noen virus som mangler et superkapsid (adenovirus, picornavirus) går ut av cellen på en "eksplosiv" måte. I dette tilfellet lyseres cellen, og virionene går ut av den ødelagte cellen inn i det intercellulære rommet. Andre virus som har en lipoprotein-sekundær konvolutt, for eksempel influensavirus, forlater cellen ved å spire fra konvolutten. Cellen kan forbli levedyktig i lang tid.

Hele virusreproduksjonssyklusen tar vanligvis flere timer. I løpet av de 4 til 5 timene som går fra det øyeblikket ett molekyl av viral nukleinsyre kommer inn i en celle, kan det dannes fra flere titalls til flere hundre nye virioner som kan infisere naboceller. Dermed skjer spredningen av virusinfeksjon i celler veldig raskt.

Dermed er måten virus reproduserer på fundamentalt forskjellig fra måten alle andre levende ting formerer seg på. Alle cellulære organismer formerer seg ved deling. Når virus formerer seg, syntetiseres individuelle komponenter på forskjellige steder i den virusinfiserte cellen og til forskjellige tider. Denne metoden for reproduksjon kalles "frakoblet" eller "disjunktiv".

Det skal sies at interaksjonen mellom viruset og cellen ikke nødvendigvis fører til det beskrevne resultatet - tidlig eller forsinket død av den infiserte cellen med produksjon av en masse nye modne virale partikler. Det er tre mulige typer virusinfeksjon i en celle.

Det første alternativet, som vi allerede har diskutert, oppstår når produktiv eller virulent infeksjoner.

Andre alternativ - vedvarende infeksjon av et virus i en celle, når det er en veldig langsom produksjon av nye virioner med frigjøring fra cellen, men den infiserte cellen forblir levedyktig i lang tid.

Til slutt er det tredje alternativet integrerende type interaksjon mellom et virus og en celle, hvor integreringen av viral nukleinsyre i det cellulære genomet skjer. Dette innebærer fysisk inkludering av et viralt nukleinsyremolekyl i vertscellens kromosom. For DNA-genomiske virus er denne prosessen ganske forståelig RNA-genomiske virus kan bare integrere genomet i form av et "provirus" - en DNA-kopi av viralt RNA syntetisert ved hjelp av revers transkriptase - RNA-avhengig DNA-polymerase. Ved integrering av det virale genomet i det cellulære, replikerer den virale nukleinsyren sammen med det cellulære under celledeling. Et virus i form av et provirus kan vedvare i en celle i lang tid på grunn av konstant replikasjon. Denne prosessen kalles " virogeni».

5. KARDINALE FUNKSJONER AV VIRUS

Imidlertid er størrelsen på store virus sammenlignbar med størrelsen på klamydia og små rickettsia, og filtrerbare former for bakterier er beskrevet. Foreløpig brukes begrepet "filtrerbare virus", som i lang tid var vanlig å referere til virus, praktisk talt ikke. Derfor er liten størrelse ikke en grunnleggende forskjell mellom virus og andre levende vesener.

Derfor er de grunnleggende forskjellene mellom virus og andre mikroorganismer for tiden basert på mer signifikante biologiske egenskaper, som vi diskuterte i denne forelesningen.

Basert på kunnskapen om egenskapene til virus vi har analysert, kan vi formulere følgende 5 grunnleggende forskjeller mellom virus fra andre levende vesener på jorden:

1. Mangel på mobilorganisering.

2. Tilstedeværelsen av bare én type nukleinsyre (DNA eller RNA).

3. Mangel på uavhengig metabolisme. Metabolisme i virus medieres gjennom metabolismen av celler og organismer.

4. Tilstedeværelsen av en unik, disjunktiv metode for reproduksjon.

Dermed kan vi gi følgende definisjon til virus.

Historie om virologi, natur og opprinnelse til virus

Virusoppdagelse

Virologi er en ung vitenskap, dens historie går litt over 100 år tilbake i tid. Etter å ha startet sin reise som vitenskapen om virus som forårsaker sykdommer hos mennesker, dyr og planter, utvikler virologi seg for tiden i retning av å studere de grunnleggende lovene i moderne biologi på molekylært nivå, basert på det faktum at virus er en del av biosfæren og en viktig faktor i utviklingen av den organiske verden.

Virologiens historie er uvanlig ved at en av dens fag - virussykdommer - begynte å bli studert lenge før selve virus ble oppdaget. Begynnelsen på virologiens historie er kampen mot infeksjonssykdommer og først etterpå den gradvise avsløringen av kildene til disse sykdommene. Dette bekreftes av arbeidet til Edward Jenner (1749–1823) om forebygging av kopper og arbeidet til Louis Pasteur (1822–1895) med det forårsakende middelet til rabies.

I uminnelige tider har kopper vært menneskehetens plage, og krevd tusenvis av liv. Beskrivelser av koppeinfeksjon finnes i manuskriptene til gamle kinesiske og indiske tekster. Den første omtalen av koppeepidemier på det europeiske kontinentet går tilbake til 600-tallet e.Kr. (en epidemi blant soldatene fra den etiopiske hæren som beleiret Mekka), hvoretter det var en uforklarlig tidsperiode da det ikke var noen omtale av koppeepidemier. Kopper begynte å spre seg over kontinenter igjen på 1600-tallet. For eksempel, i Nord-Amerika (1617-1619) i delstaten Massachusetts, døde 9/10 av befolkningen, på Island (1707) etter en koppeepidemi var det bare 17 tusen igjen fra 57 tusen mennesker, i byen Eastham ( 1763) ) fra 1331 innbyggere er det 4 personer igjen. I denne forbindelse var problemet med å bekjempe kopper veldig akutt.

En teknikk for å forebygge kopper gjennom vaksinasjon, kalt variolasjon, har vært kjent siden antikken. Omtaler av bruken av variolasjon i Europa går tilbake til midten av 1600-tallet, med referanser til tidligere erfaringer i Kina, Fjernøsten og Tyrkia. Essensen av variolasjon var at innholdet i pustler fra pasienter som led av en mild form for kopper ble introdusert i et lite sår på menneskehuden, noe som forårsaket en mild sykdom og forhindret en akutt form. Imidlertid var det fortsatt høy risiko for å få en alvorlig form for kopper, og dødeligheten blant de vaksinerte nådde 10 %. Jenner revolusjonerte forebygging av kopper. Han var den første som la merke til at personer som hadde kukopper, som var milde, aldri senere led av kopper. Den 14. mai 1796 introduserte Jenner væske fra pustlene til melkepiken Sarah Selmes, som hadde kukopper, i såret til James Phipps, som aldri hadde lidd av kopper. På stedet for den kunstige infeksjonen utviklet gutten typiske pustler, som forsvant etter 14 dager. Så introduserte Jenner svært smittsomt materiale fra pustlene til en koppepasient i guttens sår. Gutten ble ikke syk. Dette er hvordan ideen om vaksinasjon ble født og bekreftet (fra det latinske ordet vacca - ku). På Jenners tid ble vaksinasjon forstått som introduksjonen av smittsomt kukoppmateriale i menneskekroppen for å forhindre kopper. Begrepet vaksine ble brukt om et stoff som beskyttet mot kopper. Siden 1840 begynte man å få koppevaksine ved å infisere kalver. Det humane koppeviruset ble oppdaget først i 1904. Dermed er kopper den første infeksjonen som en vaksine ble brukt mot, dvs. den første infeksjonen som vaksine kan forhindres. Fremskritt innen vaksineforebygging av kopper har ført til at de er utryddet over hele verden.

I dag brukes vaksinasjon og vaksine som generelle begreper for vaksinasjon og vaksinasjonsmateriale.

Pasteur, som i hovedsak ikke visste noe spesifikt om årsakene til rabies, bortsett fra det udiskutable faktum om dens smittsomme natur, brukte prinsippet om svekkelse (dempning) av patogenet. For å svekke de patogene egenskapene til rabiespatogenet ble det brukt en kanin, i hvis hjerne hjernevevet til en hund som døde av rabies ble injisert. Etter kaninens død ble dens hjernevev injisert i den neste kaninen, og så videre ble det utført ca. 100 passasjer før patogenet tilpasset seg kaninens hjernevev. Når den ble injisert subkutant i hundens kropp, viste den bare moderate patogene egenskaper. Pasteur kalte et slikt "omutdannet" patogen "fiksert", i motsetning til det "ville", som er preget av høy patogenitet. Pasteur utviklet senere en metode for å skape immunitet, bestående av en serie injeksjoner med gradvis økende mengder av et fast patogen. Hunden som fullførte hele injeksjonsforløpet viste seg å være fullstendig motstandsdyktig mot infeksjon. Pasteur kom til den konklusjon at prosessen med å utvikle en infeksjonssykdom i hovedsak er en kamp mellom mikrober og kroppens forsvar. "Hver sykdom må ha sitt eget patogen, og vi må fremme utviklingen av immunitet mot denne sykdommen i pasientens kropp," sa Pasteur. For å ikke forstå hvordan kroppen produserer immunitet ennå, var Pasteur i stand til å bruke prinsippene og styre mekanismene i denne prosessen til fordel for mennesker. I juli 1885 fikk Pasteur muligheten til å teste egenskapene til et "fiksert" rabiespatogen på et barn som ble bitt av en rabiat hund. Gutten fikk en rekke injeksjoner av et stadig mer giftig stoff, der den siste injeksjonen inneholdt en fullstendig patogen form av patogenet. Gutten forble frisk. Rabiesviruset ble oppdaget av Remlanger i 1903.

Det skal bemerkes at verken koppeviruset eller rabiesviruset var de første virusene som ble oppdaget for å infisere dyr og mennesker. Det første stedet tilhører med rette munn- og klovsykeviruset, oppdaget av Leffler og Frosch i 1898. Disse forskerne, ved å bruke flere fortynninger av det filtrerbare middelet, viste dets toksisitet og kom med en konklusjon om dets korpuskulære natur.

På slutten av 1800-tallet ble det klart at en rekke sykdommer hos mennesker, som rabies, kopper, influensa og gul feber, er smittsomme, men de forårsakende agensene ble ikke oppdaget ved bakteriologiske metoder. Takket være arbeidet til Robert Koch (1843-1910), som var banebrytende i bruken av rene bakteriekulturteknikker, ble det mulig å skille mellom bakterielle og ikke-bakterielle sykdommer. I 1890, på X Congress of Hygienists, ble Koch tvunget til å erklære at "... med de oppførte sykdommene har vi ikke å gjøre med bakterier, men med organiserte patogener som tilhører en helt annen gruppe mikroorganismer." Denne uttalelsen fra Koch indikerer at oppdagelsen av virus ikke var en tilfeldig hendelse. Ikke bare opplevelsen av å jobbe med patogener som var uforståelige i naturen, men også en forståelse av essensen av det som skjedde bidro til formuleringen av ideen om eksistensen av en original gruppe patogener av smittsomme sykdommer av en ikke- bakteriell natur. Det gjensto å eksperimentelt bevise dens eksistens.

Det første eksperimentelle beviset på eksistensen av en ny gruppe patogener av infeksjonssykdommer ble oppnådd av vår landsmann - plantefysiolog Dmitry Iosifovich Ivanovsky (1864-1920) mens han studerte mosaikksykdommer i tobakk. Dette er ikke overraskende, siden smittsomme sykdommer av epidemisk natur ofte ble observert i planter. Tilbake i 1883-84. Den nederlandske botanikeren og genetikeren de Vries observerte en epidemi av grønnere blomster og antydet sykdommens smittsomme natur. I 1886 viste den tyske forskeren Mayer, som jobbet i Holland, at saften fra planter som lider av mosaikksykdom, når de inokuleres, forårsaker den samme sykdommen i planter. Mayer var sikker på at årsaken til sykdommen var en mikroorganisme, og søkte etter den uten hell. På 1800-tallet forårsaket tobakkssykdommer enorme skader på jordbruket i vårt land. I denne forbindelse ble en gruppe forskere sendt til Ukraina for å studere tobakkssykdommer, som som student ved St. Petersburg University inkluderte D.I. Ivanovsky. Som et resultat av å studere sykdommen beskrevet i 1886 av Mayer som mosaikksykdom av tobakk, ble D.I. Ivanovsky og V.V. Polovtsev kom til den konklusjon at det representerer to forskjellige sykdommer. En av dem - "rype" - er forårsaket av en sopp, og den andre er av ukjent opprinnelse. Studiet av tobakksmosaikksykdom ble videreført av Ivanovsky ved Nikitsky botaniske hage under ledelse av akademiker A.S. Famytsina. Ved å bruke saften fra et sykt tobakksblad, filtrert gjennom et Chamberlant-stearinlys, som beholder de minste bakteriene, forårsaket Ivanovsky en sykdom i tobakksbladene. Dyrking av den infiserte juicen på kunstige næringsmedier ga ikke resultater, og Ivanovsky kommer til den konklusjon at årsaken til sykdommen er av uvanlig natur - den filtreres gjennom bakteriefiltre og er ikke i stand til å vokse på kunstige næringsmedier. Oppvarming av saften ved en temperatur fra 60 °C til 70 °C fratok den smittsomhet, noe som indikerte patogenets levende natur. Ivanovsky kalte først den nye typen patogen "filtrerbare bakterier" (figur 1). Resultater av arbeidet til D.I. Ivanovsky ble brukt som grunnlag for avhandlingen hans, presentert i 1888, og utgitt i boken "On Two Diseases of Tobacco" i 1892. Dette året regnes som året for oppdagelsen av virus.

A – Elektronmikrofotografi etter skråavsetning med karbon og platina; 65 000´. (Foto av N. Frank.) B – Modell. (Karlson, Kurzes Lehrbuch der Biochemie, Stuttgart, Thieme, 1980).

Figur 1 – Tobakksmosaikkvirus

I en viss periode, i utenlandske publikasjoner, ble oppdagelsen av virus assosiert med navnet på den nederlandske forskeren Beijerinck (1851-1931), som også studerte tobakksmosaikksykdom og publiserte sine eksperimenter i 1898. Beijerinck plasserte den filtrerte saften av en infisert plante på overflaten av en agar, inkuberte og oppnådde bakteriekolonier på overflaten. Etter dette ble det øverste laget av agar med bakteriekolonier fjernet, og det indre laget ble brukt til å infisere en frisk plante. Planten er syk. Fra dette konkluderte Beijerinck at årsaken til sykdommen ikke var bakterier, men et flytende stoff som kunne trenge inn i agaren, og kalte patogenet "væske levende smitte." På grunn av det faktum at Ivanovsky bare beskrev eksperimentene sine i detalj, men ikke tok hensyn til den ikke-bakterielle naturen til patogenet, oppsto en misforståelse av situasjonen. Ivanovskys arbeid ble berømt først etter at Beijerinck gjentok og utvidet sine eksperimenter og understreket at Ivanovsky var den første som beviste den ikke-bakterielle naturen til årsaken til den mest typiske virussykdommen i tobakk. Beijerinck anerkjente selv Ivanovskys forrang og den nåværende prioriteringen av oppdagelsen av virus av D.I. Ivanovsky er anerkjent over hele verden.

Ord VIRUS betyr gift. Dette begrepet ble også brukt av Pasteur for å betegne et smittsomt prinsipp. Det skal bemerkes at på begynnelsen av 1800-tallet ble alle patogene midler kalt ordet virus. Først etter at naturen til bakterier, giftstoffer og giftstoffer ble klar, begynte begrepene "ultravirus" og deretter ganske enkelt "virus" å bety "en ny type filtrerbart patogen." Begrepet "virus" slo mye rot på 30-tallet av vårt århundre.

Det er nå klart at virus er preget av allestedsnærværende, det vil si allestedsnærværende distribusjon. Virus infiserer representanter for alle levende riker: mennesker, virveldyr og virvelløse dyr, planter, sopp, bakterier.

Den første rapporten relatert til bakterielle virus ble laget av Hankin i 1896. I Chronicle of the Pasteur Institute uttalte han at "... vannet i noen elver i India har en bakteriedrepende effekt...", som uten tvil er relatert til til bakterielle virus. I 1915 beskrev Twort i London, mens han studerte årsakene til lysis av bakteriekolonier, prinsippet om overføring av "lysis" til nye kulturer over en rekke generasjoner. Arbeidet hans, som ofte skjer, var praktisk talt ubemerket, og to år senere, i 1917, gjenoppdaget kanadieren de Hérelle fenomenet bakterielysis assosiert med et filtreringsmiddel. Han kalte dette middelet en bakteriofag. De Herelle antok at det bare var én bakteriofag. Forskning utført av Barnett, som jobbet i Melbourne i 1924-34, viste imidlertid et bredt utvalg av bakterielle virus i fysiske og biologiske egenskaper. Oppdagelsen av mangfoldet av bakteriofager har skapt stor vitenskapelig interesse. På slutten av 30-tallet opprettet tre forskere - fysikeren Delbrück, bakteriologene Luria og Hershey, som arbeider i USA, den såkalte "Phage Group", hvis forskning innen genetikk til bakteriofager til slutt førte til fødselen av en ny vitenskap - molekylærbiologi.

Studiet av insektvirus har ligget betydelig bak virologien til virveldyr og mennesker. Det er nå klart at virus som infiserer insekter kan deles inn i 3 grupper: insektvirus i seg selv, dyre- og menneskevirus som insekter er mellomverter for, og plantevirus som også infiserer insekter.

Det første insektviruset som ble identifisert var silkeorm gulsottvirus (silkeorm polyhedrosis virus, kalt Bollea stilpotiae). Allerede i 1907 viste Provacek at et filtrert homogenat av syke larver var smittsomt for friske silkeormelarver, men det var først i 1947 at den tyske forskeren Bergold oppdaget stavformede viruspartikler.

En av de mest fruktbare studiene innen virologi er Reeds studie av gulfeberens natur på frivillige fra den amerikanske hæren i 1900-1901. Det er overbevisende påvist at gul feber er forårsaket av et filtrerbart virus som overføres av mygg og mygg. Det ble også funnet at mygg forble ikke-smittsomt i to uker etter å ha absorbert smittsomt blod. Dermed ble den eksterne inkubasjonsperioden for sykdommen (tiden som kreves for virusreproduksjon hos et insekt) bestemt og de grunnleggende prinsippene for epidemiologien til arbovirusinfeksjoner (virale infeksjoner overført av blodsugende leddyr) ble etablert.

Plantevirusens evne til å reprodusere seg i deres vektor, et insekt, ble demonstrert i 1952 av Maramorosh. Forskeren, ved bruk av insektinjeksjonsteknikker, demonstrerte overbevisende evnen til astergulsottviruset til å formere seg i sin vektor, den seksflekkede sikaden.

Stadier av utvikling av virologi

Historien om prestasjoner innen virologi er direkte relatert til suksessen med utviklingen av den metodologiske forskningsbasen.

Slutten av det 19. - begynnelsen av det 20. århundre. Hovedmetoden for å identifisere virus i denne perioden var metoden for filtrering gjennom bakteriologiske filtre (Chamberlan-stearinlys), som ble brukt som et middel til å skille patogener i bakterier og ikke-bakterier. Ved å bruke filtrerbarhet gjennom bakteriologiske filtre ble følgende virus oppdaget:

– 1892 – tobakksmosaikkvirus;

– 1898 – munn- og klovsykevirus;

– 1899 – rinderpest virus;

– 1900 – gulfebervirus;

– 1902 – fugle- og sauekoppevirus;

– 1903 – rabiesvirus og svinepestvirus;

– 1904 – humant koppevirus;

– 1905 – hundevalpevirus og vaksinevirus;

– 1907 – dengue-virus;

– 1908 – kopper og trakomvirus;

– 1909 – poliovirus;

– 1911 – Rous sarkomvirus;

– 1915 – bakteriofager;

– 1916 – meslingvirus;

– 1917 – herpesvirus;

– 1926 – vesikulær stomatittvirus.

30-årene– den viktigste virologiske metoden som brukes for å isolere virus og deres videre identifikasjon er laboratoriedyr (hvite mus - for influensavirus, nyfødte mus - for Coxsackie-virus, sjimpanser - for hepatitt B-virus, kyllinger, duer - for onkogene virus, gnotobiont-griser - for tarmvirus osv.). Den første personen som systematisk brukte forsøksdyr i studiet av virus var Pasteur, som tilbake i 1881 forsket på å inokulere materiale fra rabiespasienter inn i hjernen til en kanin. En annen milepæl var arbeidet med studiet av gul feber, som resulterte i bruk av nyfødte mus i virologisk praksis. Kulminasjonen av denne arbeidssyklusen var isolasjonen av Cycles i 1948 av en gruppe epidemiske myalgivirus ved bruk av diende mus.

1931 - kyllingembryoer, som er svært følsomme for influensa, kopper, leukemi, kyllingsarkom og noen andre virus, begynte å bli brukt som en eksperimentell modell for å isolere virus. Og for tiden er kyllingembryoer mye brukt for å isolere influensavirus.

1932 - Den engelske kjemikeren Alford lager kunstige, fint porøse kolloidale membraner - grunnlaget for ultrafiltreringsmetoden, ved hjelp av hvilken det ble mulig å bestemme størrelsen på virale partikler og skille virus på dette grunnlaget.

1935 - bruken av sentrifugeringsmetoden gjorde det mulig å krystallisere tobakksmosaikkviruset. For tiden er sentrifugering og ultrasentrifugeringsmetoder (akselerasjon i bunnen av røret overstiger 200 000 g) mye brukt for isolering og rensing av virus.

I 1939 ble et elektronmikroskop med en oppløsning på 0,2 til 0,3 nm brukt for første gang for å studere virus. Bruken av ultratynne vevssnitt og metoden for negativ kontrastering av vandige suspensjoner gjorde det mulig å studere interaksjonen mellom virus og celler og å studere strukturen (arkitekturen) til virioner. Informasjonen oppnådd ved bruk av elektronmikroskopet ble betydelig utvidet ved røntgendiffraksjonsanalyse av krystaller og pseudokrystaller av virus. Forbedringen av elektronmikroskoper kulminerte i etableringen av skanningsmikroskoper som gjør det mulig å få tredimensjonale bilder. Ved hjelp av elektronmikroskopi ble arkitekturen til virioner og egenskapene til deres penetrering i vertscellen studert.

I løpet av denne perioden ble hoveddelen av virus oppdaget. Eksempler inkluderer følgende:

– 1931 – svineinfluensavirus og equine western encephalomyelitt virus;

– 1933 – humant influensavirus og østlig hesteencefalomyelittvirus;

– 1934 – kusmavirus;

– 1936 - brystkreftvirus fra mus;

– 1937 – flåttbåren encefalittvirus.

40-tallet. I 1940 oppdaget Hoagland og hans kolleger at vacciniaviruset inneholder DNA, men ikke RNA. Det ble åpenbart at virus skiller seg fra bakterier ikke bare i størrelse og manglende evne til å vokse uten celler, men også ved at de inneholder bare én type nukleinsyre - DNA eller RNA.

1941 - Den amerikanske vitenskapsmannen Hurst oppdaget fenomenet hemagglutinasjon (erytrocyttliming) ved å bruke en modell av influensaviruset. Denne oppdagelsen dannet grunnlaget for utviklingen av metoder for å oppdage og identifisere virus og bidro til studiet av virus-celle-interaksjoner. Prinsippet om hemagglutinasjon er grunnlaget for en rekke metoder:

HRA - hemagglutinasjonsreaksjon - brukes til å oppdage og titrere virus;

HAI – hemagglutination inhibition reaction – brukes til å identifisere og titrere virus.

1942 - Hearst oppdager tilstedeværelsen av et enzym i influensaviruset, som senere blir identifisert som neuraminidase.

1949 – oppdagelse av muligheten for å dyrke dyrevevsceller under kunstige forhold. I 1952 mottok Enders, Weller og Robbins Nobelprisen for å utvikle cellekulturmetoden.

Innføringen av cellekulturmetoden i virologien var en viktig begivenhet som gjorde det mulig å skaffe dyrkede vaksiner. Av de for tiden mye brukte kulturelle levende og drepte vaksiner laget på grunnlag av svekkede virusstammer, bør vaksiner mot polio, kusma, meslinger og røde hunder nevnes.

Skaperne av poliovaksiner er amerikanske virologer Sabin (en trivalent levende vaksine basert på svekkede stammer av poliovirus av tre serotyper) og Salk (en drept trivalent vaksine). I vårt land har sovjetiske virologer M.P. Chumakov og A.A. Smorodintsev utviklet en teknologi for produksjon av levende og drepte poliovaksiner. I 1988 satte Verdens helseforsamling WHO som mål om å utrydde polio over hele verden ved å fullstendig stoppe sirkulasjonen av vilt poliovirus. Til dags dato har det vært gjort enorme fremskritt i denne retningen. Bruken av global vaksinasjon mot polio ved hjelp av "runde" vaksinasjonsordninger gjorde det mulig ikke bare å radikalt redusere forekomsten, men også å skape områder fri for sirkulasjonen av vilt poliovirus.

Virus oppdaget:

– 1945 – Krim hemorragisk febervirus;

– 1948 – Coxsackie-virus.

50-tallet. I 1952 utviklet Dulbecco en metode for titrering av plakk i et monolag av kyllingembryoceller, som introduserte et kvantitativt aspekt til virologi. 1956-62 Watson, Caspar (USA) og Klug (Storbritannia) utvikler en generell teori om symmetrien til virale partikler. Strukturen til viruspartikkelen har blitt et av kriteriene i virusklassifiseringssystemet.

Denne perioden var preget av betydelige fremskritt innen bakteriofager:

- induksjon av profagen til lysogeniserende fager ble etablert (Lvov et al., 1950);

– det er bevist at smitteevne er iboende i fag-DNA, og ikke i proteinskallet (Hershey, Chase, 1952);

– fenomenet generell transduksjon ble oppdaget (Zinder, Lederberg, 1952).

Det smittsomme tobakksmosaikkviruset ble rekonstruert (Frenkel-Conrad, Williams, Singer, 1955-1957), og i 1955 ble polioviruset oppnådd i krystallinsk form (Shaffer, Shwerd, 1955).

Virus oppdaget:

– 1951 – murine leukemivirus og ECHO;

– 1953 – adenovirus;

– 1954 – røde hundevirus;

– 1956 – parainfluensavirus, cytomegalovirus, respiratorisk syncytialvirus;

– 1957 – polyomavirus;

– 1959 – Argentinsk hemorragisk febervirus.

60-tallet preget av blomstringen av molekylærbiologiske forskningsmetoder. Fremskritt innen kjemi, fysikk, molekylærbiologi og genetikk dannet grunnlaget for den metodiske basen for vitenskapelig forskning, som begynte å bli brukt ikke bare på nivået av teknikker, men også hele teknologier, der virus ikke bare fungerer som et objekt av forskning, men også som et verktøy. Ikke en eneste oppdagelse innen molekylærbiologi er komplett uten en viral modell.

1967 - Cates og McAuslan demonstrerer tilstedeværelsen av en DNA-avhengig RNA-polymerase i vaccinia-virion. Året etter ble RNA-avhengig RNA-polymerase oppdaget i reovirus, og deretter i paramyxo- og rhabdovirus. I 1968 etablerte Jacobson og Baltimore at poliovirus har et genomisk protein knyttet til RNA. Baltimore og Boston fastslo at det genomiske RNA fra poliovirus er oversatt til et polyprotein.

Virus oppdaget:

– 1960 – rhinovirus;

– 1963 – Australsk antigen (HBsAg).

70-tallet. Baltimore rapporterte, samtidig med Temin og Mizutani, oppdagelsen av enzymet revers transkriptase (revertase) i RNA-holdige onkogene virus. Det begynner å bli mulig å studere genomet til RNA-virus.

Studiet av genuttrykk i eukaryote virus ga grunnleggende informasjon om molekylærbiologien til eukaryotene selv - eksistensen av cap-strukturen til mRNA og dens rolle i RNA-translasjon, tilstedeværelsen av en polyadenylatsekvens i 3"-enden av mRNA, spleising og rollen til forsterkere i transkripsjon ble først identifisert i studiet av dyrevirus.

1972 - Berg publiserer en rapport om opprettelsen av et rekombinant DNA-molekyl. En ny gren av molekylærbiologi vokser frem - genteknologi. Bruk av rekombinant DNA-teknologi gjør det mulig å oppnå proteiner som er viktige i medisinen (insulin, interferon, vaksiner). 1975 - Köhler og Milstein produserer de første linjene med hybrider som produserer monoklonale antistoffer (mAbs). De mest spesifikke testsystemene for diagnostisering av virusinfeksjoner utvikles basert på mAbs. 1976 - Blumberg mottar Nobelprisen for oppdagelsen av HBsAg. Det er fastslått at hepatitt A og hepatitt B er forårsaket av forskjellige virus.

Virus oppdaget:

– 1970 – hepatitt B-virus;

– 1973 – rotavirus, hepatitt A-virus;

– 1977 – hepatitt delta-virus.

80-tallet. Utvikling av ideene fastsatt av innenriksforsker L.A. Zilbers idé om at forekomsten av svulster kan være assosiert med virus. Komponentene til virus som er ansvarlige for utviklingen av svulster kalles onkogener. Virale onkogener har vist seg å være blant de beste modellsystemene som hjelper til med å studere mekanismene for onkogenetisk transformasjon av pattedyrceller.

– 1985 – Mullis mottar Nobelprisen for oppdagelsen av polymerasekjedereaksjonen (PCR). Dette er en molekylærgenetisk diagnostisk metode, som også har gjort det mulig å forbedre teknologien for å skaffe rekombinant DNA og oppdage nye virus.

Virus oppdaget:

– 1983 – humant immunsviktvirus;

– 1989 – hepatitt C-virus;

– 1995 – hepatitt G-viruset ble oppdaget ved bruk av PCR.

Relatert informasjon.

Anomalier i utviklingen av nervesystemet. Kranialbrokk. Spina bifida. Kraniovertebrale anomalier.

Anomalier i utviklingen av kjønnsorganene. Etiopatogenese, klassifisering, diagnostiske metoder, kliniske manifestasjoner, korreksjonsmetoder.

Prestasjonene til moderne virologi er enorme. Forskere forstår stadig dypere og mer vellykket den subtile strukturen, biokjemiske sammensetningen og fysiologiske egenskapene til disse ultramikroskopiske levende vesenene, deres rolle i naturen, menneskeliv, dyr og planter. Onkovirologi studerer vedvarende og vellykket rollen til virus i forekomsten av svulster (kreft), og prøver å løse dette århundrets problem.

Ved begynnelsen av det 21. århundre var mer enn 6 tusen virus som tilhører mer enn 2000 arter, 287 slekter, 73 familier og 3 bestillinger. For mange virus har deres struktur, biologi, kjemiske sammensetning og replikasjonsmekanismer blitt studert. Oppdagelsen og forskningen av nye virus fortsetter, og de fortsetter å forbløffe med sitt mangfold. Så i 2003 ble det største kjente viruset, mimivirus, oppdaget.

Oppdagelsen av et stort antall virus kreves skaper sine samlinger og museer. De største blant dem er i Russland (statlig samling av virus ved D.I. Ivanovsky Institute of Virology i Moskva), USA (Washington), Tsjekkia (Praha), Japan (Tokyo), Storbritannia (London), Sveits (Lausanne) og Tyskland (Brunschweig). Resultatene av vitenskapelig forskning innen virologi er publisert i vitenskapelige tidsskrifter og diskutert på internasjonale kongresser som arrangeres hvert tredje år (første gang avholdt i 1968). I 1966, på den 9. internasjonale kongressen for mikrobiologi, ble den internasjonale komiteen for taksonomi av virus (ICTV) valgt for første gang.

Innenfor rammen av generell, det vil si molekylær virologi, fortsetter studiet av de grunnleggende prinsippene for interaksjon mellom virus og celler. Fremskritt innen molekylærbiologi, virologi, genetikk, biokjemi og bioinformatikk har vist at viktigheten av virus ikke er begrenset til det faktum at de forårsaker infeksjonssykdommer.

Det er vist at replikasjonstrekkene til noen virus fører til at viruset fanger opp cellulære gener og overfører dem til genomet til en annen celle - horisontal overføring av genetisk informasjon, som kan ha konsekvenser både i evolusjonsmessige termer og i form av ondartet degenerasjon av celler. .

Ved sekvensering av genomet til mennesker og andre pattedyr ble det identifisert et stort antall repeterende nukleotidsekvenser, som er defekte virale sekvenser - retrotransposoner (endogene retrovirus), som kan inneholde regulatoriske sekvenser som påvirker uttrykket av nabogener. Oppdagelsen og studien deres førte til aktiv diskusjon og forskning på rollen til virus i utviklingen av alle organismer, spesielt i utviklingen av mennesker.

En ny retning innen virologi er økologi av virus. Å oppdage virus i naturen, identifisere dem og estimere deres overflod er en svært vanskelig oppgave. For tiden er det utviklet noen metodiske teknikker som gjør det mulig å estimere mengden av visse grupper av virus, spesielt bakteriofager, i naturlige prøver og å spore deres skjebne. Foreløpige data er innhentet som indikerer at virus har en betydelig innvirkning på en rekke biogeokjemiske prosesser og effektivt regulerer overflod og artsmangfold av bakterier og planteplankton. Studiet av virus i dette aspektet har imidlertid nettopp begynt, og det er fortsatt mange uløste problemer på dette området av vitenskap.

Prestasjonene til generell virologi har gitt en kraftig drivkraft til utviklingen av de anvendte områdene. Virologi har utviklet seg til et stort kunnskapsfelt som er viktig for biologi, medisin og landbruk.

Virologer diagnostiserer virusinfeksjoner hos mennesker og dyr, studerer spredningen av dem og utvikler metoder for forebygging og behandling. Den største prestasjonen var opprettelsen av vaksiner mot polio, kopper, rabies, hepatitt B, meslinger, gul feber, encefalitt, influensa, kusma og røde hunder. Det er laget en vaksine mot papillomaviruset, som er assosiert med utviklingen av én type kreft. Takket være vaksinasjon har kopper blitt fullstendig utryddet. Internasjonale programmer for fullstendig utryddelse av polio og meslinger blir implementert. Metoder for forebygging og behandling av hepatitt og human immunsvikt (AIDS) er under utvikling. Data om stoffer med antiviral aktivitet akkumuleres. Basert på dem er det laget en rekke medikamenter for behandling av AIDS, viral hepatitt, influensa og sykdommer forårsaket av herpesviruset.

Studiet av plantevirus og egenskapene til deres distribusjon i hele planten har ført til etableringen av en ny retning i landbruket - produksjon av virusfritt plantemateriale. Meristem-teknologier som gjør det mulig å dyrke planter fri for virus, brukes i dag til poteter og en rekke frukt- og blomsteravlinger.

Av eksepsjonell betydning på dette stadiet er kunnskapen akkumulert om strukturen til virus og deres genomer for utvikling av genteknologi. Et bemerkelsesverdig eksempel på dette er bruken av bakteriofag lambda for å produsere biblioteker av klonede sekvenser. I tillegg, basert på genomene til ulike virus, har et stort antall genetisk konstruerte vektorer blitt opprettet og fortsetter å bli opprettet for å levere fremmed genetisk informasjon inn i celler. Disse vektorene brukes til vitenskapelig forskning, til akkumulering av fremmede proteiner, spesielt i bakterier og planter, og til genterapi. Genteknologi bruker noen virale enzymer som nå produseres kommersielt.

Små størrelser og evnen til å danne vanlige strukturer har åpnet muligheten for å bruke virus i nanoteknologi for å produsere nye biouorganiske materialer: nanorør, nanoledere, nanoelektroder, nanocontainere, for innkapsling av uorganiske forbindelser, magnetiske nanopartikler og uorganiske nanokrystaller av strengt kontrollerte størrelser. Nye materialer kan skapes gjennom samspillet mellom regelmessig organiserte virale proteinstrukturer med metallholdige uorganiske forbindelser. "Sfæriske" virus kan tjene som nanobeholdere for lagring og levering av medisiner og terapeutiske gener inn i celler. Overflatemodifiserte infeksiøse virioner og virale understrukturer kan brukes som nanoverktøy (for eksempel for biokatalyse eller produksjon av trygge vaksiner).
17. Bakteriofagtiter, metoder for bestemmelse. Identifikasjon av dyre- og plantevirus.

Bakteriofagtiteren er antall aktive fagpartikler per volumenhet av materialet som studeres. For å bestemme bakteriofagtiteren er agarlagmetoden mest brukt når man arbeider med bakteriofager. , foreslått av A. Grazia i 1936. Denne metoden utmerker seg ved dens enkle implementering og nøyaktigheten av de oppnådde resultatene og er også vellykket brukt for å isolere bakteriofager.

Essensen av metoden er at en bakteriofagsuspensjon blandes med en kultur av sensitive bakterier, tilsettes en lavkonsentrasjonsagar ("myk agar") og legges på overflaten av en tidligere tilberedt 1,5 % næringsagar i en petriskål. Vann ("sulten") 0,6 % ble brukt som topplag i den klassiske Grazia-metoden. - nd agar For tiden brukes 0,7 % næringsagar oftest til disse formålene. Når de inkuberes i 6-18 timer, formerer bakteriene seg innenfor det øvre "myke" laget av agar i form av mange kolonier, og mottar næring fra det nedre laget av 1,5 % næringsagar, som brukes som et substrat. Den lave konsentrasjonen av agar i det øvre laget skaper en redusert viskositet, noe som fremmer god diffusjon av fagpartikler og deres infeksjon av bakterieceller. Infiserte bakterier gjennomgår lyse, noe som resulterer i avkomsfag som igjen infiserer bakterier i umiddelbar nærhet til dem. Dannelsen av en negativ koloni for T-gruppefager er forårsaket av bare én bakteriofagpartikkel, og derfor fungerer antallet negative kolonier som en kvantitativ indikator på innholdet av plakkdannende enheter i testprøven.

Kulturen av fagsensitive bakterier brukes i den logaritmiske vekstfasen i en minimal mengde for å sikre en kontinuerlig plen av bakterier. Forholdet mellom antall fagpartikler og bakterieceller (mangfold av infeksjon) for hvert fagbakteriesystem velges eksperimentelt slik at det dannes 50-100 negative kolonier på én plate.

For å titrere en bakteriofag kan det også brukes en enkeltlagsmetode som består i å tilsette suspensjoner av bakterier og bakteriofag til overflaten av en plate med næringsagar, hvoretter blandingen fordeles med en glassspatel. Imidlertid er denne metoden dårligere i nøyaktighet enn agarlagmetoden og er derfor ikke mye brukt.

Teknikk for titrering og dyrking av bakteriofager. For å bestemme bakteriofagtiteren fortynnes den innledende fagsuspensjonen sekvensielt i en bufferløsning eller i buljong (fortynningstrinn 10-1). For hver fortynning, bruk en separat pipette, og blandingen omrøres kraftig. Fra hver fortynning av suspensjonen "sås" fagen på en plen av sensitive bakterier E. coli B. For å gjøre dette tilsettes 1 ml av den fortynnede fagen til et reagensrør med 3 ml "myk agar" smeltet og avkjølt til 48-50°C, hvoretter det tilsettes til hvert reagensglass 0,1 ml av en kultur av en sensitiv mikroorganisme (E. coli B) i den logaritmiske vekstfasen. Innholdet blandes ved å rotere reagensrøret mellom håndflatene og unngå dannelse av bobler. Hell den deretter raskt på overflaten av agaren (1,5 %) næringsmedium i en petriskål og fordel den jevnt over den, mens du rister skålen forsiktig. Ved titrering med agarlagmetoden bør minst to plater med samme fagfortynning inokuleres parallelt. Etter at topplaget er stivnet, snus koppene opp ned og settes i en termostat med temperatur på 37°C, optimalt for utvikling av sensitive bakterier. Resultatene registreres etter 18-20 timers inkubasjon.

Antall negative kolonier telles på samme måte som å telle bakteriekolonier, og fagtiteren bestemmes ved hjelp av formelen:

Hvor N er antall fagpartikler i 1 ml av testmaterialet; n er gjennomsnittlig antall negative kolonier per plate; D - fortynningsnummer; V er volumet av den inokulerte prøven, ml.

I tilfelle hvor det er nødvendig å bestemme infeksjonsmangfoldet, bestemmes titeren av levedyktige celler av E. coli B-bakterier i 1 ml næringsbuljong parallelt. For å gjøre dette, fortynn den første suspensjonen av bakterieceller til 10 -6 og inokuler den (0,1 ml) parallelt på 2 kopper. Etter inkubering ved 37 °C i 24 timer, telles antall kolonier dannet på en petriskål og celletiteren bestemmes.

For å isolere virus fra mennesker, dyr og planter, introduseres materialet som studeres i kroppen til forsøksdyr og planter som er følsomme for virus eller infiserer celle(vevs)kulturer og organkulturer. Tilstedeværelsen av viruset er bevist ved karakteristisk skade hos forsøksdyr (eller planter), og i vevskulturer - ved skade på celler, den såkalte cytopatiske effekten, som gjenkjennes ved mikroskopisk eller cytokjemisk undersøkelse. Med V. og. "plakkmetoden" brukes - observasjon av defekter i cellelaget forårsaket av ødeleggelse eller skade på celler i områder med virusakkumulering. Virioner, som har en karakteristisk struktur blant forskjellige virus, kan identifiseres ved elektronmikroskopi. Videre identifisering av virus er basert på integrert bruk av fysiske, kjemiske og immunologiske metoder. Dermed skiller virus seg i følsomhet for eter, som er assosiert med tilstedeværelse eller fravær av lipider i skallene deres. Type virusnukleinsyre (RNA og DNA) kan bestemmes ved hjelp av kjemiske eller cytokjemiske metoder. For å identifisere virale proteiner brukes serologiske reaksjoner med sera oppnådd ved å immunisere dyr med de tilsvarende virusene. Disse reaksjonene gjør det mulig å gjenkjenne ikke bare typer virus, men også deres varianter. Serologiske forskningsmetoder gjør det mulig å diagnostisere en virusinfeksjon hos mennesker og høyerestående dyr ved tilstedeværelsen av antistoffer i blodet og å studere sirkulasjonen av virus blant dem. For å identifisere latente (skjulte) virus av mennesker, dyr, planter og bakterier, brukes spesielle forskningsmetoder.

Kommunal statlig utdanningsinstitusjon

"Ungdomsskole nr. 3"

Stavropol-regionen, Stepnovsky-distriktet,
Bogdanovka landsby

MKOU ungdomsskole nr. 3, 10. trinn elev
Vitenskapelig veileder:

Toboeva Natalya Konstantinovna
lærer i geografi, biologi, MKOU ungdomsskole nr. 3

jeg .Introduksjon

II. Hoveddel:

1. Oppdagelse av virus

2. Opprinnelsen til virus

3. Struktur

4.Penetrasjon inn i cellen

5. Influensa

6. Vannkopper 7. Flåttbåren encefalitt 8. Virologiens fremtid

III.Konklusjon

IV. Referanser

V. Vedlegg

Studieobjekt:

Ikke-cellulære livsformer er virus.

Forskningsemne:

Virologiens nåtid og fremtid.

Hensikten med arbeidet:

Finn ut betydningen av virologi på nåværende tidspunkt og bestem fremtiden. Det fastsatte målet kan oppnås som et resultat av å løse følgende oppgaver:

1) studie av litteratur som dekker strukturen til virus som ikke-cellulære livsformer;

2) forskning på årsakene til virussykdommer, samt forebygging av dem.

Dette avgjorde temaet for min forskning.

JEG. Introduksjon.

Virologiens actionfylte og fascinerende historie er preget av triumferende seire, men dessverre også nederlag. Utviklingen av virologi er assosiert med de strålende suksessene til molekylær genetikk.

Studiet av virus har ført til en forståelse av den fine strukturen til gener, dekoding av den genetiske koden og identifisering av mutasjonsmekanismer.

Virus er mye brukt i genteknologi og forskning.

Men deres list og evne til å tilpasse seg kjenner ingen grenser, deres oppførsel i hvert enkelt tilfelle er uforutsigbar. Ofrene for virus er millioner av mennesker som døde av kopper, gul feber, AIDS og andre sykdommer. Mye gjenstår å oppdage og lære. Og likevel har de viktigste suksessene innen virologi blitt oppnådd i kampen mot spesifikke sykdommer. Det er grunnen til at forskere sier at virologi vil ta en ledende plass i det tredje årtusenet.

Hva har virologi gitt menneskeheten i kampen mot dens formidable fiende – viruset? Hva er strukturen, hvor og hvordan lever den, hvordan formerer den seg, hvilke andre "overraskelser" forbereder den? Jeg vurderte disse spørsmålene i arbeidet mitt.

II. Hoveddel:

1. Oppdagelse av virus.

Oppdageren av virusverdenen var den russiske botanikeren D.I. I 1891-1892 han søkte iherdig etter årsaken til tobakksmosaikksykdommen. Forskeren undersøkte væsken som ble oppnådd ved å gni syke tobakksblader. Jeg filtrerte den gjennom filtre som ikke skulle slippe en eneste bakterie gjennom. Tålmodig pumpet han litervis med juice hentet fra mosaikktobakksblader inn i hule bakteriefiltre laget av fint porselen, som minner om lange lys. Veggene i filteret svettet av gjennomsiktige dråper som strømmet inn i et forhåndssterilisert kar. Ved å gni lett, påførte forskeren en dråpe av denne filtrerte juicen på overflaten av tobakksbladet. Etter 7-10 dager viste tidligere friske planter utvilsomt tegn på mosaikksykdom. En dråpe filtrert juice fra en infisert plante påvirket enhver annen tobakksbusk med en mosaikksykdom. Angrepet kunne gå fra plante til plante i det uendelige, som en ildflamme fra et stråtak til et annet.

Deretter var det mulig å fastslå at mange andre virale patogener av infeksjonssykdommer hos mennesker, dyr og planter er i stand til å passere gjennom, noe som kunne sees gjennom de mest avanserte lysmikroskopene. Partikler av ulike virus kunne bare sees gjennom vinduet til en alt-seende enhet – et elektronmikroskop, som gir en forstørrelse på hundretusenvis av ganger.

D.I Ivanovsky la ikke stor vekt på dette faktum, selv om han beskrev sin erfaring i detalj.

Arbeidet hans fikk berømmelse etter at den nederlandske botanikeren og mikrobiologen Martin Beijerinck bekreftet resultatene av D. I. Ivanovskys forskning i 1899. M. Beyerinck beviste at mosaikken av tobakk kan overføres fra en plante til en annen ved hjelp av filtrater. Disse studiene markerte begynnelsen på studiet av virus og fremveksten av virologi som en vitenskap.

2. Opprinnelsen til virus.

3. Struktur.

Som helt primitive skapninger har virus alle de grunnleggende egenskapene til levende organismer. De reproduserer avkom som ligner på de opprinnelige foreldreformene, selv om deres reproduksjonsmetode er særegen og skiller seg på mange måter fra det som er kjent om reproduksjon av andre skapninger. Deres metabolisme er nært knyttet til metabolismen til vertsceller. De har arv som er karakteristisk for alle levende organismer. Til slutt er de, som alle andre levende vesener, preget av variabilitet og tilpasningsevne til skiftende miljøforhold.

De største virusene (for eksempel koppevirus) når en størrelse på 400-700 nm og er nær små bakterier i størrelse, de minste (årsakene til polio, encefalitt, munn- og klovsyke) måler bare titalls nanometer, dvs. er nær store proteinmolekyler, spesielt blodhemoglobinmolekyler.

Virus kommer i en rekke former, fra sfæriske til filamentøse. Elektronmikroskopi lar ikke bare se virus, bestemme deres former og størrelser, men også å studere deres romlige struktur - molekylær arkitektur.

En relativt enkel sammensetning er typisk for virus: nukleinsyre (RNA eller DNA), protein mer komplekse strukturer inneholder karbohydrater og lipider, og har noen ganger en rekke egne enzymer.

Som regel er nukleinsyren lokalisert i sentrum av viruspartikkelen og er beskyttet mot uønskede effekter av et proteinskall - kapsomerer. Elektronmikroskopobservasjoner viste at viruspartikkelen

(eller virioner) kommer i flere grunnleggende typer i form.

Noen virus (vanligvis de enkleste) ligner vanlige geometriske legemer. Proteinskallet deres nærmer seg nesten alltid formen av et ikosaeder (vanlig tjuesidig struktur) med flater av likesidede trekanter. Disse virionene kalles kubiske (som poliovirus). Nukleinsyren til et slikt virus blir ofte vridd til en ball. Partikler av andre virus er formet som avlange staver. I dette tilfellet er nukleinsyren deres omgitt av en sylindrisk kapsid. Slike virioner kalles spiralformede virioner (for eksempel tobakksmosaikkvirus).

Virus med en mer kompleks struktur, i tillegg til en icosahedral eller spiral kapsid, har også et ytre skall, som består av en rekke proteiner (mange av dem enzymer), samt lipider og karbon.

Den fysiske strukturen til det ytre skallet er svært variert og er ikke så kompakt som kapsidens. For eksempel er herpesviruset et innhyllet spiralformet virion. Det finnes virus med en enda mer kompleks struktur. Koppeviruset har altså ikke et synlig kapsid (proteinskall), men nukleinsyren er omgitt av flere skjell.

4.Penetrasjon inn i cellen.

Som regel innledes virusets inntrengning i cellens cytoplasma av bindingen til et spesielt reseptorprotein som ligger på celleoverflaten. Binding til reseptoren oppstår på grunn av tilstedeværelsen av spesielle proteiner på overflaten av viruscellen. Området på celleoverflaten som viruset har festet seg til er nedsenket i cytoplasmaet og blir til en vakuole. En vakuole er en vegg som består av en cytoplasmatisk membran som kan smelte sammen med andre vakuoler eller kjernen. På denne måten blir viruset levert til hvilken som helst del av cellen.

Reseptormekanismen for viruspenetrering i cellen sikrer spesifisiteten til den smittsomme prosessen. Den smittsomme prosessen starter når virus som har kommet inn i cellen begynner å formere seg, d.v.s. reduplisering av det virale genomet og selvmontering av kapsiden skjer. For at reduplikasjon skal skje, må nukleinsyren frigjøres fra kapsiden. Etter syntesen av et nytt nukleinsyremolekyl, er det kledd med virale proteiner syntetisert i vertscellens cytoplasma - en kapsid dannes.

Akkumulering av viruspartikler fører til eliminering fra cellen. For noen virus skjer dette gjennom en "eksplosjon", der integriteten til cellen blir forstyrret og den dør. Andre virus frigjøres på en måte som minner om spiring. I dette tilfellet kan cellene opprettholde sin levedyktighet.

Bakteriofagvirus har en annen måte å komme inn i celler på. Bakteriofagen setter en hel stav inn i cellen og skyver ut DNA (eller RNA) som finnes i hodet gjennom den. Bakteriofaggenomet kommer inn

cytoplasma, og kapsiden forblir utenfor. I det bakterielle cytoplasmaet begynner redupliseringen av bakteriofaggenomet, syntesen av dets proteiner og dannelsen av kapsiden. Etter en viss tid dør bakteriecellen og modne partikler kommer inn i miljøet.

5. Influensa.

Influensa er en akutt infeksjonssykdom, hvis årsak er et filtervirus, som forårsaker generell forgiftning og skade på slimhinnen i de øvre luftveiene.

Det er nå fastslått at influensaviruset har flere serologiske typer, som er forskjellige i deres antigene struktur.

Det finnes følgende typer influensavirus: A, B, C, D. Virus A har 2 undertyper, angitt:EN 1 og A2.

Influensaviruset utenfor menneskekroppen er ustabilt og dør raskt. Viruset tørket i vakuum kan vedvare i lang tid.

Desinfeksjonsmidler ødelegger raskt viruset; ultrafiolett stråling og varme har også en skadelig effekt på viruset.

Tillat muligheten for infeksjon fra en virusbærer. Viruset overføres fra en syk person til en frisk person gjennom luftbårne dråper. Hosting og nysing bidrar til smittespredning.

Virale influensaepidemier oppstår oftest i den kalde årstiden.

En person med influensa er smittsom i 5-7 dager. Alle mennesker som ikke har hatt influensa er mottakelige for denne sykdommen. Etter å ha lidd av influensa, forblir immuniteten i 2-3 år.

Inkubasjonsperioden er kort - fra flere timer til 3 dager. Oftest 1-2 dager.

Vanligvis er det ingen prodromer, og en plutselig start er typisk. Frysninger, hodepine, generell svakhet vises, og temperaturen stiger til 39-40 grader. Pasienter klager over smerter når de roterer øynene, verkende muskelledd, forstyrret søvn og svette. Alt dette indikerer generell rus med involvering av nervesystemet i prosessen.

Sentralnervesystemet er spesielt følsomt for de toksiske effektene av influensaviruset, som er klinisk uttrykt i alvorlig adynami, irritabilitet og nedsatt lukte- og smakssans.

Fra fordøyelseskanalen er fenomenene med influensaforgiftning også forskjellige: redusert appetitt, oppbevaring av avføring, og noen ganger, oftere hos små barn, diaré.

Tungen er belagt og litt hoven, noe som fører til utseendet av tannmerker langs kantene. Temperaturen forblir forhøyet i 3-5 dager og, i fravær av komplikasjoner, faller til normal gradvis eller synker kritisk.

Etter 1-2 dager kan det oppstå rennende nese, laryngitt og bronkitt. Blødning fra nesen er vanlig. Hosten er først tørr og går over til hoste med oppspytt. Vaskulære lidelser kommer til uttrykk i form av lavt blodtrykk, pulsustabilitet og rytmeforstyrrelser.

Ukomplisert influensa slutter vanligvis innen 3-5 dager, men full restitusjon tar 1-2 uker.

Som enhver infeksjon kan influensa oppstå i milde, alvorlige, hypertoksiske og fulminante former.

Sammen med dette kan viral influensa være ekstremt mild og spre seg på bena, og ende innen 1-2 dager. Disse formene for influensa kalles slettet.

Influensainfeksjon kan forårsake komplikasjoner i ulike organsystemer. Oftest hos barn er influensa komplisert av lungebetennelse, mellomørebetennelse, som er ledsaget av feber, angst og søvnforstyrrelser.

Komplikasjoner fra det perifere nervesystemet kommer til uttrykk i form av nevralgi, nevritt, radikulitt.

Behandling:

Pasienten skal gis sengeleie og hvile. Sengeleie må opprettholdes en stund, selv etter at temperaturen synker. Systematisk ventilasjon av rommet, daglige varme eller varme bad, god ernæring - alt dette øker kroppens motstand mot å bekjempe influensa.

Spesifikk behandling av viral influensa utføres ved å bruke det anti-influensa polyvalente serumet foreslått av A.A. Smorodintsev.

Blant de symptomatiske midlene for hodepine, muskel- og leddsmerter, samt nevrologisk smerte, er pyramidon, fenacetin og aspirin med koffein foreskrevet.

Ved alvorlig toksikose er intravenøs glukose foreskrevet. Ved ukomplisert influensa brukes ikke antibiotika, pga De jobber ikke lenger med viruset. For tørr hoste er varm melk med brus eller Borjomi nyttig.

Forebygging:

Pasienter bør isoleres hjemme eller på sykehus. Hvis pasienten blir igjen hjemme, er det nødvendig å plassere ham i et eget rom eller skille sengen med en skjerm eller et laken. Omsorgspersoner bør bruke en gasbindmaske som dekker nesen og munnen.

6. Vannkopper.

Vannkopper er en akutt infeksjonssykdom forårsaket av et virus og preget av et makulært vesikulært utslett på hud og slimhinner.

Årsaken til vannkopper er et filtervirus og finnes i vannkopper og i blodet. Viruset er ustabilt og utsatt for ulike miljøpåvirkninger og dør raskt.

Smittekilden er pasienten, som er smittsom i perioden med utslett og ved slutten av inkubasjonen. Smitten spres med luftbårne dråper. Sykdommen overføres ikke gjennom gjenstander.

Immunitet etter vannkopper forblir livet ut. Inkubasjonstiden varer fra 11 til 21 dager, med et gjennomsnitt på 14 dager.

I de fleste tilfeller begynner sykdommen umiddelbart, og bare noen ganger er det forløpere i form av en moderat temperaturøkning med symptomer på generell ubehag. Prodromer kan være ledsaget av utslett som ligner skarlagensfeber eller meslinger.

Ved moderat temperaturøkning vises et flekkete utslett av varierende størrelse på forskjellige deler av kroppen - fra et knappenålshode til en linse. I løpet av de neste timene dannes det en boble med gjennomsiktig innhold, omgitt av en rød kant, i stedet for flekkene. Vannkoppblemmer (vesikler) er plassert på uendret hud, ømme og myke å ta på. Innholdet i boblen blir snart uklar, og selve boblen sprekker (2-3 dager) og blir til en skorpe, som forsvinner etter 2-3 uker, og etterlater vanligvis ikke noe arr. Utslettet og den påfølgende dannelsen av blemmer kan være rikelig, og påvirke hele hodebunnen, stammen og lemmene, mens de er mindre rike i ansiktet og de distale delene av lemmene.

Forløpet av vannkopper er vanligvis ledsaget av en liten forstyrrelse i pasientens generelle tilstand. Hvert nytt utslett forårsaker en økning i temperaturen til 38° og over. Samtidig avtar appetitten.

I tillegg til huden kan kyllingutslett påvirke slimhinnene i munnhulen, konjunktiva, kjønnsorganene, strupehodet, etc.

Behandling:

Sengetøy må alltid være rent. Ta varme bad (35°-37°) fra svake løsninger av kaliumpermanganat. Pasientens hender skal være rene med kortklippede negler.

Individuelle bobler smøres med jod- eller kaliumløsning, 1% alkoholløsning av briljant grønt.

For purulente komplikasjoner forårsaket av sekundær infeksjon, utføres behandlingen med antibiotika (penicillin, streptomycin, biomycin)

Forebygging:

En person som er smittet med vannkopper må isoleres hjemme. Desinfeksjon utføres ikke, rommet er ventilert og utsatt for våtrengjøring.

7. Flåttbåren encefalitt.

En akutt virussykdom preget av skade på den grå substansen i hjernen og ryggmargen. Reservoaret for smittekilder er ville dyr (hovedsakelig gnagere) og ixodid flått. Infeksjon er mulig ikke bare ved å suge på en flått, men også ved å konsumere melk fra infiserte geiter. Årsaken er et arbovirus. Infeksjonsporten er huden (hvis flått suges på) eller slimhinnen i fordøyelseskanalen (hvis det er fordøyelsesinfeksjon). Viruset trenger hematogent inn i sentralnervesystemet og forårsaker de mest uttalte forandringene i nervecellene i de fremre hornene i den cervikale ryggmargen og i kjernene i medulla oblongata.

Inkubasjonstiden er fra 8 til 23 dager (vanligvis 7-14 dager). Sykdommen begynner akutt: frysninger, alvorlig hodepine og svakhet vises. Etter hjernebetennelse kan varige konsekvenser forbli i form av slapp lammelse av musklene i nakke og skulderbelte.

Behandling:

Streng sengeleie:

for milde former - 7-10 dager,

for moderate tilfeller - 2-3 uker,

for alvorlige - enda lenger.

Forebygging:

Når en flått biter i et område som er ugunstig for encefalitt, er det nødvendig å administrere anti-encefalitt gamma globulin. I henhold til indikasjoner utføres forebyggende vaksinasjon.

8. Virologiens fremtid.

Hva er utsiktene for utviklingen av virologi i det 21. århundre? I andre halvdel av 1900-tallet ble fremskritt innen virologi assosiert med klassiske oppdagelser innen biokjemi, genetikk og molekylærbiologi. Moderne virologi er sammenvevd med suksessene til grunnleggende anvendte vitenskaper, så dens videre utvikling vil følge veien for dyptgående studier av det molekylære grunnlaget for patogenisiteten til virus av nye tidligere ukjente patogener (pioner og virioner), naturen og mekanismene til persistens av virus, deres økologi, utvikling av nye og forbedring av eksisterende diagnostiske metoder og spesifikk forebygging av virussykdommer.

Det er for tiden ikke noe viktigere aspekt innen virologi enn forebygging av infeksjoner. I løpet av de 100 årene vitenskapen om virus og virussykdommer har eksistert, har vaksiner gjennomgått store endringer, fra svekkede og drepte vaksiner fra Pasteurs tid til moderne genmanipulerte og syntetiske vaksinepreparater. Denne retningen vil fortsette å utvikle seg, basert på fysisk-kjemisk genteknologi og syntetiske eksperimenter med mål om å skape polyvalente vaksiner som krever minimale vaksinasjoner så tidlig som mulig etter fødselen. Kjemoterapi vil utvikle seg, en tilnærming som er relativt ny innen virologi. Disse stoffene er så langt kun nyttige i isolerte tilfeller.

III. Konklusjon.

Menneskeheten står overfor mange komplekse uløste virologiske problemer: skjulte virusinfeksjoner, virus og svulster osv. Utviklingsnivået for virologi i dag er imidlertid slik at midler for å bekjempe infeksjoner definitivt vil bli funnet. Det er veldig viktig å forstå at virus ikke er et element som er fremmed for levende natur, de er en nødvendig komponent i biosfæren, uten hvilken tilpasning, evolusjon, immunforsvar og andre interaksjoner av levende objekter med miljøet deres ville være umulig. Forstå virussykdommer som patologier for tilpasning, kampen mot dem bør være rettet mot å forbedre statusen til immunsystemet, og ikke å ødelegge virus.

Analyse av ulike litterære kilder og statistiske data tillot oss å trekke følgende konklusjoner:

virus er autonome genetiske forbindelser av struktur som ikke er i stand til å utvikle seg utenfor cellen;

3) kommer i en rekke former og enkel komposisjon.

Referanser:

1. Store sovjetiske leksikon: T.8 / Ed. B.A. Vvedensky.

2. Denisov I.N., Ulumbaev E.G. Directory - en veiledning for en praktiserende lege - M.: Medisin, 1999.

3. Zverev I.D. En bok for lesing om menneskelig anatomi, fysiologi og hygiene - M.: Education, 1983.

4. Luria S. et al. Generell virologi - M.: Mir, 1981.

6. Pokrovsky V.I. Populært medisinsk leksikon - M.: Onyx, 1998.

7.Tokarik E.N. Virologi: nåtid og fremtid // Biologi i skolen - 2000. - Nr. 2-3.