Virologiens historie. Principper for klassificering af vira Virologi er videnskaben, der studerer vira's morfologi, fysiologi, genetik, økologi og evolution

SPØRGSMÅL nr. 1 "VIRUSOLOGIENS HISTORIE. VIRUSERNES ROLLE I MENNESKERS INFEKTIONSPATOLOGI."

I den første periode kendte folk ikke essensen af ​​sygdommen, de beskrev den kun. I 1700-tallet udviklede lægen Gener en vaccine mod kopper, som den blev behandlet med. Yderligere ære går til Pasteur, rabies eksisterede i hans tid. Han beviste, at rabies overføres ved bid. Intet voksede på næringsmedier. Efter Pasteurs arbejde fandt man ud af, at infektionssygdomme er forårsaget af bittesmå organismer (mikrober). Ikke en eneste metode til bakteriel forskning gjorde det muligt at isolere mikrober, hvis tilstedeværelse er forbundet med kopper, mund- og klovsyge og pest.

I 1931 blev en metode til at dyrke kyllingeembryoner foreslået. Denne metode er meget følsom; infektion med spontane vira er udelukket. Den hurtigste udvikling af virologi begyndte efter 1948. Enders foreslog en metode til enkeltlags celle- og vævskulturer. Denne metode gjorde det muligt at studere mange vira og få vacciner. Studiet af vira blev dannet til den uafhængige videnskab om virologi, som studerer vira og sygdomme forårsaget af dem. Generel virologi studerer viruss natur og oprindelse, struktur og kemisk sammensætning, resistens over for fysisk-kemiske faktorer er også interaktionen mellem virus og celler, genetik af vira, træk ved dannelsen af ​​immunitet mod vira, generelle principper for diagnose og forebyggelse; . Hun studerer de samme problemstillinger som generel virologi. Virus som objekter har måleenheder.

SPØRGSMÅL nr. 2 "GENERAL OG PRIVAT VETERINÆR VIRUSOLOGI OG OPGAVER. HISTORIE OM OPDAGELSEN AF VIRUS. RESULTATER I HENLANDS VIRUSOLOGI".

Virologi er en videnskab, der studerer naturen og oprindelsen af ​​vira og de sygdomme, de forårsager. Generel virologi studerer viruss natur og oprindelse, struktur og kemisk sammensætning, resistens over for fysisk-kemiske faktorer er også interaktionen mellem virus og celler, genetik af vira, træk ved dannelsen af ​​immunitet mod vira, generelle principper for diagnose; og forebyggelse. Hun studerer de samme problemstillinger som generel virologi. Virus som objekter har måleenheder. Periode - folk kendte ikke essensen af ​​sygdommen, de beskrev den kun. I 1700-tallet udviklede lægen Gener en vaccine mod kopper, som den blev behandlet med. Yderligere ære går til Pasteur; rabies eksisterede i hans tid. Han beviste, at rabies overføres ved bid. Intet voksede på næringsmedier. Efter Pasteurs arbejde fandt man ud af, at infektionssygdomme er forårsaget af bittesmå organismer (mikrober). Ikke en eneste metode til bakteriel forskning gjorde det muligt at isolere mikrober, hvis tilstedeværelse er forbundet med kopper, mund- og klovsyge og pest.

Ideen om eksistensen af ​​et patogen forskelligt i naturen fra mikrober opstod ikke for Pasteur. Den første opdagede virus påvirkede tobaksplanter (tobaksmosaik). På det tidspunkt forårsagede denne virus stor økonomisk skade. Forskere satte sig for at finde ud af årsagen til denne sygdom. Dette arbejde blev betroet D.I. Ivanovsky.

Som et resultat af observationer foreslog D.I. Ivanovsky og V.V. Polovtsev først, at tobakssygdommen, beskrevet i 1886 af A.D. Mayer under navnet mosaik, ikke er en, men to helt forskellige sygdomme af samme plante: en af ​​dem er hassel. ryper, hvis årsagsmiddel er en svamp, og den anden er af ukendt oprindelse. D.I. Ivanovsky fortsætter sin undersøgelse af tobaksmosaiksygdom i Nikitins botaniske have (nær Jalta) og det botaniske laboratorium ved Videnskabsakademiet og kommer til den konklusion, at tobaksmosaiksygdommen er forårsaget af bakterier, der passerer gennem Chamberlant-filtre, som dog er. ikke i stand til at vokse på kunstige substrater. Det forårsagende middel af mosaiksygdom kaldes af Ivanovsky enten "filtrerbare" bakterier eller mikroorganismer, da det var meget vanskeligt umiddelbart at formulere eksistensen af ​​en speciel verden af ​​vira. Understreger, at årsagen til tobaksmosaiksygdomme ikke kunne påvises i væv fra syge planter ved hjælp af et mikroskop og ikke blev dyrket på kunstige næringsmedier.

Han grundlagde virologi. Øget interesse for virologi var forårsaget af det faktum, at virussygdomme er af førende betydning. 75 % af sygdommene er forårsaget af virus. De forårsager enorm økonomisk skade. Efter Ivanovskys opdagelse gentog den danske videnskabsmand Beyering Ivanovskys eksperimenter og bekræftede, at mosaikpatogenet passerer gennem porcelænsfiltre og beviste, at det er et flydende levende smittestof. Virussen gav den sit navn. I 1903 blev årsagerne til svinepest og infektiøs anæmi opdaget. I 1915-1917 var bakterielle vira bakteriofager i slutningen af ​​40'erne, mere end 40 vira var blevet opdaget, og i løbet af de sidste 40 år er mere end 500 virussygdomme blevet kendt. Forskere satte sig for at få fat i virale midler.

I 1931 blev en metode til at dyrke kyllingeembryoner foreslået. Denne metode er meget følsom; infektion med spontane vira er udelukket. Den hurtigste udvikling af virologi begyndte efter 1948. Enders foreslog en metode til enkeltlags celle- og vævskulturer.

SPØRGSMÅL nr. 3 "PRINCIPPER FOR MODERNE KLASSIFIKATION AF VIRUS, HOVEDGRUPPER AF VIRUS."

Den moderne klassificering af vira er universel for vira fra hvirveldyr, hvirvelløse dyr, planter og protozoer. Den er baseret på virioners fundamentale egenskaber, hvoraf de førende er dem, der karakteriserer nukleinsyre, morfologi, genomstrategi og AG-egenskaber. Grundlæggende egenskaber placeres på 1. pladsen, da vira med lignende AG-egenskaber også har en lignende type nukleinsyre, lignende morfologiske og biofysiske egenskaber. Et vigtigt træk til klassificering, som tages i betragtning med strukturelle karakteristika, er strategien for det virale genom, som forstås som den reproduktionsmetode, der anvendes af virussen, bestemt af dets genetiske materiales egenskaber. AG og andre biologiske egenskaber er karakteristika, der ligger til grund for dannelsen af ​​en art og har betydning inden for slægten. Den moderne klassifikation er baseret på følgende hovedkriterier: 1) type nukleinsyre (RNA eller DNA), dens struktur (antal strenge); 2) tilstedeværelsen af ​​en lipoproteinmembran; 3) viral genom-strategi; 4) virionets størrelse og morfologi, symmetritype, antal capsomerer; 5) fænomener af genetiske interaktioner; 6) række af modtagelige værter; 7) patogenicitet, herunder patologiske ændringer i celler og dannelsen af ​​intracellulære indeslutninger; 8) geografisk fordeling; 9) transmissionsmetode; 10) AG-ejendomme. Baseret på de anførte karakteristika er vira opdelt i familier, underfamilier, slægter og typer. Der er udviklet en række regler for at organisere navnene på vira. Familiernes navne ender på "viridae", "virinae" "virus". Navnet tillader de sædvanlige latiniserede betegnelser, tal og typebetegnelser, forkortelser, bogstaver og deres kombinationer.

SPØRGSMÅL nr. 4 "KEMISK SAMMENSÆTNING OG FYSISK STRUKTUR AF VIRUS. KONCEPT OM VIRION, CAPSIDS, CAPsomere. TYPE SYMMETRI.

Vira består af et stykke genetisk materiale, enten DNA eller RNA, der udgør kerne virus, og en beskyttende proteinskal omkring denne kerne, som kaldes kapsid. En fuldt dannet infektiøs partikel kaldes virion. Nogle vira, såsom herpes eller influenzavirus, har også et ekstra lipoprotein skal, som opstår fra værtscellens plasmamembran. I modsætning til alle andre organismer har vira ikke en cellulær struktur. Skallen af ​​vira er ofte konstrueret af identiske gentagne underenheder - capsomerer. Capsomerer danner strukturer med en høj grad af symmetri, der er i stand til at krystallisere. Dette gør det muligt at få information om deres struktur ved hjælp af både krystallografiske metoder baseret på brug af røntgenstråler og elektronmikroskopi. Så snart virusunderenheder dukker op i værtscellen, udviser de straks evnen til selv at samle sig til en hel virus. Selvsamling er også karakteristisk for mange andre biologiske strukturer og er af fundamental betydning i biologiske fænomener. En væsentlig bestanddel af en viral partikel er en af ​​to nukleinsyrer, protein- og askeelementer. Disse tre komponenter er fælles for alle vira uden undtagelse, mens de resterende lipider og kulhydrater ikke er inkluderet i alle vira. Virus, der udover protein og nukleinsyre også indeholder lipider og kulhydrater, hører som regel til gruppen af ​​komplekse vira. Ud over de proteiner, der udgør nukleoproteinets "kerne", kan virioner også indeholde et virus - specifikke proteiner, der er blevet indbygget i plasmamembranerne i inficerede celler og dækker viruspartiklen, når den forlader cellen eller "knopper ud" fra dens overflade. Derudover har nogle indkapslede vira et submembranmatrixprotein mellem kappen og nukleokapsiden. Den anden store gruppe af virusspecifikke proteiner består af ikke-capsid virale proteiner. De er hovedsageligt relateret til syntesen af ​​virionnukleinsyrer. Den fjerde komponent, der nogle gange findes i rensede virale præparater, er kulhydrater (i en mængde, der overstiger sukkerindholdet i nukleinsyren). De elementære kroppe af influenzavirus og klassisk hønsepest indeholder op til 17% kulhydrater.

Ifølge morfologiske egenskaber er alle vira opdelt i:

1) Stangformet

2) Kugleformet

3) kubisk

4) Kølleformet

5) Trådagtig

De vigtigste er de første 4, filamentøse i mellemformen.

Konceptet for typen af ​​symmetri.

Afhængigt af placeringen af ​​capsomerer i proteinskallen er alle vira opdelt i 3 grupper:

1) Spiraltype

2)Kubisk type

3) Kombineret

1 - har vira, der er store i størrelse og har høj polymorfi. Deres capsomerer er arrangeret i form af en spiral med forskellige diametre og har derfor oftest en sfærisk skal, nogle gange er de dækket af en anden skal (peplos). Nukleinsyre er snoet som en fjeder og arrangeret i spoler i form af proteinmolekyler.

2 - i sådanne vira er capsomerer arrangeret i form af et regulært polyeder (icosahedron). Den er snoet til en kugle og er placeret i midten.

I de fleste vira har capsomerer form af 5-6 facetterede prismer.

3 - denne type symmetri er karakteristisk for bakteriofager. Alle varianter af bakteriofager har et hoved af kubisk symmetri og en hale med en spiralstruktur. Overfladen af ​​hovedet er dækket af en proteinskal, som består af homogene proteinunderenheder. En af nukleinsyrerne er placeret i hovedets hulrum. Haleenden består af en hul stang. Den ender med en sekskantet plade for enden. Haleenden er omgivet af en krave, hvortil der er fastgjort en kappe, der dækker hele skaftet.

Kemisk sammensætning af vira.

Metoder til oprensning og koncentration af vira ved udsaltning, adsorption, ultrafiltrering og sedimentering gjorde det muligt at studere den kemiske sammensætning. Virus indeholder proteiner og en af ​​nukleinsyrerne. Virus af store og mellemstore størrelser indeholder også lipider, kulhydrater og nogle andre organiske og uorganiske forbindelser.

Det meste af proteinet og associerede lipider og kulhydrater er membranen. De stoffer, der udgør vira, har egenskaber, både kemisk og biologisk.

Proteiner – hoveddelen (20 AA).

Betydningen af ​​virale proteiner er deres beskyttende funktion (capsiddannelse).

Virusset indeholder enzymer af proteinkarakter (adsorption, målretningsfunktion) og udstyret med immunegenskaber (bestemmer antigene egenskaber).

Funktioner af virale proteiner:

1. De har egenskaben til at samle sig selv (da de akkumuleres, aggregerer virale proteiner).

2. De har selektiv følsomhed i forhold til fysiske og kemiske faktorer.

3.Undgå hydrolyse under påvirkning af proteolytiske enzymer.

Proteiner udgør 50-75% af massen af ​​virioner.

Celler inficeret med det virale gen koder for syntesen af ​​2 proteingrupper:

Strukturel===, ===ikke-strukturel===

1.Strukturel - mængden i virionet, afhængigt af kompleksiteten af ​​virionets organisation. Strukturelle proteiner i gruppe 2 er opdelt: a. kapsid b. supercapsid (peplomerer).

Komplekse vira indeholder begge typer proteiner. En række af sådanne vira indeholder enzymer i deres kapsider, som udfører transkription og replikation.

Superkapsidproteiner danner rygsøjler (op til 7-10 nm). Glykoproteinernes hovedfunktion er interaktion med specifikke cellereceptorer. En anden funktion er deltagelse i syntesen af ​​cellulære og virale membraner.

"Adressefunktion" er udviklet i evolutionsprocessen, det er en søgen efter en følsom celle.

Det realiseres gennem tilstedeværelsen af ​​specielle proteiner, der genkender specielle receptorer på cellen.

Ikke-strukturelle (midlertidige) virale proteiner er forstadier til virale proteiner, DNA/RNA-polymerasesyntese-enzymer, sikrer transkription og replikation af det virale genom, regulatoriske proteiner, polymeraser.

Lipider - i komplekse vira findes i supercapsid (fra 15 til 35 procent). Lipidkomponenten stabiliserer strukturen af ​​den virale partikel.

Kulhydrater – op til 10-13%. De er en del af glykoproteiner. Spiller en væsentlig rolle i proteinstruktur og funktion.

Nukleinsyrer er en konstant komponent. Komplekse polymerforbindelser. Isoleret af Miescher i 1869 fra leukocytter. I modsætning til bakterier indeholder de kun 1 aminosyre. Strukturelt er nukleinsyrer forskellige.

1.Lineær dobbelt helix med åbne ender.

2.Lineær dobbelthelix med lukkede ender.

3.Lineær enkelt-spiral.

4. Ring enkelt-spiral.

1.Lineær enkelt-spiral.

2.Lineær fragmenteret.

3. Ring enkelt-spiral.

5.Lineær dobbelthelix fragmenteret.

SPØRGSMÅL nr. 5 “VIRURSRESISTENS MOD FYSISKE OG KEMISKE FAKTORER. PRAKTISK BRUG AF DISSE EGENSKABER."

Forskellige grupper af vira har forskellig resistens i det ydre miljø. De mindst resistente vira er dem, der har lipoproteinmembraner, de mest resistente er isometriske vira. Således inaktiveres orthomyxovirus og paramyxovirus på overflader i løbet af få timer, mens poliovirus, adenovira og reovira forbliver infektiøse i flere dage. Der er dog undtagelser fra denne regel. Koppevirussen er således modstandsdygtig over for udtørring og forbliver i ekskrementer i mange uger og måneder. Hepatitis B-virus er resistent over for ugunstige eksterne faktorer og bevarer sin aktivitet i serum selv efter kortvarig kogning. Følsomheden af ​​vira over for ultraviolet og røntgenbestråling afhænger primært af størrelsen af ​​deres genom. Følsomheden af ​​vira over for formaldehyd og andre kemikalier, der inaktiverer genetisk materiale, afhænger af mange forhold, herunder tætheden af ​​pakningen af ​​nukleinsyren i proteintilfældet, størrelsen af ​​genomet og tilstedeværelsen eller fraværet af ydre skaller. Vira med lipoproteinkapper er følsomme over for ether, chloroform og detergenter, mens simpelt konstruerede isometriske og stavformede vira er modstandsdygtige over for deres virkning. Et vigtigt træk ved vira er følsomhed over for pH. Der er vira, der er resistente over for sure pH-værdier (2,2-3,0), for eksempel vira, der forårsager tarminfektioner og kommer ind i kroppen gennem ernæring. De fleste vira inaktiveres dog ved sure og alkaliske pH-værdier.

SPØRGSMÅL nr. 6 “VIRALE NUKLEINSYRER. DERES VARIENTER, STRUKTURER, GRUNDLÆGGENDE EGENSKABER.

Virale DNA-molekyler kan være lineære eller cirkulære, dobbeltstrengede eller enkeltstrengede langs hele deres længde eller enkeltstrengede kun i enderne. De fleste nukleotidsekvenser forekommer kun én gang i det virale genom, men der kan være gentagne eller overflødige områder i enderne. Der er også store forskelle i størrelsen af ​​genomet i strukturen af ​​de terminale regioner af viralt DNA. Dyrevira gennemgår næsten ingen modifikationer af deres DNA. For eksempel, selvom værtscellernes DNA indeholder mange methylerede baser, har vira i bedste fald kun nogle få methylgrupper pr. genom. Størrelsen af ​​RNA-virusvirioner varierer meget - fra 7.106 dalton i picornavirus til >2.108 dalton i retrovira; men størrelsen af ​​RNA og derfor mængden af ​​information, det indeholder, varierer i meget mindre grad. RNA fra picornavira er sandsynligvis det mindste kendte, der indeholder omkring 7.500 nukleotider, og RNA fra paramyxovirus er måske det største, næsten 15.000 nukleotider. Tilsyneladende replikerer alle uafhængigt. Nukleinsyrer er en konstant komponent. Komplekse polymerforbindelser. Isoleret af Miescher i 1869 fra leukocytter. I modsætning til bakterier indeholder de kun 1 aminosyre. Strukturelt er nukleinsyrer forskellige.

1. Lineær enkelt-helix 2. Lineær fragmenteret.

SPØRGSMÅL nr. 7 "VIRUSPROTEINER, DERES FUNKTIONER (KARAKTERISTIKA FOR EGENSKABERNE AF NEURAMINIDASER OG MIXOVIRUSES ANTIGENER)."

De repræsenterer en ekstremt heterogen klasse af biologiske makromolekyler. AK'er er essentielle komponenter i proteiner. Alpha-AA er relativt simple organiske molekyler. Molekylvægten af ​​AK ligger i området 90-250D. Polypeptidet kan indeholde fra 15 til 2000 AA. De mest almindelige polypeptider, der vejer fra 20 til 700 kDa, bestående af 100-400 AA. Virale proteiner - proteiner kodet af virusgenomet - syntetiseres i den inficerede celle. Baseret på funktionen af ​​lokalisering, struktur og regulering af syntese, er virale proteiner opdelt i strukturelle og ikke-strukturelle; enzymer, prækursorer, histonlignende capsidproteiner; membran, transmembran.

Strukturelle proteiner– alle proteiner, der er en del af modne ekstracellulære virioner. De udfører en række funktioner i virion: 1) beskyttelse af NK mod ydre skadelige påvirkninger; 2) interaktion med membranen af ​​følsomme celler under den første fase af deres infektion; 3) interaktion med viralt NK under og efter dets indpakning i capsiden; 4) interaktion med hinanden under kapsid-selvsamling; 5) organisering af virusets indtrængen i en følsom celle. Disse 5 funktioner er iboende i de strukturelle proteiner af alle vira uden undtagelse. Alle funktioner kan realiseres af ét protein. 6) evne til at blive ødelagt under befrielsen af ​​NK; 7) organisering af udgang fra den inficerede celle under dannelsen af ​​virion. 8) organisering af "smeltning" og fusion af cellemembraner.

Proteiner kan også have evnen til at katalysere visse biokemiske reaktioner: 9) RNA-afhængig RNA-polymeraseaktivitet. Denne funktion udføres af de strukturelle proteiner af alle vira, hvis virioner indeholder RNA, som ikke spiller rollen som mRNA; 10) RNA-afhængig DNA-polymeraseaktivitet - denne funktion udføres af specielle retrovirale proteiner kaldet reversetaser; 11) beskyttelse og stabilisering af det virale NK efter dets frigivelse fra capsidet i den inficerede celle.

Afhængigt af placeringen af ​​et bestemt protein i virionet skelnes der mellem grupper af proteiner: A) Capsidproteiner - i virionerne af komplekst organiserede vira kan disse proteiner kun udføre 2-3 funktioner - beskyttelse af NK, evnen til selv at -samle og ødelægge under frigivelsen af ​​NK. I virioner af simple vira er deres funktioner normalt mere forskellige. B) Proteiner af den virale supercapsidskall - deres rolle reduceres hovedsageligt til at organisere spirende virioner, evnen til selv at samle, interagere med membranen af ​​følsomme celler, organisere penetration ind i en følsom celle. C) Matrixproteiner er proteiner i det mellemliggende lag af virioner, der er placeret umiddelbart under superkapsidskallen af ​​nogle vira. Deres hovedfunktioner: organisering af knopskydning, stabilisering af virionets struktur på grund af hydrofobe interaktioner, mediering af forbindelsen mellem supercapsidproteiner og capsidproteiner. D) Virale kerneproteiner - repræsenteret hovedsageligt af enzymer. Vira med flerlags capsider kan også have en beskyttende rolle. E) Proteiner forbundet med NK i det inderste lag af virioner.

Ikke-strukturelle proteiner– alle proteiner kodet af det virale genom, men ikke inkluderet i virionet. De er blevet undersøgt mindre godt, hvilket skyldes de usammenligneligt større vanskeligheder, der opstår i deres identifikation og isolering sammenlignet med strukturelle proteiner. Ikke-strukturelle proteiner, afhængigt af deres funktion, er opdelt i 5 grupper: 1) Regulatorer af viral genomekspression - påvirker direkte det virale NK, forhindrer syntesen af ​​andre virale proteiner, eller omvendt, udløser deres syntese. 2) Forstadier til virale proteiner - er forstadier til andre virale proteiner, der dannes af dem som et resultat af komplekse biokemiske processer. 3) Ikke-funktionelle peptider - dannes i en inficeret celle. 4) Inhibitorer af cellulær biosyntese og inducere af celleødelæggelse - disse inkluderer proteiner, der ødelægger cellulært DNA og mRNA, modificerer cellulære enzymer, hvilket giver dem virusspecifik aktivitet. 5) Virale enzymer - enzymer kodet af det virale genom, men ikke inkluderet i virionerne.

SPØRGSMÅL NR. 8 “PERIODER OG STADIER AF VIRUSRPRODUKTION. TYPER AF INTERAKTION."

Interaktion af vira med værtsceller og virusreproduktion.

Virus gennemgår en kompleks udviklingscyklus i en celle. Morfogenese af vira repræsenterer hovedstadiet i denne udvikling og består af formative processer, der fører til dannelsen af ​​en virion som afslutningen på formen for virusudvikling. Ontogenese og reproduktion af virusets udvikling reguleres af genomet.

I 50'erne blev det fastslået, at formering af virussen sker gennem reproduktion, dvs. reproduktion af nukleinsyrer og proteiner efterfulgt af virionsamling. Disse processer forekommer i forskellige dele af cellen, for eksempel i kernen og cytoplasmaet (disjunktiv form for reproduktion). Viral reproduktion er en unik udtryksform for en fremmed infektion i cellerne hos mennesker, dyr, insekter og bakterier.

Morfogenesen reguleres af morfogenetiske gener. Der er et direkte proportionalt forhold mellem kompleksiteten af ​​virion-ultrastrukturen og dens morfogenese. Jo mere kompleks organisering af virion, jo længere er udviklingsvejen for virus. Hele denne proces udføres ved hjælp af specielle enzymer. Fordi Vira har ikke deres eget stofskifte og kræver derfor enzymer. Imidlertid er over 10 enzymer, forskellige i oprindelse og funktionel betydning, blevet fundet i vira.

Efter oprindelse: virion, virus-induceret, cellulær, modificeret af vira. Førstnævnte er en del af mange DNA- og RNA-vira. DNA-afhængig RNA-polymerase, proteinkinase, ATPase, ribonuklease, RNA-afhængig RNA-polymerase, exonuklease og andre.

Virionformer omfatter: hæmoglutinin og neuraminidase, lysozym.

Virus-inducerende enzymer er enzymer, hvis struktur er kodet i genomet, og syntese sker på værtsribosomet - tidlige virionproteiner.

Cellulær - omfatter enzymer fra værtscellen, er ikke virusspecifikke, men når de interagerer med vira, kan aktiviteten modificeres.

Ifølge deres funktionelle betydning er enzymer opdelt i 2 grupper:

— Deltagelse i replikation og transskription;

— Neuraminidase, lysozym og ATPase, som bidrager til virusets indtrængning i cellen og udgangen af ​​modne virioner fra cellen.

Reproduktion af virioner er karakteriseret ved en ændring af stadier:

Ifølge moderne data er der 3 hovedperioder i reproduktionscyklussen:

1. Indledende (forberedende) 2. Midt (latent) 3. Final (finale)

Hver periode omfatter en række faser:

Første etape

1.Adsorption af virus på cellen.

2. Indtrængning i cellen.

3.Deproteinisering (frigivelse af nukleinsyre).

Anden fase

1.Biosyntese af tidlige virale proteiner

2.Biosyntese af virale komponenter

Tredje etape

1. Dannelse af modne virioner

2. Udgang af modne virioner fra cellen.

1.Adsorption er en fysisk og kemisk proces, der er en konsekvens af forskellen i ladninger. Dette trin er reversibelt, dets resultat påvirkes af surhedsgraden i miljøet, temperaturen og andre processer.

Hovedrollen i virusadsorption spilles af virussens interaktion med komplementære cellereceptorer. Af kemisk natur tilhører de mucopolyproteiner. Adsorptionshastigheden påvirkes af hormoner, der virker på receptorerne. Adsorption af virussen forekommer muligvis ikke, hvilket skyldes cellernes forskellige følsomhed over for vira. Følsomhed bestemmes til gengæld af:

Tilstedeværelsen i cellemembranen og cytoplasmaet af enzymer, der kan ødelægge membranen og frigive nukleinsyre.

Tilstedeværelsen af ​​enzymer, materiale, der sikrer syntesen af ​​virale komponenter.

2. Virusgennemtrængning i cellen:

Virusset trænger ind på 3 måder - ved direkte injektion (typisk for fager); ved at ødelægge cellemembranen (fusionsvej - typisk for plantevirus); ved pinocytose (karakteristisk for hvirveldyrsvirus).

3. Reproduktion af DNA-holdige vira.

4. Udgang af virion fra cellen:

1. De lækker gennem cellemembranen og er dækket af en superkapsid, som omfatter cellekomponenter: lipider, polysaccharider. I dette tilfælde bevarer cellen sin vitale aktivitet og dør derefter. I nogle tilfælde, under reproduktionsprocessen, kan processer forekomme over flere år, men vital aktivitet opretholdes. Med denne metode forlader modne virioner cellen gradvist og over en relativt lang periode. Denne sti er typisk for komplekse vira, der har en dobbelt skal.

Unormale vira.

Under reproduktionsprocessen dannes forskellige unormale vira. Gennem akademiker Zhdanovs indsats er der i de senere år blevet opdaget pseudovirus, bestående af et RNA-virus og celleproteiner, der danner et kapsid. De har infektiøse egenskaber, men på grund af kapsidens ejendommelighed er de ikke modtagelige for virkningen af ​​antistoffer, der danner et svar på denne virus.

Dannelsen af ​​sådanne vira forklares ved langvarig virustransport i nærvær af specifikke antistoffer i kroppen.

Årsagerne til dannelsen af ​​sådanne virioner er:

1.Høj multiplicitet, som et resultat af hvilket cellen ikke er i stand til at forsyne alle sine afkom med energimateriale.

2. Virkningen af ​​interferon - det påvirker syntesen af ​​DNA- og RNA-vira.

SPØRGSMÅL nr. 9 “SÆRLIGHEDER VED BIOSYNTESE AF DNA-HOLDENDE VIRUS. KONCEPTET TRANSKRIPTION OG BRADcasting.”

Transskription - omskrivning af DNA til RNA - udføres ved hjælp af enzymet RNA-polymerase, hvis produkter er biosyntesen af ​​mRNA. DNA-vira, der formerer sig i kernen, bruger cellulær polymerase til transkription. RNA-holdige vira produceres af genomet selv. I nogle RNA-holdige vira udføres overførslen af ​​genetisk information i henhold til RNA-RNA-proteinformlen. Denne gruppe af vira omfatter picornovira og cornovira.

Proteinsyntese sker som et resultat af translation til RNA.

Under påvirkning af enzymer i DNA-holdige vira syntetiseres mRNA, og mRNA'et sendes til den følsomme celles ribosomer. Syntesen af ​​tidlige virionproteiner begynder på cellens ribosomer (udrustet med enzymernes egenskaber, blokerer cellulær metabolisme).

Tidlige virionproteiner giver anledning til dannelsen af ​​tidlige virionsyrer.

Efterhånden som tidlige virionproteiner akkumuleres, blokerer de sig selv, og processen omarrangeres på det ribosomale apparat. Virioner samles og de nydannede virioner forlader modercellen.

SPØRGSMÅL nr. 10 "TYPER AF INTERAKTION, HOVEDRESULTATER AF VIRUS INTERAKTION MED EN CELLE."

1) Produktiv interaktion - når vira formerer sig i en celle danner en ny generation 2) Mislykket - når reproduktionscyklusser afbrydes på et tidspunkt. 3) Lytisk reaktion - når cellen efter dannelsen af ​​virus dør. 4) Latent reaktion - når en inficeret celle bevarer sin levedygtighed i lang tid. 5) Integration - når genomerne af virus og celler kombineres. I dette tilfælde sker reproduktion af genomer i celler og er underlagt generel regulering. Reproduktion af vira forårsager patologiske ændringer i de berørte celler, udtrykt af funktionelle og morfologiske lidelser i cellerne. Mulige resultater af processerne for interaktion mellem forskellige vira og celler kan opdeles i 5 typer: 1) Degeneration af celler - fører til deres død. I dette tilfælde får cellen en uregelmæssig rund form, bliver afrundet, bliver tættere, granularitet vises i cytoplasmaet, rynker og fragmentering af kernerne. 2. Dannelsen af ​​symplaster er flerkernet. ophobninger uden for cellen. stoffer. 3) Celletransformation – dvs. dannelse af foci af tilfældig tredimensionel vækst. Celler i disse foci får nye arvelige egenskaber, som løbende hober sig op på hinanden (tumorer). 4. Arr. ekstracellulære indeslutninger, som er produkter af cellereaktionen til den virale partikel. 5) Latent infektion er en slags tilstand. ligevægt mellem virus og celle., når infektionen ikke viser sig på nogen måde. Ubetydelig produktion af virussen observeres uden celleskade.

SPØRGSMÅL nr. 11 "FASER AF INTERAKTION AF RNA INDEHOLDENDE VIRUS MED EN CELLE."

Se spørgsmål nr. 8

SPØRGSMÅL nr. 12 "PATOGENESE AF VIRALE INFEKTIONER

Tropisme er en viruss tendens til et eller andet infektionssted. For luftvejsinfektioner er virussen lokaliseret i nasopharynx, luftrør og lunger; for enterovirus - i fæces; for neurotrope - i GM eller SM; med dermotropisk - i huden.

Patogenese af virusinfektioner.

Patogenese forstås som et sæt af processer, der forårsager en sygdom, dens udvikling og udfald.

Patogenese bestemmes af:

1.Tropisme af virussen

2.Antal infektiøse partikler

3. Cellerespons på infektion.

4. Kroppens reaktion på ændringer i celler og væv.

5. Reproduktionshastighed.

Vira's tropisme er baseret på visse cellers følsomhed over for virussen.

Patogenese bestemmes af de vigtigste mekanismer for interaktion mellem vira og celler:

Atrofi eller dystrofi (CPD)

Dannelse af inklusionsorganer

Dannelse af symplaster og syncytier

Transformation

Latent (kronisk) infektion.

Patogenese på cellulært niveau - dette inkluderer CPD (synlige morfologiske ændringer i celler under påvirkning af et bestemt viralt middel). Karakteren af ​​CPP er forskellig og afhænger af:

1. Celletype

2.Biokemiske egenskaber af virussen

3. Infektiøs dosis

Arten af ​​CPP vurderes ved hjælp af et 4-punkts krydssystem, og ændringer tages i betragtning, når cellekulturer anvendes til titrering (dvs.).

Patogenese på organismeniveau.

Infektionstilstanden er som enhver biologisk proces dynamisk. På den ene side omfatter den infektiøse proces: introduktion, reproduktion og spredning af patogenet i kroppen, såvel som en patogen effekt, og på den anden side kroppens reaktion på denne handling.

Den patogene virkning af patogenet kan være anderledes. Det manifesterer sig i form af en infektionssygdom af varierende sværhedsgrad, hos andre uden udtalte kliniske tegn, hos andre manifesterer det sig kun ved ændringer identificeret ved virologiske, biokemiske og immunologiske metoder. Det afhænger af:

Mængden og kvaliteten af ​​patogenet, der er trængt ind i en modtagelig organisme, betingelserne i det indre og ydre miljø, der bestemmer dyrets resistens og er karakteriseret ved interaktion mellem mikro- og makroorganismer. Baseret på arten af ​​interaktionen mellem patogenet og organismen er der 3 former:

1.en infektionssygdom er en infektionsproces karakteriseret ved visse kliniske tegn, samt lidelser, funktionelle lidelser og morfologiske vævsskader.

2. Mikrobiel transport er en immunologisk subinfektion. En differentieret tilgang til forskellige former for infektion gør det muligt at diagnosticere infektionen korrekt og identificere inficerede dyr i en dysfunktionel besætning. Patogenesen af ​​enhver infektionssygdom bestemmes af patogenets særlige virkning og kroppens reaktioner, afhængigt af de forhold, hvor interaktionen mellem mikro- og makroorganismer forekommer. I dette tilfælde er ruterne for penetration og distribution af patogenet af ikke ringe betydning. Patogenporte: hud, slimhinder, genitourinary system, placenta.

Hver type patogen har evolutionært tilpasset sig sådanne introduktionsveje, som giver gunstige betingelser for reproduktion og spredning - indgangsporten for hver infektion er karakteriseret ved specificitet. For at udføre forebyggelse er det nødvendigt at tage højde for specificiteten af ​​infektionsporten. For eksempel med INAN trænger patogenet ind i huden gennem et insektbid. I tilfælde af mund- og klovsyge er hovedvejen ernæringsmæssig i tilfælde af rabies, er det gennem et bid.

Klassificering af virusinfektioner.

Der er autonome og integrerede infektioner. Autonom - i dette tilfælde replikerer det virale genom uafhængigt af det cellulære genom. Autonom infektion er typisk for de fleste vira.

Integrerede infektioner - det virale genom indgår i det cellulære genom, dvs. integreret i det cellulære genom og replikeret med det. I dette tilfælde replikerer det virale genom og fungerer som en integreret del af det cellulære genom. Det kan integrere både hele genomet og en del. Ved integrerede infektioner er der ingen samling af virale partikler eller udgang.

Autonom infektion - en celle får undertiden evnen til at dele sig ubegrænset som følge af forstyrrelse af de reguleringsmekanismer, der styrer delingen. Dette ses oftere ved onkogene infektioner.

Produktive og abortive infektioner:

1. Produktiv – ender med frigivelse af smitsomt afkom.

2. Mislykket – der dannes ikke smitsomme afkom, eller der er få af dem.

Kursets former - både produktive og abortive - kan forekomme i akutte og kroniske former. En akut infektion er en infektion, der resulterer i, at cellen enten kommer sig eller dør. Akut infektion på celleniveau kan være cytolytisk (når celledød forekommer).

En kronisk infektion er en infektion, hvor en celle fortsætter med at producere virale partikler i lang tid og overfører denne evne til datterceller. Oftere antager en mislykket infektion en kronisk form, fordi viralt materiale ophobes og overføres til dattercellen.

Blandet infektion - en celle er inficeret med to eller flere forskellige vira, som et resultat af hvilke to eller flere infektiøse processer kan kombineres i cellen. Der er flere mulige muligheder for virusinteraktion under en blandet infektion:

1. Interferens - en virus undertrykker en andens virkning.

2. Komplementering (ophøjelse) - en virus forstærker virkningen af ​​en anden.

Klassificering af virusinfektioner på organismeniveau.

Klassifikationen er baseret på:

1. Generalisering af virussen

2. Varighed af infektion

3. Manifestation af kliniske symptomer

4. Udslip af vira i miljøet

En af formerne kan omdannes til en anden (for eksempel fokal til generaliseret, akut til kronisk).

Fokal infektion.

Virusset virker nær infektionens indgangsport på grund af lokal reproduktion. De har en kortere latent periode sammenlignet med generaliserede.

Generaliserede infektioner.

Efter en begrænset reproduktionsperiode i primære foci forekommer generalisering af infektioner - vira trænger ind i andre systemer, for eksempel mund- og klovsyge, polio og kopper.

Akut infektion.

Det varer i en kort periode og frigives til miljøet. Ender med død eller bedring.

Vedvarende infektion.

Med langvarig interaktion af virussen med kroppen. Det kan være latent, kronisk, langsomt.

Latent infektion - er ikke ledsaget af frigivelse af virus i miljøet under visse forhold kan det blive akut og kronisk.

Til influenza, sepsis, AIDS mv.

Kronisk infektion.

Dette er en langsigtet proces. Karakteriseret ved perioder med remission (adenovirus, herpes).

Langsomme infektioner er en slags interaktion mellem en virus og en fag og er karakteriseret ved lange inkubationsperioder.

Smittekilder.

Når man studerer enhver smitsom sygdom, er det vigtigt at kende kilden, stedet for permanent ophold og reproduktion, spredningsveje, sted og tidspunkt for bevarelse, forekomst i det ydre miljø, metoder til overførsel fra syg til rask.

Det naturlige miljø er en levende organisme, her finder den alle betingelser for eksistens. Varigheden af ​​virusophold varierer meget og afhænger af kroppens biologiske egenskaber og reaktivitet. Fra patogenesens betingelser. Smittekilder er kun inficerede organismer. De spiller kun en rolle i transmissionsprocessen. De fleste dyr udskiller vira i ekskrementer, sekreter, blod, spildevand og sputum. Ved de fleste virusinfektioner er patogenesen baseret på viræmi (mund- og klovsyge, pest osv.). Ved disse sygdomme frigives virussen på alle mulige måder. I kroniske tilfælde er viral udskillelse mindre intens, men kan blive forlænget. For virussygdomme er lokalisering begrænset til én måde: lungebetændelse - med dråber af sputum. Den mest intense frigivelse af virussen i det ydre miljø observeres i den akutte sygdomsperiode, men i en række sygdomme forekommer den også i inkubationsperioden. Asymptomatiske infektioner opstår ved vaccination med levende vacciner.

SPØRGSMÅL nr. 13 “REGLER FOR INDSAMLING AF PATHEMATERIALE FRA SYGE OG DØDE DYR I TILFÆLDE AF FORSINKELSE AF VIRALE SYGDOMME. TRANSPORT OG FORBEREDELSE AF DET TIL VIRUSOLOGISKE STUDIER.

Materiale til forskning fra syge, døde eller tvangsdræbte dyr bør tages så hurtigt som muligt efter forekomst af tydelige tegn på sygdommen eller senest 2-3 timer efter klinisk død eller slagtning. Dette skyldes, at umiddelbart efter sygdommen eller i de første 1-2 dage er tarmens barriererolle væsentligt svækket, hvilket sammen med øget permeabilitet af blodkar bidrager til spredning af tarmfloraen. Hertil kommer, at efterhånden som den infektiøse proces fortsætter og endda uddybes, kan mængden af ​​virus falde som følge af påvirkningen af ​​kroppens forsvarsmekanismer. Når man tager materiale til virusisolering, bør man gå ud fra patogenesen af ​​den infektion, der undersøges (indgangsdør, spredningsveje for virus i kroppen, steder for dets reproduktion og udskillelsesveje). For luftvejsinfektioner tages næsesvælgpodninger, næse- og svælgpodninger for at isolere vira; for enterovirus - afføring; med dermotropiske - friske hudlæsioner. Forskellige ekskreter og sekreter, stykker af organer, blod og lymfe kan tjene som materialer til isolering af virussen. Blod tages fra halsvenen hos grise, fra halespidsen eller øret. Vask fra bindehinden, fra næseslimhinden, fra bagvæggen af ​​svælget, endetarmen og cloaca hos fugle tages med sterile vatpinde og nedsænkes i penicillinflasker. Når du tager materiale fra nasopharynx, kan du bruge enheden designet af Thomas og Scott. Spyt, der strømmer fra munden, kan opsamles direkte i et reagensglas. Urin opsamles ved hjælp af et kateter i en steril beholder. Afføring fjernes fra endetarmen med en spatel eller pind og placeres i et sterilt rør. Vesikulær væske kan opsamles med en sprøjte eller Pasteur-pipette i et sterilt rør. Væggene af kræftsår og skorper fra overfladen af ​​huden fjernes med en pincet. Efter dyrets død er det vigtigt at tage stykker af organer så hurtigt som muligt, fordi... Med mange virale infektioner observeres fænomenet post-mortem autosterilisering, som et resultat af hvilket virussen måske slet ikke opdages, eller dets mængde vil være meget lille. Dernæst placeres det patologiske materiale i lave temperaturer (tøris+alkohol; sne+salt) eller glycerin på ICH. Patentmateriale skal være forsynet med en pålidelig og tydelig etiket. Du skal skrive ned, hvilket materiale der er opnået fra hvilket dyr. Et pap- eller krydsfinermærke er hængt på termokanden med PM-prøver, der angiver bedrift, type dyr, type materiale og dato. Termokanden skal forsegles og leveres med ekspres. Det anbefales, at prøver leveret til laboratoriet straks anvendes til virusisolering. I laboratoriet bliver det resulterende patologiske materiale befriet for konserveringsmidler, optøet, vasket fra glycerin, vejet og målt. Nogle er taget til forskning, nogle i køleskabet. Forberedelsen af ​​organer og væv udføres som følger: virussen frigives fra cellerne i organer og væv - materialet knuses grundigt og males i en morter med sterilt kvartssand. En 10% suspension fremstilles sædvanligvis af det formalede materiale i Hanks eller fosfatbuffer. Suspensionen centrifugeres ved 1500-3000 rpm, supernatanten suges af og befries for mikroflora ved behandling med antibiotika (penicillin, nystatin). Suspensionen udsættes for AB i mindst 30-60 minutter ved stuetemperatur, derefter udsættes materialet for bakteriologisk kontrol ved podning på MPA, MPB, MPPB, Sabourauds medium. Suspensionen opbevares ved minus 20-minus 70 C.

SPØRGSMÅL nr. 14 "METODER TIL BEVARELSE AF VIRUS OG DERES PRAKTISKE VIGTIGHED."

Følgende metoder til viruskonservering anvendes:

1) ved opbevaring af viralt materiale (organer eller vævsstykker) anvendes ofte glycerin (50 % opløsning i ICN), som virker bakteriostatisk og samtidig beskytter vira. I dette tilfælde kan det opbevares i flere måneder ved 4C.

2) vira opbevares oftest i køleskabe, der giver temperaturer på -20, -30, -70C. Ved denne temperatur mister nogle vira deres smitteevne relativt hurtigt uden tilsætning af beskyttende stoffer. Tilsætning af inaktiveret blodserum eller skummetmælk eller 0,5-1,5 % gelatine har en god beskyttende effekt ved frysning og opbevaring af vira.

3) Hurtig nedfrysning til minus 196C med flydende nitrogen. Virus følsomme over for lave pH-værdier bør nedfryses i væsker, der ikke indeholder monobasiske fosfater.

4) Lyofilisering - frysetørring under vakuumforhold - er en meget god metode til konservering. I lyofiliseret form kan vira opbevares i flere år.

SPØRGSMÅL nr. 15 “ARBEJDSREGLER I ET VIRUSOLOGISK LABORATORIUM. SIKKERHEDSFORANSTALTNINGER, VED ARBEJDE MED VIRUS-HOLDENDE MATERIALE."

Alt laboratoriepersonale er instrueret og trænet i sikre arbejdsmetoder, forsynet med overalls, sikkerhedsfodtøj, sanitær beskyttelse og værnemidler i overensstemmelse med gældende standarder. De grundlæggende arbejdsregler er som følger: 1) adgang af uautoriserede personer til produktionslokalerne samt adgang for ansatte til laboratoriet uden en kjole og reservesko er strengt forbudt; 2) det er forbudt at forlade laboratoriet i kjoler og specialsko eller at tage overtøj på over kjolen, at ryge, spise og opbevare fødevarer i laboratoriet. I boksning bærer de en steril kjole, maske, kasket og om nødvendigt gummihandsker og beskyttelsesbriller. Sørg for at skifte dine sko. 3) alt materiale, der kommer ind i laboratoriet til testning, skal betragtes som inficeret. Det skal håndteres meget forsigtigt ved udpakning, glassene skal tørres udvendigt af med en desinfektionsopløsning og placeres på en bakke eller i kuvetter. Arbejdsområdet på bordet er dækket af flere lag gaze fugtet med en 5% kloraminopløsning. Når du arbejder med pipetter, skal du bruge gummipærer. Pipetter, objektglas og dækglas og andet brugt glas desinficeres ved at nedsænke dem i 5 % kloramin, phenol, lysol og svovlsyre. 4) Efter endt arbejde er arbejdspladsen ryddet op og grundigt desinficeret. Virusholdigt materiale, der er nødvendigt for det videre arbejde, opbevares i køleskab og forsegles. 5) hænder vaskes grundigt med 5% kloramin, handsker tages af, desinficeres endnu en gang, desinficeres og vaskes. Når de arbejder i et virologisk laboratorium, skal medarbejdere nøje overholde metoderne og reglerne for asepsis og antisepsis. Asepsis er et system af foranstaltninger og arbejdsmetoder, der forhindrer indtrængen af ​​mikroorganismer og vira fra miljøet i menneskekroppen, såvel som det materiale, der undersøges. Det involverer brug af sterile instrumenter og materialer, desinfektion af medarbejdernes hænder og overholdelse af særlige hygiejniske regler og arbejdspraksis. Antiseptika er et sæt foranstaltninger, der har til formål at ødelægge mikroorganismer og vira, der kan forårsage en infektiøs proces, når de kommer i kontakt med beskadigede eller intakte områder af hud og slimhinder. Ethylalkohol (70%), alkoholopløsning af jod, strålende grøn og andre bruges som antiseptiske midler. Desinfektion er desinfektion af miljøgenstande ved at ødelægge patogene mikroorganismer og vira for mennesker og dyr med fysiske midler og ved hjælp af kemikalier. Sterilisering – sterilisering, fuldstændig destruktion af mikroorganismer og vira i forskellige materialer. Det udføres ved hjælp af fysiske og kemiske metoder.

SPØRGSMÅL nr. 16 "SKEMA FOR LABORATORIEDIAGNOSTIK AF VIRALE INFEKTIONER."

Laboratoriediagnostik er et system af foranstaltninger til at opdage og indikere virussen. Det omfatter: modtagelse af tilsendt patologisk materiale, undersøgelse af patologisk materiale ved hjælp af en hurtig diagnostisk metode, forskning ved brug af langsigtede metoder (retrospektiv diagnose, undersøgelse af parrede sera ved seroreaktioner).

Laboratorieforskning. I. Indikation af virus i patologisk materiale. 1. Detektion – lysmikroskopi af store vira (Poxviridae), elektronmikroskopi. 2. Påvisning af inklusionslegemer. (Babes-Chenegri kroppe i rabies) 3. Påvisning af virale antigener: serologiske reaktioner. 4. Påvisning af viralt NK (DNA-prober og PCR - polymerasekædereaktion). 5. Påvisning af den aktive form af virussen ved bioassay (forsøgsdyr, kyllingeembryoner, cellekultur). 6. Påvisning af hæmagglutininer i hæmagglutinerende vira (i øjeblikket praktisk talt ikke brugt på grund af tilgængeligheden af ​​mere nøjagtige metoder). II. Isolering (isolering) af virus fra patologisk materiale. Der udføres mindst tre blindpassager, og der udføres en bioassay. A) Laboratoriedyr (kliniske, død, patologiske forandringer) B) Kyllingeembryoner (død, patologiske forandringer, RGA) C) Cellekultur (CPD, RGAd, plakmetode) III. IV. Bevis for ætiologisk rolle. Nogle gange er det nødvendigt at bevise den isolerede viruss ætiologiske rolle. Til dette formål anvendes parrede blodsera i serologiske reaktioner. Et isoleret virus bruges som AG, og parrede sera bruges som AT. En stigning i antistoftiter i det andet serum med 4 eller flere gange indikerer den isolerede viruss ætiologiske rolle.

SPØRGSMÅL nr. 17 "KLINISK-EPIZOOTOLOGISK DIAGNOSTIK AF VIRALE SYGDOMME HOS DYR, ESSENS, BETYDNING."

Klinisk-epidemiologisk eller præ-laboratoriediagnostik - udføres på gårde og tillader kun en foreløbig diagnose, der udføres baseret på indsamling, sammenligning af analyse af syge dyr (kliniske symptomer på sygdommen, patologiske ændringer i organer). Indsamling af epidemiologiske data er meget vigtigt, det giver os mulighed for at få data om, hvordan sygdommen skrider frem, og information om farme. Hvis gårdene ikke er velstående, så bekræfter dette endnu en gang diagnosen. En klinisk undersøgelse fokuserer dyrlægen på kun få typer sygdomme. Laboratoriediagnostik er stadig af primær betydning.

SPØRGSMÅL nr. 18 "METODER TIL DETEKTION AF VIRUS I MØNSTERMATERIALE."

I. Indikation af virus i patologisk materiale. 1. Detektion – lysmikroskopi af store vira (Poxviridae), elektronmikroskopi. 2. Påvisning af inklusionslegemer (Babes-Chenegri-legemer i rabies) 3. Påvisning af virale antigener: serologiske reaktioner. 4. Påvisning af viralt NK (DNA-prober og PCR - polymerasekædereaktion). 5. Påvisning af den aktive form af virussen ved bioassay (forsøgsdyr, kyllingeembryoner, cellekultur). 6. Påvisning af hæmagglutininer i hæmagglutinerende vira (i øjeblikket praktisk talt ikke brugt på grund af tilgængeligheden af ​​mere nøjagtige metoder). Serologiske tests bruges til at identificere den isolerede virus. 1.RIF – immunfluorescensreaktion. AG + AT mærket med fluorokrom. Kontakt er tilladt i 30 minutter ved 37 C, derefter udføres en grundig vask i laboratoriet. Detektionsmetode: fluorescerende lys under et mikroskop. 2.ELISA – enzym-linked immunosorbent assay. AG + AT med enzym. Kontakt, vask, tilsæt derefter et substrat, som ved kontakt med AT-enzymkomplekset giver en farvereaktion. 3.RSK – komplementfikseringsreaktion. AG + AT + komplement. Kontakte. Derefter tilsættes hæmsystemet (hæmolysin + fårerøde blodlegemer). Kontakte. Hvis hæmolyse ikke forekommer, så har AG og AT fast komplement. Forsinket hæmolyse er en positiv reaktion. Hvis hæmolyse opstår, så er komplement bundet af hæmsystemet - reaktionen er negativ. 4.RDP – diffus udfældningsreaktion. AG + AT (diffusion i agargel). Detektionsmetoden er dannelsen af ​​en nedbørskontur. 5.RNHA – indirekte hæmagglutinationsreaktion. Erytrocytter er fyldt med antigen, og når antigen-antigen-komplekset dannes, opstår der agglutination af erytrocytter. 6.RTGA – hamagglutinationshæmningsreaktion 7.RTGAd – hæmadsorptionshæmningsreaktion 8.RN – neutraliseringsreaktion. Virus + AT. Kontakte. Går ind i et virusfølsomt system. Detektionsmetoden er at neutralisere virusets infektiøse aktivitet.

SPØRGSMÅL nr. 19 "PRINCIPPET FOR TILBAGEFØLGENDE DIAGNOSTIK, DETS FORDELE OG UNDERLADER."

Retrospektiv diagnostik - målet er at opdage dynamikken i stigningen i AT, baseret på undersøgelsen af ​​parrede sera, som tages to gange, i begyndelsen af ​​sygdommen og i slutningen. De testes i en af ​​seroreaktionerne. Hvis stigningen i AT er 4-5 gange større, er diagnosen 100 %.

Rolle - metoden giver dig mulighed for pålideligt at stille en diagnose i de fleste tilfælde.

Rolle – varighed af retrospektiv diagnose.

SPØRGSMÅL nr. 20 "AUJESKYS SYGDOMSVIRUS."

Aujeszkys sygdom (pseudorabies, pruritisk pest, rabiat fnat, infektiøs bulbar parese) er en akut sygdom hos alle typer husdyr, pelsdyr og gnavere. Det er karakteriseret ved tegn på skader på hjernen og rygmarven, alvorlig kløe og kløe.

AD forårsager særlig skade i svineavl og pelsdyravl. Dette er en akut fødevareinfektion hos pelsdyr. Årsagen er mad, som ofte er slagteriaffald og indmad fra syge dyr eller virusbærende dyr.

Klinik. Inkubationsperioden er 1,5 dage - 10-12 dage, afhængig af infektionsmetoden, virulensen af ​​viruset og dyrets resistens. Virussen er pantropisk.

Hos grise forløber det kliniske forløb uden tegn på kløe. Suttere og fravænnede unger er alvorligt syge. Sygdommen er septisk i naturen. Smågrise dør normalt inden for 4-12 timer. Hos smågrise fra 10 dage til 3 måneder er de første tegn på sygdommen feber (40-42), depression, slimudslip fra næsen. Senere opstår tegn på beskadigelse af centralnervesystemet: rastløshed, manøvreringsbevægelser, tab af orientering, kramper, krumning af ryggen, lammelse af svælget, strubehovedet, lemmer, lungeødem, savlen. Sygdommen varer fra flere timer til 3 dage. Dødelighed: 70-100 %

Hos søer viser det sig som et influenzalignende syndrom med bedring efter 3-4 dage.

Hos kvæg stiger temperaturen til 42 C, tyggestop, kraftig kløe i næsebor, læber, kinder, fodervægring, sløvhed, angst, frygt, hurtig vejrtrækning, svedtendens, kramper i tygge- og nakkemusklerne. Døden indtræder med stigende sløvhed efter 1-2 dage. Genopretning er yderst sjælden.

Kødædende dyr oplever madvægring, frygt, rastløshed og alvorlig kløe. Nogle gange viser hunde og katte tegn på rabies. Derefter opstår lammelse af svælget. Død om 2-3 dage. Dyr er ikke kilden til virussen og udskiller den ikke, da den er en økologisk blindgyde.

Aujeszkys sygdom kan mistænkes baseret på karakteristiske kliniske symptomer og patologiske ændringer (klinisk, epizootologisk og patologisk diagnostik).

Materiale til forskning: podninger fra næsehulen og blod (helst parret serum), fra lig - stykker af hjernen, lungerne, leveren, milten.

Express metode - påvisning af viralt antigen i RIF. Virologisk metode: a) isolering af virussen på en kultur af nyreceller fra grise: b) bioassay på kaniner (karakteristisk kløe og skrabe på infektionsstedet).

Identifikation: RIF, RN.

Retrospektiv diagnose: baseret på stigningen i antistoftiter i parrede serumprøver.

Det er nødvendigt at skelne Aujeszkys sygdom fra rabies, svinepest, influenza, erysipelas og bordsaltforgiftning.

Levende VGNKI-virusvaccine og inaktiveret kulturvaccine anvendes - immunitet i 6-10 måneder anvendes i udlandet.

SPØRGSMÅL nr. 21 "VIRALE PROTEINERS BETYDNING OG FUNKTIONER."

Se spørgsmål nummer 7

SPØRGSMÅL nr. 22 "GENERELLE PRINCIPPER FOR SEROLOGISKE REAKTIONER OG DERES ANVENDELSE TIL DIAGNOSE AF VIRALE SYGDOMME."

For at bestemme typen af ​​en given virus anvendes serologiske metoder, når man studerer beskyttelsesprocesser i kroppen af ​​en syg person eller et inficeret dyr. Serologi (fra det latinske Serum - serum, flydende bestanddel af blod) er en gren af ​​immunologien, der studerer antigenreaktioner med specifikke beskyttende stoffer, antistoffer, der findes i blodserum. Antistoffer neutraliserer virkningen af ​​virussen. De binder sig til visse antigene stoffer placeret på overfladen af ​​virale partikler. Som et resultat af bindingen af ​​antistofmolekyler til virusets overfladestruktur mister sidstnævnte sine patogene egenskaber. For at fastslå niveauet (mængden) af antistoffer i serumet eller bestemme typen af ​​en given virus, udføres en virusneutraliseringsreaktion. Det kan udføres både i dyr og i cellekultur.

Den minimale koncentration af serum indeholdende antistoffer, der er tilstrækkelig til at neutralisere virussen og forhindre den i at udvikle CPE, kaldes titeren af ​​virusneutraliserende serum. Denne koncentration kan også påvises ved hjælp af plakmetoden.

For at påvise antistoffer anvendes metoden til hæmning af hæmagglutination (limning af røde blodlegemer under påvirkning af en virus) og metoden til komplementfiksering. Af de metoder, der anvendes i virologien til forskellige forskningsformål, kan vi også nævne de metoder, hvormed virologisk materiale fremstilles til fysiske og kemiske analyser, der letter studiet af viras fine struktur og sammensætning. Disse tests kræver store mængder helt ren virus. Virusrensning er en proces, hvor alle fremmede partikler, der forurener det, fjernes fra en suspension med en virus. Disse er hovedsageligt stykker og "fragmenter" af værtsceller. Samtidig med oprensningen sker der sædvanligvis fortykkelse af suspensionen, hvilket øger koncentrationen af ​​virus. Dette giver kildematerialet til mange undersøgelser.

Ved hjælp af en serologisk reaktion kan du: bestemme antistoftiteren mod den hæmagglutinerende virus i serum; identificere et ukendt hæmagglutinerende virus fra kendte sera; etablere graden af ​​antigenbeslægtethed af 2 vira, bestemme titeren af ​​virusneutraliserende antistoffer i serum eller neutraliseringsindekset, identificere en ukendt virus ved at teste den med forskellige kendte sera.

Serologiske reaktioner.

1. RIF – immunfluorescensreaktion.

AG + AT mærket med fluorokrom. Kontakt tillades i 30 minutter ved 37 C og vaskes derefter grundigt i saltvandsopløsning. Detektionsmetode: fluorescerende lys under et mikroskop.

2. ELISA – enzym-linked immunosorbent assay.

AG + AT med enzym. Kontakt, vask, tilsæt derefter et substrat, som ved kontakt med AT-enzymkomplekset giver en farvereaktion.

3. RSK – komplementfikseringsreaktion.

AG + AT + komplement. Kontakte. Derefter tilsættes hæmsystemet (hæmolysin + fårerøde blodlegemer). Kontakte. Hvis hæmolyse ikke forekommer, så har AG og AT fast komplement. Forsinket hæmolyse er en positiv reaktion. Hvis hæmolyse opstår, så er komplement bundet af hæmsystemet - reaktionen er negativ.

4. RDP – diffus nedbørsreaktion.

AG + AT (diffusion i agargel). Detektionsmetoden er dannelsen af ​​en nedbørskontur.

5. RNHA – indirekte hæmagglutinationsreaktion.

Erytrocytter er fyldt med antigen, og når antigen-antigen-komplekset dannes, opstår der agglutination af erytrocytter.

6. RTGA – hamagglutinationshæmmende reaktion

7. RTGAd – hæmadsorptionshæmningsreaktion

8. RN – neutraliseringsreaktion.

Virus + AT. Kontakte. Går ind i et virusfølsomt system. Detektionsmetoden er at neutralisere virusets infektiøse aktivitet.

SPØRGSMÅL nr. 23, 25 “RTGA OG DETS ANVENDELSE I VIRUSOLOGI. FORDELE OG ULEMPER."

En af de enkleste serologiske reaktioner er hæmagglutinationshæmningsreaktionen. Det er baseret på det faktum, at antistoffer, når de møder et homologt antigen, neutraliserer ikke kun dets infektiøse, men også hæmagglutinerende aktivitet, fordi blokerer virion-receptorer, der er ansvarlige for hæmagglutination, og danner et "AG + AT"-kompleks med dem. Princippet for RTGA er, at lige store mængder blodserum og virussuspension blandes i et reagensglas, og efter eksponering bestemmes det, om virussen forbliver i blandingen, ved at tilsætte en suspension af røde blodlegemer. Agglutination af erytrocytter indikerer tilstedeværelsen, og fraværet af hæmagglutination indikerer fravær af virus i blandingen. Virussens forsvinden fra virus + serumblandingen betragtes som et tegn på interaktion mellem serum og virus-AT'er. RTGA giver dig mulighed for at løse følgende problemer: Bestem titeren af ​​antistoffer mod den hæmagglutinerende virus i serum; identificere et ukendt hæmagglutinerende virus fra kendte sera; etablere graden af ​​AG-forhold mellem de to vira. Fordele ved RTGA: enkel teknik, hastighed, intet sterilt arbejde påkrævet, specificitet, lave omkostninger. Ulempe ved RTGA: kun muligt med hæmagglutinerende vira.

Princippet for AT-titrering i RTGA er som følger: Forbered en række successive (normalt 2-fold) fortyndinger af testserumet i lige store volumener (normalt 0,25 eller 0,2 ml); til hver fortynding tilsættes de samme volumener af homolog virus i en titer på 4 HAE; blandingerne holdes i en vis tid ved en bestemt temperatur, lige store volumener af en 1% suspension af vaskede erytrocytter tilsættes til alle blandinger; Efter eksponering vurderes hæmagglutination i hver blanding i krydsninger.

SPØRGSMÅL nr. 26 “RDP. IMMUNOLOGISK GRUNDLAG FOR METODE, OPGØRELSE OG REGNSKAB AF RESULTATER. FORDELE OG ULEMPER."

RDP i gelen er baseret på evnen til diffusion i geler af AT og opløselig AG og fraværet af en sådan evne i "AG + AT" komplekset. Dette kompleks dannes ved kontakt mellem homolog AG og AT, der diffunderer mod hinanden. Det aflejres på dannelsesstedet i tykkelsen af ​​gelen i form af et udfældningsbånd. Stivelse, gelatine, agar-agar og mere bruges som geler. Agar gel bruges ofte i laboratoriepraksis. Serumantistoffer er Ig-molekyler, som trods deres ret store størrelse. Kan diffundere i agargel. Virale Ags er virale proteiner. De kan findes i virioner, der repræsenterer såkaldte corpuscular AG'er. Store størrelser, der ikke tillader dem at diffundere i agargelen. Men virale proteiner kan også være i form af frie molekyler dannet som følge af ødelæggelsen af ​​virioner og (eller) ødelæggelsen af ​​de celler, hvori de blev dannet. Disse er opløselige antigener. De er i stand til at sprede sig i en agargel. Teknikken til at opsætte RDP i en gel er at lave flere fordybninger i et lag agargel og hælde AG og serum i dem. Så AG og serum er i tilstødende brønde. Fra brøndene begynder AG og serum at diffundere ind i gellaget. Diffusion er rettet i alle retninger fra hvert hul. I mellemrummet mellem brøndene, der indeholder AG og serum, diffunderer sidstnævnte mod hinanden. Hvis de viser sig at være homologe, dannes et "AG + AT" kompleks, som ikke er i stand til diffusion på grund af dets større størrelse. Den sætter sig på dannelsesstedet i form af en hvidlig nedbørsstribe. RDP løser følgende problemer: 1) påvisning af antistoffer homologe med antigener i blodserum; 2) påvisning i materialet af et antigen homologt med kendte serumantistoffer 3) identifikation af et ukendt virus; 4) titrering af serum AT. Her tjener den højeste serumfortynding, som stadig giver præcipitation med homologt antigen, som en indikator for antistoftiteren i serumet. RDP bruges ofte til at diagnosticere bovin leukæmi og infektiøs anæmi hos heste. Reaktionen kan udføres i petriskåle, på objektglas, kapillærer (sjældent). For at udføre RDP på ​​objektglas skal du bruge: affedtede objektglas, graduerede pipetter (2-5 ml), Pasteur-pipetter; et rør med en diameter på 5 mm eller et stempel, et vådt kammer, et værktøj til at udvinde gel, agar, AG, serum fra brøndene. Opsætning af RDP: Glaspladerne placeres på en kold overflade. Hæld agar fra en pipette (lag 1,5-2 mm), lad afkøle i 5-10 minutter. Huller skæres ud og loddes. RDP-komponenterne hældes i brøndene og placeres i et fugtigt kammer (hvor de efterlades ved stuetemperatur eller placeres i en termostat). RDP-præparatet på objektglas kan tørres efter 48-72 timer og farves med amidsort opløsning. Dette gør det muligt at opbevare præparatet på ubestemt tid og forbedrer muligheden for at fotografere nedbørsbånd. Fordele ved RDP: teknikkens enkelhed, hurtig reaktion, krævende for komponenternes renhed, intet sterilt arbejde påkrævet, minimalt behov for komponenter, egnethed til at arbejde med alle opløselige antigener, evnen til at dokumentere resultatet ved at fotografere. Ulemper ved RDP: lav følsomhed. Reaktionen bruges til at påvise rabiesvirus, infektiøs bovin rhinotracheitis, afrikansk svinepest, hundepest og andre i patologisk materiale; Og også til identifikation af infektiøs anæmi hos heste, adenovira, respiratorisk syncytialvirus, bovin diarrévirus, til påvisning i blodserum af antistoffer mod infektiøs anæmi hos heste, bovin respiratorisk syncytialvirus og i mange andre tilfælde.

SPØRGSMÅL nr. 27 “RSK. IMMUNOLOGISK GRUNDLAG OG KARAKTERISTIKA FOR REAKTIONSKOMPONENTER."

Komplementfikseringstesten (FFR) er en af ​​de traditionelle serologiske test, der bruges til at diagnosticere mange virussygdomme. Selve navnet afspejler i høj grad essensen af ​​metoden, som består af to separate faser. Den første fase involverer et antigen og et antistof (en af ​​disse ingredienser er kendt i forvejen) samt en vis mængde præ-titreret komplement. Hvis antigenet og antistoffet matcher, binder deres kompleks komplement, som påvises i anden fase ved hjælp af et indikatorsystem (en blanding af røde blodlegemer fra får og antiserum til dem - hæmolysin). Hvis komplement er bundet af interaktionen mellem antigen og antistof, så forekommer lysis af røde blodlegemer ikke (positive RBC). Med negativ RSC fremmer ubundet komplement hæmolyse af erytrocytter (fig. 80).

RSC'er bruges ofte i diagnostisk praksis til påvisning og identifikation af vira, påvisning og titrering af antistoffer i blodserum.

Hovedkomponenterne i RSC er antigener (kendte eller påviselige), antistoffer (kendte antisera eller testsera), komplement, hæmolytisk serum og røde blodlegemer fra får; Isotonisk natriumchloridopløsning (pH 7,2-7,4) eller forskellige bufferopløsninger anvendes som fortyndingsmiddel. Antigener og serum kan have anti-komplementaritet, dvs. evnen til at adsorbere komplement, hvilket forsinker hæmolyse og forvrænger resultaterne af reaktionen. For at slippe af med antikomplementaritet renses antigener ved forskellige metoder: acetone, freon, ether, chloroform osv., afhængigt af den type væv, der bruges som antigen og virus. Serum frigøres for antikomplementaritet ved opvarmning, behandling af komplement og andre metoder.

Antigener til CSC fremstilles fra organer fra inficerede dyr, fra allantois- eller fostervandet fra inficerede kyllingeembryoner samt fra det flydende medium fra inficerede cellekulturer.

adskiller sig væsentligt fra dets forberedelse til bakterielle infektioner. Dette skyldes en række specifikke egenskaber ved vira.

For det første, for at frigive viralt antigen fra en celle, er det ofte nødvendigt at bearbejde det infektiøse materiale yderligere for at ødelægge cellerne og frigive antigenet.

For det andet den større termolabilitet af virale antigener sammenlignet med bakterielle. I de fleste vira er det komplementfikserende antigen forbundet med den infektiøse partikel, og dens ødelæggelse sker parallelt med tabet af den infektiøse. Derfor skal materialer til at opnå antigenet kun tages fra døde dyr i de første timer efter deres død, eller endnu bedre, i løbet af livet. Konservering af virusholdigt materiale med forskellige desinfektionsmidler giver ofte ikke positive resultater, da mange af dem forårsager ødelæggelsen af ​​det virale antigen.

For det tredje ujævnheden af ​​komplementfiksering, når de bæres forskelligt; med et overskud af antistoffer falder komplementfikseringen kraftigt, da det aktive antigen + antistofkompleks hovedsageligt præsenteres i form af antistoffer, og den aktive komplementoverflade er ubetydelig. Det samme observeres i zonen med overskydende antigen, hvor undertrykkelsen af ​​komplementfiksering sker endnu hurtigere. For at etablere den optimale zone for komplementfiksering er foreløbig titrering af antigen og antistoffer derfor nødvendig.

For det fjerde er volumenet af antigen + antistofkomplekset ubetydeligt. Størrelsen af ​​de virale partikler, der kommer ind i komplekset, er meget lille, og derfor er området med komplementfiksering ubetydeligt. Med en stigning i volumen af ​​antigen + antistofkomplekset ved at forlænge perioden med komplementfiksering (op til 18 timer ved 4 °C), øges reaktionens følsomhed, men dens specificitet falder, da med en lang fikseringsperiode, fikseringen af ​​komplement med uspecifikke antigener (væv) øges.

Og endelig, for det femte, den høje komplementære aktivitet af det virale antigen. For at udelukke uspecifik komplementfiksering er mere fuldstændig oprensning af det virale antigen fra vævsfragmenter nødvendig.

En stor hindring for brugen af ​​RSC til diagnosticering af virussygdomme hos dyr og mennesker er den ujævne ophobning af viralt antigen under forskellige perioder af sygdommen og især under forskellige infektioner.

RSC bruges til at bestemme typer og undertyper (varianter) af mund- og klovesygevirus, der forårsager sygdom hos dyr, til at teste produktionsstammer af mund- og klovesygevirus ved fremstilling af vacciner og laboratoriestammer i forskning arbejde.

SPØRGSMÅL nr. 28 "TITER AF VIRUS OG PRINCIPPER FOR DETS BESTEMMELSE I ENHEDER PÅ 50 % SMITTEFORSAMMELSE."

Titeren er mængden af ​​virus indeholdt i en enhedsvolumen af ​​materiale. Af de lokale skader forårsaget af vira er de bedst kendte plaques og pockmarks på XAO EC. Hvis der er evidens for det modsatte, kan virusets infektiøse aktivitet måles i plakdannende enheder (PFU) eller poxdannende enheder (PFU) 1 PFU = dosis af virus, der er i stand til at forårsage dannelse af én plak, og én PFU - en lomme. Metoder: flere CC'er eller EC'er er inficeret på KhAO. Det aritmetiske gennemsnit af antallet af pockmarks eller plaques beregnes. Det = PFU eller OFU af virussen. Beregn hvor mange PFU eller PFU der er pr. volumenhed virusholdigt materiale. Dette er titlen. T=n/Va, hvor n er det aritmetiske gennemsnit af plaques eller pockmarks, og er fortyndingen af ​​materialet, V er den indgivne dosis. Metode med 50% smitsom virkning. En enhed af virusmængden er en dosis, der kan forårsage en smitsom effekt hos 50 % af de smittede. Antallet af sådanne doser pr. materialeenhed vil udtrykke virustiteren i dette materiale. En 10-dobbelt fortynding af testmaterialet fremstilles, derefter inficeres lige store grupper af levende testobjekter med lige store doser. De tager hensyn til resultatet af handlingen og finder, i hvilken fortynding virussen viste sin virkning med 50%. Hvis en sådan fortynding ikke umiddelbart findes, beregnes den ved hjælp af formlen T=lgB – (b-50)/(b-a) *lgd, hvor B er fortyndingen, der giver en smitsom effekt på mere end 50 %, b er procent, der giver en smitsom effekt på mere end 50 %, en – mindre end 50 % d – fortyndingsfaktor. 1HAE anses for at være en dosis af virussen, der er i stand til at agglutinere ca. 50 % af de røde blodlegemer indeholdt i samme volumen som virussen, 1 % af en suspension af vaskede røde blodlegemer. En række successive multiple fortyndinger af materialet fremstilles, og en 1% suspension tilsættes til hver fortynding. Reaktionen scores i kryds. 2-krydsreaktionen indeholder 1GAE, som ganges med fortyndingsfaktoren.

SPØRGSMÅL nr. 29 “BIOLOGISKE KARAKTERISTIKA FOR MUND- OG KLOVVIRUS. DIAGNOSTISK PRINCIP"

Mund- og klovsyge er en akut, meget smitsom sygdom hos artiodactyler, manifesteret ved feber, vesikulære læsioner i mundslimhinderne, hud på kronblade og yver, hos unge dyr, beskadigelse af mundens slimhinder, hud på kronen og yveret, og hos unge dyr skader på myokardiet og skeletmuskulaturen. Mund- og klovsyge er registreret i mange lande rundt om i verden. Inkubationsperioden varer 1-3 dage. Nogle gange op til 7-10 dage. Det mest karakteristiske tegn på denne sygdom hos dyr er vesikulære læsioner af slimhinderne i munden og huden på kronen og yveret. Hos kvæg - det er akut, godartet hos voksne. Indledningsvis bemærkes en forringelse af appetit, øget spytudskillelse og en stigning i kropstemperaturen. På de 2-3 dage vises aphthae på den indre overflade af læberne og tungen (i nogle, i området mellem klovspalten, på yveret). Efter en dag dannes erosioner. Efter 2-3 uger heler erosionerne, og dyret kommer sig. Virusset tilhører familien Picornaviridae, slægten Aphthovirus, RNA-holdig, har ikke en superkapsidskal. Virioner er små partikler med icosaedrisk form. Virussen er ret modstandsdygtig over for miljøpåvirkninger. Husdyr og vilde artiodactyler er modtagelige. Virusset kan isoleres allerede i inkubationsperioden. Tilbagefald kan være ledsaget af langvarig viral transport. Omkring 50 % af det genvundne kvæg kan udskille virussen i 8 måneder, og nogle i op til 2 år. Virussen dyrkes på naturligt modtagelige dyr og forsøgsdyr: nyfødte mus, kaniner og marsvin. Prolifererer godt i knopceller. Det har ikke hæmagglutinerende egenskaber. Der er 7 kendte typer af MKS: A, O, C, Sat-1, Sat-2, Sat-3, Asia-1. I kroppen af ​​naturligt modtagelige dyr inducerer virussen dannelsen af ​​virusneutraliserende, komplementbindende og udfældende antistoffer.

Mund- og klovsygevirus bestemmes normalt i RSC. Hovedkomponenterne i RSC er AG, AT, komplement, hæmolytisk serum og fåreerythrocytter; ICN eller forskellige bufferopløsninger anvendes som fortyndingsmiddel. AG og serum kan have antikomplementaritet - evnen til at adsorbere komplement, hvilket forsinker hæmolyse og forvrænger resultaterne af reaktionen. For at slippe af med antikomplementaritet renses AG ved hjælp af forskellige metoder: acetone, freon, ether, chloroform, afhængigt af den type væv, der anvendes som AG og virus. AG til RSC fremstilles ud fra organer fra inficerede dyr, fra allantois- og fostervandet fra inficeret EC, samt fra det flydende medium fra inficeret EC. RSC bruges til at bestemme typer og undertyper af mund- og klovesygevirus, der forårsager sygdom hos dyr, til at teste produktionsstammer af mund- og klovesygevirus ved fremstilling af vacciner og laboratoriestammer i forskningsarbejde.

SPØRGSMÅL nr. 30 “LUMINESTENSMIKROSKOPI. GRUNDLÆGGENDE OM IMMUNOFLUORESCENS".

Metoden er baseret på fænomenet luminescens, hvis essens er, at ved at absorbere forskellige typer energi (lys, elektrisk), går atomer af visse stoffer i en exciteret tilstand, og derefter, når de vender tilbage til deres oprindelige tilstand, frigiver de det absorberede energi i form af lysstråling. Luminescens observeres i form af fluorescens - en glød, der opstår i øjeblikket af bestråling med spændende lys og stopper umiddelbart efter dens afslutning. Fosforescens er en glød, der fortsætter i lang tid, selv efter afslutningen af ​​excitationsprocessen.

SPØRGSMÅL nr. 31 “RABIS VIRUS, DETS EGENSKABER. PATOGENICITET. PRINCIPPER FOR DIAGNOSTIK".

Rabies er en akut infektionssygdom, der opstår med alvorlige skader på nervesystemet, normalt med dødelig udgang. Mennesker og alle pattedyr er modtagelige. Rabies er udbredt. Patogenet overføres af hunde, katte, vilde gnavere og rovdyr samt blodsugende vampyrflagermus. Varigheden af ​​inkubationsperioden afhænger af biddets placering, styrke, mængden og virulensen af ​​det virus, der er trængt ind i såret, og det bidte dyrs modstand. Inkubationsperioden varer fra 1-3 uger til et år eller mere. Sygdommen er akut. Kliniske tegn på et atypisk forløb er tab af appetit, vomatoni, svælglammelse, savlen. Der kan også være et voldsomt og stille sygdomsforløb. Rabiesvirus (RV) har udtalt neuroprobasi. Penetrerende fra periferien langs nervestammerne ind i centralnervesystemet centripetalt, spredes det i kroppen centrifugalt langs de perifere nerver og trænger ind i forskellige organer, herunder spytkirtlerne.

Virusset tilhører familien Rhabdoviridae, slægten Lyssavirus. Virioner har form som en stang med en hakket ende. Virusvirionet er RNA-holdigt med en spiralformet symmetri og har en lipoproteinkappe. Lave temperaturer bevarer virussen. VB-virionet indeholder glycoprotein og nukleocapsid Ag. Den første inducerer dannelsen af ​​virusneutraliserende antistoffer, og den anden - komplementfikserende og udfældende antistoffer. I kroppen er virussen hovedsageligt lokaliseret i centralnervesystemet, i spytkirtlerne og spyt. Dyrkes i mus, kaniner, marsvin og i primære cellekulturer. Reproduktion af virussen i CC viser sig ikke altid som CPE. Smittekilderne er syge dyr. De overfører virussen gennem en bid. Diagnosen af ​​rabies stilles på grundlag af epidemiologiske, kliniske data og laboratorietestresultater, som er af afgørende betydning. Til forskning sendes friske lig af små dyr til laboratoriet som helhed, og fra store og mellemstore dyr - hovedet med 2 halshvirvler. Ligene af små dyr behandles med insekticider, inden de sendes til forskning. Laboratoriediagnostik omfatter: påvisning af viral hypertension i RIF og RDP, Babes-Negri-kroppe og bioassays på hvide mus. RIF - til denne reaktion producerer bioindustrien fluorescerende anti-rabies gammaglobulin. Princip – 1) Lav prints eller udtværinger fra forskellige sektioner af venstre og højre side af GM på objektglas (mindst 2 præparater fra hver sektion); 2) De tørres og fikseres i afkølet acetone; 3) Tør, påfør fluorescerende gammaglobulin; 4) Anbring i et fugtigt kammer; 5) Jeg vasker ICN'en grundigt, skyller den med vand, tørrer den i luft, påfører ikke-fluorescerende immersionsolie og ser den under et fluorescerende mikroskop. I præparater, der indeholder antigen WB, observeres gulgrønne fluorescerende granuler af forskellige størrelser og former i neuroner, men oftere uden for celler. RDP – 1) Agar gel hældes på objektglas 2) Brønde laves (D = 4-5 mm); 3) Brøndene fyldes med en pasta-lignende masse fra GM-sektionerne. 4) Kontrolelementer med "+" og "-" AG placeres på et separat glas med den samme stencil; 5) Efter påfyldning af brøndene anbringes præparaterne i et fugtigt kammer og placeres i en termostat ved 37°C i 6 timer, derefter ved stuetemperatur i 18 timer. Reaktionen anses for positiv, når en eller 2-3 linjer med udfældning af en hvilken som helst intensitet forekommer mellem brøndene, der indeholder hjernesuspensionen og rabiesgammaglobulin. DETEKTION AF LIGESTILLINGER - tynde udstrygninger eller aftryk er lavet på glasglas fra alle dele af GM og farvet ifølge Sellers eller Muromtsev eller Mann eller Lenz. BIOPEST - hvide mus (16-20 gram) udvælges, nervevævet fra alle dele af GM males i en morter med sterilt sand, ICN tilsættes en 10% suspension, efterlades i 30-40 minutter og supernatanten bruges til infektion for at inficere ungerne. Inficer 10-12 stykker: halvt intracerebralt med 0,03 ml, halvt subkutant i næseområdet eller i overlæben med 0,1-0,2 ml. Observeret i 30 dage. I nærvær af VB i det patologiske materiale, fra 7-10 dage efter infektion, observeres symptomer hos mus: pjusket pels, en ejendommelig pukkelrygget i ryggen, nedsat koordination af bevægelser, lammelse af bagdelen, derefter forben og død. I døde mus undersøges GM'en i RIF for påvisning af Babes-Negri-kroppe, og en RDP diagnosticeres. Et bioassay for rabies anses for positivt, hvis Babes-Negri-kroppe findes i præparater fra hjernen på inficerede mus, eller hvis AG påvises med RIF- eller RDP-metoder. En negativ diagnose er fraværet af musedød inden for 30 dage.

SPØRGSMÅL nr. 32 “MODERNE KLASSIFIKATION AF IMMUNITET. VED STRUKTUR KARAKTERISTIKA FOR FORSKELLIGE KLASSER AF IMMUNOGLOBULINER OG DERES STRUKTUR."

Immunitet er en tilstand af kroppens immunitet over for virkningerne af patogene mikrober, deres toksiner og andre fremmede stoffer af biologisk natur.

Kroppens immunsystem er et system af organer og celler, der reagerer på fremmede stoffer.

Medfødt immunitet er immunitet over for infektiøse stoffer, lokaliseret i genomet og manifesteret ved antallet og rækkefølgen af ​​arrangement af gangliosider af en bestemt type på overfladen af ​​cellemembraner. Det er meget holdbart, men ikke absolut.

Erhvervet immunitet er kun kroppens modstand mod et specifikt patogen. Denne immunitet er opdelt i naturlig og kunstig. Naturlig er opdelt i 1. aktiv - det dannes efter at dyret naturligt er kommet sig over sygdommen, nogle gange efter udsættelse for gentagne små doser af patogenet (immuniserende subinfektion). 2.passiv – immunitet hos nyfødte erhvervet på grund af modtagelse af antistoffer mod fosteret fra moderen gennem moderkagen eller efter fødslen gennem tarmene med råmælk. Der er naturlig og kunstig colostral immunitet i det første tilfælde, immunitet opstår på grund af antistoffer naturligt produceret i moderens krop under påvirkning af forskellige miljømæssige antigener. I det andet tilfælde gennem målrettet immunisering af moderens krop. Naturlig erhvervet aktiv immunitet kan vare 2 år, nogle gange for livet, kan kunstigt erhvervet immunitet give en tilstand af immunitet fra flere uger til flere måneder.

Kunstigt erhvervet immunitet er også opdelt i 1.aktiv - opstår som følge af immunisering af dyr med vacciner (udvikles efter 7-14 dage og varer op til flere måneder til 1 år eller mere) og passiv - skabes, når immunserum indeholdende specifikke antistoffer mod et specifikt patogen.

Der er også typer af immuniteter: 1. Antibakteriel immunitet - beskyttelsesmekanismer er rettet mod en patogen mikrobe. 2. Antiviral - kroppen producerer antivirale antistoffer. 3. Antitoksisk immunitet - under dannelsen af ​​hvilke bakterier ikke ødelægges, men der produceres antistoffer, der effektivt neutraliserer toksiner i patientens krop.

4.Lokal immunitet. 5. Steril immunitet - hvis kroppen efter en sygdom er befriet fra patogenet, mens den opretholder en tilstand af immunitet. 6. Ikke-steril - når immuniteten kun opretholdes, så længe patogenet er i kroppen. 7. Humoral immunitet - produktionen af ​​specifikke antistoffer i den inficerede krop. 8. Cellulær – sikret ved dannelsen af ​​T-lymfocytter, der specifikt reagerer med patogenet.

Uspecifikke faktorer i kroppens forsvar.

De fungerer som den første beskyttende barriere og skal ikke genopbygges.

Huden er en kraftig barriere mod indtrængning af mikroorganismer, og mekaniske faktorer er vigtige.

Slimhinder - i luftvejene ved hjælp af cilieret epitel (bevæger en hinde af slim sammen med mikroorganismer mod naturlige åbninger), i munden til næsepassagerne (hoste og nysen). Disse membraner udskiller sekreter, der har bakteriedræbende egenskaber, især på grund af lysozym og IgA. Sekreterne fra fordøjelseskanalen har evnen til at neutralisere mange patogene mikrober. Spyt indeholder lysozym, amylase og fosfatase. Galde forårsager pasteurellas død. Tarmslimhinden indeholder kraftige antimikrobielle faktorer.

Lymfeknuder - betændelse udvikler sig i dem, i dens zone fikseres mikrober af fibrintråde. Komplementsystemet og endogene mediatorer er involveret i inflammation.

Fagocytose er processen med aktiv absorption af kroppens celler af patogene levende eller døde mikrober og andre fremmede partikler, der kommer ind i den, efterfulgt af fordøjelse ved hjælp af enzymer.

Antistoffer kan eksistere i millioner af varianter, hver med sit eget unikke antigenbindingssted. Samlet kaldet immunoglobulin (Ig), AT-proteiner danner en af ​​hovedklasserne af blodproteiner, der tegner sig for ca. 20 % af det samlede plasmaprotein efter vægt. Når Ag binder til de membranantigen-specifikke receptorer i B-cellen, sker celleproliferation og -differentiering for at danne celler, der udskiller Ab. AT'er har 2 identiske Ag-bindingssteder. De enkleste AT-molekyler er skematisk formet som bogstavet gamma med to identiske Ag-bindingssteder, et for enden af ​​hver af de to "grene". Da der er 2 sådanne steder, kaldes disse AT'er bivalente. Antigeners beskyttende virkning forklares ikke blot ved deres evne til at binde antigener. De udfører også en række andre funktioner, hvori "halen" er involveret, de kaldes effektorfunktioner og bestemmes ikke af "halens" deltagelse i dem, men af ​​strukturen af ​​Fc-fragmentet. Denne region af molekylet bestemmer, hvad der sker med AG, hvis det er bundet. Antistoffer med de samme antigenbindende regioner kan have meget forskellige "hale"-regioner og derfor forskellige funktionelle egenskaber. Ig G, D, E og serum IgA molekylet består af 4 polypeptidkæder - 2 lette og 2 tunge. Hos højere hvirveldyr er der 5 forskellige klasser af antistoffer - IgA, IgD, IgE, IgG, IgM, hver med sin egen klasse af tunge kæder. IgG-antistoffer udgør hovedklassen af ​​Ig, der findes i blodet. De produceres i store mængder under den sekundære respons og er de eneste antistoffer, der kan passere fra mor til foster. Dette er den fremherskende klasse af antistoffer produceret i de fleste sekundære immunresponser i de tidlige stadier af det primære immunrespons, hovedsageligt IgM-antistoffer kommer ind i blodet - de er også den første klasse af antistoffer produceret ved at udvikle B-celler. IgA er hovedklassen af ​​antistoffer i mælkesekret, spyt, tårer, sekret i luftvejene og tarmkanalen. AT'er beskytter hvirveldyr mod infektioner ved at inaktivere vira, mobiliserende komplement og forskellige celler, der dræber og opsluger invaderende MO'er.

SPØRGSMÅL nr. 33 "SÆRLIGHEDER VED ANTI-VIRAL IMMUNITET."

1. Antiviral immunitet er forbundet med unikke beskyttelsesmekanismer, fordi Virus er ude af stand til at udvikle sig og formere sig i en ikke-levende celle. Kroppens beskyttende tilpasning er rettet mod 2 former for eksistens af virussen. På de ekstracellulære virale uspecifikke og specifikke immunitetsfaktorer, på den intracellulære form - processen med fagocytose. Under virusinfektioner er det altid ufuldstændigt, interferon har en eksogen effekt på den ekstracellulære form, vira mister deres evne til at adsorbere, endogent interferon syntetiseres i celler som reaktion på viral Ag.

2. Midler og metoder til at påvirke vira kan kun være effektive i visse stadier af virussens eksistens, hvilket tydeligst kommer til udtryk ved behandling af patienter med immunmedicin, fordi Abs er ikke i stand til at trænge ind i celler.

3. Antiviral immunitet er længerevarende end bakteriel immunitet, og i nogle virale infektioner er den livslang (rinder, hund, bluetongue, kopper).

SPØRGSMÅL nr. 34 "LYMFOIDCELLERS ROLLE I ANTI-VIRAL IMMUNITET (KARAKTERISTIKA FOR T- OG B-LYMFOCYTER)."

T-lymfocytter. Thymus-afhængige lymfocytter dannes af stamceller fra hæmatopoietisk væv. Forstadierne til T-lymfocytter kommer ind i thymus, gennemgår differentiering i den og dukker op som celler med forskellige funktioner, der bærer karakteristiske markører. Der er flere underpopulationer af T-lymfocytter afhængigt af deres biologiske egenskaber.

T-hjælperceller (hjælpere) tilhører kategorien af ​​regulatoriske støtteceller. Stimuler proliferationen af ​​B-lymfocytter og differentiering til antistofdannende celler (plasmaceller). Det er blevet fastslået, at B-lymfocytters reaktion på påvirkningen af ​​de fleste proteinantigener er fuldstændig afhængig af hjælp fra T-hjælperceller, som udføres på to måder. Den første kræver direkte virkning af en hjælper-T-celle og en reagerende B-celle. Det menes, at T-cellen genkender determinanterne af et antigent molekyle, som allerede er fikseret på B-cellen af ​​cellereceptorer: I det andet tilfælde kan T-cellernes hjælpefunktion til at aktivere B-lymfocytter også udføres gennem dannelsen af opløselige uspecifikke hjælpefaktorer - lymfokiner (cytokiner).

T-dræbere (dræbere) udfører effektorfunktioner og udfører cellulære former for immunresponset. De genkender og lyserer celler, på hvis overflade der er antigener fremmed for en given organisme (tumor, viral og histokompatibilitet). Spredning og differentiering af T-mordere sker med deltagelse af T-hjælpere, hvis handling udføres hovedsageligt ved hjælp af opløselige faktorer, især interleikin. Det er blevet fastslået, at dræber-T-celler udfører en overfølsomhedsreaktion af forsinket type.

T-y s i l og t e l og aktiverer immunresponset i T-subsystemet af immunitet, og T-hjælpere giver mulighed for dets udvikling i B-linket af immunitet som respons på thymus-afhængige antigener.

T-suppressorer (suppressorer) giver intern selvregulering af immunsystemet på to måder: suppressorceller begrænser immunresponset på antigener; forhindre udviklingen af ​​autoimmune reaktioner. T-suppressorer hæmmer produktionen af ​​antistoffer og udviklingen af ​​forsinket overfølsomhed; dannelsen af ​​T-dræbere sikrer dannelse og opretholdelse af immunologisk tolerance.

Immunhukommelses-T-celler giver en sekundær type immunrespons i tilfælde af gentagen kontakt af kroppen med dette antigen. Antigenbindende receptorer og Fe-receptorer, IgA eller IgM findes på T-cellernes membraner. Nullymfocytter har ikke karakteristiske markører for T- og B-lymfocytter. De er i stand til at udføre antistofafhængig, komplementfri, lysis af målceller i nærvær af antistoffer, der er specifikke mod disse celler. K-lymfocytter er en type nullymfocytter. For dem er målcellerne tumorceller, T- og B-lymfocytter modificeret af vira, monocytter, fibroblaster og erytrocytter.

B-lymfocytter. Ligesom T-lymfocytter er de dannet af stamceller fra hæmatopoietisk væv. Forstadierne til B-lymfocytter i bursa af Fabricius gennemgår differentiering og migrerer derefter til lymfeknuderne og milten, hvor de udfører deres specifikke funktioner.

Tilstedeværelsen af ​​to klasser af B-celler er blevet fastslået: B-effektorer og B-regulatorer. Effektorcellerne i B-lymfocytter er antistofdannende celler (plasma), der syntetiserer antistoffer med én specificitet, dvs. mod én antigen determinant. B-regulatorer er til gengæld opdelt i suppressorer og forstærkere (forstærkere). Regulatorernes funktion er at frigive mediatorer, der kun hæmmer DNA-produktion i T- og B-lymfocytter inden for knoglemarven, samt at forstærke B-effektorer. B-lymfocytter er større end T-lymfocytter (henholdsvis 8 og 5 µm). Takket være elektronmikroskopi blev det konstateret, at overfladen af ​​B-lymfocytter er dækket med talrige villi og foldet, og overfladen af ​​T-lymfocytter er glat.

SPØRGSMÅL nr. 35 "CELLULÆRE FAKTORERS ROLLE I ANTI-VIRAL IMMUNITET."

Det adskiller sig fra humoral ved, at effektorelementerne i cellulær immunitet er T-lymfocytter og humorale - plasmaceller. Det er af særlig betydning for infektioner forårsaget af mange vira, bakterier og svampe.

Dannelse af cytotoksiske T-celler (TCC) - blandt celleoverflade-Ags, der kan forårsage dannelsen af ​​TTC-cyklussen - MHC-produkter (mononukleært system), vira, tumorspecifikke Ags. TCA-cyklusser har receptorer, hvorigennem antigen binder, og processer, der udløser cellelyse, udløses. Den lytiske aktivitet af T-celler begynder med en tæt vekselvirkning mellem dræbercellen og målcellen, der sker en ændring i målcellens membranpermeabilitet, som ender med brud på cellemembranen.

PC'er har evnen til direkte at lysere en lang række målceller, især tumorceller, de kan lysere celler uanset MHC-produkter (interferon og IL-2 øger den lytiske aktivitet af PC'er).

HRT er et T-celleafhængigt immunologisk respons, der viser sig som betændelse ved det sted, hvor Ag trænger ind i kroppen, normalt huden. Lymfocytter, der kan tolerere HRT, er T-celler og kaldes TGRT-lymfocytter (de kan blive aktiveret og reagere på protein Ags, alloantigener, tumorantigener, på Ags af vira, bakterier, svampe, protozoer.

Makrofager spiller en stor rolle i cellulær immunitet. Når patogener formerer sig inde i fagocytter, sker intracellulær ødelæggelse først, efter at makrofager modtager en stimulus fra specielt sensibiliserede T-lymfocytter. T-lymfocytter aktiverer makrofager ved at frigive lymfokiner.

SPØRGSMÅL nr. 36 "HUMORALE FAKTORERS ROLLE I ANTI-VIRAL IMMUNITET"

Ud over AT - en specifik faktor for antiviral immunitet - producerer kroppen specielle virus-tropiske stoffer - hæmmere, der kan interagere med vira og undertrykke deres aktivitet. Serumhæmmere har en bred vifte af virkninger: nogle undertrykker vira's hæmagglutinerende egenskaber, andre undertrykker deres cytopatogene virkning, og andre undertrykker deres infektiøse aktivitet. Varmelabile inhibitorer findes i normale sera fra mennesker og dyr. De har en bred vifte af virus-neutraliserende virkninger, er i stand til at blokere den hæmagglutinerende aktivitet af influenzavirus, New Castle-sygdom, mæslinger, arbovirus og andre og neutraliserer de infektiøse og immunogene egenskaber af inhibitorfølsomme vira. Varmestabile gammahæmmere er yderst aktive mod moderne varianter af influenzavirus. Varmestabile alfa-hæmmere blokerer den hæmagglutinerende, men ikke den infektiøse aktivitet af virussen.

SPØRGSMÅL nr. 37 "ANTIVIRAL VED, DERES EGENSKABER, BIOLOGISKE ROLLE, DETEKTION OG TITRERINGSMETODER."

AT er proteiner dannet i kroppen ved parenteral administration af højmolekylære stoffer med tegn på genetisk fremmedhed for den givne organisme. Antistoffer er i stand til at interagere med antigen som reaktion på hvilket det blev dannet og neutralisere dets biologiske aktivitet. Den sædvanlige kilde til AT er blodserum. Når man støder på et antigen, neutraliserer AT ikke kun dets infektiøse, men også dets hæmagglutinerende aktivitet, fordi blokerer virion-receptorer, der er ansvarlige for hæmagglutination, hvilket resulterer i dannelsen af ​​"AG + AT"-komplekset.

Antistoffer kan eksistere i millioner af varianter, hver med sit eget unikke antigenbindingssted. Samlet kaldet immunoglobulin (Ig), AT-proteiner danner en af ​​de vigtigste klasser af blodproteiner, og tegner sig efter vægt for ca. 20 % af det samlede plasmaprotein. Når antigen binder til de membranantigenspecifikke receptorer i B-cellen, sker celleproliferation og -differentiering for at danne antigenudskillende celler. AT'er har 2 identiske Ag-bindingssteder. De enkleste AT-molekyler er skematisk formet som bogstavet gamma med to identiske Ag-bindingssteder, et for enden af ​​hver af de to "grene". Da der er 2 sådanne steder, kaldes disse AT'er bivalente. Antigeners beskyttende virkning forklares ikke blot ved deres evne til at binde antigener. De udfører også en række andre funktioner, hvori "halen" er involveret, de kaldes effektorfunktioner og bestemmes ikke af "halens" deltagelse i dem, men af ​​strukturen af ​​Fc-fragmentet. Denne region af molekylet bestemmer, hvad der sker med AG, hvis det er bundet. Antistoffer med de samme antigenbindende regioner kan have meget forskellige "hale"-regioner og derfor forskellige funktionelle egenskaber. Ig G, D, E og serum IgA molekylet består af 4 polypeptidkæder - 2 lette og 2 tunge. Hos højere hvirveldyr er der 5 forskellige klasser af antistoffer - IgA, IgD, IgE, IgG, IgM, hver med sin egen klasse af tunge kæder. IgG-antistoffer udgør hovedklassen af ​​Ig, der findes i blodet. De produceres i store mængder under den sekundære respons og er de eneste antistoffer, der kan passere fra mor til foster. Dette er den fremherskende klasse af antistoffer produceret i de fleste sekundære immunresponser i de tidlige stadier af det primære immunrespons, hovedsageligt IgM-antistoffer kommer ind i blodet - de er også den første klasse af antistoffer produceret ved at udvikle B-celler. IgA er hovedklassen af ​​antistoffer i mælkesekret, spyt, tårer, sekret i luftvejene og tarmkanalen. AT'er beskytter hvirveldyr mod infektioner ved at inaktivere vira, mobiliserende komplement og forskellige celler, der dræber og opsluger

implementerede MO'er.

SPØRGSMÅL nr. 38 "INTERFERON OG DETS ROLLE I ANTI-VIRAL IMMUNITET."

Humane celler har 27 genetiske loci for interferoner (herefter benævnt I) - 14 er funktionelle. Og kodet i cellens genetiske apparat. Der er alfa, beta, gamma - I. Dens system har ikke et centralt organ, alle celler har evnen til at syntetisere det. Til dets dannelse er der brug for inducere (vira, bakterielle toksiner, ekstrakter fra bakterier og svampe, dobbeltstrenget RNA (det mest effektive) og andre). Virusinficeret I – alfa og beta; Gamma-I dannes under påvirkning af phytohæmagglutinin med SEA. Under induktion af I syntetiseres 2 eller flere af dens typer. De mest aktivt inducerende vira er myxo- og arbovirus. Vira's interferonogenicitet øges med et fald i deres virulens for kroppen. Inducere af ikke-viral karakter stimulerer en hurtigere og kortvarig ophobning af "tung" I (med høj molekylvægt) i kroppen. Og kan fås 4 timer efter intravenøs administration af Ig. Og det påvirker ikke adsorption, viropexis, deproteinisering af virioner, det undertrykker produktionen af ​​virussen. Det virker ikke på nogen specifik virus, men på mange typer generelt. Og det er i stand til at øge fagocytisk aktivitet (makrofager, når de udsættes for I, har betydeligt flere vakuoler, binder sig hurtigere til glas og fanger mere aktivt bakterier). Interferon-lægemidler hæmmer cellevækst og undertrykker væksten af ​​tumorceller. Og det hæmmer AT-dannelsen og har en direkte effekt på B-lymfocytter. Og det er med til at øge T-cellernes dræberaktivitet. Forbehandling af celler eller dyr med små doser And fører til en stigning i produktionen af ​​And som reaktion på den sidste induktion af dets syntese (priming). Ved forarbejdning af producenter, Og stigninger i mængder af And, observeres blokering (den modsatte effekt). Produktionen af ​​I er påvirket af ydre forhold (vejr, lufttemperatur). Ioniserende stråling reducerer I-produktionen Når kroppen vokser, falder mængden af ​​I-hæmmere. Og unge dyr udviser en reduceret antiviral effekt sammenlignet med Og et voksent dyr, fordi produktionen af ​​mononukleære fagocytter reduceres. Under dannelsen af ​​I i cellerne hos nyfødte, aktiveres og frigives cathepsin D fra lysosomer, hvilket fører til proteolytisk nedbrydning af I. Efterhånden som væksten sker, falder de komponenter, der bidrager til frigivelsen af ​​cathepsin D fra lysosomer. De mest følsomme over for I er vira, der har en ydre skal og indeholder lipider (myxovirus, koppegruppe, arbovirus). Til medicinske og veterinære formål anvendes hovedsagelig inducere af endogen I, men eksogen I anvendes også. Ligesom hormoner udskilles I-ins af nogle celler og transmitterer et specifikt signal gennem det intercellulære rum til andre celler. Og - "proteinfaktor", som ikke har virusspecificitet, og dens antivirale aktivitet udføres med deltagelse af cellulær metabolisme, der involverer syntese af RNA og protein.

SPØRGSMÅL nr. 39 “PRINCIPPET FOR AT ERNE BAKTERIOFAGER. BESTEMMELSE AF AKTIVITET OG PRAKTISK BRUG AF FAGER."

Fagen opnås ved at tilsætte en speciel fag til MO-kulturen, holdes i 24 timer ved en temperatur på 37 grader, filtreres gennem bakteriefiltre, og filtratet kontrolleres for renhed ved podning; harmløshed og aktivitet, fagtiter.

Bestemmelse af fagaktivitet.

Brug kvalitative og kvantitative metoder. Mængden af ​​fag bestemmes ved titrering på flydende eller fast næringsmedium. For at gøre dette fortyndes fagen ti gange. Den samme mængde daglig bakteriel bouillonkultur tilsættes til hver fortynding. Derefter placeres de i en termostat og resultatet tages i betragtning. Titeren bestemmes efter adskillelse af blandingen på 1 dag i en termostat.

Fagtiteren anses for at være dens højeste fortynding, som er i stand til at forsinke væksten af ​​MO. Udtrykt ved graden af ​​dets fortynding. Kun virulente fager forårsager fuldstændig ødelæggelse af cellen og dannelsen af ​​fagpartikler.

SPØRGSMÅL nr. 40 "PASSIV SPECIFIK FOREBYGGELSE AF VIRALE SYGDOMME. PRINCIPpet om at modtage."

Forberedelser til passiv IP– til parenteral og oral administration af AT eller Ig. Med henblik på at udføre IP anvendes immun-, hyperimmunsera, rekonvalescerende og allogene sera.

Rekonvalescent serum– serum fra donorer af genvundne eller inficerede dyr. Det bruges, når der ikke er mere effektive midler i en dosis på 1 ml/kg kropsvægt.

Hyperimmune serum– donorserum, som opnås som et resultat af en enkelt injektion af massive doser antigen i henhold til et bestemt skema. En rask donor, som ikke tidligere har lidt af denne sygdom, udvælges. Han er vaccineret, og efter 2-3 uger begynder de at administrere det i henhold til et bestemt skema i stigende doser, hvilket bringer det til toppen af ​​stigningen i AT. Toppen bestemmes ved at indstille en serologisk reaktion til AT-titeren (serum kontrolleres for sterilitet, aktivitet og uskadelighed. Dosis 2 ml/kg (terapeutisk), 1-1,5 ml/kg (forebyggelse). Indgives fraktioneret. Først en sensibiliseret dosis indgives, og efter 2-3 timer er den tilladelige dosis for at undgå anafylaktisk shock.

Allogen valle– kombineret valle, som fås fra forskellige dyr på samme gård. Den indeholder et stort sæt AT'er og forskellige AG'er.

SPØRGSMÅL nr. 41 “SPECIFIK FOREBYGGELSE AF VIRALE SYGDOMME. TYPER AF VACCINER OG ANVENDELSESMÅDER TIL DERES".

1. I praksis med epizootologi øger en stigning i størrelsen og tætheden af ​​dyrepopulationer risikoen for epizootier. Hovedprincippet i kampen mod dem er at bryde den smitsomme kæde på alle områder eller stoppe overgangen af ​​den epizootiske proces til en latent tilstand. Et af de vigtigste værktøjer til at bryde kæden er rettidig forebyggelse. For husdyrbrug, der udvikler sig på industrielt grundlag, bekæmpes alle faktorer, inkl. med patogene MO'er og vira er en af ​​de vigtigste betingelser for et sundt husdyr. IP (immunprævention), når den er korrekt inkluderet i strategien til bekæmpelse af infektionssygdomme, reducerer faren markant.

Målet med IP er ikke kun udryddelse af infektionssygdomme, men også bevarelse af produktiviteten, derfor er det nødvendigt at stræbe efter at skabe vacciner, der kan give en høj grad af beskyttelse for hele husdyrene umiddelbart efter vaccination, uanset alder på dyrene.

IP har en række fordele:

1. Virkningsprincippet for IP er baseret på en specifik ændring i dyrets krop i retning af maksimalt at reducere muligheden for, at patogenet forårsager en infektionssygdom.

2. IP virker kontinuerligt og i lang tid, nogle gange gennem hele livet.

3.IP ændrer ikke kun reaktiviteten af ​​dyrets krop, men øger også evnen til immunforsvar i hele husdyrene.

4. Effekten af ​​IP på den epizootiske proces kan beregnes nøjagtigt.

5. Med passende valg af vaccinationsmomenter giver PI'er maksimal beskyttelse i de farligste perioder af livet for infektion.

6.IP kan knyttes til den teknologiske proces i husdyrhold.

7. De lægemidler, der bruges til IP kan doseres, bruges i forskellige kombinationer og standardiseres.

8. I modsætning til AB og kemiske lægemidler forårsager PI ikke resistens i MO.

9. IP kræver lavere økonomiske omkostninger og omkostninger til råvarer.

10. IP har ingen indflydelse på kvaliteten af ​​animalske produkter.

Negativer:

1.Evaluering af den enkelte iværksætters evner. Ejeren af ​​dyret er ofte overbevist om, at alt allerede er blevet gjort for beskyttelse med vaccination, hvilket fører til en svækkelse af sanitære og hygiejniske foranstaltninger.

2. For stor stigning i de endelige produktionsomkostninger.

3. Post-vaccinationsreaktioner, som i en vis tid reducerer produktiviteten, hvis en utilstrækkeligt testet vaccine anvendes.

4. For hyppig forstyrrelse af dyr, hvilket fører til et fald i produktiviteten.

5. Fremkomsten af ​​diagnostiske problemer og stigende vanskeligheder i kampen mod sygdomme, hvis vaccine og patogene stammer under normale forhold ikke adskiller sig eller skelnes med store vanskeligheder.

Uhensigtsmæssig brug af vacciner kan forårsage skade, derfor er det for hver specifik infektionssygdom og epizooti-situation nødvendigt at omhyggeligt udvælge en vaccine og muligheden for dens anvendelse under hensyntagen til økonomiske omkostninger og effektivitet for at sikre det højeste resultat af massevaccinationer.

Immunprofylakse blev udviklet på grundlag af menneskehedens mangeårige erfaring, ifølge hvilken mennesker, der havde infektionssygdomme, ikke blev syge med dem en anden gang. Dengang der var menneskelig pest i Athen. Thukydid rapporterede, at de syge blev efterladt uden hjælp, hvis de ikke blev passet af mennesker, der var i bedring. I Kina i det 16. århundrede, når man beskæftigede sig med menneskelige kopper, var der en skik: at inhalere tørrede knuste koppeskorper gennem næsen. Jenner opfandt koppevaccinen. Pasteur foreslog en metode til vaccination mod rabies.

Forebyggelse af virussygdomme er baseret på de samme principper som forebyggelse af andre infektionssygdomme:

1. Udførelse af organisatoriske aktiviteter.

3. Kemoprofylakse.

Specifik forebyggelse af virussygdomme sikres ved brug af levende, inaktiverede, poly- og monovalente sera.

Klassificering og karakteristika af immunpræparater:

Biologiske produkter er produkter af biologisk oprindelse, der anvendes til aktiv og passiv IP.

Præparater til passiv IP – til parenteral og oral administration af AT eller Ig. Med henblik på at udføre IP anvendes immun-, hyperimmunsera, rekonvalescerende og allogene sera.

Rekonvalescent serum er serum fra donorer af genoprettede eller inficerede dyr. Det bruges, når der ikke er mere effektive midler i en dosis på 1 ml/kg kropsvægt.

Hyperimmune sera er donorsera, der opnås som et resultat af en enkelt administration af massive doser antigen i henhold til et bestemt skema. En rask donor, som ikke tidligere har lidt af denne sygdom, udvælges. Han er vaccineret, og efter 2-3 uger begynder de at administrere det i henhold til et bestemt skema i stigende doser, hvilket bringer det til toppen af ​​stigningen i AT. Toppen bestemmes ved at indstille en serologisk reaktion til AT-titeren (serum kontrolleres for sterilitet, aktivitet og uskadelighed. Dosis 2 ml/kg (terapeutisk), 1-1,5 ml/kg (forebyggelse). Indgives fraktioneret. Først en sensibiliseret dosis indgives, og efter 2-3 timer er den tilladelige dosis for at undgå anafylaktisk shock.

Gamma-globuliner opnås fra hyperimmune sera ved at frigive ballastproteiner. De administreres subkutant eller intramuskulært i en dosis på 0,5-2 ml/kg. Først administreres sensibilisering, derefter en opløsningsdosis.

Allogen valle er en kombineret valle, der fås fra forskellige dyr på samme gård. Den indeholder et stort sæt AT'er og forskellige AG'er.

Forberedelser til aktiv immunisering - vacciner. Der er levende og inaktiverede vacciner.

Vacciner klassificeres også efter: 1) Initialt virusholdigt materiale - væv, embryovirusvacciner, dyrkede virusvacciner; 2) ved dæmpningsmetoden - lapiniseret (mod mund- og klovsyge, kvægpest og andre, brug kaniner), kapriniseret (gennem kroppen af ​​en ged, mod fårekopper ved at passere gennem flere geder, mod kvæg), oviniseret (gennem får - mod kvægpest, mund- og klovsyge).

Metoder til administration af vaccine:

1.Subkutant

2. Intramuskulært

3. Aerosol

4.Rektal metode

5. Intranasal

SPØRGSMÅL nr. 42 "INAKTIVEREDE ANTI-VIRALE VACCINER, DERES OPNÅELSE, EGENSKABER, ANVENDELSE, FORSKEL FRA LEVENDE VACCINER."

Inaktiverede vacciner er komplekse præparater. Deres produktion kræver en stor mængde virus. Hovedkravet for dræbte vacciner er fuldstændig og irreversibel inaktivering af genomet med maksimal bevarelse af antigendeterminanten og immunbeskyttelse af vaccinerede dyr. For at opnå inaktiverede vacciner anvendes formalin, chloroform, thiomersal, hydroxylamin, ethanol, beta-propiolacton, ethylenimin, UV- og gammabestråling og temperatur i vid udstrækning som inaktiveringsmidler. Inaktiverede vacciner anvendes kun parenteralt. De inkluderer nødvendigvis adjuvanser - uspecifikke stimulatorer af immunogenese. En større dosis er påkrævet og som regel gentagen administration. De skaber mindre intens, kortvarig immunitet end med levende vacciner.

SPØRGSMÅL nr. 43 "FAKTORER AF ANTI-VIRAL IMMUNITET, DERES KARAKTERISTIKA."

Bestemt

1) Forbundet med kvalitativt unikke beskyttelsesmekanismer, fordi vira er ikke i stand til at udvikle sig uden for en levende celle 2) Beskyttelse er rettet mod 2 former for navneord. virus: uden for og inde i celler. Hvileformen påvirkes af specifikke og uspecifikke faktorer, humorale og cellulære beskyttende faktorer. Vegetative former – interferon, som forhindrer syntesen af ​​viralt mRNA. 3) Virusneutraliserende antistof reagerer ikke med viral information NK. 4) Metoder og midler til at neutralisere virussen er kun effektive på et bestemt tidspunkt. 5) Særlige beskyttende faktorer: dannelsen af ​​ekstracellulære oxyfile og basofile granula og tilstedeværelsen af ​​antivirale inhibitorer. 6) Denne immunitet er langvarig og nogle gange livslang.

Uspecifikke cellulære og generelle fysiologiske reaktioner.

Temperatur

Hormoner reducerer resistens, men somatotrope hormoner øger modstanden og forstærker det inflammatoriske respons.

Et drægtigt dyr bliver hurtigere sygt, og sygdommen er mere alvorlig.

Den fysiologiske tilstand af udskillelsessystemet er hastigheden af ​​virusfrigivelse fra kroppen.

Humorale faktorer - tilstedeværelsen af ​​serumhæmmere (varmestabile eller varmelabile). Hver art har sin egen fremherskende type.

SPØRGSMÅL nr. 44 "LEVENDE ANTI-VIRALE VACCINER, DERES EGENSKABER, ANVENDELSE OG FORSKELLE FRA INAKTIVEREDE VACCINER."

Levende antivirale vacciner er frysetørrede suspensioner af vaccinestammer af virus dyrket i forskellige biologiske systemer (EC, CC, laboratoriedyr) eller anvender naturligt svækkede stammer af patogenet, der dannes under en langvarig epizooti. Hovedegenskaben er det vedvarende tab af evnen til at forårsage en typisk infektionssygdom i et vaccineret dyrs krop, de har også evnen til at "slå rod" i dyrets krop, det vil sige at formere sig. Vaccinestammens ophold og reproduktion varer normalt 5-10 dage. op til flere uger og er ikke ledsaget af kliniske manifestationer, der er karakteristiske for denne sygdom, fører til dannelsen af ​​immunitet mod den smitsomme sygdom. Fordele: høj intensitet og varighed af den immunitet, de skaber, nærmer sig post-infektiøs immunitet. Mulighed for de fleste enkeltadministration. Administration er ikke kun subkutan, men også oralt og internt. Ulemper: følsomhed over for negative faktorer. Strenge opbevarings- og transportgrænser - temperatur - 4-8C. Det er uacceptabelt at bryde vakuumet i vaccineampuller. Streng overholdelse af asepsis regler. Kvalitetskontrol: 1) omfattende undersøgelse af donorer. 2) vurdering af kvaliteten af ​​næringsmediet og QC for sterilitet. 3) Tilsyn med kvaliteten af ​​produktionsvirusstammer. 4) Skabelse af optimale betingelser for bevaring af biomaterialer.

Inaktiverede vacciner skaber mindre intens og langvarig immunitet, de skal administreres gentagne gange.

SPØRGSMÅL nr. 45 "BAKTERIOFAGER, DERES BETYDNING OG GRUNDLÆGGENDE EGENSKABER."

Bakteriofager (fra lat. Bacteriophaga) - ødelægger bakterier. Det er vira, der har evnen til at trænge ind i bakterieceller, formere sig i dem og forårsage deres død.

Historien om opdagelsen af ​​bakteriofagen er forbundet med akademiker Gamaley, som observerede utilsigtet lysis af miltbrandbakterier.

Tvort - beskrev degeneration af stafylokokker (1915). D'Herelle (1917) studerede i detaljer samspillet mellem fagen og bakterierne i dysenteribacillen og gav midlet navnet "bakteriofag". Efterfølgende blev vira af svampe, mycoplasmas og andre mikroorganismer isoleret. Derfor, for at betegne disse vira, bruges udtrykket "fag" - eater.

Fagstruktur og morfologi.

Fager består af DNA/RNA-nukleinsyre omgivet af et kapsid indeholdende strengt orienterede capsomerer. Store fager har en haletudse-lignende struktur, har et hoved, en krave og en haleproces, der ender i en sekskantet basalplade, hvortil fibriller er knyttet. Hovedet har 2 skaller: en ydre membran og en indre membran, hvori AK'en er indesluttet. Den gennemsnitlige størrelse af hovedet er 60-100 nm, halen er 100-200 nm. Ifølge morfologi er fager opdelt i 6 grupper:

Fager med en lang proces, hvis skede trækker sig sammen - T-lige fager.

Fager med en lang proces, hvis skede ikke trækker sig sammen.

Fager med en procesanalog.

Fager med en kort proces.

Filamentøse fager.

Fager uden en proces.

Kemisk sammensætning af fagen.

Faghovedet indeholder en af ​​nukleinsyrerne. Skallen indeholder også lipider og kulhydrater. Fager kan modstå tryk op til 6 tusinde atmosfærer. De er modstandsdygtige over for miljøpåvirkninger og bevarer deres aktivitet i ekstra ampuller i op til 13 år.

De dør hurtigt under påvirkning af kogning, UV-lys og visse kemikalier (1% phenol, alkohol, chloroform ether ændrer ikke fagen). Nogle stoffer: thymol, chloroform, dinitrophenol har ingen effekt på fager, men dræber bakterier.

En 1% formaldehydopløsning inaktiverer fagen. Der er fager: polyfager (lysebeslægtede bakterier), monofager (lysebeslægtede bakterier), monofager (lysebakterier af samme art), fager, der forårsager lysis af en specifik serotype af 1. art. Baseret på deres typespecifikke egenskaber er fager opdelt i serotyper. Særlige fager kan let tilpasses til beslægtede bakterier ved at ride på bakterier af samme art. Fænomenet bakteriofagi kan let observeres i både flydende og faste næringsmedier. Hvis du inokulerer en kultur i en skål med et næringsmedium og anvender et par dråber af en høj koncentration af fag, så vil der ikke være nogen vækst på dette sted - sterile pletter. Ifølge mekanismen for interaktion med celler er fager opdelt i virulente og moderate.

Fænomenet bakteriofagi forårsaget af tempererede fager manifesterer sig kun i form af faser af adsorption, indtrængning i celler, reproduktion og frigivelse af fagen. Hele reproduktionsprocessen følger mønsteret af DNA-vira. Virulente fager sikrer dannelsen af ​​nye fager og lysis af bakterieceller. Det er blevet fastslået, at 7-8 fagpartikler optræder i faginficerede bakterier inden for 1 minut.

Reproduktionsdiagram.

1. Adsorption af fag på MO-skallen og dens opløsning. Fager adsorberes af deres flageller, disse flageller forbinder sig fast med cellevæggens receptorer, som et resultat af, at fagpartiklen trækker sig sammen, og processens afslutning trænger ind i bakteriecellemembranen og samtidig udskiller fagen et lysozym- som enzym, der opløser cellemembranen.

2. Injektion af nukleinsyre i den mikrobielle celle. Hele nukleinsyren og en del af proteinerne sprøjtes ind i den mikrobielle celle.

3.Latent fase – formørkelsesfase. Fasen fremmer udviklingen af ​​DNA-vira. I begyndelsen syntetiseres mRNA, det giver anledning til syntesen af ​​tidlige virale proteiner, som stopper cellulær metabolisme og giver anledning til dannelsen af ​​datternukleinsyrer.

4. Dannelse af nye fagpartikler. Forbindelsen af ​​to hovedfagpartikler ved at fylde fagproteinskallen med nukleinfagpartikler.

5. Opløsning af bakteriecellemembranen og frigivelse af nydannede partikler uden for cellen. Bruddet af cellevæggen lettes af: en stærk stigning i intracellulært tryk og på den anden side virkningen af ​​enzymatiske processer forårsaget af fager. Antallet af opfattede fager varierer og varierer fra 1 til 1000 eller mere.

Hele reproduktionsprocessen tager fra 3 til 10 timer.

Lysogeni - sammen med virulente fager er der også tempererede fager, der adskiller sig i arten af ​​deres interaktion med bakteriecellen. Deres hovedtræk er, at de er i stand til at transformere sig fra en vegetativ tilstand til en ikke-infektiøs form kaldet en profag, som ikke er i stand til at forårsage bakteriel lysis. Bakterieceller, der indeholder en profag på kromosomet, kaldes lysogene, og fænomenet er lysogeni. I dette fænomen lyseres bakterier inficeret med fagen ikke. Men kunstig lysis kan frigive en fag, der kan inficere bakterier af en given art. Overgangen af ​​en profag til en vegetativ fag forekommer ikke ofte. Når de er inficeret med tempererede fager, lyseres den ene del af cellerne for at danne en vegetativ fag, og den anden del overlever og bliver lysogen.

I lysogene bakterier integreres fag-DNA'et i cellens DNA, og den tempererede fag omdannes til en profag, der ikke har lytiske egenskaber.

Lysogene bakterier dannet som følge af lysogenisering bliver bærere af fagen og opnår immunitet i lang tid. Denne forbindelse er stærk og forstyrres, når bakterien udsættes for inducerende stoffer. Disse er UV-stråler, ioniserende stråling, kemiske mutagener. Under påvirkning af disse faktorer overføres profeten til en autonom tilstand, og der opstår disintegration.

Lysogenisering af bakterier er ledsaget af en ændring i deres egenskaber (morfologiske, kulturelle og biologiske egenskaber). Ikke-toksiske stammer bliver giftige. Ændring af bakteriers egenskaber - fagomdannelse. Lysogene bakterier er de mest bekvemme modeller til at studere interaktionen mellem vira og celler.

I øjeblikket bruges tempererede fager i vid udstrækning til at studere spørgsmål om genetik, ved hjælp af hvilke det er muligt mere præcist at differentiere variabilitetsprocesserne. Under påvirkning af stråling øges antallet af fagpartikler produceret af cellerne fra lysogene bakterier.

Praktisk brug af fager - fager bruges til at titrere bakterier, behandle og forebygge en række infektionssygdomme og bruges til at bestemme dosis af stråling på rumfartøjer.

SPØRGSMÅL nr. 46 "LABORATORIEDYR, FORMÅL OG METODER TIL DERES ANVENDELSE I VIROLOGI."

På grund af det faktum, at vira kun kan reproducere i levende celler, i de tidligste stadier af udviklingen af ​​virologi, blev dyrkning af vira i kroppen af ​​laboratoriedyr, specielt opdrættet til forskning på dem, meget brugt.

Anvendes: 1) til påvisning af virus i PM 2) primær isolering af virus fra PM 3) akkumulering af viral masse 4) opretholdelse af virussen i laboratoriet i en aktiv tilstand. 5) titrering af virus 6) som testobjekt i pH 6) opnåelse af hyperimmune sera. Anvendte dyr: hvide mus (rabies, mund- og klovsyge), hvide rotter (svineinfluenza, Aujeszkys sygdom), marsvin (rabies, mund- og klovsyge, hundesyge). Kaniner (rabies, kanin myxomer).

Krav til forsøgsdyr - dyret skal være følsomt over for denne virus; dens alder er af stor betydning for dyrkningen af ​​mange vira. De fleste vira formerer sig bedre i kroppen hos unge og endda nyfødte dyr; standardfølsomhed opnås ved at udvælge dyr af en vis alder og samme vægt. Med hensyn til følsomhed har de såkaldte lineære dyr opnået som følge af indavl over en række generationer den største standard; forsøgsdyr skal være sunde. Dyr, der kommer ind i virologilaboratoriets vivarium, skal bringes fra en gård fri for smitsomme sygdomme. De holdes i karantæne og gennemgår klinisk observation. Hvis der er en sygdom, bliver de ødelagt.

Dyr placeres således, at det på den ene side sikres, at alle kropssystemer fungerer inden for fysiologiske normer, og på den anden side er gensidig reinfektion og smittespredning ud over vivarium udelukket. Forskellige metoder til individuel mærkning bruges til dyr af forskellige arter. Til store dyr og høns bruges metalmærker med stemplet nummer. Ved brug af en lille gruppe dyr i et forsøg og i en kort periode kan håret trimmes med mærker på ryg og hofter. Mærkning af hvide mus og hvide rotter kan udføres ved amputation af individuelle fingre på for- eller bagbenene. Metoden til at påføre farvede pletter på upigmenteret uld bruges ofte. Infektion af forsøgsdyr.

1. subkutant - tilbage.

2. Intradermal – hæl

3. Intramuskulær – lår

4. Intravenøst ​​- ind i halen (foreløbig gnides med varmt vand og klemme)

5. Intranasalt - en dråbe i næsen (en svag æterbedøvelse gives først for at forhindre nysen)

6. Interocerebral - kraniet er forsigtigt boret med en nål, tryk ikke, dråben går væk af sig selv.

Alle overflader er forsmurt med iodiseret alkohol.

Forberedelseslaboratorium. dyr (ved at bruge eksemplet med en hvid mus)

Huden smøres med et desinfektionsmiddel.

Et snit laves langs linea alba.

Åbning af brystbenet - lungerne tages og placeres i rør nr. 1

Åbning af bughulen - lever, milt, nyre tages og placeres i rør nr. 2.

Kraniet er åbnet. Hjernen tages, sektioner af 4 lag laves, stykkerne lægges på filterpapir og printes på glas.

SPØRGSMÅL nr. 47 “STRUKTUR AF ET KYLLINGEMBRYO I UDVIKLING. VIGTIGSTE PROBLEMER LØST VED INFEKTIONSMETODEN MED TBE OG DENS FORDELE OVER DYRKNING AF VIRUS PÅ FORSØGSDYR.

CE anvendes i virologi hovedsageligt til de samme formål som LV: påvisning af aktivt virus ved bioassay i patologisk materiale; primær isolering af virussen; vedligeholdelse af vira i laboratoriet; virustitrering; akkumulering af virus til laboratorieforskning og opnåelse af vacciner; som testobjekt i neutraliseringsreaktionen.

Struktur: 1. Skal 2. Subshell-membran 3. Luftkammer 4. Allantoisk hulrum 5. Blommepose 6. Albuminsæk 7. CHAO - chorion-allantoisk membran 8. Fosterhule 9. Embryo 10. Snor (forbindelse til blommesækken) navlestrengen). Fra 5-12 dage kan EC bruges til infektion

1) Skallen og subshellmembranen tjener som god beskyttelse mod miljøfaktorer. 2) EC indeholder et substrat til dyrkning af virussen. 3) CE er modstandsdygtige over for påvirkninger forbundet med frigivelsen af ​​det materiale, der undersøges. 4) EC'er er let tilgængelige, miljøvenlige, kræver ikke pleje eller fodring og danner ikke AT.

6 infektionsmetoder med TBE: 1) Infektion i allantoishulen (influenza, Newcastle disease). EC'et fikseres lodret med den stumpe ende opad, og der laves et 1 mm hul på siden af ​​embryoet 5-6 mm over grænsen til luftkammeret. Nålen indsættes parallelt med længdeaksen til en dybde på 10-12 mm. 2) for CAO (kopper, hundepest): a) S/h naturligt luftkammer. FE ind i et stativ med den stumpe ende opad, et 15-20mm vindue i skallen mod midten af ​​luftkammeret. Fjern skalmembranen. 0,2 mm suspension påføres XAO. Hul klæbende gips. b) S/h kunstigt luftkammer. Stativet er vandret med knoppen opad. Lav 2 huller: over midten af ​​luftkammeret, yderligere 0,2-0,5 cm på siden, på siden af ​​embryonet. Luften suges ud af det første embryo, der dannes et kunstigt luftkammer, hvis bund er CAO, der påføres en smitsom væske, og den forsegles med et klæbende plaster. 3) I blommesækken (chlamydia, Mareks b.): a) EC placeres lodret i et stativ. Et hul over midten af ​​luftkammeret, en nål 3,5-4 cm i en vinkel på 45, modsat placeringen af ​​embryonet. b) en lignende smittevej udføres på et vandret forstærket CE-stativ; i dette tilfælde er embryonet i bunden, og blommen er over det. 4) Ind i fostervandshulen (influenza, Newcastle disease): metoden lukkes - embryonet. op. Nålen indsættes med en stump ende mod det åbne embryo. metode - et hul på 1,5-2,5 cm over lufthulen. Subshell-membranen fjernes. Pincet skubber XAO mod embryoet. Derefter trækkes fosterhinden sammen med CAO til vinduet, og suspensionen indføres der. De lader dig gå. Plaster. 5) Infektion i embryonets krop. 6) ind i blodkarrene.

SPØRGSMÅL nr. 48 “TYPER AF CELLEKULTURER OG DERES ANVENDELSE I VIRUSOLOGI. KORTE KARAKTERISTIKA FOR HVER ART."

Cellekultur (CC) er cellerne i en flercellet organisme, der lever og formerer sig under kunstige forhold uden for kroppen. Dyrkningsteknikken begyndte at udvikle sig særligt med succes efter 40'erne. Dette blev lettet af følgende begivenheder: opdagelsen af ​​antibiotika, der forhindrer bakteriel infektion af CC, opdagelsen af ​​Hang og Enders af viruss evne til at forårsage specifik celleødelæggelse. Dulbecco og Vogt (1952) foreslog en metode til trypsinisering af væv og opnåelse af enkeltlags CC'er. Følgende CC'er anvendes: 1) PTCC - celler opnået direkte fra organer eller væv i kroppen, vokser in vitro i ét lag. CC kan fås fra næsten ethvert menneske- eller dyrorgan eller væv. Det er bedre at gøre dette fra embryonale organer, fordi embryonale celler har et højere vækstpotentiale. Oftest fås de fra nyrerne, lungerne, huden, thymus og testiklerne. For at opnå primære celler fra et sundt dyr, senest 2-3 timer efter slagtning, tages de tilsvarende organer eller væv, knuses og behandles med trypsin, pancreatin og collagenase. Enzymer ødelægger intercellulære stoffer, og de resulterende individuelle celler suspenderes i et næringsmedium og dyrkes på indersiden af ​​reagensglas eller madrasser i en termostat ved 37C. Cellerne hæfter sig til glasset og begynder at dele sig. Der dannes et lag en celle tykt på glasset, normalt efter 3-5 dage. Næringsmediet ændres, da det bliver forurenet med celleaffaldsprodukter. Monolaget forbliver levedygtigt i 7-21 dage. Ved dyrkning af vira i CC er det muligt at få præparater med en høj titer af virus, hvilket er vigtigt ved opnåelse af antigener og vacciner. 2) Subkulturer - de bliver ofte brugt og opnået fra primære celler dyrket i madrasser ved at fjerne dem fra glasset med en opløsning af versene eller trypsin, resuspendere dem i et nyt næringsmedium og genså dem på nye madrasser eller reagensglas. Efter 2-3 dage dannes et monolag. De er ikke ringere i følsomhed over for PTCA og er mere økonomiske. 3) Transplanterbare CC'er er celler, der er i stand til at formere sig uden for kroppen i uendeligt lang tid. De vedligeholdes i laboratoriet ved subkultur fra en beholder til en anden (med forbehold for udskiftning af næringsmediet). De opnås fra primære CC'er med øget vækstaktivitet gennem langsigtede subkulturer i en bestemt dyrkningstilstand. Cellerne i transplanterede kulturer har samme form, et heteroploid sæt kromosomer, er stabile under in vitro vækstbetingelser, og nogle af dem har onkogen aktivitet. "+" før de primære - det er lettere at forberede, du kan kontrollere på forhånd for tilstedeværelsen af ​​latente vira og mikroflora; klonale linjer giver flere standardbetingelser for virusudbredelse end primære linjer. De fleste transplanterede celler har et bredere spektrum af følsomhed over for vira end de tilsvarende primære kulturer. Men de er tilbøjelige til ondartet degeneration. 4) Diploide CC'er er en morfologisk homogen population af celler, stabiliseret under in vitro-dyrkning, med en begrænset levetid, kendetegnet ved 3 vækstfaser, bevarer den karyotype, der er karakteristisk for det oprindelige væv under passage, fri for kontaminanter og uden tumorigen aktivitet ved transplantation til hamstere. De fås også fra primære celler. Derimod har de begrænsede passageevner. Det maksimale antal passager er 50 -\+ 10, så falder antallet af delende celler kraftigt, og de dør. Fordele i forhold til transplanterbare CC'er - de kan være i en levedygtig tilstand i 10-12 dage uden at ændre næringsmediet; når mediet skiftes en gang om ugen, forbliver de levedygtige i 4 uger; De er særligt velegnede til langtidsdyrkning af vira, de bevarer det oprindelige vævs følsomhed over for vira. 5) Suspension CC'er - kontinuerlige cellekulturer i suspension.

SPØRGSMÅL nr. 49 "PRIMÆRE TRYPSINISEREDE CELLEKULTURER. DERES FORDELE OG ULEMPER. ANVENDELSE I VIROLOGISK FORSKNING".

PTCA er celler opnået direkte fra organer eller væv i kroppen, der vokser in vitro i ét lag. CC kan fås fra næsten ethvert menneske- eller dyrorgan eller væv. Det er bedre at gøre dette fra embryonale organer, fordi embryonale celler har et højere vækstpotentiale. Oftest fås de fra nyrerne, lungerne, huden, thymus og testiklerne. For at opnå primære celler fra et sundt dyr, senest 2-3 timer efter slagtning, tages de tilsvarende organer eller væv, knuses og behandles med trypsin, pancreatin og collagenase. Enzymer ødelægger intercellulære stoffer, og de resulterende individuelle celler suspenderes i et næringsmedium og dyrkes på indersiden af ​​reagensglas eller madrasser i en termostat ved 37C. Cellerne hæfter sig til glasset og begynder at dele sig. Der dannes et lag en celle tykt på glasset, normalt efter 3-5 dage. Næringsmediet ændres, da det bliver forurenet med celleaffaldsprodukter. Monolaget forbliver levedygtigt i 7-21 dage. Ved dyrkning af vira i CC er det muligt at få præparater med en høj titer af virus, hvilket er vigtigt ved opnåelse af antigener og vacciner. Ved hjælp af QC-metoden blev nogle teoretiske spørgsmål løst - om virussens interaktion med cellen, stedet for virusreproduktion, mekanismen for antiviral immunisering. I øjeblikket bruges QC til isolering af vira fra patogent materiale, deres indikation, identifikation, til opsætning af en neutraliseringsreaktion, bestemmelse af virustiter, til fremstilling af diagnostiske Ags og vacciner og som testobjekter i en neutraliseringsreaktion.

SPØRGSMÅL nr. 50 “NÆRINGSMIDLER OG LØSNINGER ANVENDES I VIRUSOLOGI. KRAV TIL redskaber til CC-DYRKNING, DETS BEHANDLING.”

De mest udbredte løsninger, når man arbejder med CC, er Hanks og Earle opløsninger, som fremstilles ved hjælp af dobbeltdestilleret vand med tilsætning af forskellige salte og glukose. Disse afbalancerede saltopløsninger bruges til at forberede alle dyrkningsmedier, fordi... de sikrer bevarelse af pH, osmotisk tryk i celler og passende koncentration af nødvendige uorganiske stoffer. De bruges også til at vaske vækstmedier væk, virusfortyndinger mv. Ved dyrkning af celler anvendes dispergeringsopløsninger af trypsin og versene. Trypsinopløsning bruges til at adskille vævsstykker i individuelle celler og til at fjerne laget af celler fra glasset. Versene-opløsning - bruges til at fjerne celler fra glas. Næringsmedier (herefter benævnt NS) - skeln mellem: 1) naturlige medier, som består af en blanding af saltvand, blodserum, vævsekstrakt, ko fostervand osv. Antallet af komponenter varierer. De bliver sjældent brugt. 2) kunstig PS - enzymatiske hydrolysater af forskellige proteinprodukter: laktalbuminhydrolysat, muskelenzymatisk hydrolysat osv. Af de syntetiske medier er de mest anvendte medium 199 og Eagles medium. Fenolrød indikator tilsættes til alle dyrkningsmedier og nogle saltvandsopløsninger for at bestemme koncentrationen af ​​hydrogenioner. For at ødelægge mikrofloraen før brug tilsættes AB til mediet: penicillin og streptomycin, 100 enheder pr. ml. Alle PS er opdelt i 2 grupper: vækst – sikre cellernes liv og reproduktion; understøttende - sikring af cellernes vitale aktivitet, men ikke deres reproduktion (de indeholder ikke blodserum). Glasvarer - Kvaliteten af ​​glasvarer er vigtig for en vellykket dyrkning af celler uden for kroppen. Det skal være sterilt, fedtfrit og ikke have nogen toksisk virkning. Til celledyrkning anvendes reagensglas, madrasser på 50, 100, 250, 500, 1000, 1500 ml, rullekolber på 500, 1000, 2000 ml, forskellige pipetter, flasker til PS og opløsninger samt kolber med forskellig kapacitet. Behandling af glasvarer består af flere trin: 1) det inficerede glasvarer nedsænkes i en 2-3% NaOH-opløsning i 5-6 timer; 2) skyl i 3-4 skift af postevand; 3) lægges i blød i en 0,3-0,5% pulveropløsning; 4) vask grundigt med en børste i en varm pulveropløsning; 5) skyl i flere skift af postevand; 6) skyl i destilleret vand indeholdende 0,5% HCl; 7) skyl 4-5 gange med postevand og 3 skift destilleret vand; 8) tørret i et tørreskab; 9) monteret og steriliseret i en ovn eller autoklaveret.

SPØRGSMÅL nr. 51 “PRINCIPPET FOR INFEKTION AF CELLEKULTURER VED VIRUS-INDHOLDENDE MATERIALE. INDIKATION AF VIRUS I CELLEKULTUR."

Til infektion vælges reagensglas (madrasser) med et kontinuerligt celle-monolag, som ses under et mikroskop med lav forstørrelse. Vækstnæringsmediet drænes, cellerne vaskes 1-2 gange med Hanks opløsning for at fjerne serumantistoffer og inhibitorer. 0,1-0,2 ml virusholdigt materiale tilsættes til hvert rør og fordeles jævnt over cellelaget ved omrystning. Lad stå i 1-2 timer ved 22-37C for virusadsorption på celleoverfladen. Det virusholdige materiale fjernes fra beholderne, og det understøttende medium hældes. Til indikation er der følgende hovedmetoder til indikation af virus i CC: ved cytopatisk effekt eller cytopatisk effekt; ved en positiv hæmadsorptionsreaktion; ved plakdannelse; til påvisning af intracellulære indeslutninger; at påvise vira i immunfluorescensreaktioner; at detektere virusinterferens; at undertrykke cellemetabolisme (farvetest); elektronmikroskopi. Påvisning af specifik celledegeneration (ved CPD) - et simpelt tegn er degenerative ændringer i celler (manifestation af CPD). Synlige ændringer i cellen kaldes cytopatiske ændringer. Disse ændringer i inficerede celler afhænger af dosis og biologiske egenskaber af den virus, der undersøges, manifestationen af ​​CPE og dens egenskaber tillader nogle gange identifikation af de isolerede vira. Når KK er inficeret med mellemstore doser af virussen, er arten af ​​disse ændringer specifik og kan klassificeres i grupper: fokal finkornet degeneration, finkornet degeneration gennem hele monolaget, fokal klyngeformet ophobning af runde celler, ensartet granularitet, association af celler til gigantiske flerkernede symplaster og syncytia. Graden af ​​degeneration vurderes ved hjælp af et 4-punktssystem.

Nogle gange observeres fravær af CPD, men dette anses ikke for at være fravær af virus, og derfor udføres 2-3 blindpassager og ved 2-3 passage kan vira udvise de ønskede egenskaber.

SPØRGSMÅL nr. 52 "METODER TIL DETEKTION AF VIRIONER OG VIRALE INKLUSIONSKROPP, DERES PRAKTISKE BETYDNING."

Det er normalt muligt at undersøge virusvirioner og etablere deres struktur ved hjælp af elektronmikroskopi, som gør det muligt at skelne objekter op til 0,2-0,4 nm i størrelse. Påvisning af virioner i materiale fra syge dyr ved hjælp af elektronmikroskopi kan tjene som bevis på tilstedeværelsen af ​​vira i dette materiale og bruges i nogle tilfælde til at diagnosticere virussygdomme. Men denne metode er teknisk kompleks og dyr og tillader ikke nøjagtig identifikation af den opdagede virus. Med et lysmikroskop er det muligt kun at se virioner af koppevirus på grænsen af ​​synlighed. Evnen til at blive farvet med visse farvestoffer, størrelsen, formen, strukturen, placeringen i cellen af ​​inklusionslegemer dannet af forskellige vira er ikke den samme, men er specifikke for hver virus. Derfor giver påvisningen af ​​intracellulære inklusionslegemer med visse karakteristika i materiale fra syge dyr os mulighed for at bedømme, hvilken slags virus de blev dannet, og derfor tilstedeværelsen af ​​denne virus i materialet, der undersøges. For at påvise inklusionslegemer fremstilles udstrygninger eller print (posthumt eller intravitalt), som udsættes for specielle farvningsmetoder efterfulgt af mikroskopi. For inklusionslegemer dannet af forskellige vira er farvningsmetoder forskellige. Der er udviklet mange farveopskrifter. Blandt dem er der også universelle, som inkluderer hæmatoxylin-eosin-farvning.

Virologi.

Andre mycoplasmas patogene for mennesker.

Mycoplasma lungebetændelse.

Mycoplasma pneumoniae.

M. pneumoniae adskiller sig fra andre arter ved serologiske metoder, såvel som ved egenskaber som b-hæmolyse af røde blodlegemer fra får, aerob reduktion af tetrazolium og evnen til at vokse i nærvær af methylenblåt.

M. pneumoniae er den mest almindelige årsag til ikke-bakteriel lungebetændelse. Infektion med denne mycoplasma kan også tage form af bronkitis eller mild luftvejsfeber.

Asymptomatiske infektioner er almindelige. Familiære udbrud er almindelige, og store udbrud er forekommet i militære træningscentre. Inkubationsperioden er cirka to uger.

M. pneumoniae kan isoleres ved dyrkning af sputum og svælgpodninger, men diagnosen stilles lettere ved serologi, normalt komplementfikseringstesten. Diagnosen mycoplasma lungebetændelse er hjulpet af den empiriske opdagelse, at mange patienter udvikler kolde agglutininer til humane røde blodlegemer i gruppe 0.

Mycoplasmas er normalt indbyggere i reproduktionskanalen hos mænd og kvinder. Den mest almindeligt forekommende art er M. hominis, som er ansvarlig for nogle tilfælde af vaginalt udflåd, urethritis, salpingitis og bækkensepsis. Det er den mest almindelige årsag til postpartum sepsis.

Mikroorganismen kan komme ind i moderens blod under fødslen og være lokaliseret i leddene. En gruppe af mycoplasmas (ureaplasmas), der danner små kolonier, betragtes som en mulig årsag til nongonokok urethritis hos begge køn. Andre arter er normale kommensaler i mundhulen og nasopharynx.

Forebyggelse. Det kommer ned til at opretholde et højt niveau af generel modstand i den menneskelige krop. En vaccine fremstillet af dræbte mycoplasmas til specifik forebyggelse af atypisk lungebetændelse er opnået i USA

1. Pyatkin K.D., Krivoshein Yu.S. Mikrobiologi. - K: Højere skole, 1992. - 432 s.

Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Mikrobiologi. - M: Medicin, 1983. - 312 s.

2. Borisov L.B., Kozmin-Sokolov B.N., Freidlin I.S. Vejledning til laboratoriehold i medicinsk mikrobiologi, virologi og immunologi / red. Borisova L.B. – G.: Medicin, 1993. – 232 s.

3. Medicinsk mikrobiologi, virologi og immunologi: Lærebog, red. A.A. Vorobyova. – M.: Lægeinformationsstyrelsen, 2004. - 691 s.

4. Medicinsk mikrobiologi, virologi, immunologi / udg. L.B.Borisov, A.M.Smirnova. - M: Medicin, 1994. - 528 s.

Odessa-2009

Foredrag nr. 21. Emne og opgaver inden for medicinsk virologi. Generelle karakteristika for vira

Vi begynder at studere en ny videnskab - virologi, videnskaben om vira. Virologi er en uafhængig videnskab inden for moderne naturvidenskab, der indtager en fortrop inden for biologi og medicin, og virologiens rolle og betydning er støt stigende. Dette skyldes en række omstændigheder:

1. Virale sygdomme indtager en førende plads i menneskelig infektiøs patologi. Brugen af ​​antibiotika gør det muligt effektivt at løse behandlingen af ​​de fleste bakterielle sygdomme, mens der stadig ikke findes tilstrækkeligt effektive og harmløse lægemidler til behandling af virussygdomme. Efterhånden som forekomsten af ​​bakterielle infektioner falder, er andelen af ​​virussygdomme støt stigende. Problemet med massevirusinfektioner - luftveje og tarm - er akut. For eksempel tager den velkendte influenza ofte form af massive epidemier og endda pandemier, hvor en betydelig procentdel af verdens befolkning bliver syg.

2. Den viral-genetiske teori om oprindelsen af ​​tumorer og leukæmi har vundet anerkendelse og bliver i stigende grad bekræftet. Derfor forventer vi, at udviklingen af ​​virologi vil føre til en løsning på det vigtigste problem med menneskelig patologi - problemet med carcinogenese.

3. I øjeblikket dukker nye virussygdomme op, eller tidligere kendte virussygdomme bliver akutte, hvilket konstant giver nye udfordringer for virologien. Et eksempel er HIV-infektion.

4. Virus er blevet en klassisk model for molekylærbiologi og molekylærgenetisk forskning. Mange spørgsmål om grundlæggende forskning i biologi løses ved hjælp af vira er meget udbredt i bioteknologi.

5. Virologi er en grundlæggende videnskab i moderne naturvidenskab, ikke kun fordi den beriger andre videnskaber med nye metoder og nye ideer, men også fordi emnet for studiet af virologi er en kvalitativt speciel form for organisering af levende stof - vira, som er radikalt forskellige fra alle andre levende væsener på Jorden.

2. HISTORISK SKITSE OVER VIRUSOLOGIENS UDVIKLING

Æren for opdagelsen af ​​vira og beskrivelsen af ​​deres vigtigste karakteristika tilhører den russiske videnskabsmand Dmitry Iosifovich Ivanovsky (1864-1920). Det er interessant, at Ivanovsky begyndte sin forskning som 3. års studerende ved St. Petersburg Universitet, da han lavede kursusarbejde i Ukraine og Bessarabien. Han studerede tobaksmosaiksygdom og fandt ud af, at det var en smitsom plantesygdom, men dens forårsagende agens tilhørte ikke nogen af ​​de dengang kendte grupper af mikroorganismer. Senere, allerede en certificeret specialist, fortsætter Ivanovsky sin forskning i Nikitsky Botanisk Have (Krim) og udfører et klassisk eksperiment: han filtrerer saften af ​​bladene fra den berørte plante gennem et bakteriefilter og beviser, at saftens smitsomme aktivitet gør. ikke forsvinde.

Efterfølgende blev hovedgrupperne af vira opdaget. I 1898 beviste F. Leffler og P. Frosch filtrerbarheden af ​​det forårsagende middel til mund- og klovesyge (mund- og klovesygevirusset rammer dyr og mennesker), i 1911 beviste P. Raus filtrerbarheden af forårsagende middel til tumorsygdommen - kyllingesarkom, i 1915, F. Twort og i 1917 opdagede hr. D'Herelle fager - bakterielle vira.

Sådan blev hovedgrupperne af vira opdaget. I øjeblikket kendes mere end 500 typer vira.

Yderligere fremskridt i udviklingen af ​​virologi er forbundet med udviklingen af ​​metoder til dyrkning af vira. I starten blev vira kun undersøgt, når de inficerede følsomme organismer. Et væsentligt skridt fremad var udviklingen af ​​en metode til dyrkning af vira i kyllingeembryoner af Woodruff og Goodpasture i 1931. En revolution inden for virologi var udviklingen af ​​en metode til dyrkning af vira i enkeltlagscellekulturer af J. Enders, T. Weller , F. Robbins, og i 1948. Ikke uden grund i 1952 Denne opdagelse blev tildelt Nobelprisen.

Allerede i 30'erne blev de første virologiske laboratorier oprettet. I øjeblikket har Ukraine Odessa Research Institute of Epidemiology and Virology opkaldt efter. I.I. Mechnikov, der er virologiske laboratorier i en række forskningsinstitutter for epidemiologi, mikrobiologi og infektionssygdomme. Der er virologiske laboratorier for praktisk sundhedspleje, som primært beskæftiger sig med diagnosticering af virussygdomme.

3. Komponer ultrastrukturen af ​​vira

Først og fremmest skal det siges, at udtrykket "virus" blev introduceret i den videnskabelige terminologi af L. Pasteur. L. Pasteur modtog sin vaccine for at forhindre rabies i 1885, selvom han ikke opdagede årsagen til denne sygdom - der var stadig 7 år tilbage før opdagelsen af ​​vira. L. Pasteur kaldte det hypotetiske patogen for rabiesvirus, som oversat betyder "rabiesgift".

Udtrykket "virus" bruges til at henvise til ethvert stadium af virusudvikling - både ekstracellulært lokaliserede infektiøse partikler og intracellulært reproducerende virus. For at betegne en viral partikel, udtrykket " virion».

Ved kemisk sammensætning Vira ligner grundlæggende andre mikroorganismer, de har nukleinsyrer, proteiner, og nogle har også lipider og kulhydrater.

Virus indeholder kun én type nukleinsyre - enten DNA eller RNA. Følgelig isoleres DNA-genomiske og RNA-genomiske vira. Nukleinsyre i virion kan indeholde fra 1 til 40%. Typisk indeholder virionet kun ét nukleinsyremolekyle, ofte lukket i en ring. Virale nukleinsyrer er ikke meget forskellige fra eukaryote nukleinsyrer, de består af de samme nukleotider og har samme struktur. Sandt nok kan vira ikke kun indeholde dobbeltstrenget, men også enkeltstrenget DNA. Nogle RNA-vira kan indeholde dobbeltstrenget RNA, selvom de fleste indeholder enkeltstrenget RNA. Det skal bemærkes, at vira kan indeholde plus-streng RNA, som kan fungere som messenger RNA, men de kan også indeholde minus-streng RNA. Sådant RNA kan kun udføre sin genetiske funktion, efter at den komplementære plusstreng er syntetiseret i cellen. Et andet træk ved virale nukleinsyrer er, at i nogle vira er nukleinsyren infektiøs. Det betyder, at hvis RNA uden proteinblanding isoleres fra en virus, for eksempel poliovirus, og indføres i en celle, vil der udvikles en virusinfektion med dannelse af nye viruspartikler.

Proteiner er indeholdt i vira i en mængde på 50-90%, de har antigene egenskaber. Proteiner er en del af virionets kappestrukturer. Derudover er der interne proteiner forbundet med nukleinsyren. Nogle virale proteiner er enzymer. Men det er ikke enzymer, der sikrer omsætningen af ​​vira. Virale enzymer er involveret i virusets indtrængning i cellen, virusets udgang fra cellen, nogle af dem er nødvendige for replikation af virale nukleinsyrer.

Lipoider kan være fra 0 til 50%, kulhydrater - 0 - 22%. Lipider og kulhydrater er en del af den sekundære skal af komplekse vira og er ikke virusspecifikke. De er lånt af virussen fra cellen og er derfor cellulære.

Lad os bemærke en grundlæggende forskel i den kemiske sammensætning af vira - tilstedeværelsen af ​​kun én type nukleinsyre, DNA eller RNA.

Ultrastruktur af vira- dette er virions struktur. Størrelsen af ​​virioner varierer og måles i nanometer. 1 nm er en tusindedel af en mikrometer. De mindste typiske vira (poliomyelitisvirus) har en diameter på omkring 20 nm, den største (variolavirus) - 200-250 nm. Gennemsnitlige vira har størrelser på 60 - 120 nm. Små vira kan kun ses i et elektronmikroskop store er på grænsen af ​​opløsningen af ​​et lysmikroskop og er synlige i et mørkt synsfelt eller med speciel farvning, der øger partiklernes størrelse. Individuelle virale partikler, der er synlige under et lysmikroskop, kaldes normalt elementære Paschen-Morozov-legemer. E. Paschen opdagede variola-virussen ved hjælp af en speciel farve, og Morozov foreslog en forsølvningsmetode, der gjorde det muligt at se selv mellemstore vira i et lysmikroskop.

Formen af ​​virioner kan være forskellig - sfærisk, kubisk, stavformet, sædlignende.

Hver virion består af en nukleinsyre, som i vira udgør et "nukleon". Sammenlign - kerne i eukaryoter, nukleoid - i prokaryoter. Nukleonet er nødvendigvis forbundet med den primære proteinskal - kapsiden, der består af proteinkapsomerer. Som et resultat dannes et nukleoprotein - et nukleocapsid. Simple vira består kun af et nukleokapsid (poliomyelitisvirus, tobaksmosaiksygdomsvirus). Komplekse vira har også en sekundær skal - en supercapsid, som udover proteiner også indeholder lipider og kulhydrater.

Kombinationen af ​​strukturelle elementer i virion kan være anderledes. Der er tre typer symmetri af vira - spiralformet, kubisk og blandet. Når vi taler om symmetri, understreges symmetrien af ​​de virale partikler i forhold til aksen.

På spiral type af symmetri individuelle capsomerer, synlige i et elektronmikroskop, er arrangeret langs nukleinsyrehelixen, så tråden passerer mellem to capsomerer og dækker den på alle sider. Resultatet er en stavformet struktur, såsom den stavformede tobaksmosaikvirus. Men vira med en spiralformet symmetri behøver ikke nødvendigvis at være stavformede. For eksempel, selvom influenzaviruset har en spiralformet symmetri, er dets nukleokapsid foldet på en bestemt måde og er dækket af et superkapsid. Som et resultat er influenzavirioner normalt kugleformede.

På kubisk type symmetri folder nukleinsyren sig på en bestemt måde i midten af ​​virion, og kapsomerer dækker ydersiden af ​​nukleinsyren og danner en tredimensionel geometrisk figur. Oftest dannes figuren af ​​et icosahedron, et polyhedron med et vist forhold mellem antallet af hjørner og flader. For eksempel har poliovirus denne form. I profil har virion form af en sekskant. En mere kompleks form for adenovirus, også af kubisk type symmetri. Lange tråde og fibre strækker sig fra polyederens hjørner og ender i en fortykkelse.

Med en blandet type symmetri, for eksempel i bakteriofager, har hovedet med en kubisk type symmetri form som et icosahedron, og processen indeholder en spiral snoet kontraktil fibril.

Nogle vira har en mere kompleks struktur. For eksempel indeholder variola-virussen et stort nukleocapsid med en spiralformet symmetri, og supercapsiden er kompleks og indeholder et system af rørformede strukturer.

Derfor er vira ret komplekse. Men vi skal bemærke, at vira ikke har en cellulær organisation. Vira er ikke-cellulære væsner, og dette er en af ​​deres grundlæggende forskelle fra andre organismer.

Et par ord om stabiliteten af ​​vira. De fleste vira inaktiveres ved 56 - 60 °C i 5 - 30 minutter. Vira tåler nedkøling godt ved stuetemperatur, de fleste vira inaktiveres hurtigt. Virussen er mere modstandsdygtig over for ultraviolet stråling og ioniserende stråling end bakterier. Virus er resistente over for glycerol. Antibiotika har ingen effekt på virus overhovedet. Af desinfektionsmidlerne er den mest effektive 5% Lysol; de fleste vira dør inden for 1 - 5 minutter.

4. VIRUS REPRODUKTION

Normalt bruger vi ikke udtrykket "reproduktion af vira", men siger snarere "reproduktion", reproduktion af vira, da metoden til reproduktion af vira er fundamentalt forskellig fra metoden til reproduktion af alle organismer, vi kender.

For bedre at studere mekanismen for virusreproduktion tilbyder vi dig en tabel, der ikke er inkluderet i lærebøger, men hjælper med at forstå denne komplekse proces.

stadier af virusreproduktion

Den første, forberedende periode, begynder med stadiet af virusadsorption på cellen. Adsorptionsprocessen udføres på grund af den komplementære interaktion af virusbindingsproteiner med cellulære receptorer. Cellulære receptorer kan være af glycoprotein, glycolipid, protein og lipid natur. Hver virus kræver specifikke cellulære receptorer.

Virale bindingsproteiner placeret på overfladen af ​​capsidet eller supercapsidet fungerer som virale receptorer.

Interaktionen mellem virus og celle begynder med uspecifik adsorption af virion på cellemembranen, og derefter sker specifik interaktion mellem virale og cellulære receptorer i henhold til komplementaritetsprincippet. Derfor er processen med virusadsorption på en celle en specifik proces. Hvis kroppen ikke har celler med receptorer for en bestemt virus, så er infektion med denne type virus i en sådan organisme umulig - der er artsresistens. På den anden side, hvis vi kunne blokere denne første fase af interaktion mellem virus og celle, så kunne vi forhindre udviklingen af ​​en virusinfektion på et meget tidligt stadium.

Fase 2 - indtrængning af virussen i cellen - kan forekomme på to hovedmåder. Den første, som blev beskrevet tidligere, hedder viropexis. Denne vej minder meget om fagocytose og er en variant af receptorendocytose. Viruspartiklen adsorberes på cellemembranen som et resultat af interaktionen af ​​receptorer, membranens tilstand ændres, og den invaginerer, som om den flyder rundt om viruspartiklen. Der dannes en vakuole, afgrænset af en cellemembran, i hvis centrum den virale partikel er placeret.

Når en virus trænger igennem membranfusion gensidig penetration af elementerne i virusskallen og cellemembranen forekommer. Som et resultat ender virionets "kerne" i cytoplasmaet i den inficerede celle. Denne proces sker ret hurtigt, så det var svært at registrere det på elektrondiffraktionsmønstre.

Deproteinisering - frigivelse af det virale genom fra superkapsiden og kapsiden. Denne proces kaldes undertiden "afklædning" af virioner.

Frigivelse fra kapperne begynder ofte umiddelbart efter, at virion binder sig til cellulære receptorer og fortsætter inde i cellens cytoplasma. Lysosomale enzymer deltager i dette. Under alle omstændigheder, for at yderligere reproduktion kan finde sted, er deproteinisering af den virale nukleinsyre nødvendig, da uden dette er det virale genom ikke i stand til at inducere reproduktionen af ​​nye virioner i den inficerede celle.

Gennemsnitlig reproduktionsperiode ringede latent, skjult, da virussen efter deproteinisering ser ud til at "forsvinde" fra cellen, kan den ikke detekteres på elektrondiffraktionsmønstre. I denne periode påvises tilstedeværelsen af ​​virussen kun ved ændringer i værtscellens metabolisme. Cellen genopbygges under påvirkning af det virale genom på biosyntesen af ​​virionkomponenter - dets nukleinsyre og proteiner.

Første fase af mellemperioden, t transskription virale nukleinsyrer, omskrivning af genetisk information gennem syntese af messenger RNA - en nødvendig proces for at begynde syntesen af ​​virale komponenter. Det forekommer forskelligt afhængigt af typen af ​​nukleinsyre.

Viralt dobbeltstrenget DNA transskriberes på samme måde som cellulært DNA af DNA-afhængig RNA-polymerase. Hvis denne proces udføres i cellekernen (i adenovira), anvendes cellulær polymerase. Hvis i cytoplasmaet (koppevirus), så ved hjælp af RNA-polymerase, som trænger ind i cellen som en del af virussen.

Hvis RNA'et er minus-strenget (ved influenza, mæslinger, rabiesvirus), skal informations-RNA først syntetiseres på den virale RNA-matrix ved hjælp af et særligt enzym - RNA-afhængig RNA-polymerase, som er en del af virionerne og trænger ind i cellen langs med det virale RNA. Det samme enzym findes også i vira, der indeholder dobbeltstrenget RNA (reovirus).

Regulering af transkriptionsprocessen udføres ved sekventiel omskrivning af information fra "tidlige" og "sene" gener. "Tidlige" gener indeholder information om syntesen af ​​enzymer, der er nødvendige for gentranskription og deres efterfølgende replikation. I de "sene" er der information til syntesen af ​​viruskappeproteiner.

Udsende- syntese af virale proteiner. Denne proces er fuldstændig analog med det kendte skema for proteinbiosyntese. Virusspecifikt messenger-RNA, cellulær overførsels-RNA, ribosomer, mitokondrier og aminosyrer er involveret. Først syntetiseres enzymproteiner, der er nødvendige for transkriptionsprocessen, såvel som til delvis eller fuldstændig undertrykkelse af metabolismen af ​​den inficerede celle. Nogle virusspecifikke proteiner er strukturelle og er inkluderet i virionet (for eksempel RNA-polymerase), andre er ikke-strukturelle, som kun findes i den inficerede celle og er nødvendige for en af ​​processerne for virionreproduktion.

Senere begynder syntesen af ​​virale strukturelle proteiner - komponenter af capside og supercapsid.

Efter syntesen af ​​virale proteiner på ribosomer kan deres post-translationelle modifikation forekomme, som et resultat af, at de virale proteiner "modnes" og bliver funktionelt aktive. Cellulære enzymer kan udføre phosphorylering, sulfonering, methylering, acylering og andre biokemiske transformationer af virale proteiner. Processen med proteolytisk skæring af virale proteiner fra store molekylære precursorproteiner er essentiel.

Replikation viralt genom - syntese af virale nukleinsyremolekyler, reproduktion af viral genetisk information.

Replikation af viralt dobbeltstrenget DNA sker ved hjælp af cellulær DNA-polymerase på en semi-konservativ måde på samme måde som cellulær DNA-replikation. Enkeltstrenget DNA replikerer gennem en mellemliggende dobbeltstrenget replikativ form.

Der er ingen enzymer i cellen, der kan udføre RNA-replikation. Derfor udføres en sådan proces altid af virusspecifikke enzymer, hvis information om syntesen er kodet i det virale genom. Under replikationen af ​​enkeltstrengede RNA-genomer syntetiseres først en RNA-streng komplementær til den virale, og derefter bliver denne nydannede RNA-streng skabelonen for syntesen af ​​genomkopier. I modsætning til transkriptionsprocessen, hvor der ofte kun syntetiseres relativt korte RNA-kæder, dannes der under replikation en komplet RNA-streng. Dobbeltstrenget RNA replikerer på samme måde som dobbeltstrenget DNA, men ved hjælp af det tilsvarende enzym - RNA-polymerase af viral oprindelse.

Som et resultat af processen med viral genomreplikation akkumuleres midler af virale nukleinsyremolekyler, der er nødvendige for dannelsen af ​​modne virioner, i cellen.

Således er syntesen af ​​individuelle komponenter af virion adskilt i tid og rum, der forekommer i forskellige cellulære strukturer og på forskellige tidspunkter.

I sidste periode Under reproduktionen samles virioner, og virussen forlader cellen.

Virion samling kan forekomme på forskellige måder, men det er baseret på processen med selvsamling af virale komponenter, der transporteres fra stederne for deres syntese til samlingsstedet. Den primære struktur af virale nukleinsyrer og proteiner bestemmer rækkefølgen af ​​konformationen af ​​molekylerne og deres forbindelse med hinanden. For det første dannes et nukleocapsid på grund af den strengt orienterede forbindelse af proteinmolekyler til capsomerer og capsomerer med nukleinsyre. For simple vira er det her, samlingen slutter. Samlingen af ​​komplekse vira med et superkapsid er flertrins og ender normalt under processen med virioner, der forlader cellen. I dette tilfælde er elementer af cellemembranen inkluderet i supercapsid af virus.

Udgang af virus fra cellen kan ske på to måder. Nogle vira, der mangler et superkapsid (adenovira, picornavirus), forlader cellen på en "eksplosiv" måde. I dette tilfælde lyseres cellen, og virionerne forlader den ødelagte celle ind i det intercellulære rum. Andre vira, der har en lipoprotein-sekundær kappe, for eksempel influenzavirus, forlader cellen ved at knopskyde fra dens kappe. Cellen kan forblive levedygtig i lang tid.

Hele virusreproduktionscyklussen tager normalt flere timer. I løbet af de 4 til 5 timer, der går fra det øjeblik, et molekyle af viral nukleinsyre kommer ind i en celle, kan der dannes fra flere tiere til flere hundrede nye virioner, som kan inficere naboceller. Spredningen af ​​virusinfektion i celler sker således meget hurtigt.

Den måde, virus formerer sig på, er således fundamentalt forskellig fra den måde, alle andre levende ting formerer sig på. Alle cellulære organismer formerer sig ved deling. Når vira formerer sig, syntetiseres individuelle komponenter forskellige steder i den virusinficerede celle og på forskellige tidspunkter. Denne reproduktionsmetode kaldes "frakoblet" eller "disjunktiv".

Det skal siges, at interaktionen mellem virussen og cellen ikke nødvendigvis fører til det beskrevne resultat - tidlig eller forsinket død af den inficerede celle med produktion af en masse nye modne virale partikler. Der er tre mulige typer af virusinfektion i en celle.

Den første mulighed, som vi allerede har diskuteret, opstår når produktiv eller virulent infektioner.

Anden mulighed - vedvarende infektion af en virus i en celle, når der er en meget langsom produktion af nye virioner med deres frigivelse fra cellen, men den inficerede celle forbliver levedygtig i lang tid.

Endelig er den tredje mulighed integrerende type interaktion mellem en virus og en celle, hvorunder integrationen af ​​viral nukleinsyre i det cellulære genom sker. Dette involverer den fysiske inklusion af et viralt nukleinsyremolekyle i værtscellens kromosom. For DNA-genomiske vira er denne proces ganske forståelig RNA-genomiske vira kan kun integrere deres genom i form af et "provirus" - en DNA-kopi af viralt RNA syntetiseret ved hjælp af revers transkriptase - RNA-afhængig DNA-polymerase. I tilfælde af integration af det virale genom i det cellulære, replikerer den virale nukleinsyre sammen med det cellulære under celledeling. En virus i form af et provirus kan forblive i en celle i lang tid på grund af konstant replikation. Denne proces kaldes " virogeni».

5. KARDINALE FUNKTIONER FOR VIRUS

Imidlertid er størrelsen af ​​store vira sammenlignelig med størrelsen af ​​klamydia og små rickettsia, og filtrerbare former for bakterier er blevet beskrevet. I øjeblikket bruges udtrykket "filtrerbare vira", som i lang tid var almindeligt at henvise til vira, praktisk talt ikke. Derfor er lille størrelse ikke en grundlæggende forskel mellem vira og andre levende væsener.

Derfor er de grundlæggende forskelle mellem vira og andre mikroorganismer på nuværende tidspunkt baseret på mere signifikante biologiske egenskaber, som vi diskuterede i dette foredrag.

Baseret på viden om egenskaberne af virus, vi har analyseret, kan vi formulere følgende 5 grundlæggende forskelle mellem vira fra andre levende væsener på Jorden:

1. Mangel på cellulær organisation.

2. Tilstedeværelsen af ​​kun én type nukleinsyre (DNA eller RNA).

3. Mangel på selvstændigt stofskifte. Metabolisme i vira medieres gennem metabolismen af ​​celler og organismer.

4. Tilstedeværelsen af ​​en unik, disjunktiv metode til reproduktion.

Således kan vi give følgende definition til vira.

Virologiens historie, viras natur og oprindelse

Virus opdagelse

Virologi er en ung videnskab, dens historie går lidt over 100 år tilbage. Efter at have begyndt sin rejse som videnskaben om vira, der forårsager sygdomme hos mennesker, dyr og planter, udvikler virologi sig i øjeblikket i retning af at studere de grundlæggende love for moderne biologi på molekylært niveau, baseret på det faktum, at vira er en del af biosfæren og en vigtig faktor i udviklingen af ​​den økologiske verden.

Virologiens historie er usædvanlig, idet en af ​​dens emner - virussygdomme - begyndte at blive undersøgt længe før selve vira blev opdaget. Begyndelsen på virologiens historie er kampen mod infektionssygdomme og først efterfølgende den gradvise afsløring af kilderne til disse sygdomme. Dette bekræftes af Edward Jenners (1749-1823) arbejde om forebyggelse af kopper og Louis Pasteurs (1822-1895) arbejde med det forårsagende middel til rabies.

Siden umindelige tider har kopper været menneskehedens svøbe og krævet tusindvis af liv. Beskrivelser af koppeinfektion findes i manuskripter af gamle kinesiske og indiske tekster. Den første omtale af koppeepidemier på det europæiske kontinent går tilbage til det 6. århundrede e.Kr. (en epidemi blandt soldaterne fra den etiopiske hær, der belejrede Mekka), hvorefter der var en uforklarlig periode, hvor der ikke var nogen omtaler af koppeepidemier. Kopper begyndte at sprede sig på tværs af kontinenter igen i det 17. århundrede. For eksempel, i Nordamerika (1617-1619) i staten Massachusetts døde 9/10 af befolkningen, i Island (1707) efter en koppeepidemi var der kun 17 tusinde tilbage fra 57 tusinde mennesker i byen Eastham ( 1763) ) fra 1331 indbyggere er der 4 personer tilbage. I denne henseende var problemet med at bekæmpe kopper meget akut.

En teknik til at forebygge kopper gennem vaccination, kaldet variolation, har været kendt siden oldtiden. Omtaler af brugen af ​​variolation i Europa går tilbage til midten af ​​det 17. århundrede med referencer til tidligere erfaringer i Kina, Fjernøsten og Tyrkiet. Essensen af ​​variolation var, at indholdet af pustler fra patienter, der led af en mild form for kopper, blev indført i et lille sår på menneskehuden, hvilket forårsagede en mild sygdom og forhindrede en akut form. Der var dog fortsat en høj risiko for at få en alvorlig form for kopper, og dødeligheden blandt vaccinerede nåede op på 10 %. Jenner revolutionerede koppeforebyggelse. Han var den første til at henlede opmærksomheden på, at folk, der havde kokopper, som var milde, aldrig efterfølgende led af kopper. Den 14. maj 1796 introducerede Jenner væske fra malkepigen Sarah Selmes' pustler, som havde kokopper, i James Phipps' sår, som aldrig havde lidt af kopper. På stedet for den kunstige infektion udviklede drengen typiske pustler, som forsvandt efter 14 dage. Derefter introducerede Jenner meget smitsomt materiale fra en koppepatients pustler i drengens sår. Drengen blev ikke syg. Sådan blev ideen om vaccination født og bekræftet (fra det latinske ord vacca - ko). På Jenners tid blev vaccination forstået som indførelsen af ​​smitsomt kokoppermateriale i menneskekroppen for at forhindre kopper. Udtrykket vaccine blev anvendt om et stof, der beskyttede mod kopper. Siden 1840 begyndte man at få koppevaccine ved at inficere kalve. Den humane koppevirus blev først opdaget i 1904. Kopper er således den første infektion, mod hvilken der blev brugt en vaccine, dvs. den første infektion, der kan forebygges af vaccinen. Fremskridt inden for vaccineforebyggelse af kopper har ført til dens verdensomspændende udryddelse.

I dag bruges vaccination og vaccine som generelle begreber, der betegner vaccination og vaccinationsmateriale.

Pasteur, der i det væsentlige ikke vidste noget specifikt om årsagerne til rabies, bortset fra den ubestridelige kendsgerning af dens smitsomme natur, brugte princippet om svækkelse (dæmpning) af patogenet. For at svække rabiespatogenets patogene egenskaber blev der brugt en kanin, i hvis hjerne hjernevævet fra en hund, der døde af rabies, blev sprøjtet ind. Efter kaninens død blev dens hjernevæv sprøjtet ind i den næste kanin, og så videre blev der udført omkring 100 passager, før patogenet tilpassede sig kaninens hjernevæv. Når den blev injiceret subkutant i hundens krop, udviste den kun moderate patogenicitetsegenskaber. Pasteur kaldte sådan et "genuddannet" patogen "fikseret", i modsætning til det "vilde", som er karakteriseret ved høj patogenicitet. Pasteur udviklede senere en metode til at skabe immunitet, bestående af en række injektioner med gradvist stigende mængder af et fikseret patogen. Hunden, der gennemførte hele injektionsforløbet, viste sig at være fuldstændig resistent over for infektion. Pasteur kom til den konklusion, at processen med udvikling af en infektionssygdom i det væsentlige er en kamp mellem mikrober og kroppens forsvar. "Enhver sygdom skal have sit eget patogen, og vi skal fremme udviklingen af ​​immunitet mod denne sygdom i patientens krop," sagde Pasteur. Da han endnu ikke havde forstået, hvordan kroppen producerer immunitet, var Pasteur i stand til at bruge sine principper og styre mekanismerne i denne proces til gavn for mennesker. I juli 1885 havde Pasteur mulighed for at teste egenskaberne af et "fast" rabiespatogen på et barn, der blev bidt af en rabiat hund. Drengen fik en række injektioner af et stadig mere giftigt stof, hvor den sidste injektion indeholdt en fuldstændig patogen form af patogenet. Drengen forblev rask. Rabiesvirussen blev opdaget af Remlanger i 1903.

Det skal bemærkes, at hverken koppevirus eller rabiesvirus var de første vira, der blev opdaget til at inficere dyr og mennesker. Det første sted hører med rette til mund- og klovsygevirussen, opdaget af Leffler og Frosch i 1898. Disse forskere, ved hjælp af flere fortyndinger af det filtrerbare middel, viste dets toksicitet og konkluderede om dets korpuskulære natur.

I slutningen af ​​det 19. århundrede blev det klart, at en række menneskelige sygdomme, såsom rabies, kopper, influenza og gul feber, er smitsomme, men deres forårsagende stoffer blev ikke påvist ved bakteriologiske metoder. Takket være arbejdet af Robert Koch (1843-1910), der var pionerer i brugen af ​​rene bakteriekulturteknikker, blev det muligt at skelne mellem bakterielle og ikke-bakterielle sygdomme. I 1890, på Hygienisternes X-kongres, blev Koch tvunget til at erklære, at "... med de nævnte sygdomme har vi ikke at gøre med bakterier, men med organiserede patogener, der tilhører en helt anden gruppe af mikroorganismer." Denne udtalelse fra Koch indikerer, at opdagelsen af ​​vira ikke var en tilfældig begivenhed. Ikke kun oplevelsen af ​​at arbejde med patogener af ukendt natur, men også en forståelse af essensen af, hvad der skete, bidrog til formuleringen af ​​ideen om eksistensen af ​​en original gruppe af patogener af infektionssygdomme af ikke-bakteriel karakter . Det var tilbage at eksperimentelt bevise dets eksistens.

Det første eksperimentelle bevis på eksistensen af ​​en ny gruppe patogener af infektionssygdomme blev opnået af vores landsmand - plantefysiolog Dmitry Iosifovich Ivanovsky (1864-1920), mens han studerede mosaiksygdomme i tobak. Dette er ikke overraskende, da smitsomme sygdomme af epidemisk karakter ofte blev observeret i planter. Tilbage i 1883-84. Den hollandske botaniker og genetiker De Vries observerede en epidemi af grønnere blomster og antydede sygdommens smitsomme natur. I 1886 viste den tyske videnskabsmand Mayer, der arbejdede i Holland, at saften fra planter, der lider af mosaiksygdomme, forårsager den samme sygdom i planter, når de inokuleres. Mayer var sikker på, at synderen bag sygdommen var en mikroorganisme, og søgte efter den uden held. I det 19. århundrede forårsagede tobakssygdomme enorme skader på landbruget i vores land. I den forbindelse blev en gruppe forskere sendt til Ukraine for at studere tobakssygdomme, som som studerende ved St. Petersburg Universitet omfattede D.I. Ivanovsky. Som et resultat af at studere sygdommen beskrevet i 1886 af Mayer som mosaiksygdom af tobak, D.I. Ivanovsky og V.V. Polovtsev kom til den konklusion, at det repræsenterer to forskellige sygdomme. En af dem - "rype" - er forårsaget af en svamp, og den anden er af ukendt oprindelse. Studiet af tobaksmosaiksygdom blev videreført af Ivanovsky i Nikitsky Botanisk Have under ledelse af akademiker A.S. Famytsina. Ved at bruge saften fra et sygt tobaksblad, filtreret gennem et Chamberlant-lys, som bevarer de mindste bakterier, forårsagede Ivanovsky en sygdom i tobaksblade. Dyrkning af den inficerede juice på kunstige næringsmedier gav ikke resultater, og Ivanovsky kommer til den konklusion, at årsagsagenset til sygdommen er af usædvanlig karakter - den filtreres gennem bakteriefiltre og er ikke i stand til at vokse på kunstige næringsmedier. Opvarmning af saften ved en temperatur fra 60 °C til 70 °C fratog den smitteevne, hvilket indikerede patogenets levende natur. Ivanovsky kaldte først den nye type patogen "filtrerbare bakterier" (figur 1). Resultater af D.I. Ivanovsky blev brugt som grundlag for sin afhandling, præsenteret i 1888 og udgivet i bogen "On Two Diseases of Tobacco" i 1892. Dette år betragtes som året for opdagelsen af ​​vira.

A – Elektronmikrofotografi efter skrå aflejring med kulstof og platin; 65.000´. (Foto af N. Frank.) B – Model. (Karlson, Kurzes Lehrbuch der Biochemie, Stuttgart, Thieme, 1980).

Figur 1 – Tobaksmosaikvirus

I en vis periode, i udenlandske publikationer, blev opdagelsen af ​​vira forbundet med navnet på den hollandske videnskabsmand Beijerinck (1851-1931), som også studerede tobaksmosaiksygdom og offentliggjorde sine eksperimenter i 1898. Beijerinck placerede den filtrerede saft af en inficeret plante på overfladen af ​​en agar, inkuberede og opnåede bakteriekolonier på dens overflade. Herefter blev det øverste lag af agar med bakteriekolonier fjernet, og det inderste lag blev brugt til at inficere en sund plante. Planten er syg. Ud fra dette konkluderede Beijerinck, at årsagen til sygdommen ikke var bakterier, men et eller andet flydende stof, der kunne trænge ind i agaren, og kaldte patogenet "væske levende smitte." På grund af det faktum, at Ivanovsky kun beskrev sine eksperimenter i detaljer, men ikke var opmærksom på patogenets ikke-bakterielle natur, opstod en misforståelse af situationen. Ivanovskys arbejde blev først berømt, efter at Beijerinck gentog og udvidede sine eksperimenter og understregede, at Ivanovsky var den første til at bevise den ikke-bakterielle natur af det forårsagende middel til den mest typiske virussygdom i tobak. Beijerinck anerkendte selv Ivanovskys forrang og den nuværende prioritet for opdagelsen af ​​vira af D.I. Ivanovsky er anerkendt over hele verden.

Ord VIRUS betyder gift. Dette udtryk blev også brugt af Pasteur til at betegne et smitsomt princip. Det skal bemærkes, at i begyndelsen af ​​det 19. århundrede blev alle patogene stoffer kaldt ordet virus. Først efter at naturen af ​​bakterier, giftstoffer og toksiner blev klar, begyndte udtrykkene "ultravirus" og derefter blot "virus" at betyde "en ny type filtrerbart patogen." Udtrykket "virus" slog rod i 30'erne af vores århundrede.

Det er nu klart, at vira er karakteriseret ved ubiquity, det vil sige ubiquity of distribution. Virus inficerer repræsentanter for alle levende riger: mennesker, hvirveldyr og hvirvelløse dyr, planter, svampe, bakterier.

Den første rapport relateret til bakterielle vira blev lavet af Hankin i 1896. I Chronicle of the Pasteur Institute udtalte han, at "... vandet i nogle floder i Indien har en bakteriedræbende effekt...", hvilket uden tvivl er relateret til bakterielle vira. I 1915 beskrev Twort i London, mens han studerede årsagerne til lysis af bakteriekolonier, princippet om transmission af "lysis" til nye kulturer over en række generationer. Hans arbejde var, som det ofte sker, næsten ubemærket, og to år senere, i 1917, genopdagede canadieren de Hérelle fænomenet bakteriel lysis forbundet med et filtreringsmiddel. Han kaldte dette middel en bakteriofag. De Herelle antog, at der kun var én bakteriofag. Forskning udført af Barnett, der arbejdede i Melbourne i 1924-34, viste imidlertid en bred vifte af bakterielle vira i fysiske og biologiske egenskaber. Opdagelsen af ​​mangfoldigheden af ​​bakteriofager har skabt stor videnskabelig interesse. I slutningen af ​​30'erne skabte tre forskere - fysikeren Delbrück, bakteriologerne Luria og Hershey, der arbejder i USA, den såkaldte "Phage Group", hvis forskning inden for genetik af bakteriofager i sidste ende førte til fødslen af ​​en ny videnskab - molekylærbiologi.

Studiet af insektvira har haltet betydeligt bagefter virologien hos hvirveldyr og mennesker. Det er nu klart, at vira, der inficerer insekter, kan opdeles i 3 grupper: insektvirus i sig selv, dyre- og menneskevira, for hvilke insekter er mellemværter, og plantevirus, der også inficerer insekter.

Den første insektvirus, der blev identificeret, var silkeorm gulsotvirus (silkeorm polyhedrosis virus, kaldet Bollea stilpotiae). Allerede i 1907 viste Provacek, at et filtreret homogenat af syge larver var smitsomt for sunde silkeormslarver, men det var først i 1947, at den tyske videnskabsmand Bergold opdagede stavformede viruspartikler.

En af de mest frugtbare undersøgelser inden for virologi er Reeds undersøgelse af gul febers natur på frivillige fra den amerikanske hær i 1900-1901. Det er overbevisende blevet påvist, at gul feber er forårsaget af en filtrerbar virus, der overføres af myg og myg. Det blev også fundet, at myg forblev ikke-smitsomme i to uger efter at have absorberet smitsomt blod. Således blev den ydre inkubationsperiode for sygdommen (den tid, der kræves til virusreproduktion hos et insekt) bestemt, og de grundlæggende principper for epidemiologien af ​​arbovirusinfektioner (virale infektioner overført af blodsugende leddyr) blev etableret.

Planteviruss evne til at formere sig i deres vektor, et insekt, blev demonstreret i 1952 af Maramorosh. Forskeren, ved hjælp af insektinjektionsteknikker, demonstrerede overbevisende evnen hos astergulsotvirus til at formere sig i sin vektor, den seksplettede cikade.

Stadier af udvikling af virologi

Historien om præstationer inden for virologi er direkte relateret til succesen med udviklingen af ​​den metodologiske forskningsbase.

Slutningen af ​​det 19. - begyndelsen af ​​det 20. århundrede. Den vigtigste metode til at identificere vira i denne periode var metoden til filtrering gennem bakteriologiske filtre (Chamberlan-stearinlys), som blev brugt som et middel til at adskille patogener i bakterier og ikke-bakterier. Ved at bruge filtrerbarhed gennem bakteriologiske filtre blev følgende vira opdaget:

– 1892 – tobaksmosaikvirus;

– 1898 – mund- og klovsygevirus;

– 1899 – kvægpestvirus;

– 1900 – gul feber-virus;

– 1902 – hønse- og fårekoppevirus;

– 1903 – rabiesvirus og svinepestvirus;

– 1904 – human koppevirus;

– 1905 – hundesygevirus og vaccinevirus;

– 1907 – dengue-virus;

– 1908 – koppe- og trakomvirus;

– 1909 – poliovirus;

– 1911 – Rous sarkomvirus;

– 1915 – bakteriofager;

– 1916 – mæslingevirus;

– 1917 – herpesvirus;

– 1926 – vesikulær stomatitisvirus.

30'erne– den vigtigste virologiske metode, der anvendes til isolering af vira og deres yderligere identifikation, er laboratoriedyr (hvide mus - for influenzavirus, nyfødte mus - for Coxsackie-virus, chimpanser - for hepatitis B-virus, høns, duer - for onkogene vira, gnotobiont-grise – for tarmvirus osv.). Den første person, der systematisk brugte forsøgsdyr i studiet af vira, var Pasteur, som tilbage i 1881 forskede i at pode materiale fra rabiespatienter ind i hjernen på en kanin. En anden milepæl var arbejdet med undersøgelsen af ​​gul feber, som resulterede i brugen af ​​nyfødte mus i virologisk praksis. Kulminationen på denne arbejdscyklus var Cycles' isolation i 1948 af en gruppe epidemiske myalgivira ved hjælp af diende mus.

1931 - kyllingeembryoner, som er meget følsomme over for influenza, kopper, leukæmi, kyllingesarkom og nogle andre vira, begyndte at blive brugt som en eksperimentel model til isolering af vira. Og i øjeblikket er kyllingeembryoner meget brugt til at isolere influenzavirus.

1932 - Den engelske kemiker Alford skaber kunstige fint porøse kolloide membraner - grundlaget for ultrafiltreringsmetoden, ved hjælp af hvilken det blev muligt at bestemme størrelsen af ​​virale partikler og differentiere vira på dette grundlag.

1935 - brugen af ​​centrifugeringsmetoden gjorde det muligt at krystallisere tobaksmosaikvirus. I øjeblikket anvendes centrifugering og ultracentrifugeringsmetoder (acceleration i bunden af ​​røret overstiger 200.000 g) i vid udstrækning til isolering og oprensning af vira.

I 1939 blev et elektronmikroskop med en opløsning på 0,2 til 0,3 nm brugt for første gang til at studere vira. Anvendelsen af ​​ultratynde vævssnit og metoden til negativ kontrastering af vandige suspensioner gjorde det muligt at studere virioners interaktion med celler og at studere virioners struktur (arkitektur). Informationen opnået ved hjælp af elektronmikroskopet blev signifikant udvidet ved røntgendiffraktionsanalyse af krystaller og pseudokrystaller af vira. Forbedringen af ​​elektronmikroskoper kulminerede i skabelsen af ​​scanningsmikroskoper, der gør det muligt at opnå tredimensionelle billeder. Ved hjælp af elektronmikroskopi blev virioners arkitektur og egenskaberne ved deres indtrængning i værtscellen undersøgt.

I denne periode blev hovedparten af ​​vira opdaget. Eksempler inkluderer følgende:

– 1931 – svineinfluenzavirus og hestevestlig encephalomyelitisvirus;

– 1933 – human influenzavirus og østlig hesteencephalomyelitisvirus;

– 1934 – fåresygevirus;

– 1936 – muse brystkræftvirus;

– 1937 – flåtbåren encephalitisvirus.

40'erne. I 1940 opdagede Hoagland og hans kolleger, at vacciniavirussen indeholder DNA, men ikke RNA. Det blev tydeligt, at vira adskiller sig fra bakterier ikke kun i størrelse og manglende evne til at vokse uden celler, men også ved, at de kun indeholder én type nukleinsyre - DNA eller RNA.

1941 - Den amerikanske videnskabsmand Hurst opdagede fænomenet hæmagglutination (erythrocytlimning) ved hjælp af en model af influenzavirus. Denne opdagelse dannede grundlag for udviklingen af ​​metoder til påvisning og identifikation af vira og bidrog til studiet af virus-celle-interaktioner. Princippet om hæmagglutination er grundlaget for en række metoder:

HRA - hæmagglutinationsreaktion - bruges til at detektere og titrere vira;

HAI - hæmagglutinationshæmningsreaktion - bruges til at identificere og titrere vira.

1942 - Hearst opdager tilstedeværelsen af ​​et enzym i influenzavirussen, som senere identificeres som neuraminidase.

1949 – opdagelse af muligheden for at dyrke dyrevævsceller under kunstige forhold. I 1952 modtog Enders, Weller og Robbins Nobelprisen for at udvikle cellekulturmetoden.

Introduktionen af ​​cellekulturmetoden i virologien var en vigtig begivenhed, der gjorde det muligt at opnå dyrkede vacciner. Af de i øjeblikket meget udbredte kulturelle levende og dræbte vacciner, der er skabt på basis af svækkede virusstammer, bør vacciner mod polio, fåresyge, mæslinger og røde hunde bemærkes.

Skaberne af poliovacciner er de amerikanske virologer Sabin (en trivalent levende vaccine baseret på svækkede stammer af poliovirus af tre serotyper) og Salk (en dræbt trivalent vaccine). I vores land har sovjetiske virologer M.P. Chumakov og A.A. Smorodintsev udviklede en teknologi til fremstilling af levende og dræbte poliovacciner. I 1988 satte Verdenssundhedsforsamlingen WHO som mål at udrydde polio på verdensplan ved fuldstændig at stoppe cirkulationen af ​​vild poliovirus. Til dato er der gjort enorme fremskridt i denne retning. Brugen af ​​global vaccination mod polio ved hjælp af "runde" vaccinationsordninger gjorde det muligt ikke kun at reducere forekomsten radikalt, men også at skabe områder fri for cirkulation af vilde poliovirus.

Virus opdaget:

– 1945 – Krim hæmoragisk febervirus;

– 1948 – Coxsackie-virus.

50'erne. I 1952 udviklede Dulbecco en metode til titrering af plaques i et monolag af kyllingeembryoceller, som introducerede et kvantitativt aspekt til virologi. 1956-62 Watson, Caspar (USA) og Klug (Storbritannien) udvikler en generel teori om virale partiklers symmetri. Strukturen af ​​viruspartiklen er blevet et af kriterierne i virusklassificeringssystemet.

Denne periode var præget af betydelige fremskridt inden for bakteriofager:

- induktion af profagen af ​​lysogeniserende fager blev etableret (Lvov et al., 1950);

– det er blevet bevist, at infektivitet er iboende i fag-DNA og ikke i proteinskallen (Hershey, Chase, 1952);

– fænomenet generel transduktion blev opdaget (Zinder, Lederberg, 1952).

Det infektiøse tobaksmosaikvirus blev rekonstrueret (Frenkel-Conrad, Williams, Singer, 1955-1957), og i 1955 blev polioviruset opnået i krystallinsk form (Shaffer, Shwerd, 1955).

Virus opdaget:

– 1951 – murine leukæmivirus og ECHO;

– 1953 – adenovira;

– 1954 – røde hundevirus;

– 1956 – parainfluenzavirus, cytomegalovirus, respiratorisk syncytialvirus;

– 1957 – polyomavirus;

– 1959 – Argentinsk hæmoragisk febervirus.

60'erne kendetegnet ved blomstringen af ​​molekylærbiologiske forskningsmetoder. Fremskridt inden for kemi, fysik, molekylærbiologi og genetik dannede grundlaget for den metodologiske base for videnskabelig forskning, som begyndte at blive brugt ikke kun på teknikniveau, men også hele teknologier, hvor vira ikke kun fungerer som et objekt af forskning, men også som et værktøj. Ikke en eneste opdagelse inden for molekylærbiologi er komplet uden en viral model.

1967 - Cates og McAuslan demonstrerer tilstedeværelsen af ​​en DNA-afhængig RNA-polymerase i vaccinia virion. Året efter blev RNA-afhængig RNA-polymerase opdaget i reovira og derefter i paramyxo- og rhabdovira. I 1968 fastslog Jacobson og Baltimore, at poliovirus har et genomisk protein forbundet med RNA. Baltimore og Boston fastslog, at det genomiske RNA fra poliovirus er oversat til et polyprotein.

Virus opdaget:

– 1960 – rhinovirus;

– 1963 – Australsk antigen (HBsAg).

70'erne. Baltimore rapporterede samtidig med Temin og Mizutani opdagelsen af ​​enzymet revers transkriptase (revertase) i RNA-holdige onkogene vira. Det er ved at blive muligt at studere genomet af RNA-vira.

Studiet af genekspression i eukaryote vira gav grundlæggende information om eukaryoternes molekylære biologi - eksistensen af ​​mRNA's cap-struktur og dens rolle i RNA-translation, tilstedeværelsen af ​​en polyadenylatsekvens i 3"-enden af ​​mRNA, splejsning og forstærkernes rolle i transkription blev først identificeret i undersøgelsen af ​​dyrevira.

1972 - Berg udgiver en rapport om skabelsen af ​​et rekombinant DNA-molekyle. En ny gren af ​​molekylærbiologi er ved at opstå - genteknologi. Brugen af ​​rekombinant DNA-teknologi gør det muligt at opnå proteiner, der er vigtige i medicin (insulin, interferon, vacciner). 1975 - Köhler og Milstein producerer de første linjer af hybrider, der producerer monoklonale antistoffer (mAbs). De mest specifikke testsystemer til diagnosticering af virusinfektioner er ved at blive udviklet baseret på mAbs. 1976 - Blumberg modtager Nobelprisen for opdagelsen af ​​HBsAg. Det er blevet fastslået, at hepatitis A og hepatitis B er forårsaget af forskellige vira.

Virus opdaget:

– 1970 – hepatitis B-virus;

– 1973 – rotavirus, hepatitis A-virus;

– 1977 – hepatitis delta-virus.

80'erne. Udvikling af de ideer, der er fastlagt af husforskeren L.A. Zilbers idé om, at forekomsten af ​​tumorer kan være forbundet med vira. Komponenterne i vira, der er ansvarlige for udviklingen af ​​tumorer, kaldes onkogener. Virale onkogener har vist sig at være blandt de bedste modelsystemer, der hjælper med at studere mekanismerne for onkogenetisk transformation af pattedyrsceller.

– 1985 – Mullis modtager Nobelprisen for opdagelsen af ​​polymerasekædereaktionen (PCR). Dette er en molekylærgenetisk diagnostisk metode, som også har gjort det muligt at forbedre teknologien til at opnå rekombinant DNA og opdage nye vira.

Virus opdaget:

– 1983 – human immundefektvirus;

– 1989 – hepatitis C-virus;

– 1995 – hepatitis G-virus blev opdaget ved hjælp af PCR.

Relaterede oplysninger.

Anomalier i udviklingen af ​​nervesystemet. Kraniel brok. Spina bifida. Kraniovertebrale anomalier.

Anomalier i udviklingen af ​​kønsorganerne. Etiopatogenese, klassifikation, diagnostiske metoder, kliniske manifestationer, korrektionsmetoder.

Den moderne virologis resultater er enorme. Forskere forstår i stigende grad og mere dybt og med succes den subtile struktur, biokemiske sammensætning og fysiologiske egenskaber af disse ultramikroskopiske levende væsener, deres rolle i naturen, menneskers liv, dyr og planter. Oncovirology studerer vedvarende og med succes vira's rolle i forekomsten af ​​tumorer (kræft) og forsøger at løse dette århundredes problem.

I begyndelsen af ​​det 21. århundrede var mere end 6 tusind vira tilhørende mere end 2.000 arter, 287 slægter, 73 familier og 3 ordrer. For mange vira er deres struktur, biologi, kemiske sammensætning og replikationsmekanismer blevet undersøgt. Opdagelsen og forskningen af ​​nye vira fortsætter, og de fortsætter med at forbløffe med deres mangfoldighed. Så i 2003 blev den største kendte virus, mimivirus, opdaget.

Opdagelsen af ​​et stort antal vira påkrævet skabe deres samlinger og museer. De største blandt dem er i Rusland (statslig samling af vira ved D.I. Ivanovsky Institute of Virology i Moskva), USA (Washington), Tjekkiet (Prag), Japan (Tokyo), Storbritannien (London), Schweiz (Lausanne) og Tyskland (Brunschweig). Resultaterne af videnskabelig forskning inden for virologi publiceres i videnskabelige tidsskrifter og diskuteres på internationale kongresser, der afholdes hvert 3. år (afholdt første gang i 1968). I 1966, på den 9. internationale kongres for mikrobiologi, blev den internationale komité for taksonomi af virus (ICTV) valgt for første gang.

Inden for rammerne af generel, det vil sige molekylær virologi, fortsætter studiet af de grundlæggende principper for interaktion mellem vira og celler. Fremskridt inden for molekylærbiologi, virologi, genetik, biokemi og bioinformatik har vist, at vigtigheden af ​​vira ikke er begrænset til, at de forårsager infektionssygdomme.

Det har vist sig, at nogle viruss replikationstræk fører til, at virussen fanger cellulære gener og overfører dem til genomet af en anden celle - horisontal overførsel af genetisk information, hvilket kan have konsekvenser både evolutionært og malignt degenerering af celler. .

Ved sekventering af genomet hos mennesker og andre pattedyr blev der identificeret et stort antal gentagne nukleotidsekvenser, som er defekte virale sekvenser - retrotransposoner (endogene retrovira), som kan indeholde regulatoriske sekvenser, der påvirker ekspressionen af ​​nabogener. Deres opdagelse og undersøgelse førte til aktiv diskussion og forskning i virussers rolle i udviklingen af ​​alle organismer, især i menneskers udvikling.

En ny retning inden for virologi er økologi af vira. At opdage vira i naturen, identificere dem og estimere deres overflod er en meget vanskelig opgave. På nuværende tidspunkt er der udviklet nogle metodiske teknikker, som gør det muligt at estimere mængden af ​​visse grupper af vira, især bakteriofager, i naturlige prøver og at spore deres skæbne. Der er opnået foreløbige data, der indikerer, at vira har en betydelig indvirkning på adskillige biogeokemiske processer og effektivt regulerer overfloden og artsdiversiteten af ​​bakterier og fytoplankton. Studiet af vira i dette aspekt er dog lige begyndt, og der er stadig mange uløste problemer på dette område af videnskaben.

Resultaterne af generel virologi har givet en kraftig impuls til udviklingen af ​​dets anvendte områder. Virologi er vokset til et stort videnfelt, der er vigtigt for biologi, medicin og landbrug.

Virologer diagnosticerer virusinfektioner hos mennesker og dyr, studerer deres spredning og udvikler metoder til forebyggelse og behandling. Den største præstation var skabelsen af ​​vacciner mod polio, kopper, rabies, hepatitis B, mæslinger, gul feber, hjernebetændelse, influenza, fåresyge og røde hunde. Der er lavet en vaccine mod papillomavirus, som er forbundet med udviklingen af ​​én type kræft. Takket være vaccination er kopper blevet fuldstændig udryddet. Internationale programmer for fuldstændig udryddelse af polio og mæslinger er ved at blive implementeret. Der udvikles metoder til forebyggelse og behandling af hepatitis og human immundefekt (AIDS). Data om stoffer med antiviral aktivitet akkumuleres. Baseret på dem er der skabt en række lægemidler til behandling af AIDS, viral hepatitis, influenza og sygdomme forårsaget af herpesvirus.

Studiet af plantevirus og egenskaberne ved deres distribution i hele planten har ført til skabelsen af ​​en ny retning i landbruget - produktionen af ​​virusfrit plantemateriale. Meristem-teknologier, som gør det muligt at dyrke planter fri for virus, bruges i dag til kartofler og en række frugt- og blomsterafgrøder.

Af usædvanlig vigtighed på dette stadium er den viden, der er akkumuleret om strukturen af ​​vira og deres genomer til udvikling af genteknologi. Et bemærkelsesværdigt eksempel på dette er anvendelsen af ​​bakteriofag lambda til at producere biblioteker af klonede sekvenser. Derudover er der, baseret på genomerne af forskellige vira, blevet skabt et stort antal gensplejsede vektorer, og de bliver fortsat skabt til at levere fremmed genetisk information ind i celler. Disse vektorer bruges til videnskabelig forskning, til akkumulering af fremmede proteiner, især i bakterier og planter, og til genterapi. Genteknologi bruger nogle virale enzymer, der nu produceres kommercielt.

Små størrelser og evnen til at danne regulære strukturer har åbnet muligheden for at bruge vira i nanoteknologi til at producere nye biouorganiske materialer: nanorør, nanoledere, nanoelektroder, nanocontainere, til indkapsling af uorganiske forbindelser, magnetiske nanopartikler og uorganiske nanokrystaller af strengt kontrollerede størrelser. Nye materialer kan skabes gennem interaktion af regelmæssigt organiserede virale proteinstrukturer med metalholdige uorganiske forbindelser. "Sfæriske" vira kan tjene som nanocontainere til lagring og levering af lægemidler og terapeutiske gener ind i celler. Overflademodificerede infektiøse virioner og virale understrukturer kan bruges som nanoværktøjer (f.eks. med henblik på biokatalyse eller produktion af sikre vacciner).
17. Bakteriofagtiter, metoder til dets bestemmelse. Identifikation af dyre- og plantevirus.

Bakteriofagtiteren er antallet af aktive fagpartikler pr. volumenhed af det materiale, der undersøges. For at bestemme bakteriofagtiteren er agarlagsmetoden mest udbredt, når man arbejder med bakteriofager. , foreslået af A. Grazia i 1936. Denne metode er kendetegnet ved dens lette implementering og nøjagtighed af de opnåede resultater og er også med succes brugt til isolering af bakteriofager.

Essensen af ​​metoden er, at en bakteriofagsuspension blandes med en kultur af følsomme bakterier, tilsættes til en lav koncentration agar ("blød agar") og lægges på overfladen af ​​en tidligere forberedt 1,5% næringsagar i en petriskål. Vand ("sulten") 0,6% blev brugt som toplag i den klassiske Grazia-metode. - nd agar I øjeblikket bruges 0,7 % næringsagar oftest til disse formål. Ved inkubation i 6-18 timer formerer bakterierne sig i det øverste "bløde" lag af agar i form af mange kolonier, og modtager næring fra det nederste lag af 1,5% næringsagar, som bruges som substrat. Den lave koncentration af agar i det øverste lag skaber en reduceret viskositet, hvilket fremmer god diffusion af fagpartikler og deres infektion af bakterieceller. Inficerede bakterier gennemgår lyse, hvilket resulterer i afkomsfag, der igen inficerer bakterier i umiddelbar nærhed af dem. Dannelsen af ​​en negativ koloni for T-gruppefager forårsages af kun én bakteriofagpartikel, og derfor tjener antallet af negative kolonier som en kvantitativ indikator for indholdet af plakdannende enheder i testprøven.

Kulturen af ​​fagfølsomme bakterier anvendes i den logaritmiske vækstfase i en minimal mængde for at sikre en kontinuerlig plæne af bakterier. Forholdet mellem antallet af fagpartikler og bakterieceller (infektionsmangfoldighed) for hvert fagbakteriesystem vælges eksperimentelt således, at der dannes 50-100 negative kolonier på én plade.

For at titrere en bakteriofag kan der også anvendes en enkeltlagsmetode, som består i at tilsætte suspensioner af bakterier og bakteriofag til overfladen af ​​en plade med næringsagar, hvorefter blandingen fordeles med en glasspatel. Denne metode er imidlertid ringere med hensyn til nøjagtighed i forhold til agarlagsmetoden og er derfor ikke udbredt.

Teknik til titrering og dyrkning af bakteriofager. For at bestemme bakteriofagtiteren fortyndes den indledende fagsuspension sekventielt i en bufferopløsning eller i bouillon (fortyndingstrin 10-1). Brug en separat pipette til hver fortynding, og blandingen omrøres kraftigt. Fra hver fortynding af suspensionen "podes" fagen på en græsplæne af følsomme bakterier E. coli B. For at gøre dette tilsættes 1 ml af den fortyndede fag til et reagensglas med 3 ml "blød agar" smeltet og afkøles til 48-50°C, hvorefter der til hvert reagensglas tilsættes 0,1 ml af en kultur af en følsom mikroorganisme (E. coli B) i den logaritmiske vækstfase. Indholdet blandes ved at dreje reagensglasset mellem håndfladerne og undgå dannelse af bobler. Hæld det derefter hurtigt på overfladen af ​​agaren (1,5 %) næringsmediet i en petriskål og fordel det jævnt over det, mens du ryster skålen forsigtigt. Ved titrering med agarlagsmetoden skal mindst to plader med samme fagfortynding inokuleres parallelt. Efter at det øverste lag er hærdet, vendes kopperne på hovedet og placeres i en termostat med en temperatur på 37°C, optimalt til udvikling af følsomme bakterier. Resultaterne registreres efter 18-20 timers inkubation.

Antallet af negative kolonier tælles på samme måde som ved optælling af bakteriekolonier, og fagtiteren bestemmes ved hjælp af formlen:

Hvor N er antallet af fagpartikler i 1 ml af testmaterialet; n er det gennemsnitlige antal negative kolonier pr. plade; D - fortyndingsnummer; V er volumenet af den inokulerede prøve, ml.

I det tilfælde, hvor det er nødvendigt at bestemme infektionsmangfoldigheden, bestemmes titeren af ​​levedygtige celler af E. coli B-bakterier i 1 ml næringsbouillon parallelt. For at gøre dette skal du fortynde den indledende suspension af bakterieceller til 10 -6 og inokulere den (0,1 ml) parallelt på 2 kopper. Efter inkubation ved 37 °C i 24 timer tælles antallet af kolonier dannet på en petriskål, og celletiteren bestemmes.

For at isolere vira fra mennesker, dyr og planter indføres det undersøgte materiale i kroppen af ​​forsøgsdyr og planter, der er følsomme over for virus eller inficerer celle(vævs)kulturer og organkulturer. Tilstedeværelsen af ​​virussen påvises ved karakteristiske skader i forsøgsdyr (eller planter) og i vævskulturer - ved beskadigelse af celler, den såkaldte cytopatiske effekt, som genkendes ved mikroskopisk eller cytokemisk undersøgelse. Med V. og. "plakmetoden" anvendes - observation af defekter i cellelaget forårsaget af ødelæggelse eller beskadigelse af celler i områder med virusophobning. Virioner, som har en karakteristisk struktur blandt forskellige vira, kan identificeres ved elektronmikroskopi. Yderligere identifikation af vira er baseret på integreret brug af fysiske, kemiske og immunologiske metoder. Således adskiller vira sig i følsomhed over for ether, som er forbundet med tilstedeværelsen eller fraværet af lipider i deres skaller. Typen af ​​virusnukleinsyre (RNA og DNA) kan bestemmes ved kemiske eller cytokemiske metoder. For at identificere virale proteiner anvendes serologiske reaktioner med sera opnået ved at immunisere dyr med de tilsvarende vira. Disse reaktioner gør det muligt at genkende ikke kun typer af vira, men også deres sorter. Serologiske forskningsmetoder gør det muligt at diagnosticere en virusinfektion hos mennesker og højerestående dyr ved tilstedeværelsen af ​​antistoffer i blodet og at studere cirkulationen af ​​vira blandt dem. For at identificere latente (skjulte) vira af mennesker, dyr, planter og bakterier anvendes særlige forskningsmetoder.

Kommunal statslig uddannelsesinstitution

"Grundskole nr. 3"

Stavropol-regionen, Stepnovsky-distriktet,
Bogdanovka landsby

MKOU realskole nr. 3, 10. klasses elev
Videnskabelig vejleder:

Toboeva Natalya Konstantinovna
lærer i geografi, biologi, MKOU gymnasiet nr. 3

jeg .Indledning

II. Hoveddel:

1. Opdagelse af vira

2.Oprindelse af vira

3. Struktur

4.Penetration ind i cellen

5.Influenza

6. Skoldkopper 7. Flåtbåren hjernebetændelse 8. Virologiens fremtid

III.Konklusion

IV. Referencer

V.Bilag

Studieobjekt:

Ikke-cellulære livsformer er vira.

Forskningsemne:

Virologiens nutid og fremtid.

Formålet med arbejdet:

Find ud af betydningen af ​​virologi på nuværende tidspunkt og bestem dens fremtid. Det fastsatte mål kunne nås som et resultat af løsning af følgende opgaver:

1) undersøgelse af litteratur, der dækker strukturen af ​​vira som ikke-cellulære livsformer;

2) forskning i årsagerne til virussygdomme, samt deres forebyggelse.

Dette afgjorde emnet for min undersøgelse.

JEG. Indledning.

Virologiens actionfyldte og fascinerende historie er præget af triumferende sejre, men desværre også nederlag. Udviklingen af ​​virologi er forbundet med de strålende succeser af molekylær genetik.

Studiet af vira har ført til en forståelse af genernes fine struktur, dechifrering af den genetiske kode og identifikation af mekanismerne for mutationer.

Vira er meget udbredt i genteknologi og forskning.

Men deres list og evne til at tilpasse sig kender ingen grænser, deres adfærd er i hvert tilfælde uforudsigelig. Ofrene for vira er millioner af mennesker, der døde af kopper, gul feber, AIDS og andre sygdomme. Meget mangler at blive opdaget og lært. Og alligevel er de vigtigste fremskridt inden for virologi blevet opnået i kampen mod specifikke sygdomme. Det er grunden til, at videnskabsmænd siger, at virologi vil tage en førende plads i det tredje årtusinde.

Hvad har virologi givet menneskeheden i kampen mod dens formidable fjende - virussen? Hvad er dens struktur, hvor og hvordan lever den, hvordan formerer den sig, hvilke andre "overraskelser" forbereder den? Jeg overvejede disse spørgsmål i mit arbejde.

II. Hoveddel:

1. Opdagelse af vira.

Opdageren af ​​virusverdenen var den russiske botaniker D.I. I 1891-1892 han søgte vedvarende efter årsagen til tobaksmosaiksygdommen. Videnskabsmanden undersøgte væsken opnået ved at gnide syge tobaksblade. Jeg filtrerede det gennem filtre, der ikke skulle slippe en eneste bakterie igennem. Tålmodigt pumpede han litervis af juice taget fra mosaiktobaksblade ned i hule bakteriefiltre lavet af fint porcelæn, der minder om lange stearinlys. Filterets vægge svedte med gennemsigtige dråber, der strømmede ind i en præ-steriliseret beholder. Ved let at gnide påførte videnskabsmanden en dråbe af denne filtrerede saft på overfladen af ​​tobaksbladet. Efter 7-10 dage viste tidligere sunde planter utvivlsomme tegn på mosaiksygdom. En dråbe filtreret juice fra en inficeret plante påvirkede enhver anden tobaksbusk med en mosaiksygdom. Angrebet kunne gå fra plante til plante i det uendelige, som en ildflamme fra et stråtag til et andet.

Efterfølgende var det muligt at fastslå, at mange andre virale patogener af infektionssygdomme hos mennesker, dyr og planter er i stand til at passere igennem, hvilket kunne ses gennem de mest avancerede lysmikroskoper. Partikler af forskellige vira kunne kun ses gennem vinduet på en altseende enhed - et elektronmikroskop, som giver en forstørrelse på hundredtusindvis af gange.

D.I Ivanovsky tillagde ikke stor betydning for denne kendsgerning, selvom han beskrev sin oplevelse i detaljer.

Hans arbejde opnåede berømmelse efter den hollandske botaniker og mikrobiolog Martin Beijerinck bekræftede resultaterne af D. I. Ivanovskys forskning i 1899. M. Beyerinck beviste, at mosaikken af ​​tobak kan overføres fra en plante til en anden ved hjælp af filtrater. Disse undersøgelser markerede begyndelsen på studiet af vira og fremkomsten af ​​virologi som en videnskab.

2. Viruss oprindelse.

3. Struktur.

Da de er helt primitive væsner, har vira alle de grundlæggende egenskaber for levende organismer. De reproducerer afkom svarende til de oprindelige forældreformer, selv om deres reproduktionsmetode er ejendommelig og adskiller sig i mange henseender fra, hvad der er kendt om reproduktion af andre skabninger. Deres metabolisme er tæt forbundet med metabolismen af ​​værtsceller. De har arvelighed, der er karakteristisk for alle levende organismer. Endelig er de, ligesom alle andre levende væsener, karakteriseret ved variation og tilpasningsevne til skiftende miljøforhold.

De største vira (f.eks. koppevirus) når en størrelse på 400-700 nm og er tæt på små bakterier i størrelse, de mindste (forårsager til polio, hjernebetændelse, mund- og klovsyge) måler kun snesevis af nanometer, dvs. er tæt på store proteinmolekyler, især blodhæmoglobinmolekyler.

Vira kommer i en række forskellige former, fra sfæriske til trådformede. Elektronmikroskopi giver ikke kun mulighed for at se vira, bestemme deres former og størrelser, men også at studere deres rumlige struktur - molekylær arkitektur.

En relativt simpel sammensætning er typisk for vira: nukleinsyre (RNA eller DNA), protein mere komplekse strukturer indeholder kulhydrater og lipider og har nogle gange en række af deres egne enzymer.

Som regel er nukleinsyren placeret i midten af ​​den virale partikel og er beskyttet mod negative virkninger af en proteinskal - capsomerer. Elektronmikroskopobservationer viste, at viruspartiklen

(eller virioner) kommer i flere grundlæggende typer i form.

Nogle vira (normalt de simpleste) ligner almindelige geometriske legemer. Deres proteinskal nærmer sig næsten altid formen af ​​et icosahedron (regelmæssig tyvesidet struktur) med flader af ligesidede trekanter. Disse virioner kaldes kubiske (såsom poliovirus). Nukleinsyren i en sådan virus er ofte snoet til en kugle. Partikler af andre vira er formet som aflange stænger. I dette tilfælde er deres nukleinsyre omgivet af et cylindrisk kapsid. Sådanne virioner kaldes spiralformede virioner (for eksempel tobaksmosaikvirus).

Vira med en mere kompleks struktur har ud over det icosaedriske eller spiralformede kapsid også en ydre skal, som består af en række forskellige proteiner (mange af dem enzymer) samt lipider og kulstoffer.

Den fysiske struktur af den ydre skal er meget varieret og er ikke så kompakt som kapsidens. For eksempel er herpesvirus en indhyllet spiralformet virion. Der er vira med en endnu mere kompleks struktur. Koppevirussen har således ikke et synligt capsid (proteinskal), men dets nukleinsyre er omgivet af flere skaller.

4.Penetration ind i cellen.

Som regel går virusets indtrængning i cellens cytoplasma forud af dets binding til et specielt receptorprotein placeret på celleoverfladen. Binding til receptoren sker på grund af tilstedeværelsen af ​​specielle proteiner på overfladen af ​​viruscellen. Området af celleoverfladen, som virussen er knyttet til, nedsænkes i cytoplasmaet og bliver til en vakuole. En vakuole er en væg, der består af en cytoplasmatisk membran, der kan smelte sammen med andre vakuoler eller kernen. På denne måde afgives virussen til enhver del af cellen.

Receptormekanismen til viruspenetrering i cellen sikrer specificiteten af ​​den infektiøse proces. Den smitsomme proces begynder, når vira, der er trængt ind i cellen, begynder at formere sig, dvs. Det virale genom replikeres, og kapsiden samler sig selv. For at der kan opstå reduplicering, skal nukleinsyren befris fra capsidet. Efter syntesen af ​​et nyt nukleinsyremolekyle bliver det klædt på med virale proteiner syntetiseret i værtscellens cytoplasma - der dannes et kapsid.

Ophobningen af ​​virale partikler fører til eliminering fra cellen. For nogle vira sker dette gennem en "eksplosion", hvor cellens integritet forstyrres, og den dør. Andre vira frigives på en måde, der minder om knopskydning. I dette tilfælde kan cellerne bevare deres levedygtighed.

Bakteriofagvirus har en anden måde at trænge ind i celler på. Bakteriofagen indsætter en hel stav ind i cellen og skubber det DNA (eller RNA), der findes i hovedet, ud gennem den. Bakteriofagens genom kommer ind

cytoplasma, og kapsiden forbliver udenfor. I det bakterielle cytoplasma begynder redupliceringen af ​​bakteriofaggenomet, syntesen af ​​dets proteiner og dannelsen af ​​kapsiden. Efter en vis periode dør bakteriecellen, og modne partikler kommer ind i miljøet.

5.Influenza.

Influenza er en akut infektionssygdom, hvis årsag er en filtervirus, der forårsager generel forgiftning og beskadigelse af slimhinden i de øvre luftveje.

Det er nu blevet fastslået, at influenzavirus har flere serologiske typer, der adskiller sig i deres antigene struktur.

Der er følgende typer af influenzavirus: A, B, C, D. Virus A har 2 undertyper, betegnet:EN 1 og A2.

Influenzavirussen uden for menneskekroppen er ustabil og dør hurtigt. Virus tørret i et vakuum kan vare ved i lang tid.

Desinfektionsmidler ødelægger hurtigt virussen; ultraviolet stråling og varme har også en skadelig effekt på virussen.

Tillad muligheden for infektion fra en virusbærer. Virussen overføres fra en syg person til en rask person gennem luftbårne dråber. Hoste og nysen bidrager til spredning af infektion.

Virale influenzaepidemier forekommer oftest i den kolde årstid.

En person med influenza er smitsom i 5-7 dage. Alle mennesker, der ikke har haft influenza, er modtagelige for denne sygdom. Efter at have lidt af influenza forbliver immuniteten i 2-3 år.

Inkubationsperioden er kort - fra flere timer til 3 dage. Oftest 1-2 dage.

Normalt er der ingen prodromer, og en pludselig indtræden er typisk. Kuldegysninger, hovedpine, generel svaghed opstår, og temperaturen stiger til 39-40 grader. Patienter klager over smerter, når de drejer øjnene, ømme muskelled, forstyrret søvn og svedtendens. Alt dette indikerer generel forgiftning med involvering af nervesystemet i processen.

Centralnervesystemet er særligt følsomt over for de toksiske virkninger af influenzavirus, som er klinisk udtrykt i svær adynami, irritabilitet og nedsat lugte- og smagssans.

Fra fordøjelseskanalen er fænomenerne med influenzaforgiftning også forskellige: nedsat appetit, afføringsretention og nogle gange, oftere hos små børn, diarré.

Tungen er belagt og let hævet, hvilket fører til forekomsten af ​​tandmærker langs kanterne. Temperaturen forbliver forhøjet i 3-5 dage og falder i mangel af komplikationer til normal gradvist eller falder kritisk.

Efter 1-2 dage kan der opstå en løbende næse, laryngitis og bronkitis. Blødning fra næsen er almindelig. Hosten er tør i starten og bliver til en hoste med opspyt. Vaskulære lidelser kommer til udtryk i form af lavt blodtryk, pulsustabilitet og rytmeforstyrrelser.

Ukompliceret influenza ender normalt inden for 3-5 dage, dog tager fuld bedring 1-2 uger.

Som enhver infektion kan influenza forekomme i milde, svære, hypertoksiske og fulminante former.

Sammen med dette kan viral influenza være ekstremt mild og spredes på benene og slutte inden for 1-2 dage. Disse former for influenza kaldes slettet.

Influenzainfektion kan forårsage komplikationer i forskellige organsystemer. Oftest hos børn kompliceres influenzaen af ​​lungebetændelse, mellemørebetændelse, som er ledsaget af feber, angst og søvnforstyrrelser.

Komplikationer fra det perifere nervesystem udtrykkes i form af neuralgi, neuritis, radiculitis.

Behandling:

Patienten skal forsynes med sengeleje og hvile. Sengeleje skal opretholdes i nogen tid, selv efter temperaturen falder. Systematisk ventilation af rummet, daglige varme eller varme bade, god ernæring - alt dette øger kroppens modstand mod at bekæmpe influenza.

Specifik behandling af viral influenza udføres under anvendelse af det anti-influenza polyvalente serum foreslået af A.A. Smorodintsev.

Blandt de symptomatiske midler mod hovedpine, muskel- og ledsmerter samt neurologiske smerter ordineres pyramidon, phenacetin og aspirin med koffein.

I tilfælde af alvorlig toksikose er intravenøs glukose ordineret. Ved ukompliceret influenza anvendes ikke antibiotika, pga De arbejder ikke længere på virussen. Til tør hoste er varm mælk med sodavand eller Borjomi nyttig.

Forebyggelse:

Patienter bør isoleres i hjemmet eller på hospitaler. Hvis patienten efterlades hjemme, er det nødvendigt at placere ham i et separat rum eller adskille hans seng med en skærm eller et lagen. Plejepersonale bør bære en gazemaske, der dækker næse og mund.

6. Skoldkopper.

Skoldkopper er en akut infektionssygdom forårsaget af en virus og karakteriseret ved et makulært blæreudslæt på hud og slimhinder.

Årsagsagenset til skoldkopper er en filtervirus og findes i skoldkopper og i blodet. Virussen er ustabil og udsat for forskellige miljøpåvirkninger og dør hurtigt.

Smittekilden er patienten, som er smitsom i udslætsperioden og ved inkubationens afslutning. Infektionen spredes af luftbårne dråber. Sygdommen overføres ikke gennem genstande.

Immunitet efter skoldkopper forbliver for livet. Inkubationsperioden varer fra 11 til 21 dage, med et gennemsnit på 14 dage.

I de fleste tilfælde begynder sygdommen straks, og kun nogle gange er der forstadier i form af en moderat temperaturstigning med symptomer på generel utilpashed. Prodromer kan være ledsaget af udslæt, der ligner skarlagensfeber eller mæslinger.

Ved en moderat temperaturstigning opstår et plettet udslæt af varierende størrelse på forskellige dele af kroppen - fra et knappenålshoved til en linse. I løbet af de næste par timer dannes en boble med gennemsigtigt indhold, omgivet af en rød rand, i stedet for pletterne. Skoldkoppeblærer (vesikler) er placeret på uændret hud, ømme og bløde at røre ved. Boblens indhold bliver hurtigt uklar, og selve boblen brister (2-3 dage) og bliver til en skorpe, som forsvinder efter 2-3 uger og normalt ikke efterlader noget ar. Udslættet og den efterfølgende dannelse af blærer kan være rigeligt og påvirke hele hovedbunden, stammen og lemmerne, mens de i ansigtet og de distale dele af lemmerne er mindre rigelige.

Forløbet af skoldkopper er normalt ledsaget af en let forstyrrelse i patientens almene tilstand. Hvert nyt udslæt forårsager en stigning i temperaturen til 38° og derover. Samtidig falder appetitten.

Ud over huden kan kyllingeudslæt påvirke slimhinderne i mundhulen, bindehinden, kønsorganerne, strubehovedet mv.

Behandling:

Sengetøj skal altid være rent. Tag varme bade (35°-37°) fra svage opløsninger af kaliumpermanganat. Patientens hænder skal være rene med kortklippede negle.

Individuelle bobler smøres med jod- eller kaliumopløsning, 1% alkoholopløsning af strålende grønt.

For purulente komplikationer forårsaget af sekundær infektion udføres behandlingen med antibiotika (penicillin, streptomycin, biomycin)

Forebyggelse:

En person, der er smittet med skoldkopper, skal isoleres derhjemme. Desinfektion udføres ikke, rummet er ventileret og udsat for våd rengøring.

7. Flåtbåren hjernebetændelse.

En akut virussygdom karakteriseret ved beskadigelse af den grå substans i hjernen og rygmarven. Reservoiret for smittekilder er vilde dyr (hovedsageligt gnavere) og ixodid-flåter. Infektion er mulig ikke kun ved at sutte på en skovflåt, men også ved at indtage mælken fra inficerede geder. Det forårsagende middel er en arbovirus. Infektionsporten er huden (hvis flåter suges på) eller slimhinden i fordøjelseskanalen (hvis der er fordøjelsesinfektion). Virussen trænger hæmatogent ind i centralnervesystemet og forårsager de mest udtalte ændringer i nervecellerne i de forreste horn i den cervikale rygmarv og i kernerne i medulla oblongata.

Inkubationsperioden er fra 8 til 23 dage (normalt 7-14 dage). Sygdommen begynder akut: kulderystelser, alvorlig hovedpine og svaghed vises. Efter hjernebetændelse kan varige konsekvenser forblive i form af slap lammelse af musklerne i nakke og skulderbælte.

Behandling:

Streng sengeleje:

til milde former - 7-10 dage,

for moderate tilfælde - 2-3 uger,

for svære - endnu længere.

Forebyggelse:

Når en skovflåt bider i et område, der er ugunstigt for encephalitis, er det nødvendigt at administrere anti-encephalitis gamma globulin. Ifølge indikationer udføres forebyggende vaccination.

8. Virologiens fremtid.

Hvad er udsigterne for udviklingen af ​​virologi i det 21. århundrede? I anden halvdel af det 20. århundrede var fremskridt inden for virologi forbundet med klassiske opdagelser inden for biokemi, genetik og molekylærbiologi. Moderne virologi er sammenflettet med succeserne fra grundlæggende anvendte videnskaber, så dens videre udvikling vil følge vejen for en dybtgående undersøgelse af det molekylære grundlag for patogeniciteten af ​​vira af nye hidtil ukendte patogener (pioner og virioner), arten og mekanismerne persistens af vira, deres økologi, udvikling af nye og forbedringer af eksisterende diagnostiske metoder og specifik forebyggelse af virussygdomme.

Der er i øjeblikket ikke noget vigtigere aspekt i virologi end forebyggelse af infektioner. I løbet af de 100 år, hvor videnskaben om vira og virussygdomme eksisterede, har vacciner undergået store forandringer, der går fra svækkede og dræbte vacciner fra Pasteurs tid til moderne gensplejsede og syntetiske vaccinepræparater. Denne retning vil fortsætte med at udvikle sig, baseret på fysisk-kemisk genteknologi og syntetiske eksperimenter med det mål at skabe polyvalente vacciner, der kræver minimale vaccinationer så tidligt som muligt efter fødslen. Kemoterapi vil udvikle sig, en tilgang relativt ny inden for virologi. Disse lægemidler er indtil videre kun nyttige i isolerede tilfælde.

III. Konklusion.

Menneskeheden står over for mange komplekse uløste virologiske problemer: skjulte virusinfektioner, vira og tumorer osv. Virologiens udviklingsniveau i dag er imidlertid sådan, at der helt sikkert vil blive fundet midler til at bekæmpe infektioner. Det er meget vigtigt at forstå, at vira ikke er et element, der er fremmed for den levende natur, de er en nødvendig komponent i biosfæren, uden hvilken tilpasning, evolution, immunforsvar og andre interaktioner mellem levende objekter og deres miljø sandsynligvis ville være umulige. Ved at forstå virussygdomme som tilpasningspatologier bør kampen mod dem være rettet mod at forbedre immunsystemets status og ikke at ødelægge vira.

Analyse af forskellige litterære kilder og statistiske data gjorde det muligt for os at drage følgende konklusioner:

vira er autonome genetiske forbindelser af struktur, der ikke er i stand til at udvikle sig uden for cellen;

3) kommer i en række forskellige former og enkel sammensætning.

Referencer:

1. Store sovjetiske encyklopædi: T.8 / Udg. B.A. Vvedensky.

2. Denisov I.N., Ulumbaev E.G. Directory - en vejledning til en praktiserende læge - M.: Medicin, 1999.

3. Zverev I.D. En bog til læsning om menneskelig anatomi, fysiologi og hygiejne - M.: Education, 1983.

4. Luria S. et al. Generel virologi - M.: Mir, 1981.

6. Pokrovsky V.I. Populær medicinsk encyklopædi - M.: Onyx, 1998.

7.Tokarik E.N. Virologi: nutid og fremtid // Biologi i skolen - 2000. - Nr. 2-3.