Virolojinin tarihi. Virüslerin sınıflandırılmasının ilkeleri Viroloji, virüslerin morfolojisini, fizyolojisini, genetiğini, ekolojisini ve evrimini inceleyen bilimdir.

SORU NO: 1 “VİRÜSOLOJİNİN TARİHİ. İNSAN HAYVANLARIN BULAŞICI PATOLOJİSİNDE VİRÜSLERİN ROLÜ."

İlk dönemde insanlar hastalığın mahiyetini bilmiyorlardı, sadece tarif ediyorlardı. 18. yüzyılda doktor Gener, çiçek hastalığına karşı tedavi edilen bir aşı geliştirdi. Pasteur'e daha fazla itibar ediliyor; onun zamanında kuduz vardı; Kuduzun ısırma yoluyla bulaştığını kanıtladı. Besin ortamında hiçbir şey büyümedi. Pasteur'ün çalışmalarından sonra bulaşıcı hastalıkların minik organizmalardan (mikroplar) kaynaklandığı tespit edildi. Tek bir bakteriyel araştırma yöntemi bile varlığı çiçek hastalığı, şap hastalığı ve veba ile ilişkilendirilen mikropların izole edilmesini mümkün kılmadı.

1931'de tavuk embriyolarının yetiştirilmesine yönelik bir yöntem önerildi. Bu yöntem oldukça hassastır; spontan virüslerin neden olduğu enfeksiyon hariçtir. Virolojinin en hızlı gelişimi 1948 yılından sonra başlamıştır. Enders, tek katmanlı hücre ve doku kültürleri yöntemini önerdi. Bu yöntem birçok virüsün incelenmesini ve aşı elde edilmesini mümkün kıldı. Virüslerin incelenmesi, virüsleri ve bunların neden olduğu hastalıkları inceleyen bağımsız viroloji bilimi olarak oluşturuldu. Genel viroloji, virüslerin doğasını ve kökenini, yapısını ve kimyasal bileşimini, fizikokimyasal faktörlere direncini inceler; konusu aynı zamanda virüs ve hücre etkileşimi, virüslerin genetiği, virüslere karşı bağışıklık oluşumunun özellikleri, teşhis ve korunmanın genel prensipleridir. . Genel viroloji ile aynı konuları inceliyor. Nesneler olarak virüslerin ölçü birimleri vardır.

SORU 2 “GENEL VE ​​ÖZEL VETERİNER VİRÜSOLOJİSİNİN KONUSU VE GÖREVLERİ. VİRÜSLERİN KEŞFİNİN TARİHİ. YERLİ VİRÜSOLOJİNİN BAŞARILARI".

Viroloji, virüslerin doğasını, kökenini ve neden oldukları hastalıkları inceleyen bir bilimdir. Genel viroloji, virüslerin doğasını ve kökenini, yapısını ve kimyasal bileşimini, fizikokimyasal faktörlere direncini inceler; konusu aynı zamanda virüs ve hücre etkileşimi, virüslerin genetiği, virüslere karşı bağışıklık oluşumunun özellikleri, teşhis ve korunmanın genel prensipleridir. . Genel viroloji ile aynı konuları inceliyor. Nesneler olarak virüslerin ölçü birimleri vardır. Dönem - insanlar hastalığın özünü bilmiyorlardı, sadece onu tanımladılar. 18. yüzyılda doktor Gener, çiçek hastalığına karşı tedavi edilen bir aşı geliştirdi. Pasteur'e daha fazla itibar ediliyor; onun zamanında kuduz vardı; Kuduzun ısırma yoluyla bulaştığını kanıtladı. Besin ortamında hiçbir şey büyümedi. Pasteur'ün çalışmalarından sonra bulaşıcı hastalıkların minik organizmalardan (mikroplar) kaynaklandığı tespit edildi. Tek bir bakteriyel araştırma yöntemi bile varlığı çiçek hastalığı, şap hastalığı ve veba ile ilişkilendirilen mikropların izole edilmesini mümkün kılmadı.

Doğası gereği mikroplardan farklı bir patojenin varlığı fikri Pasteur'un aklına gelmedi. Keşfedilen ilk virüs tütün bitkilerini (tütün mozaiği) etkilemiştir. O dönemde bu virüs büyük ekonomik zarara neden olmuştu. Bilim insanları bu hastalığın nedenini bulmak için yola çıktı. Bu iş D.I.'ye emanet edildi. Ivanovsky.

Gözlemler sonucunda D.I. Ivanovsky ve V.V. Polovtsev, 1886 yılında Hollanda'da A.D. Mayer tarafından mozaik adıyla tanımlanan tütün hastalığının bir değil, aynı bitkinin tamamen farklı iki hastalığı olduğunu öne sürdü: bunlardan biri fındıktır. Etken maddesi mantar olan orman tavuğu, diğeri ise bilinmeyen bir kökene sahiptir. D.I. Ivanovsky, Nikitin Botanik Bahçesi'nde (Yalta yakınında) ve Bilimler Akademisi botanik laboratuvarında tütün mozaiği hastalığı üzerine çalışmalarına devam ediyor ve tütün mozaiği hastalığının Chamberlant filtrelerinden geçen bakterilerden kaynaklandığı sonucuna varıyor. yapay yüzeylerde büyüyemez. Mozaik hastalığının etken maddesi Ivanovsky tarafından "filtrelenebilir" bakteri veya mikroorganizmalar olarak adlandırılıyor, çünkü özel bir virüs dünyasının varlığını hemen formüle etmek çok zordu. Tütün mozaiği hastalığına neden olan etkenin hastalıklı bitkilerin dokularında mikroskopla tespit edilemediğini ve yapay besin ortamlarında yetiştirilmediğini vurgulayan Dr.

Virolojiyi kurdu. Virolojiye olan ilginin artması viral hastalıkların ön planda olmasından kaynaklanmıştır. Hastalıkların yüzde 75'i virüslerden kaynaklanıyor. Çok büyük ekonomik zarara neden oluyorlar. Ivanovsky'nin keşfinin ardından Danimarkalı bilim adamı Beyering, Ivanovsky'nin deneylerini tekrarlayarak mozaik patojenin porselen filtrelerden geçtiğini doğruladı ve bunun sıvı, yaşayan bir bulaşıcı olduğunu kanıtladı. Virüs ona adını verdi. 1903 yılında domuz nezlesi ve bulaşıcı aneminin etken maddeleri keşfedildi. 1915-1917'de bakteriyel virüsler bakteriyofajlardı; 40'lı yılların sonuna gelindiğinde 40'tan fazla virüs keşfedildi ve son 40 yılda 500'den fazla viral hastalık biliniyordu. Bilim insanları viral ajanları elde etmek için yola çıktı.

1931'de tavuk embriyolarının yetiştirilmesine yönelik bir yöntem önerildi. Bu yöntem oldukça hassastır; spontan virüslerin neden olduğu enfeksiyon hariçtir. Virolojinin en hızlı gelişimi 1948 yılından sonra başlamıştır. Enders, tek katmanlı hücre ve doku kültürleri yöntemini önerdi.

SORU No: 3 “VİRÜSLERİN MODERN SINIFLANDIRILMASI İLKELERİ, ANA VİRÜS GRUPLARI.”

Virüslerin modern sınıflandırması omurgalılar, omurgasızlar, bitkiler ve protozoa virüsleri için evrenseldir. Virionların temel özelliklerine dayanmaktadır; bunların önde gelenleri nükleik asit, morfoloji, genom stratejisi ve AG özelliklerini karakterize edenlerdir. Benzer AG özelliklerine sahip virüsler aynı türde nükleik asit, benzer morfolojik ve biyofiziksel özelliklere sahip olduğundan temel özellikler 1. sıraya yerleştirilmiştir. Yapısal özelliklerle birlikte dikkate alınan sınıflandırma için önemli bir özellik, virüsün kullandığı üreme yöntemi olarak anlaşılan, genetik materyalinin özelliklerine göre belirlenen viral genom stratejisidir. AG ve diğer biyolojik özellikler, bir türün oluşumunun altında yatan ve cins içinde önem taşıyan özelliklerdir. Modern sınıflandırma aşağıdaki ana kriterlere dayanmaktadır: 1) nükleik asit türü (RNA veya DNA), yapısı (iplik sayısı); 2) bir lipoprotein zarının varlığı; 3) viral genom stratejisi; 4) viryonun boyutu ve morfolojisi, simetri türü, kapsomer sayısı; 5) genetik etkileşim olgusu; 6) duyarlı konakçı aralığı; 7) hücrelerdeki patolojik değişiklikler ve hücre içi kapanımların oluşumu dahil patojenite; 8) coğrafi dağılım; 9) iletim yöntemi; 10) AG'nin özellikleri. Listelenen özelliklere göre virüsler ailelere, alt ailelere, cinslere ve türlere ayrılır. Virüs adlarını düzenlemek için bir takım kurallar geliştirilmiştir. Aile isimleri "viridae" "virinae" "virüs" ile bitmektedir. Ad, olağan Latince gösterimlere, sayılara ve tür tanımlamalarına, kısaltmalara, harflere ve bunların kombinasyonlarına izin verir.

SORU NO: 4 “VİRÜSLERİN KİMYASAL BİLEŞİMİ VE FİZİKSEL YAPISI. VİRYON KAVRAMI, KAPSİTLER, KAPSomerler. SİMETRİ TÜRÜ.

Virüsler, DNA veya RNA gibi bir genetik materyal parçasından oluşur. çekirdek virüs ve bu çekirdeği çevreleyen koruyucu bir protein kabuk kapsid. Tamamen oluşmuş bulaşıcı bir parçacık denir virüs. Uçuk veya grip virüsleri gibi bazı virüslerde ayrıca ek bir lipoprotein bulunur. kabuk konakçı hücrenin plazma zarından kaynaklanır. Diğer tüm organizmalardan farklı olarak virüslerin hücresel bir yapısı yoktur. Virüslerin kabuğu genellikle aynı tekrar eden alt birimlerden (kapsomerlerden) oluşur. Kapsomerler, kristalleşme yeteneğine sahip, yüksek derecede simetriye sahip yapılar oluşturur. Bu, hem X ışınlarının kullanımına dayalı kristalografik yöntemleri hem de elektron mikroskobunu kullanarak yapıları hakkında bilgi elde etmeyi mümkün kılar. Virüs alt birimleri konakçı hücrede ortaya çıktığı anda, hemen kendi kendine birleşerek bütün bir virüsü oluşturma yeteneğini sergilerler. Kendi kendine toplanma aynı zamanda diğer birçok biyolojik yapının da karakteristiğidir ve biyolojik olaylarda temel öneme sahiptir. Viral partikülün vazgeçilmez bir bileşeni iki nükleik asitten, protein ve kül elementlerinden biridir. Bu üç bileşen istisnasız tüm virüslerde ortaktır, geri kalan lipitler ve karbonhidratlar ise tüm virüslerde bulunmaz. Protein ve nükleik asidin yanı sıra lipitler ve karbonhidratlar da içeren virüsler, kural olarak karmaşık virüsler grubuna aittir. Nükleoprotein "çekirdeğini" oluşturan proteinlere ek olarak viryonlar, enfekte olmuş hücrelerin plazma zarlarına yerleştirilmiş ve hücreden ayrıldığında veya hücreden "tomurcuklandığı" zaman viral parçacığı kaplayan virüse özgü proteinler de içerebilir. onun yüzeyi. Ek olarak, bazı zarflı virüsler, zarf ile nükleokapsid arasında bir alt zar matris proteinine sahiptir. Virüse özgü proteinlerin ikinci büyük grubu, kapsid olmayan viral proteinlerden oluşur. Bunlar esas olarak virion nükleik asitlerinin sentezi ile ilgilidir. Saflaştırılmış viral preparatlarda bazen bulunan dördüncü bileşen karbonhidratlardır (nükleik asidin şeker içeriğini aşan bir miktarda). İnfluenza virüsünün ve klasik kümes hayvanı vebasının temel gövdeleri %17'ye kadar karbonhidrat içerir.

Morfolojik özelliklere göre tüm virüsler ikiye ayrılır:

1) Çubuk şeklinde

2) Küresel

3)Küboidal

4) Kulüp şeklinde

5) İplik benzeri

Ana olanlar, ara formda filamentli olan ilk 4'tür.

Simetri türü kavramı.

Kapsomerlerin protein kabuğundaki konumuna bağlı olarak tüm virüsler 3 gruba ayrılır:

1) Spiral tip

2) Kübik tip

3) Kombine

1 – Büyük boyutlu ve yüksek polimorfizmi olan virüslere sahiptir. Kapsomerleri farklı çaplarda spiral şeklinde düzenlenmiştir ve bu nedenle çoğunlukla küresel bir kabuğa sahiptirler, bazen ikinci bir kabukla (peplos) kaplanırlar. Nükleik asit bir yay gibi bükülür ve protein molekülleri şeklinde bobinler halinde düzenlenir.

2 – bu tür virüslerde kapsomerler düzenli bir çokyüzlü (ikosahedron) şeklinde düzenlenmiştir. Bir top şeklinde bükülür ve ortada bulunur.

Çoğu virüste kapsomerler 5-6 yönlü prizma şeklindedir.

3 – bu tür simetri bakteriyofajların karakteristiğidir. Tüm bakteriyofaj çeşitlerinin kübik simetrili bir kafası ve spiral yapılı bir kuyruğu vardır. Başın yüzeyi homojen protein alt birimlerinden oluşan bir protein kabuğu ile kaplıdır. Nükleik asitlerden biri kafa boşluğunda bulunur. Kuyruk ucu içi boş bir çubuktan oluşur. Ucunda altıgen bir plaka ile sonlanmaktadır. Kuyruk ucu, tüm şaftı kaplayan bir kılıfın takıldığı bir yaka ile çevrelenmiştir.

Virüslerin kimyasal bileşimi.

Tuzlama, adsorpsiyon, ultrafiltrasyon ve çökeltme yoluyla virüslerin saflaştırılması ve konsantrasyonu yöntemleri, kimyasal bileşimin incelenmesini mümkün kıldı. Virüsler proteinleri ve nükleik asitlerden birini içerir. Büyük ve orta büyüklükteki virüsler ayrıca lipitler, karbonhidratlar ve diğer bazı organik ve inorganik bileşikleri de içerir.

Proteinin ve ilgili lipitlerin ve karbonhidratların çoğu membrandır. Virüsleri oluşturan maddelerin hem kimyasal hem de biyolojik özellikleri vardır.

Proteinler – ana kısım (20 AA).

Viral proteinlerin önemi koruyucu işlevleridir (kapsid oluşumu).

Virüs, protein niteliğindeki (adsorpsiyon, hedefleme işlevi) ve bağışıklık özelliklerine sahip (antijenik özellikleri belirleme) enzimler içerir.

Viral proteinlerin özellikleri:

1. Kendiliğinden toplanma özelliğine sahiptirler (biriktikçe viral proteinler toplanır).

2. Fiziksel ve kimyasal etkenlere karşı seçici duyarlılığa sahiptirler.

3. Proteolitik enzimlerin etkisi altında hidrolize maruz kalmayın.

Proteinler virion kütlesinin %50-75'ini oluşturur.

Viral genle enfekte olmuş hücreler, 2 protein grubunun sentezini kodlar:

Yapısal===, ===yapısal olmayan===

1.Yapısal – virionun organizasyonunun karmaşıklığına bağlı olarak viriondaki miktar. Grup 2'nin yapısal proteinleri bölünmüştür: a. kapsid b. süperkapsid (peplomerler).

Karmaşık virüsler her iki protein tipini de içerir. Bu tür virüslerin bir kısmı, kapsidlerinde transkripsiyon ve replikasyonu gerçekleştiren enzimler içerir.

Süperkapsid proteinleri dikenler oluşturur (7-10 nm'ye kadar). Glikoproteinlerin ana işlevi spesifik hücre reseptörleriyle etkileşimdir. Diğer bir fonksiyon ise hücresel ve viral membranların sentezine katılımdır.

“Adres fonksiyonu” evrim sürecinde geliştirilen; hassas bir hücre arayışıdır.

Hücre üzerindeki özel reseptörleri tanıyan özel proteinlerin varlığıyla gerçekleşir.

Yapısal olmayan (geçici) viral proteinler, viral proteinlerin öncüleri, DNA/RNA polimeraz sentez enzimleri, viral genomun transkripsiyonunu ve replikasyonunu sağlayan, düzenleyici proteinler, polimerazlardır.

Lipitler – karmaşık virüslerde süperkapsidde bulunur (yüzde 15 ila 35). Lipid bileşeni viral partikülün yapısını stabilize eder.

Karbonhidratlar – %10-13'e kadar. Glikoproteinlerin bir parçasıdırlar. Protein yapısı ve işlevinde önemli bir rol oynar.

Nükleik asitler sabit bir bileşendir. Karmaşık polimer bileşikleri. 1869 yılında Miescher tarafından lökositlerden izole edilmiştir. Bakterilerden farklı olarak sadece 1 amino asit içerirler. Yapısal olarak nükleik asitler farklıdır.

1. Açık uçlu doğrusal çift sarmal.

2. Kapalı uçlu doğrusal çift sarmal.

3. Doğrusal tek spiral.

4.Halka tek spiral.

1. Doğrusal tek spiral.

2.Doğrusal parçalanmış.

3.Halka tek spiral.

5. Doğrusal çift sarmal parçalanmış.

SORU 5 “VİRÜSLERİN FİZİKSEL VE ​​KİMYASAL FAKTÖRLERE KARŞI DİRENCİ. BU ÖZELLİKLERİN PRATİK KULLANIMI."

Farklı virüs gruplarının dış ortamda farklı dirençleri vardır. En az dirençli virüsler lipoprotein membranlara sahip olanlardır; en dirençli olanlar ise izometrik virüslerdir. Böylece ortomiksovirüsler ve paramiksovirüsler yüzeylerde birkaç saat içinde etkisiz hale getirilirken, çocuk felci virüsleri, adenovirüsler ve reovirüsler birkaç gün boyunca bulaşıcı kalır. Ancak bu kuralın istisnaları da vardır. Böylece çiçek hastalığı virüsü kurumaya karşı dirençlidir ve dışkıda haftalarca ve aylarca varlığını sürdürür. Hepatit B virüsü olumsuz dış etkenlere karşı dayanıklıdır ve kısa süreli kaynatma sonrasında bile serumdaki aktivitesini korur. Virüslerin ultraviyole ve X-ışını radyasyonuna duyarlılığı öncelikle genomlarının boyutuna bağlıdır. Virüslerin formaldehit ve genetik materyali etkisiz hale getiren diğer kimyasallara karşı duyarlılığı, protein kutusundaki nükleik asidin paketlenme yoğunluğu, genomun boyutu ve dış kabukların varlığı veya yokluğu gibi birçok duruma bağlıdır. Lipoprotein zarflı virüsler eter, kloroform ve deterjanlara karşı duyarlıyken, basit yapılı izometrik ve çubuk şeklindeki virüsler bunların etkilerine karşı dirençlidir. Virüslerin önemli bir özelliği pH'a duyarlılıktır. Asidik pH değerlerine (2,2-3,0) dayanıklı virüsler vardır, örneğin bağırsak enfeksiyonlarına neden olan ve beslenme yoluyla vücuda giren virüsler vardır. Ancak çoğu virüs asidik ve alkali pH değerlerinde etkisiz hale gelir.

SORU 6 “VİRAL NÜKLEİK ASİTLER. ÇEŞİTLERİ, YAPILARI, TEMEL ÖZELLİKLERİ.

Viral DNA molekülleri, tüm uzunlukları boyunca doğrusal veya dairesel, çift sarmallı veya tek sarmallı veya yalnızca uçlarda tek sarmallı olabilir. Çoğu nükleotid dizisi viral genomda yalnızca bir kez meydana gelir, ancak uçlarda tekrar eden veya fazlalık bölgeler bulunabilir. Viral DNA'nın terminal bölgelerinin yapısında da genom boyutunda büyük farklılıklar vardır. Hayvan virüsleri DNA'larında neredeyse hiçbir değişikliğe uğramaz. Örneğin, konakçı hücrelerin DNA'sı birçok metillenmiş baz içermesine rağmen, virüsler en iyi ihtimalle genom başına yalnızca birkaç metil grubuna sahiptir. RNA virüsü viryonlarının boyutları büyük farklılıklar gösterir - pikornavirüslerde 7,106 daltondan retrovirüslerde >2,108 daltona; ancak RNA'nın boyutu ve dolayısıyla içerdiği bilgi miktarı çok daha az farklılık gösterir. Picornavirüs RNA'sı muhtemelen bilinenlerin en küçüğüdür ve yaklaşık 7.500 nükleotid içerir; paramiksovirüs RNA ise neredeyse 15.000 nükleotid ile belki de en büyüğüdür. Görünüşe göre hepsi bağımsız olarak kopyalanıyor. Nükleik asitler sabit bir bileşendir. Karmaşık polimer bileşikleri. 1869 yılında Miescher tarafından lökositlerden izole edilmiştir. Bakterilerden farklı olarak sadece 1 amino asit içerirler. Yapısal olarak nükleik asitler farklıdır.

1. Doğrusal tek sarmal 2. Doğrusal parçalanmış 3. Halka tek sarmal 5. Doğrusal çift sarmal parçalanmış.

SORU No. 7 “VİRÜS PROTEİNLERİ, ÖZELLİKLERİ (NÖRAMİNİDAZLARIN VE MİKSOVİRÜS ANTİJENLERİNİN ÖZELLİKLERİ).”

Son derece heterojen bir biyolojik makromolekül sınıfını temsil ederler. AK'ler proteinlerin temel bileşenleridir. Alfa-AA nispeten basit organik moleküllerdir. AK'nin moleküler ağırlığı 90-250D aralığındadır. Polipeptit 15 ila 2000 AA arasında içerebilir. 100-400 AA'dan oluşan, 20 ila 700 kDa ağırlığındaki en yaygın polipeptitler. Virüs genomu tarafından kodlanan proteinler olan viral proteinler, enfekte olmuş hücrede sentezlenir. Lokalizasyon işlevine, sentezin yapısına ve düzenlenmesine bağlı olarak viral proteinler yapısal ve yapısal olmayan olarak ikiye ayrılır; enzimler, öncüler, histon benzeri kapsid proteinleri; zar, zar ötesi.

Yapısal proteinler– olgun hücre dışı viryonların parçası olan tüm proteinler. Virionda bir dizi işlevi yerine getirirler: 1) NK'nin dış zararlı etkilerden korunması; 2) enfeksiyonlarının ilk aşamasında hassas hücrelerin zarı ile etkileşim; 3) kapside paketlenmesi sırasında ve sonrasında viral NK ile etkileşim; 4) kapsidin kendi kendine birleşmesi sırasında birbirleriyle etkileşim; 5) virüsün hassas bir hücreye nüfuz etmesini organize etmek. Bu 5 fonksiyon, istisnasız tüm virüslerin yapısal proteinlerinde doğaldır. Tüm fonksiyonlar tek bir protein tarafından gerçekleştirilebilir. 6) NK'nin kurtarılması sırasında yok edilebilme yeteneği; 7) viryonun oluşumu sırasında enfekte olmuş hücreden çıkışın organizasyonu. 8) hücre zarlarının “erime” ve füzyonunun organizasyonu.

Proteinler ayrıca belirli biyokimyasal reaksiyonları katalize etme yeteneğine de sahip olabilir: 9) RNA'ya bağımlı RNA polimeraz aktivitesi. Bu işlev, viryonları mRNA rolünü oynamayan RNA içeren tüm virüslerin yapısal proteinleri tarafından gerçekleştirilir; 10) RNA'ya bağımlı DNA polimeraz aktivitesi - bu fonksiyon, revertazlar adı verilen özel retroviral proteinler tarafından gerçekleştirilir; 11) enfekte olmuş hücredeki kapsidden salındıktan sonra viral NK'nin korunması ve stabilizasyonu.

Belirli bir proteinin viryondaki konumuna bağlı olarak, protein grupları ayırt edilir: A) Kapsid proteinleri - karmaşık biçimde organize edilmiş virüslerin viryonlarında, bu proteinler yalnızca 2-3 işlevi yerine getirebilir - NK'nin korunması, kendi kendine yetme yeteneği -NK'nın serbest bırakılması sırasında toplayın ve imha edin. Basit virüslerin viryonlarında işlevleri genellikle daha çeşitlidir. B) Viral süperkapsid kabuğunun proteinleri - rolleri esas olarak viryonların tomurcuklanmasını organize etmeye, kendi kendine toplanma yeteneğine, hassas hücrelerin zarıyla etkileşime girmeye, hassas bir hücreye penetrasyonu organize etmeye indirgenmiştir. C) Matriks proteinleri, bazı virüslerin süperkapsid kabuğunun hemen altında yer alan virionların ara tabakasının proteinleridir. Ana işlevleri: tomurcuklanmayı düzenlemek, hidrofobik etkileşimler nedeniyle viryonun yapısını stabilize etmek, süperkapsid proteinlerinin kapsid proteinleriyle bağlantısına aracılık etmek. D) Viral çekirdek proteinleri - esas olarak enzimlerle temsil edilir. Çok katmanlı kapsidlere sahip virüsler de koruyucu bir role sahip olabilir. E) Virionların en iç katmanındaki NK ile ilişkili proteinler.

Yapısal olmayan proteinler– viral genom tarafından kodlanan ancak viryona dahil olmayan tüm proteinler. Yapısal proteinlerle karşılaştırıldığında tanımlanması ve izolasyonu sırasında ortaya çıkan kıyaslanamayacak kadar büyük zorluklar nedeniyle, bunlar üzerinde daha az çalışılmıştır. Yapısal olmayan proteinler, işlevlerine bağlı olarak 5 gruba ayrılır: 1) Viral genom ekspresyonunun düzenleyicileri - viral NK'yi doğrudan etkiler, diğer viral proteinlerin sentezini engeller veya tam tersine sentezlerini tetikler. 2) Viral proteinlerin öncüleri - karmaşık biyokimyasal süreçlerin bir sonucu olarak onlardan oluşan diğer viral proteinlerin öncüleridir. 3) Fonksiyonel olmayan peptitler – enfekte olmuş bir hücrede oluşur. 4) Hücresel biyosentez inhibitörleri ve hücre yıkımının indükleyicileri - bunlar arasında hücresel DNA ve mRNA'yı yok eden, hücresel enzimleri değiştiren ve onlara virüse özgü aktivite veren proteinler bulunur. 5) Viral enzimler - viral genom tarafından kodlanan ancak viryonlara dahil olmayan enzimler.

SORU 8 “VİRÜS ÜREME DÖNEMLERİ VE AŞAMALARI. ETKİLEŞİM TÜRLERİ.”

Virüslerin konak hücrelerle etkileşimi ve virüs çoğalması.

Virüsler hücrede karmaşık bir gelişim döngüsünden geçer. Virüslerin morfogenezi, bu gelişimin ana aşamasını temsil eder ve virüs gelişiminin sonucu olarak bir viryonun oluşumuna yol açan biçimlendirici süreçlerden oluşur. Virüsün gelişiminin Ontogenezi ve çoğalması genom tarafından düzenlenir.

50'li yıllarda virüsün çoğalmasının üreme yoluyla gerçekleştiği tespit edildi. nükleik asitlerin ve proteinlerin çoğaltılması ve ardından virion toplanması. Bu işlemler hücrenin farklı kısımlarında, örneğin çekirdekte ve sitoplazmada (ayırıcı üreme modu) meydana gelir. Viral üreme, insan, hayvan, böcek ve bakteri hücrelerinde yabancı bir enfeksiyonun benzersiz bir ifade şeklidir.

Morfogenez, morfogenetik genler tarafından düzenlenir. Virionun üst yapısının karmaşıklığı ile morfogenezi arasında doğru orantılı bir ilişki vardır. Viryonun organizasyonu ne kadar karmaşıksa, virüsün gelişme yolu da o kadar uzun olur. Tüm bu süreç özel enzimlerin yardımıyla gerçekleştirilir. Çünkü Virüslerin kendi metabolizmaları yoktur ve bu nedenle enzimlere ihtiyaç duyarlar. Ancak virüslerde kökenleri ve fonksiyonel önemleri farklı olan 10'dan fazla enzim bulunmuştur.

Kökenine göre: viryon, virüs kaynaklı, hücresel, virüsler tarafından değiştirilmiş. Birincisi birçok DNA ve RNA virüsünün bir parçasıdır. DNA'ya bağımlı RNA polimeraz, protein kinaz, ATPaz, ribonükleaz, RNA'ya bağımlı RNA polimeraz, eksonükleaz ve diğerleri.

Virion formları şunları içerir: hemoğlutinin ve nöraminidaz, lizozim.

Virüs indükleyici enzimler, yapısı genomda kodlanan enzimlerdir ve sentez, konakçı ribozom - erken virion proteinleri üzerinde meydana gelir.

Hücresel - konakçı hücrenin enzimlerini içerir, virüse özgü değildir, ancak virüslerle etkileşime girdiğinde aktivite değiştirilebilir.

Fonksiyonel önemlerine göre enzimler 2 gruba ayrılır:

— Çoğaltma ve transkripsiyona katılmak;

— Virüsün hücreye nüfuz etmesine ve olgun virionların hücreden çıkışına katkıda bulunan nöraminidaz, lizozim ve ATPaz.

Virionların çoğaltılması aşamaların değişmesiyle karakterize edilir:

Modern verilere göre üreme döngüsünde 3 ana dönem vardır:

1. Başlangıç ​​(hazırlık) 2. Orta (gizli) 3. Final (final)

Her dönem birkaç aşamadan oluşur:

İlk aşama

1. Virüsün hücreye adsorpsiyonu.

2. Hücreye nüfuz etme.

3.Deproteinizasyon (nükleik asit salınımı).

İkinci aşama

1. Erken viral proteinlerin biyosentezi

2. Viral bileşenlerin biyosentezi

Üçüncü sahne

1. Olgun viryonların oluşumu

2. Olgun viryonların hücreden çıkışı.

1.Adsorpsiyon, yükler arasındaki farkın bir sonucu olan fiziksel ve kimyasal bir işlemdir. Bu aşama tersine çevrilebilir; sonucu ortamın asitliğinden, sıcaklıktan ve diğer süreçlerden etkilenir.

Virüs adsorpsiyonundaki ana rol, virüsün tamamlayıcı hücre reseptörleri ile etkileşimi tarafından oynanır. Kimyasal yapıları gereği mukopoliproteinlere aittirler. Adsorpsiyon hızı, reseptörlere etki eden hormonlardan etkilenir. Hücrelerin virüslere karşı farklı hassasiyetinden dolayı virüsün adsorpsiyonu gerçekleşmeyebilir. Hassasiyet ise şu şekilde belirlenir:

Hücre zarında ve sitoplazmada, zarı yok edebilen ve nükleik asit salgılayabilen enzimlerin varlığı.

Viral bileşenlerin sentezini sağlayan enzimlerin varlığı.

2. Virüsün hücreye nüfuz etmesi:

Virüs 3 yoldan nüfuz eder - doğrudan enjeksiyonla (fajlarda olduğu gibi); hücre zarını yok ederek (füzyon yolu - bitki virüsleri için tipiktir); pinositoz (omurgalı virüslerinin özelliği) ile.

3. DNA içeren virüslerin çoğalması.

4. Viryonun hücreden çıkışı:

1. Hücre zarından sızarlar ve hücre bileşenlerini içeren bir süper kapsid ile kaplanırlar: lipitler, polisakkaritler. Bu durumda hücre yaşamsal aktivitesini sürdürür ve ölür. Bazı durumlarda üreme sürecinde süreçler birkaç yıl sürebilir, ancak hayati aktivite korunur. Bu yöntemle olgun virionlar yavaş yavaş ve nispeten uzun bir süre boyunca hücreyi terk eder. Bu yol, çift kabuğa sahip karmaşık virüsler için tipiktir.

Anormal virüsler.

Üreme sürecinde çeşitli anormal virüsler oluşur. Akademisyen Zhdanov'un çabalarıyla son yıllarda, bir RNA virüsü ve kapsiti oluşturan hücre proteinlerinden oluşan psödovirüsler keşfedildi. Bulaşıcı özelliklere sahiptirler, ancak kapsidin özelliği nedeniyle bu virüse yanıt oluşturan antikorların etkisine duyarlı değildirler.

Bu tür virüslerin oluşumu, vücutta spesifik antikorların varlığında uzun süreli virüs taşınmasıyla açıklanmaktadır.

Bu tür viryonların oluşma nedenleri şunlardır:

1. Yüksek çokluk, bunun sonucunda hücrenin tüm yavrularına enerji materyali sağlayamaması.

2. İnterferonun etkisi - DNA ve RNA virüslerinin sentezini etkiler.

SORU No: 9 “DNA İÇEREN VİRÜSLERİN BİYOsentezİNİN ÖZELLİKLERİ. TRANSKRİPSİYON VE YAYIN KAVRAMI.”

Transkripsiyon - DNA'nın RNA'ya yeniden yazılması - ürünleri mRNA'nın biyosentezi olan RNA polimeraz enzimi kullanılarak gerçekleştirilir. Çekirdekte üreyen DNA virüsleri, transkripsiyon için hücresel polimerazı kullanır. RNA içeren virüsler genomun kendisi tarafından üretilir. Bazı RNA içeren virüslerde genetik bilginin aktarımı RNA-RNA-protein formülüne göre gerçekleştirilir. Bu virüs grubu pikornovirüsleri ve kornovirüsleri içerir.

Protein sentezi, RNA'ya çevirinin bir sonucu olarak ortaya çıkar.

DNA içeren virüslerdeki enzimlerin etkisi altında mRNA sentezlenir ve mRNA, duyarlı hücrenin ribozomlarına gönderilir. Erken virion proteinlerinin sentezi hücrenin ribozomlarında başlar (hücresel metabolizmayı bloke eden enzimlerin özelliklerine sahiptir).

Erken virion proteinleri erken virion asitlerinin oluşumuna yol açar.

Erken virion proteinleri biriktikçe kendilerini bloke ederler ve süreç ribozomal aparatta yeniden düzenlenir. Viryonlar toplanır ve yeni oluşan viryonlar ana hücreyi terk eder.

SORU 10 “ETKİLEŞİM TÜRLERİ, VİRÜSÜN HÜCRE İLE ETKİLEŞİMİNİN ANA SONUÇLARI.”

1) Üretken etkileşim - bir hücrede çoğalan virüsler yeni bir nesil oluşturduğunda 2) Abortif - üreme döngüleri bir aşamada kesintiye uğradığında. 3) Litik reaksiyon - virüsün oluşumundan sonra hücre öldüğünde. 4) Gizli reaksiyon - enfekte olmuş bir hücre canlılığını uzun süre koruduğunda. 5) Entegrasyon - virüslerin ve hücrelerin genomları birleştirildiğinde. Bu durumda genomların çoğalması hücrelerde meydana gelir ve genel düzenlemeye tabidir. Virüslerin çoğalması, etkilenen hücrelerde hücrelerin fonksiyonel ve morfolojik bozukluklarıyla ifade edilen patolojik değişikliklere neden olur. Çeşitli virüsler ve hücreler arasındaki etkileşim süreçlerinin olası sonuçları 5 türe ayrılabilir: 1) Hücrelerin dejenerasyonu - onların ölümüne yol açar. Bu durumda hücre düzensiz yuvarlak bir şekil alır, yuvarlanır, yoğunlaşır, sitoplazmada granülerlik ortaya çıkar, çekirdeklerin kırışması ve parçalanması ortaya çıkar. 2. Simplastların oluşumu çok çekirdeklidir. Hücre dışında birikimler. maddeler. 3) Hücre dönüşümü – yani. rastgele üç boyutlu büyüme odaklarının oluşumu. Bu odaklardaki hücreler, sürekli olarak birbirlerinin (tümörlerin) üzerinde birikerek yeni kalıtsal özellikler kazanır. 4. Varış. viral partiküle karşı hücre reaksiyonunun ürünleri olan hücre dışı kapanımlar. 5) Gizli enfeksiyon bir tür durumdur. enfeksiyon hiçbir şekilde kendini göstermediğinde virüs ile hücre arasındaki denge. Hücre hasarı olmadan virüsün önemsiz düzeyde üretimi gözlenir.

SORU 11 “VİRÜS İÇEREN RNA'NIN HÜCRE İLE ETKİLEŞİMİNİN AŞAMALARI.”

8 numaralı soruya bakın

SORU 12 “VİRAL ENFEKSİYONLARIN PATOJENİZİ

Tropizm, bir virüsün bir veya başka bir enfeksiyon bölgesine eğilimidir. Solunum yolu enfeksiyonlarında virüs nazofarinks, trakea ve akciğerlerde lokalize olur; enterovirüsler için - dışkıda; nörotropik olanlar için - GM veya SM'de; dermotropik ile - ciltte.

Viral enfeksiyonların patogenezi.

Patogenez, bir hastalığa, gelişimine ve sonucuna neden olan bir dizi süreç olarak anlaşılmaktadır.

Patogenez şu şekilde belirlenir:

1. Virüsün tropizmi

2.Bulaşıcı parçacıkların sayısı

3. Enfeksiyona hücre yanıtı.

4. Vücudun hücre ve dokulardaki değişikliklere tepkisi.

5. Üreme hızı.

Virüslerin tropizmi, belirli hücrelerin virüse duyarlılığına dayanır.

Patogenez, virüslerin hücrelerle etkileşiminin ana mekanizmaları tarafından belirlenir:

Atrofi veya distrofi (CPD)

Dahil etme organlarının oluşumu

Simplast ve sinsityanın oluşumu

dönüşüm

Gizli (kronik) enfeksiyon.

Hücresel düzeyde patogenez - buna CPD (belirli bir viral ajanın etkisi altında hücrelerde gözle görülür morfolojik değişiklikler) dahildir. CPP'nin doğası farklıdır ve aşağıdakilere bağlıdır:

1. Hücre tipi

2. Virüsün biyokimyasal özellikleri

3. Bulaşıcı doz

CPP'nin doğası 4 noktalı çapraz sistem kullanılarak değerlendirilir ve titrasyon için hücre kültürleri kullanıldığında (örn.) değişiklikler dikkate alınır.

Organizma düzeyinde patogenez.

Herhangi bir biyolojik süreç gibi enfeksiyon durumu da dinamiktir; etkileşimin dinamiklerine genellikle bulaşıcı süreç denir. Bir yandan bulaşıcı süreç şunları içerir: patojenin vücuda girişi, çoğalması ve yayılmasının yanı sıra patojenik etki, diğer yandan vücudun bu eyleme tepkisi.

Patojenin patojenik etkisi farklı olabilir. Kendini değişen şiddette bulaşıcı bir hastalık şeklinde gösterir, diğerlerinde belirgin klinik belirtiler olmadan, diğerlerinde ise yalnızca virolojik, biyokimyasal ve immünolojik yöntemlerle tanımlanan değişikliklerle kendini gösterir. Aşağıdakilere bağlıdır:

Duyarlı bir organizmaya nüfuz eden patojenin miktarı ve kalitesi, hayvanın direncini belirleyen iç ve dış çevre koşulları ve mikro ve makroorganizmaların etkileşimi ile karakterize edilir. Patojen ve organizma arasındaki etkileşimin doğasına bağlı olarak 3 form vardır:

1. bulaşıcı bir hastalık, belirli klinik belirtilerin yanı sıra bozukluklar, fonksiyonel bozukluklar ve morfolojik doku hasarı ile karakterize edilen bulaşıcı bir süreçtir.

2. Mikrobiyal taşıyıcılık immünolojik bir alt enfeksiyondur. Çeşitli enfeksiyon türlerine farklılaştırılmış bir yaklaşım, enfeksiyonun doğru şekilde teşhis edilmesini ve işlevsiz bir sürüdeki enfekte hayvanların tanımlanmasını mümkün kılar. Herhangi bir bulaşıcı hastalığın patogenezi, mikro ve makroorganizmanın etkileşiminin meydana geldiği koşullara bağlı olarak patojenin özel etkisi ve vücudun tepkileri ile belirlenir. Bu durumda patojenin penetrasyon ve dağılım yollarının önemi az değildir. Patojen kapıları: cilt, mukoza, genitoüriner sistem, plasenta.

Her patojen türü, üreme ve yayılma için uygun koşullar sağlayan giriş yollarına evrimsel olarak adapte olmuştur; her enfeksiyonun giriş kapısı, özgüllük ile karakterize edilir. Önlemeyi gerçekleştirmek için enfeksiyon kapısının özgüllüğünü hesaba katmak gerekir. Örneğin INAN'da patojen, bir böcek ısırığı yoluyla cilde nüfuz eder. Şap hastalığında ana yol beslenme; kuduz hastalığında ise ısırıktır.

Viral enfeksiyonların sınıflandırılması.

Otonom ve entegre enfeksiyonlar vardır. Özerk - bu durumda viral genom, hücresel genomdan bağımsız olarak çoğalır. Otonom enfeksiyon çoğu virüs için tipiktir.

Entegre enfeksiyonlar - viral genom, hücresel genoma dahil edilir, yani. hücresel genoma entegre olur ve onunla kopyalanır. Bu durumda viral genom çoğalır ve hücresel genomun ayrılmaz bir parçası olarak işlev görür. Hem genomun tamamını hem de bir kısmını entegre edebilir. Entegre enfeksiyonlarda viral partiküllerin toplanması veya çıkışı yoktur.

Otonom enfeksiyon: Bir hücre bazen bölünmeyi kontrol eden düzenleyici mekanizmaların bozulması sonucunda sınırsız bölünme yeteneği kazanır. Bu daha çok onkojenik enfeksiyonlarda görülür.

Üretken ve abortif enfeksiyonlar:

1. Üretken – bulaşıcı yavruların serbest bırakılmasıyla sona erer.

2. Abortif – bulaşıcı yavrular oluşmaz veya sayıları azdır.

Kursun formları - hem üretken hem de abortif - akut ve kronik formlarda ortaya çıkabilir. Akut enfeksiyon, hücrenin iyileşmesine veya ölmesine neden olan bir enfeksiyondur. Hücresel düzeyde akut enfeksiyon sitolitik olabilir (hücre ölümü meydana geldiğinde).

Kronik enfeksiyon, bir hücrenin uzun süre viral parçacıklar üretmeye devam ettiği ve bu yeteneği yavru hücrelere aktardığı bir enfeksiyondur. Daha sık olarak, kürtajla sonuçlanan bir enfeksiyon kronik bir form alır çünkü viral materyal birikir ve yavru hücreye iletilir.

Karışık enfeksiyon - bir hücreye iki veya daha fazla farklı virüs bulaşır, bunun sonucunda hücrede iki veya daha fazla bulaşıcı süreç birleştirilebilir. Karışık bir enfeksiyon sırasında virüs etkileşimi için birkaç olası seçenek vardır:

1. Müdahale – bir virüs diğerinin eylemini bastırır.

2. Tamamlama (yüceltme) - bir virüs diğerinin etkisini artırır.

Viral enfeksiyonların organizma düzeyinde sınıflandırılması.

Sınıflandırma aşağıdakilere dayanmaktadır:

1. Virüsün genelleştirilmesi

2.Enfeksiyonun süresi

3. Klinik semptomların ortaya çıkışı

4. Virüslerin çevreye yayılması

Formlardan biri diğerine dönüşebilir (örneğin fokalden genele, akuttan kronikliğe).

Odak enfeksiyonu.

Virüs, yerel üreme nedeniyle enfeksiyonun giriş kapısının yakınında etki eder. Genelleştirilmiş olanlara göre daha kısa bir latent periyoda sahiptirler.

Genelleştirilmiş enfeksiyonlar.

Birincil odaklarda sınırlı bir üreme süresinden sonra, enfeksiyonların genelleşmesi meydana gelir - virüsler, örneğin şap hastalığı, çocuk felci ve çiçek hastalığı gibi diğer sistemlere nüfuz eder.

Akut enfeksiyon.

Kısa bir süre devam eder ve çevreye salınır. Ölüm veya iyileşmeyle biter.

Kalıcı enfeksiyon.

Virüsün vücutla uzun süreli etkileşimi ile. Gizli, kronik, yavaş olabilir.

Gizli enfeksiyon - belirli koşullar altında virüsün çevreye salınması eşlik etmez; akut ve kronik hale gelebilir.

Grip, sepsis, AIDS vb. için.

Kronik enfeksiyon.

Bu uzun vadeli bir süreçtir. Remisyon dönemleri (adenovirüs, herpes) ile karakterize edilir.

Yavaş enfeksiyonlar, bir virüs ile faj arasındaki bir tür etkileşimdir ve uzun kuluçka dönemleriyle karakterize edilir.

Enfeksiyon kaynakları.

Herhangi bir bulaşıcı hastalığı incelerken kaynağı, kalıcı ikamet yeri ve üreme yerini, yayılma yollarını, korunma yerini ve zamanlamasını, dış ortamda ortaya çıkışını, hastadan sağlıklıya bulaşma yöntemlerini bilmek önemlidir.

Doğal çevre yaşayan bir organizmadır, varoluşunun tüm koşullarını burada bulur. Virüslerin kalış süresi büyük ölçüde değişir ve vücudun biyolojik özelliklerine ve reaktivitesine bağlıdır. Patogenez koşullarından. Enfeksiyon kaynakları yalnızca enfekte organizmalardır. Sadece iletim sürecinde rol oynarlar. Çoğu hayvan virüsleri dışkı, salgı, kan, atık su ve balgamla salgılar. Viral enfeksiyonların çoğunda patogenez viremiye (şap hastalığı, veba vb.) dayanmaktadır. Bu hastalıklarda virüs mümkün olan tüm yollarla salınır. Kronik vakalarda viral bulaşma daha az yoğundur ancak daha uzun sürebilir. Viral hastalıklar için lokalizasyon tek bir yolla sınırlıdır: zatürre - balgam damlalarıyla. Virüsün dış ortama en yoğun salınımı hastalığın akut döneminde gözlenir ancak bazı hastalıklarda kuluçka döneminde de ortaya çıkar. Canlı aşılarla aşılandığında asemptomatik enfeksiyonlar ortaya çıkar.

SORU No: 13 “VİRÜS HASTALIKLARINDAN ŞÜPHELİ DURUMDA HASTA VE ÖLÜ HAYVANLARDAN PATHMATERYALİN TOPLANMASINA İLİŞKİN KURALLAR. VİRÜSOLOJİK ÇALIŞMALARA TAŞINMASI VE HAZIRLANMASI.

Hasta, ölü veya zorla öldürülmüş hayvanlardan elde edilen araştırma materyalleri, hastalığın açık belirtilerinin ortaya çıkmasından sonra veya klinik ölüm veya kesimden en geç 2-3 saat sonra mümkün olan en kısa sürede alınmalıdır. Bunun nedeni, hastalıktan hemen sonra veya ilk 1-2 gün içinde bağırsağın bariyer rolünün önemli ölçüde zayıflaması, bunun da kan damarlarının geçirgenliğinin artmasıyla birlikte bağırsak florasının yayılmasına katkıda bulunmasıdır. Ayrıca enfeksiyon süreci devam ettikçe ve hatta derinleştikçe vücudun savunma mekanizmalarının da etkisiyle virüs miktarı azalabilir. Virüs izolasyonu için materyal alırken, incelenen enfeksiyonun patogenezinden (giriş kapısı, virüsün vücutta yayılma yolları, üreme yerleri ve atılım yolları) yola çıkılmalıdır. Solunum yolu enfeksiyonlarında virüsleri izole etmek için nazofaringeal sürüntüler, nazal ve faringeal sürüntüler alınır; enterovirüs için - dışkı; dermotropik - taze cilt lezyonları ile. Çeşitli dışkı ve salgılar, organ parçaları, kan ve lenf, virüsün izole edilmesinde materyal görevi görebilir. Kan, domuzlarda şah damarından, kuyruk ucundan veya kulaktan alınır. Kuşlarda konjonktivadan, burun mukozasından, farenks arka duvarı, rektum ve kloakadan yıkamalar steril pamuklu çubuklarla alınır ve penisilin şişelerine batırılır. Nazofarenksten materyal alırken Thomas ve Scott'ın tasarladığı cihazı kullanabilirsiniz. Ağızdan akan tükürük doğrudan bir test tüpüne toplanabilir. İdrar, bir kateter kullanılarak steril bir kaba toplanır. Dışkı bir spatula veya çubukla rektumdan çıkarılır ve steril bir tüpe yerleştirilir. Veziküler sıvı bir şırınga veya Pasteur pipeti ile steril bir tüpe toplanabilir. Aftın duvarları ve cilt yüzeyindeki kabuklar cımbızla çıkarılır. Hayvanın ölümünden sonra organ parçalarının mümkün olduğu kadar çabuk alınması önemlidir, çünkü... Birçok viral enfeksiyonda, ölüm sonrası otosterilizasyon olgusu gözlenir, bunun sonucunda virüs hiç tespit edilemeyebilir veya miktarı çok az olacaktır. Daha sonra patolojik materyal ICH üzerinde düşük sıcaklıklara (kuru buz + alkol; kar + tuz) veya gliserine yerleştirilir. Patent materyali güvenilir ve anlaşılır bir etiketle birlikte sunulmalıdır. Hangi hayvandan hangi malzemenin elde edildiğini yazmanız gerekiyor. Termosun üzerine PM numunelerinin bulunduğu, çiftliği, hayvan türünü, malzeme türünü ve tarihi belirten bir karton veya kontrplak etiket asılır. Termos mühürlenmeli ve ekspres kargo ile teslim edilmelidir. Laboratuvara teslim edilen numunelerin derhal virüs izolasyonu için kullanılması tavsiye edilir. Laboratuvarda ortaya çıkan patolojik materyal koruyucu maddelerden arındırılır, eritilir, gliserinden yıkanır, tartılır ve ölçülür. Bazıları araştırmaya götürülüyor, bazıları buzdolabında. Organ ve dokuların hazırlanması şu şekilde gerçekleştirilir: Virüs organ ve doku hücrelerinden salınır - malzeme iyice ezilir ve steril kuvars kumu içeren bir harç içinde öğütülür. %10'luk bir süspansiyon genellikle Hanks veya fosfat tamponu içindeki öğütülmüş malzemeden hazırlanır. Süspansiyon 1500-3000 rpm'de santrifüjlenir, süpernatan emilir ve antibiyotiklerle (penisilin, nistatin) işlenerek mikrofloradan arındırılır. Süspansiyon oda sıcaklığında en az 30-60 dakika AB'ye maruz bırakılır, ardından malzeme MPA, MPB, MPPB, Sabouraud ortamı üzerinde aşılama yoluyla bakteriyolojik kontrole tabi tutulur. Süspansiyon eksi 20-eksi 70 C'de saklanır.

SORU No: 14 “VİRÜSLERİN KORUNMASINA YÖNELİK YÖNTEMLER VE BUNLARIN PRATİK ÖNEMİ.”

Aşağıdaki virüs koruma yöntemleri kullanılır:

1) viral materyali (organ veya doku parçaları) saklarken, bakteriyostatik etkiye sahip olan ve aynı zamanda virüsleri koruyan gliserin (ICN'de% 50'lik çözelti) sıklıkla kullanılır. Bu durumda 4°C'de birkaç ay saklanabilir.

2) virüsler çoğunlukla -20, -30, -70C sıcaklık sağlayan buzdolaplarında saklanır. Bu sıcaklıkta bazı virüsler, koruyucu maddeler eklenmeden bulaşıcılıklarını nispeten hızlı bir şekilde kaybederler. İnaktive edilmiş kan serumu veya yağsız süt veya %0,5-1,5 jelatin eklenmesi, virüslerin dondurulması ve saklanması sırasında iyi bir koruyucu etkiye sahiptir.

3) Sıvı nitrojen ile eksi 196°C'ye hızlı dondurma. Düşük pH değerlerine duyarlı virüslerin monobazik fosfat içermeyen sıvılarda dondurulması gerekir.

4) Liyofilizasyon - vakum koşulları altında dondurarak kurutma - çok iyi bir konserveleme yöntemidir. Liyofilize formda virüsler birkaç yıl saklanabilir.

SORU NO: 15 “VİRÜSOLOJİ LABORATUVARINDA ÇALIŞMA KURALLARI. VİRÜS İÇEREN MALZEMELERLE ÇALIŞIRKEN ALINMASI GEREKEN GÜVENLİK ÖNLEMLERİ.”

Tüm laboratuvar personeli, mevcut standartlara uygun tulumlar, koruyucu ayakkabılar, sıhhi koruma ve koruyucu ekipmanlarla birlikte güvenli çalışma yöntemleri konusunda eğitilir ve eğitilir. Temel çalışma kuralları aşağıdaki gibidir: 1) Yetkisiz kişilerin üretim tesislerine girmesi ve çalışanların önlük ve yedek ayakkabı olmadan laboratuvara girmesi kesinlikle yasaktır; 2) Laboratuvarda önlük ve özel ayakkabılarla laboratuvardan çıkmak veya önlüğün üzerine dış giyim giymek, sigara içmek, yemek yemek ve yiyecek depolamak yasaktır. Boks yaparken steril önlük, maske, başlık ve gerekirse lastik eldiven ve gözlük takarlar. Ayakkabılarınızı mutlaka değiştirin. 3) test için laboratuvara giren tüm materyalin enfekte olduğu kabul edilmelidir. Çok dikkatli kullanılmalıdır; ambalajı açarken kavanozların dışı dezenfektan solüsyonla silinmeli ve bir tepsiye veya küvetlere yerleştirilmelidir. Masanın üzerindeki çalışma alanı,% 5'lik kloramin çözeltisiyle nemlendirilmiş birkaç kat gazlı bezle kaplıdır. Pipetlerle çalışırken lastik ampuller kullanın. Pipetler, slaytlar ve kapak camları ve diğer kullanılmış cam eşyalar %5 kloramin, fenol, Lysol, sülfürik asit içerisine daldırılarak dezenfekte edilir. 4) İşin tamamlanmasının ardından işyeri toplanır ve iyice dezenfekte edilir. Daha fazla çalışma için gerekli olan virüs içeren malzeme buzdolabında saklanır ve kapatılır. 5) Eller %5 kloramin ile iyice yıkanır, eldivenler çıkarılır, ikinci kez dezenfekte edilir, dezenfekte edilir ve yıkanır. Viroloji laboratuvarında çalışırken çalışanların asepsi ve antisepsi yöntem ve kurallarına sıkı sıkıya uyması gerekir. Asepsi, ortamdan mikroorganizmaların ve virüslerin insan vücuduna ve ayrıca üzerinde çalışılan materyale girişini önleyen bir önlem ve çalışma yöntemleri sistemidir. Steril alet ve malzemelerin kullanımını, çalışanların ellerinin dezenfekte edilmesini, özel sağlık ve hijyen kurallarına ve iş uygulamalarına uyulmasını içerir. Antiseptikler, cildin ve mukoza zarının hasarlı veya sağlam bölgeleriyle temas ettiğinde bulaşıcı bir sürece neden olabilecek mikroorganizmaları ve virüsleri yok etmeyi amaçlayan bir dizi önlemdir. Antiseptik olarak etil alkol (%70), iyot alkol çözeltisi, parlak yeşil ve diğerleri kullanılır. Dezenfeksiyon, çevresel nesnelerin insanlar ve hayvanlar için patojen mikroorganizmaların ve virüslerin fiziksel yollarla ve kimyasallar yardımıyla yok edilerek dezenfekte edilmesidir. Sterilizasyon – sterilizasyon, çeşitli malzemelerdeki mikroorganizmaların ve virüslerin tamamen yok edilmesi. Fiziksel ve kimyasal yöntemler kullanılarak gerçekleştirilir.

SORU No: 16 “VİRAL ENFEKSİYONLARIN LABORATUAR TEŞHİSİ İÇİN ŞEMA.”

Laboratuvar teşhisi, bir virüsü tespit etmek ve belirtmek için kullanılan bir önlem sistemidir. Gönderilen patolojik materyalin alınması, patolojik materyalin hızlı tanı yöntemi kullanılarak incelenmesi, uzun vadeli yöntemler kullanılarak araştırma yapılması (geriye dönük tanı, seroreaksiyonlarda eşleştirilmiş serumların incelenmesi).

Laboratuvar araştırması. I. Patolojik materyalde virüsün gösterilmesi. 1. Tespit – büyük virüslerin (Poxviridae) ışık mikroskobu, elektron mikroskobu. 2. İçerme cisimciklerinin tespiti. (Kuduzda Babes-Chenegri cisimcikleri) 3. Viral antijenlerin tespiti: serolojik reaksiyonlar. 4. Viral NK'nin tespiti (DNA probları ve PCR - polimeraz zincir reaksiyonu). 5. Virüsün aktif formunun biyoanaliz (laboratuvar hayvanları, tavuk embriyoları, hücre kültürü) ile tespiti. 6. Hemaglutinasyon yapan virüslerde hemaglutininlerin tespiti (şu anda daha doğru yöntemlerin mevcudiyeti nedeniyle pratik olarak kullanılmamaktadır). II. Virüsün patolojik materyalden izolasyonu (izolasyonu). En az üç kör geçiş gerçekleştirilir ve bir biyoanaliz yapılır. A) Laboratuvar hayvanları (klinik, ölüm, patolojik değişiklikler) B) Tavuk embriyoları (ölüm, patolojik değişiklikler, RGA) C) Hücre kültürü (CPD, RGAd, plak yöntemi) III. İzole edilen virüsün tanımlanması - serolojik reaksiyonlar. IV. Etiyolojik rolün kanıtı. Bazen izole edilen virüsün etiyolojik rolünü kanıtlamak gerekebilir. Bu amaçla serolojik reaksiyonlarda eşleştirilmiş kan serumları kullanılır. İzole edilmiş bir virüs AG olarak kullanılır ve eşleştirilmiş serumlar AT olarak kullanılır. İkinci serumdaki antikor titresinde 4 kat veya daha fazla artış, izole edilen virüsün etiyolojik rolünü gösterir.

SORU No: 17 “HAYVANLARIN VİRAL HASTALIKLARININ KLİNİK-EPİZOOTOLOJİK TANISI, ÖZÜ, ÖNEMİ.”

Klinik-epidemiyolojik veya laboratuvar öncesi teşhis - çiftliklerde gerçekleştirilir ve yalnızca ön teşhisin yapılmasına izin verir; hasta hayvanların toplanması, karşılaştırılmasına (hastalığın klinik semptomları, organlardaki patolojik değişiklikler) dayalı olarak yapılır. Epidemiyolojik verilerin toplanması çok önemli; hastalığın gidişatına dair veriler ve çiftlikler hakkında bilgi edinmemizi sağlıyor. Çiftlikler refah içinde değilse, bu bir kez daha tanıyı doğrular. Klinik muayene, veteriner hekimin yalnızca birkaç hastalık türüne odaklanmasını sağlar. Laboratuvar teşhisleri hala birincil öneme sahiptir.

SORU No: 18 “DESEN MALZEMESİNDEKİ VİRÜSLERİ TESPİT ETME YÖNTEMLERİ.”

I. Patolojik materyalde virüsün gösterilmesi. 1. Tespit – büyük virüslerin (Poxviridae) ışık mikroskobu, elektron mikroskobu. 2. İnklüzyon cisimciklerinin tespiti (kuduzda Babes-Chenegri cisimcikleri) 3. Viral antijenlerin tespiti: serolojik reaksiyonlar. 4. Viral NK'nin tespiti (DNA probları ve PCR - polimeraz zincir reaksiyonu). 5. Virüsün aktif formunun biyoanaliz (laboratuvar hayvanları, tavuk embriyoları, hücre kültürü) ile tespiti. 6. Hemaglutinasyon yapan virüslerde hemaglutininlerin tespiti (şu anda daha doğru yöntemlerin mevcudiyeti nedeniyle pratik olarak kullanılmamaktadır). İzole edilen virüsü tanımlamak için serolojik testler kullanılır. 1.RIF – immünofloresan reaksiyonu. AG + AT florokrom ile etiketlenmiştir. 37°C'de 30 dakika süreyle temasa izin verilir, ardından laboratuvarda iyice yıkama yapılır. Algılama yöntemi: mikroskop altında floresan ışık. 2.ELISA – enzime bağlı immünosorbent tahlili. AG + AT enzimli. Temas ettirin, yıkayın ve ardından AT-enzim kompleksi ile temas ettiğinde renk reaksiyonu veren bir substrat ekleyin. 3.RSK – tamamlayıcı fiksasyon reaksiyonu. AG + AT + tamamlayıcı. Temas etmek. Daha sonra heme sistemi (hemolizin + koyun kırmızı kan hücreleri) eklenir. Temas etmek. Hemoliz oluşmazsa AG ve AT'nin sabit komplemanı vardır. Gecikmiş hemoliz olumlu bir reaksiyondur. Hemoliz meydana gelirse, kompleman hem sistemi tarafından bağlanır - reaksiyon negatiftir. 4.RDP – yaygın çökeltme reaksiyonu. AG + AT (agar jelinde difüzyon). Tespit yöntemi bir yağış eğrisinin oluşturulmasıdır. 5.RNHA – dolaylı hemaglutinasyon reaksiyonu. Eritrositler antijenle yüklenir ve antijen-antijen kompleksi oluştuğunda eritrositlerin aglütinasyonu meydana gelir. 6.RTGA – hemaglutinasyon inhibisyon reaksiyonu 7.RTGAd – hemadsorpsiyon inhibisyon reaksiyonu 8.RN – nötralizasyon reaksiyonu. Virüs + AT. Temas etmek. Virüse duyarlı bir sisteme giriliyor. Tespit yöntemi virüsün bulaşıcı aktivitesini nötralize etmektir.

SORU No: 19 “RETROSPEKTİF TEŞHİS İLKESİ, AVANTAJLARI VE EKSİLERİ.”

Retrospektif teşhis - amaç, hastalığın başlangıcında ve sonunda iki kez alınan eşleştirilmiş serumların çalışmasına dayanarak AT'deki artışın dinamiklerini tespit etmektir. Seroreaksiyonlardan birinde test edilirler. AT'deki artış 4-5 kat daha fazla ise tanı %100'dür.

Rol - yöntem çoğu durumda güvenilir bir şekilde teşhis koymanıza olanak tanır.

Rol, geriye dönük teşhisin süresidir.

SORU NO: 20 “AUJESKY HASTALIĞI VİRÜSÜ.”

Aujeszky hastalığı (pseudorabies, pruritic veba, kuduz uyuz, bulaşıcı bullar palsi) her tür çiftlik hayvanının, kürklü hayvanın ve kemirgenlerin akut bir hastalığıdır. Beyin ve omurilikte hasar belirtileri, şiddetli kaşıntı ve kaşınma ile karakterizedir.

AD özellikle domuz yetiştiriciliğinde ve kürk yetiştiriciliğinde hasara neden olur. Bu, kürklü hayvanlarda görülen akut bir gıda enfeksiyonudur. Bunun nedeni genellikle mezbaha atıkları ve hasta hayvanlardan veya virüs taşıyan hayvanlardan elde edilen sakatatlar olan yiyeceklerdir.

Klinik. Kuluçka süresi enfeksiyon yöntemine, virüsün virülansına ve hayvanın direncine bağlı olarak 1,5 gün - 10-12 gündür. Virüs pantropiktir.

Domuzlarda klinik seyir kaşıntı belirtileri olmadan ilerlemektedir. Enayiler ve sütten kesilmiş yavrular ciddi şekilde hasta. Hastalık doğası gereği septiktir. Domuz yavruları genellikle 4-12 saat içinde ölürler. 10 günden 3 aya kadar olan domuz yavrularında hastalığın ilk belirtileri ateş (40-42), depresyon, burundan mukus akıntısıdır. Daha sonra merkezi sinir sistemi hasarı belirtileri ortaya çıkar: huzursuzluk, manevra hareketleri, yönelim kaybı, kasılmalar, sırtın kavislenmesi, farenks, gırtlak, uzuvlarda felç, akciğer ödemi, tükürük salgılanması. Hastalık birkaç saatten 3 güne kadar sürer. Ölüm oranı: %70-100

Dişi domuzlarda gribe benzer bir sendrom olarak kendini gösterir ve 3-4 gün sonra iyileşir.

Sığırlarda sıcaklık 42 C'ye yükselir, çiğneme durur, burun deliklerinde, dudaklarda, yanaklarda şiddetli kaşıntı, beslenmeyi reddetme, uyuşukluk, kaygı, korku, hızlı nefes alma, terleme, çiğneme ve boyun kaslarında kramplar görülür. 1-2 gün sonra artan uyuşukluk ile ölüm meydana gelir. İyileşme son derece nadirdir.

Etçil hayvanlarda yiyecek reddi, korku, huzursuzluk ve şiddetli kaşıntı görülür. Bazen köpekler ve kediler kuduz belirtileri gösterir. Daha sonra farenks felci meydana gelir. 2-3 gün içinde ölüm. Hayvanlar virüsün kaynağı değildir ve onu dışarı atmazlar, bu da ekolojik bir çıkmazdır.

Aujeszky hastalığından karakteristik klinik semptomlara ve patolojik değişikliklere (klinik, epizootolojik ve patolojik teşhis) dayanarak şüphelenilebilir.

Araştırma malzemesi: burun boşluğundan ve kandan (tercihen eşleştirilmiş serum), cesetlerden - beyin parçaları, akciğerler, karaciğer, dalak.

Ekspres yöntem - RIF'de viral antijenin tespiti. Virolojik yöntem: a) virüsün domuz yavrusu böbrek hücrelerinin kültüründe izolasyonu: b) tavşanlar üzerinde biyoanaliz (enfeksiyon bölgesinde karakteristik kaşıntı ve kaşınma).

Kimlik: RIF, RN.

Retrospektif tanı: eşleştirilmiş serum örneklerinde antikor titresindeki artışa dayanır.

Aujeszky hastalığını kuduz, domuz nezlesi, grip, erizipel ve sofra tuzu zehirlenmesinden ayırmak gerekir.

Canlı VGNKI virüsü aşısı ve inaktif kültürel aşı kullanılıyor - Yurt dışında 6-10 ay bağışıklık sağlayan alt ünite ve rekombinant aşılar kullanılıyor.

SORU NO: 21 “VİRAL PROTEİNLERİN ÖNEMİ VE ÖZELLİKLERİ.”

7 numaralı soruya bakın

SORU NO: 22 “SEROLOJİK REAKSİYONLARIN GENEL İLKELERİ VE VİRÜS HASTALIKLARIN TANISINDA KULLANILMASI.”

Belirli bir virüsün türünü belirlemek için, hasta bir kişinin veya enfekte bir hayvanın vücudundaki koruyucu süreçleri incelerken serolojik yöntemler kullanılır. Seroloji (Latince Serum'dan - serum, kanın sıvı bileşeni), kan serumunda bulunan spesifik koruyucu maddelerle, antikorlarla antijen reaksiyonlarını inceleyen bir immünoloji dalıdır. Antikorlar virüsün etkisini nötralize eder. Viral partiküllerin yüzeyinde bulunan bazı antijenik maddelere bağlanırlar. Antikor moleküllerinin virüsün yüzey yapısına bağlanması sonucunda virüs patojenik özelliklerini kaybeder. Serumdaki antikorların seviyesini (miktarını) belirlemek veya belirli bir virüsün türünü belirlemek için bir virüs nötralizasyon reaksiyonu gerçekleştirilir. Hem hayvanlarda hem de hücre kültüründe gerçekleştirilebilir.

Virüsü nötralize etmek ve CPE gelişmesini önlemek için yeterli antikor içeren serumun minimum konsantrasyonuna virüs nötralize edici serum titresi denir. Bu konsantrasyon plak yöntemi kullanılarak da tespit edilebilir.

Antikorları tespit etmek için hemaglutinasyonu engelleme yöntemi (kırmızı kan hücrelerinin bir virüsün etkisi altında yapıştırılması) ve kompleman fiksasyonu yöntemi kullanılır. Virolojide çeşitli araştırma amaçlarıyla kullanılan yöntemlerden, virüslerin ince yapısı ve kompozisyonunun incelenmesini kolaylaştıran, fiziksel ve kimyasal analizler için virolojik materyalin hazırlandığı yöntemlerden de bahsedebiliriz. Bu testler büyük miktarlarda tamamen saf virüs gerektirir. Virüs saflaştırması, onu kirleten tüm yabancı parçacıkların virüs içeren bir süspansiyondan uzaklaştırıldığı bir işlemdir. Bunlar esas olarak konakçı hücrelerin parçaları ve "parçalarıdır". Saflaştırma ile eş zamanlı olarak, süspansiyonun kalınlaşması genellikle meydana gelir ve virüs konsantrasyonu artar. Bu, birçok çalışmaya kaynak materyal sağlar.

Serolojik bir reaksiyon kullanarak şunları yapabilirsiniz: serumdaki hemaglutinasyon virüsüne karşı antikor titresini belirlemek; bilinen serumlardan bilinmeyen bir hemaglutinasyon virüsünün tanımlanması; 2 virüsün antijen ilişkisinin derecesini belirlemek, serumdaki virüs nötrleştirici antikorların titresini veya nötralizasyon indeksini belirlemek, bilinmeyen bir virüsü bilinen çeşitli serumlarla test ederek tanımlamak.

Serolojik reaksiyonlar.

1. RIF – immünofloresan reaksiyonu.

AG + AT florokrom ile etiketlenmiştir. 37°C'de 30 dakika süreyle temasa izin verilir, daha sonra salin solüsyonunda iyice yıkanır. Algılama yöntemi: mikroskop altında floresan ışık.

2. ELISA – enzime bağlı immünosorbent tahlili.

AG + AT enzimli. Temas ettirin, yıkayın ve ardından AT-enzim kompleksi ile temas ettiğinde renk reaksiyonu veren bir substrat ekleyin.

3. RSK – tamamlayıcı fiksasyon reaksiyonu.

AG + AT + tamamlayıcı. Temas etmek. Daha sonra heme sistemi (hemolizin + koyun kırmızı kan hücreleri) eklenir. Temas etmek. Hemoliz oluşmazsa AG ve AT'nin sabit komplemanı vardır. Gecikmiş hemoliz olumlu bir reaksiyondur. Hemoliz meydana gelirse, kompleman hem sistemi tarafından bağlanır - reaksiyon negatiftir.

4. RDP – yaygın çökeltme reaksiyonu.

AG + AT (agar jelinde difüzyon). Tespit yöntemi bir yağış eğrisinin oluşturulmasıdır.

5. RNHA – dolaylı hemaglutinasyon reaksiyonu.

Eritrositler antijenle yüklenir ve antijen-antijen kompleksi oluştuğunda eritrositlerin aglütinasyonu meydana gelir.

6. RTGA – hemaglutinasyon inhibisyon reaksiyonu

7. RTGAd – hemadsorpsiyon inhibisyonu reaksiyonu

8. RN – nötrleştirme reaksiyonu.

Virüs + AT. Temas etmek. Virüse duyarlı bir sisteme giriliyor. Tespit yöntemi virüsün bulaşıcı aktivitesini nötralize etmektir.

SORU 23, 25 “RTGA VE VİRÜSOLOJİDE KULLANIMI. AVANTAJLAR VE DEZAVANTAJLAR".

En basit serolojik reaksiyonlardan biri hemaglutinasyon inhibisyon reaksiyonudur. Homolog bir antijenle karşılaştığında antikorların sadece bulaşıcı değil aynı zamanda hemaglutinasyon aktivitesini de nötralize ettiği gerçeğine dayanmaktadır, çünkü Hemaglütinasyondan sorumlu virion reseptörlerini bloke ederek onlarla bir “AG + AT” kompleksi oluşturur. RTGA'nın prensibi, eşit hacimde kan serumu ve virüs süspansiyonunun bir test tüpünde karıştırılması ve maruz kaldıktan sonra kırmızı kan hücreleri süspansiyonunun eklenmesiyle virüsün karışımda kalıp kalmadığının belirlenmesidir. Eritrositlerin aglütinasyonu, karışımdaki virüsün varlığını, hemaglutinasyonun olmaması ise virüsün olmadığını gösterir. Virüsün virüs + serum karışımından kaybolması, serum ve virüs AT'leri arasındaki etkileşimin bir işareti olarak kabul edilir. RTGA aşağıdaki sorunları çözmenize olanak tanır: serumdaki hemaglutinasyon virüsüne karşı antikorların titresini belirlemek; bilinen serumlardan bilinmeyen bir hemaglutinasyon virüsünün tanımlanması; İki virüs arasındaki AG ilişkisinin derecesini belirlemek. RTGA'nın avantajları: tekniğin basitliği, hız, steril çalışmaya gerek olmaması, özgüllük, düşük maliyet. RTGA'nın dezavantajı: yalnızca hemaglutinasyon yapan virüslerle mümkündür.

RTGA'da AT titrasyonunun prensibi şu şekildedir: eşit hacimlerde (genellikle 0,25 veya 0,2 ml) test serumunun bir dizi ardışık (genellikle 2 kat) seyreltisini hazırlayın; her seyreltmeye 4 HAE titresinde aynı hacimde homolog virüs ekleyin; karışımlar belirli bir süre belirli bir sıcaklıkta tutulur, tüm karışımlara eşit hacimlerde% 1'lik yıkanmış eritrosit süspansiyonu eklenir; Maruziyetten sonra, her karışımdaki hemaglutinasyon çaprazlamalarla değerlendirilir.

SORU No. 26 “RDP. YÖNTEMİN İMMÜNOLOJİK TEMELLERİ, SONUÇLARIN AÇIKLANMASI VE MUHASEBESİ. AVANTAJLAR VE DEZAVANTAJLAR".

Jeldeki RDP, AT ve çözünebilir AG jellerinde difüzyon yeteneğine ve "AG + AT" kompleksinde böyle bir yeteneğin bulunmamasına dayanmaktadır. Bu kompleks birbirine doğru yayılan homolog AG ve AT'nin temasıyla oluşur. Oluşum yerinde jelin kalınlığında bir çökelme bandı şeklinde biriktirilir. Jel olarak nişasta, jelatin, agar-agar ve daha fazlası kullanılır. Agar jeli laboratuvar uygulamalarında sıklıkla kullanılır. Serum antikorları oldukça büyük boyutlarına rağmen Ig molekülleridir. Agar jelinde yayılabilir. Viral Ag'ler viral proteinlerdir. Korpüsküler AG'leri temsil eden viryonlarda bulunabilirler. Agar jeli içinde dağılmalarına izin vermeyen büyük boyutlar. Ancak viral proteinler, viryonların yok edilmesi ve (veya) oluştukları hücrelerin yok edilmesi sonucu oluşan serbest moleküller biçiminde de olabilir. Bunlar çözünür antijenlerdir. Agar jelinde difüzyon yeteneğine sahiptirler. Bir jelde RDP oluşturma tekniği, bir agar jeli tabakasında birkaç çöküntü oluşturmak ve bunların içine AG ve serumu dökmektir. Böylece AG ve serum bitişik kuyucuklardadır. Kuyucuklardan AG ve serum jel tabakasına yayılmaya başlar. Difüzyon her kuyucuktan her yöne yönlendirilir. AG ve serum içeren kuyucuklar arasındaki boşlukta ikincisi birbirine doğru yayılır. Homolog oldukları ortaya çıkarsa, daha büyük boyutundan dolayı difüzyon kabiliyeti olmayan bir "AG + AT" kompleksi oluşur. Beyazımsı bir yağış şeridi şeklinde oluşum yerine yerleşir. RDP aşağıdaki sorunları çözer: 1) kan serumundaki antijenlere homolog antikorların tespiti; 2) bilinen serum antikorlarına homolog bir antijenin materyalinde tespit edilmesi; 3) bilinmeyen bir virüsün tanımlanması; 4) serum AT'nin titrasyonu. Burada hala homolog antijen ile çökelme veren en yüksek serum dilüsyonu, serumdaki antikor titresinin bir göstergesi olarak görev yapar. RDP sıklıkla sığır lösemisini ve atlarda enfeksiyöz anemiyi teşhis etmek için kullanılır. Reaksiyon Petri kaplarında, cam slaytlarda, kılcal damarlarda (nadiren) gerçekleştirilebilir. Cam slaytlarda RDP'yi gerçekleştirmek için şunlara ihtiyacınız vardır: yağı alınmış cam slaytlar, dereceli pipetler (2-5 ml), Pasteur pipetleri; 5 mm çapında bir tüp veya bir damga, ıslak bir oda, kuyucuklardan jel, agar, AG, serum çıkarmak için bir alet. RDP'nin Kurulumu: Cam slaytlar soğuk bir yüzeye yerleştirilir. Bir pipetten agarı dökün (katman 1,5-2 mm), 5-10 dakika soğumaya bırakın. Delikler kesilir ve lehimlenir. RDP bileşenleri kuyucuklara dökülür ve nemli bir odaya yerleştirilir (burada oda sıcaklığında bırakılırlar veya bir termostata yerleştirilirler). Cam slaytlar üzerindeki RDP preparatı 48-72 saat sonra kurutulabilir ve amid siyahı solüsyonu ile boyanabilir. Bu, preparatın süresiz olarak saklanmasına olanak tanır ve yağış bantlarını fotoğraflama yeteneğini geliştirir. RDP'nin avantajları: tekniğin basitliği, hızlı yanıt, bileşenlerin saflığı konusunda iddiasız, steril çalışma gerektirmez, bileşenlere minimum ihtiyaç, herhangi bir çözünür antijenle çalışmaya uygunluk, sonucu fotoğraflayarak belgeleme yeteneği. RDP'nin dezavantajları: düşük hassasiyet. Reaksiyon, patolojik materyaldeki kuduz virüslerini, bulaşıcı sığır rinotrasitini, Afrika domuz ateşini, köpek ateşini ve diğerlerini tespit etmek için kullanılır; Ve ayrıca atlarda enfeksiyöz anemi virüsleri, adenovirüsler, solunum sinsityal virüsü, sığır ishal virüsünün tanımlanması için, atlarda enfeksiyöz anemi virüsleri, sığır solunum sinsityal virüsü ve diğer birçok durumda kan serumunda antikorların tespiti için.

SORU 27 “RSK. İMMÜNOLOJİK TEMELLER VE REAKSİYON BİLEŞENLERİNİN ÖZELLİKLERİ.”

Kompleman fiksasyon testi (FFR), birçok viral hastalığın teşhisinde kullanılan geleneksel serolojik testlerden biridir. Adın kendisi büyük ölçüde iki ayrı aşamadan oluşan yöntemin özünü yansıtıyor. İlk aşama, bir antijen ve bir antikorun (bu bileşenlerden biri önceden bilinmektedir) yanı sıra belirli bir miktarda önceden titre edilmiş tamamlayıcıyı içerir. Antijen ve antikor eşleşirse, kompleksleri ikinci aşamada bir gösterge sistemi (koyun kırmızı kan hücreleri ve onlara karşı antiserum karışımı - hemolizin) kullanılarak tespit edilen komplemana bağlanır. Kompleman, antijen ve antikor etkileşimi ile bağlanırsa, kırmızı kan hücrelerinin parçalanması gerçekleşmez (pozitif RBC). Negatif RSC ile bağlanmamış kompleman, eritrositlerin hemolizini teşvik eder (Şekil 80).

RSC'ler sıklıkla teşhis uygulamalarında virüslerin tespiti ve tanımlanması, kan serumundaki antikorların tespiti ve titrasyonu için kullanılır.

RSC'nin ana bileşenleri antijenler (bilinen veya tespit edilebilir), antikorlar (bilinen antiserum veya test serumları), kompleman, hemolitik serum ve koyun eritrositleridir; Seyreltici olarak izotonik sodyum klorür çözeltisi (pH 7.2-7.4) veya çeşitli tampon çözeltileri kullanılır. Antijenler ve serumlar anti-tamamlayıcılığa, yani hemolizi geciktiren ve reaksiyonun sonuçlarını bozan komplemanı adsorbe etme yeteneğine sahip olabilir. Anti-tamamlayıcılıktan kurtulmak için antijenler, antijen ve virüs olarak kullanılan doku türüne bağlı olarak çeşitli yöntemlerle saflaştırılır: aseton, freon, eter, kloroform vb. Serumlar ısıtma, kompleman muamelesi ve diğer yöntemlerle anti-komplementerlikten arındırılır.

CSC için antijenler, enfekte hayvanların organlarından, enfekte tavuk embriyolarının allantoik veya amniyotik sıvısından ve ayrıca enfekte hücre kültürlerinin sıvı ortamından hazırlanır.

bakteriyel enfeksiyonlara yönelik hazırlanmasından önemli ölçüde farklıdır. Bu, virüslerin bir takım spesifik özelliklerinden kaynaklanmaktadır.

İlk olarak, bir hücreden viral antijeni serbest bırakmak için, genellikle hücreleri yok etmek ve antijeni serbest bırakmak amacıyla bulaşıcı materyalin daha fazla işlenmesi gerekir.

İkincisi, viral antijenlerin bakteriyel olanlara kıyasla daha fazla termolabilitesidir. Çoğu virüste, kompleman sabitleyici antijen bulaşıcı parçacıkla ilişkilidir ve onun yok edilmesi, bulaşıcı olanın kaybına paralel olarak gerçekleşir. Bu nedenle, antijen elde etmek için gerekli malzemeler ölü hayvanlardan yalnızca ölümden sonraki ilk saatlerde veya daha iyisi yaşamları boyunca alınmalıdır. Virüs içeren materyalin çeşitli dezenfektanlarla saklanması çoğu zaman olumlu sonuç vermez çünkü bunların birçoğu viral antijenin yok olmasına neden olur.

Üçüncüsü, farklı şekilde giyildiğinde tamamlayıcı fiksasyonunun eşitsizliği; antikor fazlalığı ile kompleman fiksasyonu keskin bir şekilde azalır, çünkü aktif antijen + antikor kompleksi esas olarak antikorlar formunda sunulur ve aktif kompleman yüzeyi önemsizdir. Aynı şey, kompleman fiksasyonunun baskılanmasının daha da hızlı gerçekleştiği aşırı antijen bölgesinde de gözlenir. Bu nedenle kompleman fiksasyonunun optimal bölgesini oluşturmak için antijen ve antikorların ön titrasyonu gereklidir.

Dördüncüsü, antijen + antikor kompleksinin hacmi önemsizdir. Komplekse giren viral partiküllerin boyutu çok küçüktür ve bu nedenle kompleman fiksasyon alanı önemsizdir. Kompleman fiksasyon süresinin uzatılmasıyla antijen + antikor kompleksinin hacminin artmasıyla (4 ° C'de 18 saate kadar), reaksiyonun duyarlılığı artar, ancak uzun bir fiksasyon süresinden dolayı özgüllüğü azalır. Komplemanın spesifik olmayan antijenler (doku) tarafından sabitlenmesi artar.

Ve son olarak beşinci olarak viral antijenin yüksek tamamlayıcı aktivitesi. Spesifik olmayan kompleman fiksasyonunu dışlamak için viral antijenin doku parçalarından daha eksiksiz saflaştırılması gereklidir.

Hayvanlarda ve insanlarda viral hastalıkların teşhisinde RSC'nin kullanılmasının önündeki büyük bir engel, hastalığın farklı dönemlerinde ve özellikle farklı enfeksiyonlar sırasında viral antijenin eşit olmayan birikimidir.

RSC, hayvanlarda hastalığa neden olan şap hastalığı virüsünün türlerini ve alt tiplerini (varyantlarını) belirlemek, aşı üretiminde şap hastalığı virüsünün üretim suşlarını ve araştırmalarda laboratuvar suşlarını test etmek için kullanılır. iş.

SORU NO: 28 “VİRÜSLERİN TİTRESİ VE %50 BULAŞICI EYLEM BİRİMLERİNDE BELİRLENME İLKELERİ.”

Titre, malzemenin birim hacminde bulunan virüs miktarıdır. Virüslerin neden olduğu yerel hasarlardan en ünlüsü, XAO EC üzerindeki plaklar ve kabarcıklardır. Aksine kanıt varsa, virüsün bulaşıcı aktivitesi plak oluşturan birimler (PFU) veya çiçek hastalığı oluşturan birimler (PFU) cinsinden ölçülebilir. 1 PFU = bir plak oluşumuna ve bir plak oluşumuna neden olabilen virüs dozu PFU - bir cep. Yöntemler: HAO'da birkaç CC veya EC'ye virüs bulaştı. Pockmark veya plakların aritmetik ortalama sayısı hesaplanır. Bu = virüsün PFU'su veya OFU'su. Virüs içeren malzemenin birim hacmi başına kaç PFU veya TFU olduğunu hesaplayın. Bu başlık. T=n/Va, burada n, plakların veya kabarcıkların aritmetik ortalamasıdır ve malzemenin seyreltilmesidir, V uygulanan dozdur. % 50 bulaşıcı etki yöntemi. Bir birim virüs miktarı, enfekte olanların %50'sinde bulaşıcı etki yaratabilecek bir dozdur. Malzeme birimi başına bu tür dozların sayısı, bu malzemedeki virüsün titresini ifade edecektir. Test materyalinin 10 kat seyreltilmesi hazırlanır, daha sonra eşit gruplardaki canlı test nesnelerine eşit dozlar uygulanır. Eylemin sonucunu dikkate alıyorlar ve virüsün hangi seyreltmede etkisini% 50 oranında gösterdiğini buluyorlar. Böyle bir seyreltme hemen bulunamazsa, T=lgB – (b-50)/(b-a) *lgd formülü kullanılarak hesaplanır; burada B, %50'den fazla bulaşıcı etki veren seyreltmedir, b ise %50'den fazla bulaşıcı etki veren yüzde, a – %50'den az d – seyreltme faktörü. 1HAE, virüsle aynı hacimde bulunan kırmızı kan hücrelerinin yaklaşık %50'sini, yıkanmış kırmızı kan hücrelerinin %1'lik süspansiyonunu aglütine etme kapasitesine sahip bir virüs dozu olarak alınır. Malzemenin bir dizi birbirini takip eden çoklu seyreltmeleri hazırlanır ve her seyreltmeye %1'lik bir süspansiyon eklenir. Reaksiyon çapraz olarak puanlanır. 2-çapraz reaksiyon, seyreltme faktörü ile çarpılan 1GAE'yi içerir.

SORU 29 “AY VE AĞIZ VİRÜSÜNÜN BİYOLOJİK ÖZELLİKLERİ. TANI PRENSİBİ"

Şap hastalığı, ateş, ağız mukozasında veziküler lezyonlar, korolla ve meme derisi, genç hayvanlarda ağız mukozasının lezyonları ile kendini gösteren akut, oldukça bulaşıcı bir artiodaktil hastalığıdır. taç ve meme derisi ve genç hayvanlarda miyokard ve iskelet kaslarının hasar görmesi nedeniyle. Şap hastalığı dünyanın birçok ülkesinde kayıtlıdır. Kuluçka süresi 1-3 gün sürer. Bazen 7-10 güne kadar. Hayvanlarda bu hastalığın en karakteristik belirtisi ağız mukozasında ve korolla ve meme derisinde veziküler lezyonlardır. Sığırlarda akut, yetişkinlerde iyi huyludur. Başlangıçta iştahta bir bozulma, tükürük salgısında artış ve vücut ısısında bir artış kaydedildi. 2-3. günde dudakların ve dilin iç yüzeyinde (bazılarında toynak arası boşluk bölgesinde, meme üzerinde) aftlar görülür. Bir gün içinde erozyonlar oluşur. 2-3 hafta sonra erozyonlar iyileşir ve hayvan iyileşir. Virüs, Picornaviridae familyasına ait, Aphtovirus cinsine ait, RNA içeren, süperkapsid bir kabuğa sahip değil. Virionlar ikosahedral şekilli küçük parçacıklardır. Virüs çevresel etkilere karşı oldukça dayanıklıdır. Evcil ve yabani artiodaktiller duyarlıdır. Virüs kuluçka döneminde zaten izole edilebilir. Nükse uzun süreli viral taşıyıcılık eşlik edebilir. İyileşen sığırların yaklaşık %50'si virüsü 8 ay boyunca, bazıları ise 2 yıla kadar saçabilir. Virüs, doğal olarak duyarlı ve laboratuvar hayvanları üzerinde yetiştiriliyor: yeni doğmuş fareler, tavşanlar ve kobaylar. Tomurcuk hücrelerinde iyi çoğalır. Hemaglutinasyon özelliği yoktur. Bilinen 7 Şap hastalığı türü vardır: A, O, C, Sat-1, Sat-2, Sat-3, Asia-1. Doğal olarak duyarlı hayvanların vücudunda virüs, virüsü nötralize eden, kompleman bağlayan ve çökelten antikorların oluşumunu indükler.

Şap hastalığı virüsü genellikle RSC'de belirlenir. RSC'nin ana bileşenleri AG, AT, kompleman, hemolitik serum ve koyun eritrositleridir; Seyreltici olarak ICN veya çeşitli tampon çözeltileri kullanılır. AG ve serum, tamamlayıcılık karşıtı özelliğe sahip olabilir - hemolizi geciktiren ve reaksiyonun sonuçlarını bozan komplemanı adsorbe etme yeteneği. Tamamlayıcılık karşıtlığından kurtulmak için AG, AG ve virüs olarak kullanılan doku tipine bağlı olarak aseton, freon, eter, kloroform gibi çeşitli yöntemler kullanılarak saflaştırılır. RSC için AG, enfekte hayvanların organlarından, enfekte EC'nin allantoik ve amniyotik sıvısından ve ayrıca enfekte EC'nin sıvı ortamından hazırlanır. RSC, hayvanlarda hastalığa neden olan şap hastalığı virüsünün türlerini ve alt tiplerini belirlemek, aşı üretiminde şap hastalığı virüsünün üretim suşlarını ve araştırma çalışmalarında laboratuvar suşlarını test etmek için kullanılır.

SORU 30 “PARLAKLIK MİKROSKOPİSİ. İMMÜNOFLORESANIN TEMELLERİ".

Yöntem, özü, çeşitli enerji türlerini (ışık, elektrik) emerek, belirli maddelerin atomlarının uyarılmış bir duruma geçmesi ve daha sonra orijinal durumlarına geri dönerek emileni serbest bırakması olan lüminesans olgusuna dayanmaktadır. enerji ışık radyasyonu şeklindedir. Lüminesans, floresans şeklinde gözlenir - heyecan verici ışıkla ışınlama anında ortaya çıkan ve tamamlandıktan hemen sonra duran bir parıltı. Fosforesans, uyarılma sürecinin bitiminden sonra bile uzun süre devam eden bir parıltıdır.

SORU 31 “RABİS VİRÜSÜ, ÖZELLİKLERİ. PATOJENİZE. TEŞHİS İLKELERİ".

Kuduz, sinir sisteminde ciddi hasara neden olan, genellikle ölümcül sonuçlarla ortaya çıkan akut bulaşıcı bir hastalıktır. İnsanlar ve tüm memeliler duyarlıdır. Kuduz yaygındır. Patojen köpekler, kediler, yabani kemirgenler ve yırtıcı hayvanların yanı sıra kan emen vampir yarasalar tarafından da bulaşır. Kuluçka süresinin süresi ısırığın yerine, şiddetine, yaraya giren virüsün miktarına ve virülansına ve ısırılan hayvanın direncine bağlıdır. Kuluçka süresi 1-3 haftadan bir yıla kadar veya daha fazla sürer. Hastalık akut. Atipik bir seyrin klinik belirtileri iştah kaybı, rumen atonisi, faringeal felç, salya akmasıdır. Hastalığın şiddetli ve sessiz bir seyri de olabilir. Kuduz virüsü (RV) nöroprobazia olarak belirgindir. Sinir gövdeleri boyunca çevreden merkezi sinir sistemine merkezcil olarak nüfuz ederek, vücutta periferik sinirler boyunca merkezkaç olarak yayılır ve tükürük bezleri de dahil olmak üzere çeşitli organlara girer.

Virüs, Lyssavirus cinsi Rhabdoviridae familyasına aittir. Viryonlar ucu kesik bir çubuk şeklindedir. Virüs viryonu sarmal tipte simetriye sahip RNA içerir ve bir lipoprotein zarfına sahiptir. Düşük sıcaklıklar virüsü korur. VB viryonu glikoprotein ve nükleokapsid Ag içerir. Birincisi virüsü nötralize eden antikorların oluşumunu tetikler, ikincisi ise komplemanı sabitleyen ve çökelten antikorları tetikler. Vücutta virüs esas olarak merkezi sinir sisteminde, tükürük bezlerinde ve tükürükte lokalize olur. Farelerde, tavşanlarda, kobaylarda ve birincil hücre kültürlerinde yetiştirilir. Virüsün CC'de çoğalması her zaman CPE olarak kendini göstermez. Enfeksiyon kaynakları hasta hayvanlardır. Virüsü bir ısırık yoluyla bulaştırıyorlar. Kuduz tanısı kritik önem taşıyan epidemiyolojik, klinik veriler ve laboratuvar test sonuçlarına dayanılarak konur. Araştırma için, küçük hayvanların taze cesetleri bir bütün olarak laboratuvara ve büyük ve orta boy hayvanlardan - 2 servikal omurlu kafa - gönderilir. Küçük hayvanların cesetleri araştırmaya gönderilmeden önce böcek ilacı ile tedavi ediliyor. Laboratuvar teşhisleri şunları içerir: RIF ve RDP'de viral hipertansiyonun tespiti, Babes-Negri cisimcikleri ve beyaz farelerde biyoanalizler. RIF - bu reaksiyon için biyoendüstri floresan anti-kuduz gama globulin üretir. Prensip – 1) GM'nin sol ve sağ tarafının çeşitli bölümlerinden cam slaytlar üzerine baskı veya smear yapın (her bölümden en az 2 hazırlık); 2) Kurutulur ve soğutulmuş asetonda sabitlenir; 3) Kurutun, floresan gama globulin uygulayın; 4) Nemli bir odaya yerleştirin; 5) ICN'yi iyice yıkadım, suyla duruladım, havayla kuruttum, floresan olmayan immersiyon yağı uyguladım ve floresan mikroskobu altında inceledim. Antijen WB içeren preparatlarda, nöronlarda, ancak daha sıklıkla hücrelerin dışında, farklı boyut ve şekillerde sarı-yeşil floresan granüller gözlenir. RDP – 1) Cam slaytların üzerine agar jeli dökülür 2) Kuyucuklar yapılır (D = 4-5 mm); 3) Kuyular GM bölümlerinden gelen macun benzeri bir kütle ile doldurulur. 4) “+” ve “-“ AG işaretli kontroller aynı kalıp kullanılarak ayrı bir cam üzerine yerleştirilir; 5) Kuyucuklar doldurulduktan sonra preparatlar nemli bir odaya yerleştirilir ve 37°C'de 6 saat termostatta, ardından 18 saat oda sıcaklığında tutulur. Beyin süspansiyonu ve kuduz gama globulin içeren oyuklar arasında herhangi bir yoğunlukta bir veya 2-3 çizgi çökelme göründüğünde reaksiyon pozitif kabul edilir. BEDENLERİN TESPİTİ - GM'nin tüm parçalarından cam slaytlar üzerine ince lekeler veya baskılar yapılır ve Satıcılar veya Muromtsev veya Mann veya Lenz'e göre boyanır. BIOPEST - beyaz fareler (16-20 gram) seçilir, GM'nin tüm kısımlarından alınan sinir dokusu, steril kumlu bir havanda öğütülür, %10'luk bir süspansiyona ICN eklenir, 30-40 dakika bırakılır ve süpernatan, yavrulara enfeksiyon bulaştırmak için kullanılır. 10-12 parçayı enfekte edin: yarısı intraserebral olarak 0,03 ml ile, yarısı deri altından burun bölgesinde veya üst dudağa 0,1-0,2 ml ile. 30 gün boyunca gözlemlendi. Patolojik materyalde VD varlığında, enfeksiyondan 7-10 gün sonra fareler semptomlar sergiler: kabarık kürk, tuhaf bir sırt kamburluğu, hareketlerin koordinasyonunda bozulma, arka tarafta felç, ardından ön ayaklar ve ölüm. Ölü farelerde, Babes-Negri cisimciklerinin saptanması için RIF'de GM incelenir ve bir RDP tanısı konur. Enfekte farelerin beyinlerinden alınan preparatlarda Babes-Negri cisimcikleri bulunursa veya AG, RIF veya RDP yöntemleriyle tespit edilirse, kuduz için yapılan bir biyolojik tahlil pozitif kabul edilir. Negatif tanı, farelerin 30 gün içinde ölmemesidir.

SORU NO: 32 “BAĞIŞIKLIĞIN MODERN SINIFLANDIRILMASI. FARKLI İMMÜNOGLOBÜLİN SINIFLARININ YAPI ÖZELLİKLERİ VE YAPILARINDA.”

Bağışıklık, vücudun patojen mikropların, bunların toksinlerinin ve biyolojik nitelikteki diğer yabancı maddelerin etkilerine karşı bağışıklık durumudur.

Vücudun bağışıklık sistemi, yabancı maddelere karşı tepki veren organ ve hücrelerden oluşan bir sistemdir.

Doğuştan bağışıklık, genomda bulunan ve hücre zarlarının yüzeyinde belirli bir tipteki gangliosidlerin sayısı ve düzenlenme sırası ile ortaya çıkan bulaşıcı ajanlara karşı bağışıklıktır. Çok dayanıklıdır ancak mutlak değildir.

Edinilmiş bağışıklık, vücudun yalnızca belirli bir patojene karşı direncidir. Bu bağışıklık doğal ve yapay olarak ikiye ayrılır. Doğal 1'e ayrılır. aktif - hayvan hastalıktan doğal olarak kurtulduktan sonra, bazen tekrarlanan küçük patojen dozlarına maruz kaldıktan sonra (bağışıklık kazandırıcı alt enfeksiyon) oluşur. 2.pasif - anneden fetusa karşı antikorların plasenta yoluyla veya doğumdan sonra kolostrumlu bağırsaklardan alınması nedeniyle edinilen yenidoğanların bağışıklığı. Doğal ve yapay kolostral bağışıklık vardır; ilk durumda bağışıklık, çeşitli çevresel antijenlerin etkisi altında annenin vücudunda doğal olarak üretilen antikorlardan kaynaklanır. İkinci durumda, annenin vücudunun hedefe yönelik aşılanması yoluyla. Doğal olarak edinilen aktif bağışıklık 2 yıl, bazen ömür boyu sürebilir; yapay olarak edinilen bağışıklık, birkaç haftadan birkaç aya kadar bir bağışıklık durumu sağlayabilir.

Yapay olarak edinilen bağışıklık da 1'e ayrılır.aktif - hayvanların aşılarla aşılanması sonucu oluşur (7-14 gün sonra gelişir ve birkaç aydan 1 yıla kadar veya daha fazla sürer) ve pasif - spesifik içeren bağışıklık serumu oluştuğunda oluşturulur Belirli bir patojene karşı antikorlar.

Ayrıca bağışıklık türleri de vardır: 1. Antibakteriyel bağışıklık - koruyucu mekanizmalar patojenik mikroplara karşı yönlendirilir. 2. Antiviral – vücut antiviral antikorlar üretir. 3. Antitoksik bağışıklık - oluşumu sırasında bakteriler yok edilmez, ancak hastanın vücudundaki toksinleri etkili bir şekilde nötralize eden antikorlar üretilir.

4.Yerel bağışıklık. 5. Steril bağışıklık - eğer bir hastalıktan sonra bağışıklık durumu korunurken vücut patojenden kurtulursa. 6. Steril olmayan - bağışıklık yalnızca patojen vücutta olduğu sürece korunduğunda. 7. Humoral bağışıklık - enfekte vücutta spesifik antikorların üretimi. 8. Hücresel – patojenle spesifik olarak reaksiyona giren T-lenfositlerin oluşumuyla sağlanır.

Vücudun savunmasının spesifik olmayan faktörleri.

İlk koruyucu bariyer görevi görürler ve yeniden inşa edilmeleri gerekmez.

Deri, mikroorganizmaların girişine karşı güçlü bir bariyerdir ve mekanik faktörler önemlidir.

Mukoza zarları - siliyer epitel yardımıyla solunum yolunda (mikroorganizmalarla birlikte bir mukus filmini doğal açıklıklara doğru hareket ettirir), ağızda burun geçişlerine (öksürme ve hapşırma). Bu membranlar, özellikle lizozim ve IgA'ya bağlı olarak bakteri yok edici özelliklere sahip salgılar salgılar. Sindirim sisteminin salgıları birçok patojenik mikrobu etkisiz hale getirme özelliğine sahiptir. Tükürük lizozim, amilaz ve fosfataz içerir. Safra, pastörellanın ölümüne neden olur. Bağırsak mukozası güçlü antimikrobiyal faktörler içerir.

Lenf düğümleri - içlerinde iltihaplanma gelişir, kendi bölgesinde mikroplar fibrin iplikleri ile sabitlenir. Kompleman sistemi ve endojen medyatörler inflamasyonda rol oynar.

Fagositoz, patojenik canlı veya ölü mikropların ve içine giren diğer yabancı parçacıkların vücut hücreleri tarafından aktif olarak emilmesi ve ardından enzimlerin yardımıyla sindirim sürecidir.

Antikorlar, her biri kendine özgü antijen bağlanma bölgesine sahip milyonlarca çeşitte mevcut olabilir. Toplu olarak immünoglobulin (Ig) olarak adlandırılan AT proteinleri, kan proteinlerinin ana sınıflarından birini oluşturur ve toplam plazma proteininin ağırlıkça yaklaşık %20'sini oluşturur. Antijen, B hücresinin membran antijene spesifik reseptörlerine bağlandığında, antijen salgılayan hücreleri oluşturmak için hücre çoğalması ve farklılaşması meydana gelir. AT'ler 2 özdeş Ag bağlama bölgesine sahiptir. En basit AT molekülleri, iki "dalın" her birinin sonunda bir tane olmak üzere iki özdeş Ag bağlama bölgesine sahip, şematik olarak gama harfi şeklindedir. Bu tür 2 bölge olduğundan bu AT'lere iki değerlikli denir. Antijenlerin koruyucu etkisi basitçe antijenlere bağlanma yetenekleriyle açıklanmaz. Ayrıca "kuyruğun" dahil olduğu bir dizi başka işlevi de yerine getirirler; bunlara efektör işlevler denir ve "kuyruğun" bunlara katılımıyla değil, Fc parçasının yapısıyla belirlenir. Molekülün bu bölgesi, AG'nin bağlanması durumunda ne olacağını belirler. Aynı antijen bağlama bölgelerine sahip antikorlar, çok farklı "kuyruk" bölgelerine ve dolayısıyla farklı fonksiyonel özelliklere sahip olabilir. Ig G, D, E ve serum IgA molekülü 2 hafif ve 2 ağır olmak üzere 4 polipeptit zincirinden oluşur. Yüksek omurgalılarda, her biri kendi ağır zincir sınıfına sahip olan 5 farklı antikor sınıfı vardır: IgA, IgD, IgE, IgG, IgM. IgG antikorları kanda bulunan Ig'nin ana sınıfını oluşturur. İkincil yanıt sırasında büyük miktarlarda üretilirler ve anneden fetüse geçebilen tek antikorlardır. Bu, çoğu ikincil bağışıklık tepkisinde üretilen baskın antikor sınıfıdır; birincil bağışıklık tepkisinin erken aşamalarında, esas olarak IgM antikorları kana girer - bunlar aynı zamanda gelişen B hücreleri tarafından üretilen ilk antikor sınıfıdır. IgA, süt salgılarında, tükürükte, gözyaşında, solunum yolu ve bağırsak yolu salgılarında bulunan ana antikor sınıfıdır. AT'ler, virüsleri etkisiz hale getirerek, tamamlayıcıyı ve istilacı MO'ları öldüren ve yutan çeşitli hücreleri harekete geçirerek omurgalıları enfeksiyonlardan korur.

SORU NO: 33 “ANTİ-VİRAL BAĞIŞIKLIĞIN ÖZELLİKLERİ.”

1. Antiviral bağışıklık benzersiz koruyucu mekanizmalarla ilişkilidir, çünkü Virüsler cansız bir hücrede gelişip çoğalamazlar. Vücudun koruyucu adaptasyonu, virüsün 2 varoluş biçimine yöneliktir. Hücre dışı viral spesifik olmayan ve spesifik bağışıklık faktörlerinde, hücre içi formda - fagositoz süreci. Viral enfeksiyonlar sırasında her zaman eksiktir, interferonun hücre dışı form üzerinde eksojen bir etkisi vardır, virüsler adsorbe etme yeteneklerini kaybeder, viral Ag'ye yanıt olarak hücrelerde endojen interferon sentezlenir.

2.Virüsleri etkilemenin araçları ve yöntemleri, virüsün varlığının yalnızca belirli aşamalarında etkili olabilir; bu, hastaları bağışıklık ilaçları ile tedavi ederken en açık şekilde ortaya çıkar, çünkü Abs hücrelere nüfuz edemez.

3. Antiviral bağışıklık, bakteriyel bağışıklıktan daha uzun sürelidir ve bazı viral enfeksiyonlarda (sığır eti, köpek, mavi dil, çiçek hastalığı) ömür boyu sürer.

SORU No: 34 “LENFOİD HÜCRELERİN ANTİ-VİRAL BAĞIŞIKLIKTA ROLÜ (T VE B LENFOSİTLERİNİN ÖZELLİKLERİ).”

T lenfositleri. Timusa bağımlı lenfositler hematopoietik dokunun kök hücrelerinden oluşur. T lenfositlerin öncülleri timusa girer, burada farklılaşır ve çeşitli işlevlere sahip, karakteristik işaretler taşıyan hücreler olarak ortaya çıkar. Biyolojik özelliklerine bağlı olarak çeşitli T lenfosit alt popülasyonları vardır.

T yardımcı hücreleri (yardımcılar), düzenleyici destek hücreleri kategorisine aittir. B lenfositlerinin çoğalmasını ve antikor oluşturan hücrelere (plazma hücreleri) farklılaşmasını teşvik edin. B lenfositlerinin çoğu protein antijeninin etkisine tepkisinin tamamen iki şekilde gerçekleştirilen T yardımcı hücrelerinin yardımına bağlı olduğu tespit edilmiştir. Birincisi, yardımcı bir T hücresinin ve yanıt veren bir B hücresinin doğrudan eylemini gerektirir. T hücresinin, hücre reseptörleri tarafından zaten B hücresine sabitlenmiş bir antijenik molekülün determinantlarını tanıdığına inanılmaktadır: İkinci durumda, T hücrelerinin B lenfositlerini aktive etmedeki yardımcı fonksiyonu, aynı zamanda, çözünür spesifik olmayan yardımcı faktörler - lenfokinler (sitokinler).

T katilleri (öldürücüler), bağışıklık tepkisinin hücresel formlarını gerçekleştirerek efektör işlevlerini yerine getirir. Belirli bir organizmaya yabancı antijenlerin (tümör, viral ve doku uyumluluğu) bulunduğu yüzeyindeki hücreleri tanır ve yok ederler. T öldürücülerin çoğalması ve farklılaşması, eylemi esas olarak çözünebilir faktörlerin, özellikle interleikinin yardımıyla gerçekleştirilen T yardımcılarının katılımıyla gerçekleşir. Öldürücü T hücrelerinin gecikmiş tipte aşırı duyarlılık reaksiyonu yürüttüğü tespit edilmiştir.

T-y sil ve tel, bağışıklığın T alt sistemi içindeki bağışıklık tepkisini aktive eder ve T yardımcıları, timusa bağımlı antijenlere yanıt olarak bağışıklığın B bağlantısında bunun gelişmesi için fırsat sağlar.

T baskılayıcılar (baskılayıcılar), bağışıklık sisteminin dahili kendi kendini düzenlemesini iki şekilde sağlar: baskılayıcı hücreler, antijenlere karşı bağışıklık tepkisini sınırlar; otoimmün reaksiyonların gelişmesini önler. T baskılayıcılar antikor üretimini ve gecikmiş tip aşırı duyarlılığın gelişimini engeller; T öldürücülerin oluşumu immünolojik toleransın oluşmasını ve sürdürülmesini sağlar.

Bağışıklık hafızası T hücreleri, vücudun bu antijenle tekrar tekrar teması durumunda ikincil tipte bir bağışıklık tepkisi sağlar. Antijen bağlama reseptörleri ve Fe reseptörleri, IgA veya IgM, T hücrelerinin zarlarında bulunur. Boş lenfositler, T ve B lenfositlerinin ayırt edici belirteçlerine sahip değildir. Bu hücrelere karşı spesifik antikorların varlığında hedef hücrelerin antikora bağımlı, komplement içermeyen lizizini gerçekleştirme kapasitesine sahiptirler. K lenfositleri bir tür boş lenfosittir. Onlar için hedef hücreler tümör hücreleri, virüsler, monositler, fibroblastlar ve eritrositler tarafından değiştirilmiş T ve B lenfositleridir.

B lenfositleri. T lenfositleri gibi hematopoietik dokudaki kök hücrelerden oluşurlar. Fabricius bursasındaki B lenfositlerin öncülleri farklılaşmaya uğrar ve daha sonra lenf düğümlerine ve dalağa göç ederek spesifik işlevlerini yerine getirirler.

İki sınıf B hücresinin varlığı tespit edilmiştir: B efektörleri ve B düzenleyicileri. B lenfositlerinin efektör hücreleri, antikor oluşturan hücrelerdir (plazma), tek bir spesifikliğe sahip, yani bir antijenik belirleyiciye karşı antikorları sentezler. B-düzenleyiciler ise baskılayıcılara ve yükselticilere (yükselticiler) ayrılır. Düzenleyicilerin işlevi, yalnızca kemik iliğindeki T ve B lenfositlerinde DNA üretimini inhibe eden aracıları serbest bırakmak ve aynı zamanda B efektörlerini arttırmaktır. B lenfositleri T lenfositlerinden daha büyüktür (sırasıyla 8 ve 5 µm). Elektron mikroskobu sayesinde B lenfositlerin yüzeyinin çok sayıda villusla kaplı ve kıvrımlı olduğu, T lenfositlerin yüzeyinin ise pürüzsüz olduğu tespit edildi.

SORU NO: 35 “ANTİ-VİRAL BAĞIŞIKLIKTA HÜCRESEL FAKTÖRLERİN ROLÜ.”

Hücresel bağışıklığın efektör elemanlarının T-lenfositler ve humoral - plazma hücreleri olması nedeniyle humoraldan farklıdır. Birçok virüs, bakteri ve mantarın neden olduğu enfeksiyonlar için özellikle önemlidir.

Sitotoksik T hücrelerinin (TCC) oluşumu - TTC döngüsünün oluşumuna neden olabilen hücre yüzeyi Ag'leri arasında - MHC ürünleri (mononükleer sistem), virüsler, tümöre özgü Ag'ler. TCA döngüleri, antijenin bağlandığı ve hücre lizizini tetikleyen süreçlerin tetiklendiği reseptörlere sahiptir. T hücrelerinin litik aktivitesi, öldürücü hücre ile hedef hücre arasındaki yakın etkileşimle başlar, hedef hücrenin zar geçirgenliğinde bir değişiklik meydana gelir ve hücre zarının yırtılmasıyla sona erer.

PC'ler, çok çeşitli hedef hücreleri, özellikle tümör hücrelerini doğrudan parçalama yeteneğine sahiptir; MHC ürünlerinden bağımsız olarak hücreleri parçalayabilirler (interferon ve IL-2, PC'lerin litik aktivitesini arttırır).

HRT, Ag'nin vücuda, genellikle de cilde girdiği yerde iltihaplanma olarak kendini gösteren, T hücresine bağımlı bir immünolojik yanıttır. HRT'yi tolere edebilen lenfositler T hücreleridir ve TGRT lenfositleri olarak adlandırılırlar (aktive edilebilirler ve protein antijenlerine, alloantijenlere, tümör antijenlerine, virüs, bakteri, mantar, protozoa antijenlerine yanıt verebilirler.

Makrofajlar hücresel bağışıklıkta önemli bir rol oynar. Patojenler fagositlerin içinde çoğaldığında, hücre içi yıkım ancak makrofajlar özel olarak duyarlılaştırılmış T lenfositlerden bir uyarı aldıktan sonra meydana gelir. T lenfositleri, lenfokinleri serbest bırakarak makrofajları aktive eder.

SORU 36 “ANTİVİRAL BAĞIŞIKLIKTA HUMORAL FAKTÖRLERİN ROLÜ”

AT'ye ek olarak - antiviral bağışıklığın spesifik bir faktörü - vücut, virüslerle etkileşime girebilen ve aktivitelerini baskılayabilen özel virüs tropik maddeleri - inhibitörler üretir. Serum inhibitörlerinin geniş bir etki alanı vardır: bazıları virüslerin hemaglutinasyon özelliklerini bastırır, diğerleri sitopatojenik etkilerini bastırır ve diğerleri de bulaşıcı aktivitelerini bastırır. Isıya duyarlı inhibitörler normal insan ve hayvan serumlarında bulunur. Çok çeşitli virüs nötrleştirici etkilere sahiptirler, grip virüslerinin, New Castle hastalığının, kızamığın, arbovirüslerin ve diğerlerinin hemaglutinasyon aktivitesini bloke edebilir ve inhibitöre duyarlı virüslerin bulaşıcı ve immünojenik özelliklerini nötralize edebilirler. Isıya dayanıklı gama inhibitörleri, grip virüsünün modern varyantlarına karşı oldukça aktiftir. Isıya dayanıklı alfa inhibitörleri, virüsün hemaglutinasyon aktivitesini bloke eder, ancak bulaşıcı aktivitesini bloke etmez.

SORU 37 “ANTİVİRAL AT, ÖZELLİKLERİ, BİYOLOJİK ROLÜ, TESPİT VE TİTRASYON YÖNTEMLERİ.”

AT, belirli bir organizma için genetik yabancılık belirtileri olan yüksek moleküllü maddelerin parenteral uygulanması üzerine vücutta oluşan proteinlerdir. Antikorlar, oluşturulduğu yanıt olarak antijenle etkileşime girme ve biyolojik aktivitesini nötrleştirme yeteneğine sahiptir. AT'nin olağan kaynağı kan serumudur. Bir antijenle karşılaştığında AT sadece onun enfeksiyöz değil aynı zamanda hemaglutinasyon aktivitesini de nötralize eder, çünkü Hemaglütinasyondan sorumlu virion reseptörlerini bloke ederek “AG + AT” kompleksinin oluşmasına neden olur.

Antikorlar, her biri kendine özgü antijen bağlanma bölgesine sahip milyonlarca çeşitte mevcut olabilir. Toplu olarak immünoglobulin (Ig) olarak adlandırılan AT proteinleri, kan proteinlerinin ana sınıflarından birini oluşturur ve toplam plazma proteininin ağırlıkça yaklaşık %20'sini oluşturur. Antijen, B hücresinin membran antijene spesifik reseptörlerine bağlandığında, antijen salgılayan hücreleri oluşturmak için hücre çoğalması ve farklılaşması meydana gelir. AT'ler 2 özdeş Ag bağlama bölgesine sahiptir. En basit AT molekülleri, iki "dalın" her birinin sonunda bir tane olmak üzere iki özdeş Ag bağlama bölgesine sahip, şematik olarak gama harfi şeklindedir. Bu tür 2 bölge olduğundan bu AT'lere iki değerlikli denir. Antijenlerin koruyucu etkisi basitçe antijenlere bağlanma yetenekleriyle açıklanmaz. Ayrıca "kuyruğun" dahil olduğu bir dizi başka işlevi de yerine getirirler; bunlara efektör işlevler denir ve "kuyruğun" bunlara katılımıyla değil, Fc parçasının yapısıyla belirlenir. Molekülün bu bölgesi, AG'nin bağlanması durumunda ne olacağını belirler. Aynı antijen bağlama bölgelerine sahip antikorlar, çok farklı "kuyruk" bölgelerine ve dolayısıyla farklı işlevsel özelliklere sahip olabilir. Ig G, D, E ve serum IgA molekülü 2 hafif ve 2 ağır olmak üzere 4 polipeptit zincirinden oluşur. Yüksek omurgalılarda, her biri kendi ağır zincir sınıfına sahip olan 5 farklı antikor sınıfı vardır: IgA, IgD, IgE, IgG, IgM. IgG antikorları kanda bulunan Ig'nin ana sınıfını oluşturur. İkincil yanıt sırasında büyük miktarlarda üretilirler ve anneden fetüse geçebilen tek antikorlardır. Bu, çoğu ikincil bağışıklık tepkisinde üretilen baskın antikor sınıfıdır; birincil bağışıklık tepkisinin erken aşamalarında, esas olarak IgM antikorları kana girer - bunlar aynı zamanda gelişen B hücreleri tarafından üretilen ilk antikor sınıfıdır. IgA, süt salgılarında, tükürükte, gözyaşında, solunum yolu ve bağırsak yolu salgılarında bulunan ana antikor sınıfıdır. AT'ler, virüsleri etkisiz hale getirerek, komplemanı ve öldüren ve yutan çeşitli hücreleri harekete geçirerek omurgalıları enfeksiyonlardan korur.

MO'ları uyguladı.

SORU NO: 38 “İNTERFERON VE ANTİVİRAL BAĞIŞIKLIKTA ROLÜ.”

İnsan hücrelerinde interferonlar için 27 genetik lokus bulunur (bundan sonra I olarak anılacaktır) - 14'ü işlevseldir. Ve hücrenin genetik aparatında kodlanmıştır. Alfa, beta, gama - I vardır. Sisteminin merkezi bir organı yoktur, tüm hücreler onu sentezleme yeteneğine sahiptir. Oluşumu için indükleyicilere ihtiyaç vardır (virüsler, bakteriyel toksinler, bakteri ve mantarlardan elde edilen ekstraktlar, çift sarmallı RNA (en etkili) ve diğerleri). Virüs bulaşmış I – alfa ve beta; Gama-I, SEA ile fitohemaglutinin etkisi altında oluşur. I'in indüksiyonu sırasında 2 veya daha fazla türü sentezlenir. En aktif olarak indükleyen virüsler mixo ve arbovirüslerdir. Virüslerin interferonojenitesi, vücut için virülanslarının azalmasıyla artar. Viral olmayan yapıdaki indükleyiciler vücutta daha hızlı ve kısa süreli "ağır" I (yüksek moleküler ağırlığa sahip) birikimini uyarır. Ve Ig'nin intravenöz uygulanmasından 4 saat sonra elde edilebilir. Ve virionların adsorpsiyonunu, viropeksisini, deproteinizasyonunu etkilemez, virüs üretimini baskılar. Belirli bir virüse etki etmez, genel olarak birçok türe etki eder. Ve fagositik aktiviteyi artırabilir (makrofajlar I'e maruz kaldıklarında önemli ölçüde daha fazla vakuol içerir, cama daha hızlı bağlanır ve bakterileri daha aktif bir şekilde yakalar). İnterferon ilaçları hücre büyümesini engeller ve tümör hücrelerinin büyümesini baskılar. AT oluşumunu engeller ve B lenfositleri üzerinde doğrudan etkisi vardır. Ve T hücrelerinin öldürücü aktivitesinin artmasına yardımcı olur. Hücrelerin veya hayvanların küçük dozlarda And ile ön tedavisi, sentezinin son indüksiyonuna (hazırlama) yanıt olarak And üretiminde bir artışa yol açar. Üreticiler işlenirken And miktarlarında artışlar meydana gelir ve blokaj gözlenir (tersi etki). I üretimi dış koşullardan (hava, hava sıcaklığı) etkilenir. İyonlaştırıcı radyasyon I üretimini azaltır. Vücut büyüdükçe I inhibitörlerinin miktarı azalır. Ve genç hayvanlar, yetişkin bir hayvana kıyasla daha düşük bir antiviral etki sergiler çünkü mononükleer fagositlerin üretimi azalır. Yenidoğan hücrelerinde I oluşumu sırasında katepsin D aktive edilir ve lizozomlardan salınır, bu da I'in proteolitik bozulmasına yol açar. Büyüme meydana geldikçe, katepsin D'nin lizozomlardan salınmasına katkıda bulunan bileşenler azalır. I'ye en duyarlı olanlar, bir dış kabuğa sahip olan ve lipitler içeren virüslerdir (miksovirüsler, çiçek hastalığı grubu, arbovirüsler). Tıbbi ve veterinerlik amaçları için esas olarak endojen I indükleyicileri kullanılır, ancak eksojen I de kullanılır. Hormonlar gibi, I-in'ler de bazı hücreler tarafından salgılanır ve hücreler arası boşluk yoluyla diğer hücrelere belirli bir sinyal iletir. Ve - virüs spesifikliği olmayan ve antiviral aktivitesi olmayan “protein faktörü”, RNA ve protein sentezini içeren hücresel metabolizmanın katılımıyla gerçekleştirilir.

SORU NO: 39 “BAKTERİFaj ELDE ETME İLKESİ. Fajların AKTİVİTELERİNİN BELİRLENMESİ VE PRATİK KULLANIMI."

Faj, MO kültürüne özel bir fajın eklenmesiyle elde edilir, 37 derece sıcaklıkta 24 saat bekletilir, bakteri filtrelerinden süzülür ve süzüntünün saflığı aşılama ile kontrol edilir; zararsızlık ve aktivite, faj titresi.

Faj aktivitesinin belirlenmesi.

Kalitatif ve kantitatif yöntemleri kullanın. Faj miktarı sıvı veya katı besin ortamında titrasyonla belirlenir. Bunu yapmak için faj on kat seyreltilir. Her dilüsyona aynı miktarda günlük bakteri suyu kültürü eklenir. Daha sonra bir termostata yerleştirilirler ve sonuç dikkate alınır. Titre, karışımın 1 gün boyunca termostatta ayrılmasından sonra belirlenir.

Faj titresi, MO'nun büyümesini geciktirebilecek en yüksek seyreltme olarak alınır. Seyrelme derecesi ile ifade edilir. Yalnızca öldürücü fajlar hücrenin tamamen yok olmasına ve faj parçacıklarının oluşmasına neden olur.

SORU NO: 40 “VİRÜS HASTALIKLARIN PASİF ÖZEL ÖNLENMESİ. ALMANIN PRENSİBİ."

Pasif IP için hazırlıklar– AT veya Ig'nin parenteral ve oral uygulaması için. IP'nin gerçekleştirilmesi amacıyla immün, hiperimmün serumlar, iyileşen ve allojenik serumlar kullanılır.

İyileşme serumu– iyileşmiş veya enfekte olmuş hayvanların donörlerinden alınan serum. 1 ml/kg vücut ağırlığı dozunda artık etkili ajan kalmadığında kullanılır.

Hiperimmün serumlar– belirli bir şemaya göre büyük dozlarda antijenin tek bir uygulanması sonucu elde edilen donör serumu. Daha önce bu hastalığa yakalanmamış sağlıklı bir donör seçilir. Aşı oluyor ve 2-3 hafta sonra belli bir şemaya göre artan dozlarda uygulamaya başlıyorlar ve AT'deki artışın zirvesine ulaşıyorlar. Zirve, AT titresine serolojik bir reaksiyon ayarlanarak belirlenir (serum, sterilite, aktivite ve zararsızlık açısından kontrol edilir. Doz 2 ml/kg (terapötik), 1-1,5 ml/kg (önleme). Fraksiyonel olarak uygulanır. İlk olarak, duyarlılaştırılmış bir doz uygulanır ve 2-3 saat sonra anafilaktik şoku önlemek için izin verilen doz olur.

Allojenik peynir altı suyu– aynı çiftlikteki farklı hayvanlardan elde edilen kombine peynir altı suyu. Çok sayıda AT ve çeşitli AG'ler içerir.

SORU NO: 41 “VİRÜS HASTALIKLARIN ÖZELLİKLE ÖNLENMESİ. AŞI TÜRLERİ VE UYGULAMA YÖNTEMLERİ".

1. Epizootoloji pratiğinde hayvan popülasyonlarının boyutu ve yoğunluğundaki artış, epizootik riskini artırır. Bunlarla mücadelede temel prensip, bulaşıcı zincirin tüm alanlarda kırılması veya epizootik sürecin gizli duruma geçişini durdurmaktır. Zinciri kırmanın ana araçlarından biri zamanında önlem almaktır. Endüstriyel temelde gelişen hayvancılık için tüm faktörlere karşı mücadele. Patojenik MO'lar ve virüslerle enfekte olması sağlıklı bir hayvancılık için en önemli koşullardan biridir. IP (bağışıklık önleme), bulaşıcı hastalıklarla mücadele stratejisine uygun şekilde dahil edildiğinde tehlikeyi önemli ölçüde azaltır.

IP'nin amacı sadece bulaşıcı hastalıkların ortadan kaldırılması değil, aynı zamanda verimliliğin korunmasıdır, bu nedenle aşılamadan hemen sonra, yaşı ne olursa olsun tüm hayvan için yüksek derecede koruma sağlayabilecek aşılar oluşturmaya çalışmak gerekir. hayvanlar.

IP'nin birçok avantajı vardır:

1. IP'nin etki prensibi, hayvanın vücudunda, patojenin bulaşıcı bir hastalığa neden olma olasılığını maksimum düzeyde azaltma yönünde spesifik bir değişikliğe dayanmaktadır.

2.IP sürekli ve uzun bir süre, bazen de yaşam boyunca hareket eder.

3.IP yalnızca hayvanın vücudunun reaktivitesini değiştirmekle kalmaz, aynı zamanda tüm hayvanın bağışıklık savunması yeteneğini de arttırır.

4. IP'nin epizootik süreç üzerindeki etkisi doğru bir şekilde hesaplanabilir.

5. Uygun aşılama anlarının seçilmesiyle PI'ler, enfeksiyon açısından yaşamın en tehlikeli dönemlerinde maksimum koruma sağlar.

6.IP, hayvancılıktaki teknolojik süreçle ilişkilendirilebilir.

7. İP için kullanılan ilaçlar dozlanabilir, farklı kombinasyonlarda kullanılabilir ve standardize edilebilir.

8. AB ve kimyasal ilaçlardan farklı olarak PI, MO'da dirence neden olmaz.

9. IP, daha düşük ekonomik maliyetler ve hammadde maliyetleri gerektirir.

10. IP'nin hayvansal ürünlerin kalitesi üzerinde herhangi bir etkisi yoktur.

Olumsuz taraflar:

1.Bireysel girişimcinin yeteneklerinin değerlendirilmesi. Hayvanın sahibi çoğu zaman aşıyla korunmak için her şeyin zaten yapıldığına inanır, bu da sıhhi ve hijyenik önlemlerin zayıflamasına yol açar.

2. Nihai üretim maliyetinde çok büyük artış.

3. Yeterince test edilmemiş bir aşı kullanıldığında belirli bir süre için verimliliği azaltan aşılama sonrası reaksiyonlar.

4. Hayvanların çok sık rahatsız edilmesi, verimliliğin düşmesine neden olur.

5. Normal şartlarda aşı ve patojenik suşların farklılık göstermemesi veya ayırt edilmesinin büyük zorluklarla karşılanması durumunda teşhis sorunlarının ortaya çıkması ve hastalıklarla mücadelede zorlukların artması.

Aşıların uygunsuz kullanımı zarara neden olabilir, bu nedenle, her spesifik bulaşıcı hastalık ve epizootik durum için, en yüksek sonucu sağlamak amacıyla, ekonomik maliyetler ve etkililik dikkate alınarak bir aşının ve kullanım seçeneğinin dikkatli bir şekilde seçilmesi gerekir. toplu aşılamalar.

İmmünoprofilaksi, bulaşıcı hastalıkları olan kişilerin ikinci kez hastalanmadıklarına göre, insanlığın uzun süredir devam eden deneyimine dayanarak geliştirildi. Atina'da insan vebası olduğu zamanlar. Thukydides, iyileşmekte olan kişiler tarafından bakım sağlanmadığı takdirde hastaların yardımsız kalacağını bildirdi. 16. yüzyılda Çin'de, insan çiçek hastalığıyla uğraşırken bir gelenek vardı: kurutulmuş, ezilmiş çiçek hastalığı kabuklarını burundan solumak. Jenner çiçek aşısını icat etti. Pasteur kuduza karşı bir aşı yöntemi önerdi.

Viral hastalıkların önlenmesi, diğer bulaşıcı hastalıkların önlenmesiyle aynı prensiplere dayanmaktadır:

1. Organizasyonel faaliyetlerin yürütülmesi.

3. Kemoprofilaksi.

Canlı, inaktif, çok ve tek değerlikli serumların kullanılmasıyla viral hastalıkların spesifik olarak önlenmesi sağlanır.

İmmünpreparasyonların sınıflandırılması ve özellikleri:

Biyolojik ürünler, aktif ve pasif IP için kullanılan biyolojik kökenli ürünlerdir.

Pasif IP hazırlıkları – AT veya Ig'nin parenteral ve oral uygulaması için. IP'nin gerçekleştirilmesi amacıyla immün, hiperimmün serumlar, iyileşen ve allojenik serumlar kullanılır.

İyileşme serumu, iyileşmiş veya enfekte olmuş hayvanların donörlerinden alınan serumdur. 1 ml/kg vücut ağırlığı dozunda artık etkili ajan kalmadığında kullanılır.

Hiperimmün serumlar, belirli bir şemaya göre büyük dozlarda antijenin tek bir enjeksiyonu sonucu elde edilen donör serumlarıdır. Daha önce bu hastalığa yakalanmamış sağlıklı bir donör seçilir. Aşı oluyor ve 2-3 hafta sonra belli bir şemaya göre artan dozlarda uygulamaya başlıyorlar ve AT'deki artışın zirvesine ulaşıyorlar. Zirve, AT titresine serolojik bir reaksiyon ayarlanarak belirlenir (serum, sterilite, aktivite ve zararsızlık açısından kontrol edilir. Doz 2 ml/kg (terapötik), 1-1,5 ml/kg (önleme). Fraksiyonel olarak uygulanır. İlk olarak, duyarlılaştırılmış bir doz uygulanır ve 2-3 saat sonra anafilaktik şoku önlemek için izin verilen doz olur.

Gama globulinler, balast proteinlerinin salınması yoluyla hiperimmün serumlardan elde edilir. 0.5-2 ml/kg dozunda deri altı veya kas içi olarak uygulanırlar. Önce duyarlılaştırma uygulanır, ardından çözücü doz uygulanır.

Allojeneik peynir altı suyu, aynı çiftlikteki farklı hayvanlardan elde edilen kombine peynir altı suyudur. Çok sayıda AT ve çeşitli AG'ler içerir.

Aktif bağışıklama için hazırlıklar - aşılar. Canlı ve inaktif aşılar bulunmaktadır.

Aşılar ayrıca aşağıdakilere göre de sınıflandırılır: 1) Başlangıç ​​virüs içeren materyal – doku, embriyo-virüs aşıları, kültürlenmiş virüs aşıları; 2) zayıflatma yöntemiyle - lapinleştirilmiş (şap hastalığına, sığır vebasına ve diğerlerine karşı, tavşan kullanın), keçileştirilmiş (bir keçinin vücudundan, birkaç keçiden geçerek koyun çiçeğine karşı, sığırlara karşı), ovinleştirilmiş (içinden) koyun - sığır vebasına, şap hastalığına karşı).

Aşı uygulama yöntemleri:

1. Deri altı

2. Kas içi

3. Aerosol

4.Rektal yöntem

5. Burun içi

SORU 42 “İNAKTİF ANTİVİRAL AŞILAR, ELDE EDİLMESİ, ÖZELLİKLERİ, UYGULANMASI, CANLI AŞILARDAN FARKLARI.”

İnaktif aşılar karmaşık preparatlardır. Üretimleri büyük miktarda virüs gerektirir. Öldürülmüş aşılar için temel gereklilik, antijen belirleyicinin maksimum düzeyde korunması ve aşılanmış hayvanların bağışıklık koruması ile genomun tamamen ve geri döndürülemez şekilde inaktivasyonudur. İnaktive aşılar elde etmek için formalin, kloroform, tiyomersal, hidroksilamin, etanol, beta-propiolakton, etilenimin, UV ve gama ışınlaması ve sıcaklık inaktif maddeler olarak yaygın şekilde kullanılır. İnaktif aşılar sadece parenteral olarak kullanılır. Bunlar mutlaka adjuvanları içerir - spesifik olmayan immünojenez uyarıcıları. Daha büyük bir dozaj gereklidir ve kural olarak tekrarlanan uygulama gerekir. Canlı aşılara göre daha az yoğun ve kısa süreli bağışıklık yaratırlar.

SORU 43 “ANTİ-VİRAL BAĞIŞIKLIĞIN FAKTÖRLERİ, ÖZELLİKLERİ.”

Özel

1) Niteliksel olarak benzersiz koruyucu mekanizmalarla ilişkilidir, çünkü virüsler canlı bir hücrenin dışında gelişemezler 2) Koruma ismin 2 biçimine yöneliktir. virüs: hücrelerin dışında ve içinde. Dinlenme formu spesifik ve spesifik olmayan faktörlerden, humoral ve hücresel koruyucu faktörlerden etkilenir. Bitkisel formlar - viral mRNA'nın sentezini engelleyen interferon. 3) Virüs nötralize edici antikor, viral bilgi NK ile reaksiyona girmez. 4)Virüsü etkisiz hale getirme yöntem ve araçları ancak belirli bir aşamada etkilidir. 5) Özel koruyucu faktörler: hücre dışı oksifilik ve bazofilik granüllerin oluşumu ve antiviral inhibitörlerin varlığı. 6) Bu bağışıklık uzun süreli, bazen de ömür boyudur.

Spesifik olmayan hücresel ve genel fizyolojik reaksiyonlar.

Sıcaklık

Hormonlar direnci azaltır, ancak somatotropik hormonlar direnci arttırır ve inflamatuar yanıtı arttırır.

Hamile bir hayvan daha çabuk hastalanır ve hastalık daha şiddetli olur.

Boşaltım sisteminin fizyolojik durumu, virüsün vücuttan salınma hızıdır.

Humoral faktörler - serum inhibitörlerinin varlığı (ısıya dayanıklı veya ısıya dayanıklı). Her türün kendine özgü baskın türü vardır.

SORU 44 “CANLI ANTİ-VİRAL AŞILAR, ÖZELLİKLERİ, UYGULANIŞI VE İNAKTİF AŞILARDAN FARKLARI.”

Canlı antiviral aşılar, çeşitli biyolojik sistemlerde (EC, CC, laboratuvar hayvanları) yetiştirilen virüslerin aşı suşlarının liyofilize süspansiyonlarıdır veya uzun süreli bir epizootik sırasında oluşturulan patojenin doğal olarak zayıflatılmış suşlarını kullanır. Ana özellik, aşılanmış bir hayvanın vücudunda tipik bir bulaşıcı hastalığa neden olma yeteneğinin kalıcı olarak kaybedilmesidir; aynı zamanda hayvanın vücudunda "kök salma", yani çoğalma yeteneğine de sahiptirler. Aşı suşunun kalışı ve çoğalması genellikle 5-10 gün sürer. birkaç haftaya kadar ve bu hastalığın karakteristik klinik belirtilerinin eşlik etmemesi, bulaşıcı hastalığa karşı bağışıklık oluşumuna yol açar. Avantajları: Enfeksiyon sonrası bağışıklığa yaklaşan yüksek yoğunluk ve bağışıklık süresine sahiptirler. Çoğu tekli yönetim imkanı. Uygulama sadece deri altından değil, aynı zamanda ağızdan ve içten de yapılır. Dezavantajları: Olumsuz faktörlere duyarlılık. Sıkı depolama ve taşıma sınırları - sıcaklık - 4-8C. Aşı ampullerindeki vakumun kırılması kabul edilemez. Asepsi kurallarına sıkı sıkıya bağlılık. Kalite kontrol: 1) bağışçıların kapsamlı incelenmesi. 2) besin ortamının kalitesinin değerlendirilmesi ve kısırlık için kalite kontrol. 3) Virüs suşlarının üretim kalitesinin denetimi. 4) Biyomateryallerin korunması için en uygun koşulların yaratılması.

İnaktive aşılar daha az yoğun ve uzun süreli bağışıklık sağlar; tekrar tekrar uygulanmaları gerekir.

SORU NO: 45 “BAKTERİFajLAR, ÖNEMİ VE TEMEL ÖZELLİKLERİ.”

Bakteriyofajlar (Lat. Bacteriophaga'dan) – bakterileri yok eder. Bunlar bakteri hücrelerine nüfuz etme, içlerinde çoğalma ve ölümlerine neden olma yeteneğine sahip virüslerdir.

Bakteriyofajın keşfinin tarihi, şarbon bakterilerinin kazara parçalanmasını gözlemleyen Akademisyen Gamaley ile ilişkilidir.

Tvort - stafilokokların dejenerasyonunu tanımladı (1915). D'Herelle (1917), dizanteri basilinin faj ve bakterileri arasındaki etkileşimi ayrıntılı olarak incelemiş ve ajana “bakteriyofaj” adını vermiştir. Daha sonra mantar virüsleri, mikoplazmalar ve diğer mikroorganizmalar izole edildi. Bu nedenle, bu virüsleri belirtmek için "faj" terimi kullanılır - yiyici.

Faj yapısı ve morfolojisi.

Fajlar, kesin olarak yönlendirilmiş kapsomerler içeren bir kapsid ile çevrelenmiş DNA/RNA nükleik asidinden oluşur. Büyük fajlar iribaş benzeri bir yapıya sahiptir, bir başları, bir yakaları ve fibrillerin bağlandığı altıgen bir bazal plakayla biten bir kuyruk süreci vardır. Kafanın 2 kabuğu vardır: bir dış zar ve içinde AK'nin bulunduğu bir iç zar. Başın ortalama boyutu 60-100 nm, kuyruk ise 100-200 nm'dir. Morfolojiye göre fajlar 6 gruba ayrılır:

Kılıfı kasılan uzun bir süreç olan fajlar - T-çift fajlar.

Kılıfı büzülmeyen, uzun süreçli fajlar.

Proses analoğuna sahip fajlar.

Kısa bir süreçle fajlar.

Filamentli fajlar.

Bir süreci olmayan fajlar.

Fajın kimyasal bileşimi.

Faj kafası nükleik asitlerden birini içerir. Kabuk ayrıca lipitler ve karbonhidratlar da içerir. Fajlar 6 bin atmosfere kadar basınca dayanabiliyor. Çevresel etkilere karşı dayanıklıdırlar ve yedek ampullerde 13 yıla kadar etkinliklerini korurlar.

Kaynama, UV ışığı ve bazı kimyasalların etkisi altında hızla ölürler (%1 fenol, alkol, kloroform eter fajı değiştirmez). Bazı maddelerin: timol, kloroform, dinitrofenolün fajlar üzerinde etkisi yoktur ancak bakterileri öldürür.

%1 formalin çözeltisi fajı etkisiz hale getirir. Fajlar vardır: polifajlar (lizi ile ilgili bakteriler), monofajlar (lizi ile ilgili bakteriler), monofajlar (aynı türden lizis bakterileri), 1. türün belirli bir serotipinin parçalanmasına neden olan fajlar. Tipe özgü özelliklerine göre fajlar serotiplere ayrılır. Özel fajlar, aynı türden bakterilere binerek ilgili bakterilere kolaylıkla adapte olabilirler. Bakteriyofaj olgusu hem sıvı hem de katı besin ortamlarında kolaylıkla gözlemlenebilir. Besleyici ortamı olan bir tabağa bir kültür aşılarsanız ve birkaç damla yüksek konsantrasyonlu faj uygularsanız, o zaman bu yerde hiçbir büyüme olmayacaktır - steril noktalar. Hücrelerle etkileşim mekanizmasına göre fajlar öldürücü ve orta dereceli olarak ayrılır.

Ilıman fajların neden olduğu bakteriyofaj olgusu, yalnızca adsorpsiyon, hücrelere nüfuz etme, fajın çoğalması ve salınması aşamaları şeklinde kendini gösterir. Tüm üreme süreci DNA virüslerinin modelini takip eder. Virülent fajlar, yeni fajların oluşumunu ve bakteri hücrelerinin parçalanmasını sağlar. Fajla enfekte olmuş bakterilerde 1 dakika içinde 7-8 faj partikülünün ortaya çıktığı tespit edilmiştir.

Üreme diyagramı.

1. Fajın MO kabuğuna adsorpsiyonu ve çözünmesi. Fajlar flagellaları tarafından adsorbe edilir, bu flagellalar hücre duvarı reseptörlerine sıkı bir şekilde bağlanır, bunun sonucunda faj partikülü kasılır ve işlemin sonunda bakteri hücre zarına nüfuz eder ve aynı zamanda faj lizozim benzeri bir enzim salgılar. bu hücre zarını çözer.

2. Mikrobiyal hücreye nükleik asit enjeksiyonu. Nükleik asidin tamamı ve proteinlerin bir kısmı mikrobiyal hücreye enjekte edilir; kılıf bakteri hücresinin yüzeyinde kalır.

3.Gizli aşama – tutulma aşaması. Faz, DNA virüslerinin gelişimini teşvik eder. Başlangıçta mRNA sentezlenir, hücresel metabolizmayı durduran ve yavru nükleik asitlerin oluşumuna yol açan erken viral proteinlerin sentezine yol açar.

4. Yeni faj parçacıklarının oluşumu. Faj protein kabuğunun nükleik faj partikülleri ile doldurulmasıyla iki ana faj partikülünün bağlanması.

5. Bakteri hücre zarının çözünmesi ve yeni oluşan parçacıkların hücre dışına salınması. Hücre duvarının yırtılması şu şekilde kolaylaştırılır: hücre içi basınçta güçlü bir artış ve diğer yandan fajların neden olduğu enzimatik süreçlerin etkisi. Algılanan fajların sayısı 1 ila 1000 veya daha fazla arasında değişir.

Tüm çoğaltma süreci 3 ila 10 saat sürer.

Lizogeni - öldürücü fajların yanı sıra, bakteri hücresi ile etkileşimlerinin doğasında farklılık gösteren ılıman fajlar da vardır. Başlıca özellikleri, bitkisel bir durumdan profaj adı verilen, bakteriyel lizise neden olamayan, bulaşıcı olmayan bir forma dönüşebilmeleridir. Kromozom üzerinde bir profaj içeren bakteri hücrelerine lizojenik denir ve bu olaya lizojen denir. Bu olayda fajla enfekte olan bakteriler parçalanmaz. Ancak yapay lizis, belirli bir türün bakterilerini enfekte edebilecek bir fajın serbest bırakılmasını sağlayabilir. Bir profajın bitkisel faja geçişi sıklıkla gerçekleşmez. Ilıman fajlarla enfekte olduğunda hücrelerin bir kısmı bitkisel faj oluşturacak şekilde parçalanır, diğer kısmı hayatta kalır ve lizojenik hale gelir.

Lizojenik bakterilerde faj DNA'sı hücrenin DNA'sına entegre olur ve ılıman faj, litik özelliği olmayan profaja dönüştürülür.

Lizojenizasyon sonucu oluşan lizojenik bakteriler fajın taşıyıcısı haline gelir ve uzun süre bağışıklık kazanır. Bu bağlantı güçlüdür ve bakteri indükleyici ajanlara maruz kaldığında bozulur. Bunlar UV ışınları, iyonlaştırıcı radyasyon, kimyasal mutajenlerdir. Bu faktörlerin etkisi altında profaj özerk bir duruma geçer ve parçalanma meydana gelir.

Bakterilerin lizojenizasyonuna özelliklerinde (morfolojik, kültürel ve biyolojik özellikler) bir değişiklik eşlik eder. Toksik olmayan suşlar toksik hale gelir. Bakterilerin özelliklerinin değiştirilmesi – faj dönüşümü. Lizojenik bakteriler, virüslerin ve hücrelerin etkileşimini incelemek için en uygun modellerdir.

Şu anda, ılıman fajlar, değişkenlik süreçlerini daha doğru bir şekilde ayırt etmenin mümkün olduğu genetik soruları incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Radyasyonun etkisi altında lizojenik bakteri hücreleri tarafından üretilen faj parçacıklarının sayısı artar.

Fajların pratik kullanımı - fajlar bakterileri titre etmek, bir dizi bulaşıcı hastalığı tedavi etmek ve önlemek için kullanılır ve uzay aracındaki radyasyon dozunu belirlemek için kullanılır.

SORU 46 “LABORATUVAR HAYVANLARI, VIROLOJİDE KULLANIM AMAÇLARI VE YÖNTEMLERİ.”

Virüslerin yalnızca canlı hücrelerde çoğalabilmesi nedeniyle, virolojinin gelişiminin ilk aşamalarında, virüslerin laboratuvar hayvanlarının vücudunda yetiştirilmesi, bunlar üzerinde araştırma yapmak için özel olarak yetiştirilmesi yaygın olarak kullanıldı.

Kullanıldığı yerler: 1) PM'deki virüsü tespit etmek için 2) virüsün PM'den birincil izolasyonu 3) viral kütlenin birikmesi 4) virüsün laboratuvarda aktif durumda tutulması. 5) virüsün titrasyonu 6) bir test nesnesi olarak pH 6'da hiperimmün serumların elde edilmesi. Kullanılan hayvanlar: beyaz fareler (kuduz, şap hastalığı), beyaz sıçanlar (domuz gribi, Aujeszky hastalığı), kobaylar (kuduz, şap hastalığı, köpek hastalığı). Tavşanlar (kuduz, tavşan miksomaları).

Laboratuar hayvanları için gereklilikler - hayvanın bu virüse karşı duyarlı olması gerekir; Birçok virüsün üremesi açısından yaşı büyük önem taşıyor. Virüslerin çoğu genç ve hatta yeni doğmuş hayvanların vücudunda daha iyi çoğalır; Belirli yaşta ve aynı ağırlıkta hayvanların seçilmesiyle standart hassasiyet elde edilir. Hassasiyet açısından, birkaç nesil boyunca akraba yetiştirme sonucunda elde edilen sözde doğrusal hayvanlar en yüksek standarda sahiptir; Laboratuvar hayvanları sağlıklı olmalıdır. Viroloji laboratuvarının canlıyumuna giren hayvanların bulaşıcı hastalıklardan ari bir çiftlikten getirilmesi gerekmektedir. Karantinada tutuluyorlar ve klinik gözleme tabi tutuluyorlar. Hastalık varsa yok edilirler.

Hayvanlar, bir yandan tüm vücut sistemlerinin fizyolojik normlar dahilinde çalışmasını sağlayacak, diğer yandan karşılıklı yeniden enfeksiyon ve enfeksiyonun vivaryum dışına yayılması önlenecek şekilde yerleştirilir. Farklı türlerdeki hayvanlar için farklı bireysel işaretleme yöntemleri kullanılır. Büyük hayvanlar ve tavuklar için damgalı numaraya sahip metal etiketler kullanılır. Küçük bir grup hayvanı bir deneyde ve kısa bir süre için kullanırken, sırt ve kalçadaki izlerle saçlar kesilebilir. Beyaz farelerin ve beyaz sıçanların işaretlenmesi, ön veya arka bacaklardaki parmakların tek tek kesilmesiyle gerçekleştirilebilir. Pigmentsiz yüne renkli lekeler uygulama yöntemi sıklıkla kullanılır. Laboratuar hayvanlarının enfeksiyonu.

1. deri altından - geri.

2. İntradermal – topuk

3. Kas içi – uyluk

4. İntravenöz olarak - kuyrukta (önceden sıcak su ile ovulur ve sıkılır)

5. Burun içinden - burunda bir damla (hapşırmayı önlemek için önce zayıf bir eter anestezisi verilir)

6. İnteroserebral - kafatası bir iğne ile dikkatlice delinir, basmayın, damla kendi kendine gider.

Tüm yüzeyler iyotlu alkolle önceden yağlanmıştır.

Hazırlık laboratuvarı. hayvanlar (beyaz fare örneğini kullanarak)

Cilt bir dezenfektanla yağlanır.

Linea alba boyunca bir kesi yapılır.

Sternumun açılması - akciğerler alınır ve 1 numaralı tüpe yerleştirilir

Karın boşluğunun açılmasıyla karaciğer, dalak, böbrekler alınıp 2 numaralı tüpe yerleştirilir.

Kafatası açıldı. Beyin alınır, 4 katlı kesitler alınır, parçalar filtre kağıdına konulur ve cam üzerine baskılar yapılır.

SORU NO: 47 “GELİŞEN TAVUK EMBRİYOSUNUN YAPISI. TBE İLE ENFEKSİYON YÖNTEMİYLE ÇÖZÜLEN ANA SORUNLAR VE LABORATUVAR HAYVANLARINDA VİRÜS YETİŞTİRİLMESİNE GÖRE AVANTAJLARI.

CE, virolojide esasen LV ile aynı amaçlarla kullanılır: patolojik materyalde biyolojik tahlil yoluyla aktif virüsün saptanması; virüsün birincil izolasyonu; laboratuvarda virüslerin muhafaza edilmesi; virüs titrasyonu; laboratuvar araştırması ve aşı elde etmek için virüsün birikmesi; nötrleştirme reaksiyonunda bir test nesnesi olarak.

Yapısı: 1. Kabuk 2. Kabuk altı zarı 3. Hava odası 4. Alantoik boşluk 5. Yumurta sarısı kesesi 6. Albümin kesesi 7. CHAO - koryon-allantoik membran 8. Amniyotik boşluk 9. Embriyo 10. Kordon (yumurta kesesi ile yumurta sarısı kesesinin bağlantısı) göbek kordonu). 5-12 günden itibaren EC enfeksiyon için kullanılabilir

1) Kabuk ve kabuk altı membran, çevresel faktörlere karşı iyi bir koruma görevi görür. 2) EC, virüsün büyümesi için bir substrat içerir. 3) CE, incelenen malzemenin salınmasından kaynaklanan darbelere karşı dayanıklıdır. 4) EC'ler kolay erişilebilirdir, çevre dostudur, bakım ve besleme gerektirmez ve AT oluşturmaz.

TBE ile enfeksiyonun 6 yöntemi: 1) Alantoik boşlukta enfeksiyon (grip, Newcastle hastalığı). EC, küt ucu yukarı gelecek şekilde dikey olarak sabitlenir ve embriyonun yan tarafında, hava odası sınırının 5-6 mm yukarısında 1 mm'lik bir delik açılır. İğne, uzunlamasına eksene paralel olarak 10-12 mm derinliğe kadar yerleştirilir. 2) CAO (çiçek hastalığı, köpek vebası) için: a) S/B doğal hava odası. FE'yi küt ucu yukarı bakacak şekilde bir tripoda, hava odasının merkezinin karşısındaki kabukta 15-20 mm'lik bir pencereye yerleştirin. Kabuk membranını çıkarın. XAO'ya 0,2 mm süspansiyon uygulanır. Delik yara bandı. b) S/B yapay hava odası. Tripod, tomurcuk yukarıda olacak şekilde yataydır. 2 delik açın: hava odasının merkezinin üstünde, embriyonun yanında, yan tarafta 0,2-0,5 cm daha. İlk embriyodan hava emilir, tabanı CAO olan yapay bir hava odası oluşturulur, üzerine bulaşıcı bir sıvı uygulanır ve yapışkan bir sıva ile kapatılır. 3) Yumurta sarısı kesesinde (klamidya, Marek b.): a) EC dikey olarak bir standa yerleştirilir. Hava odasının merkezinin üzerinde, embriyonun bulunduğu yere zıt, 45 derecelik bir açıyla 3,5-4 cm'lik bir iğne olan bir delik. b) benzer bir enfeksiyon yolunun yatay olarak güçlendirilmiş bir CE standında gerçekleştirilmesi; bu durumda embriyo alttadır ve yumurta sarısı onun üstündedir. 4) Amniyotik boşluğa (grip, Newcastle hastalığı): yöntem kapalıdır - embriyo. yukarı. İğne küt ucu açık embriyoya doğru sokulur. yöntem - hava boşluğunun 1,5-2,5 cm yukarısında bir delik. Alt kabuk zarı çıkarılır. Cımbız XAO'yu embriyoya doğru iter. Daha sonra amniyotik membran CAO ile birlikte pencereye çekilir ve süspansiyon oraya verilir. Gitmene izin verdiler. Yara bandı. 5) Embriyonun vücuduna enfeksiyon. 6) kan damarlarına.

SORU 48 “HÜCRE KÜLTÜRLERİ TÜRLERİ VE VİRÜSOLOJİDE KULLANIMI. HER TÜRÜN KISA ÖZELLİKLERİ.”

Hücre kültürü (CC), çok hücreli bir organizmanın vücut dışındaki yapay koşullarda yaşayan ve çoğalan hücreleridir. Yetiştirme tekniği özellikle 40'lı yıllardan sonra başarılı bir şekilde gelişmeye başladı. Bu, şu olaylarla kolaylaştırılmıştır: CC'nin bakteriyel enfeksiyonunu önleyen antibiyotiklerin keşfi, Hang ve Enders'in virüslerin spesifik hücre tahribatına neden olma yeteneğinin keşfi. Dulbecco ve Vogt (1952), dokuları trypsinize etmek ve tek katmanlı CC'ler elde etmek için bir yöntem önerdi. Aşağıdaki CC'ler kullanılır: 1) PTCC – doğrudan vücudun organlarından veya dokularından elde edilen, in vitro olarak tek katmanda büyüyen hücreler. CC hemen hemen her insan veya hayvan organı veya dokusundan elde edilebilir. Bunu embriyonik organlardan yapmak daha iyidir çünkü embriyonik hücrelerin büyüme potansiyeli daha yüksektir. Çoğu zaman böbreklerden, akciğerlerden, deriden, timustan ve testislerden elde edilirler. Sağlıklı bir hayvandan birincil hücrelerin elde edilmesi için, kesimden en geç 2-3 saat sonra ilgili organlar veya dokular alınır, ezilir ve trypsin, pankreatin ve kollajenaz ile tedavi edilir. Enzimler hücreler arası maddeleri yok eder ve ortaya çıkan tek tek hücreler, besin ortamında süspanse edilir ve test tüplerinin veya yatakların iç yüzeyinde 37°C'deki bir termostatta kültürlenir. Hücreler cama yapışır ve bölünmeye başlar. Genellikle 3-5 gün sonra cam üzerinde 1 hücre kalınlığında bir tabaka oluşur. Besin ortamı, hücre atık ürünleriyle kirlendikçe değiştirilir. Tek tabaka 7-21 gün boyunca canlı kalacaktır. CC'de virüs yetiştirirken, antijen ve aşı elde ederken önemli olan yüksek titrede virüs içeren preparatlar elde etmek mümkündür. 2) Alt kültürler - bunlar sıklıkla kullanılır ve şiltelerde yetiştirilen birincil hücrelerin bir versen veya trypsin çözeltisi ile camdan çıkarılması, yeni bir besin ortamında yeniden süspanse edilmesi ve yeni şilteler veya test tüpleri üzerine yeniden tohumlanması yoluyla kullanılır ve elde edilir. 2-3 gün sonra tek tabaka oluşur. PTCA'ya karşı duyarlılık açısından daha düşük değildirler ve daha ekonomiktirler. 3) Transplante edilebilir CC'ler, vücut dışında süresiz olarak uzun bir süre çoğalma yeteneğine sahip hücrelerdir. Laboratuvarda bir kaptan diğerine alt kültür yoluyla tutulurlar (besleyici ortamın değiştirilmesine tabidir). Belirli bir yetiştirme modunda uzun vadeli alt kültürler yoluyla artan büyüme aktivitesine sahip birincil CC'lerden elde edilirler. Nakledilen kültürlerin hücreleri aynı şekle sahiptir, heteroploid bir kromozom setine sahiptir, in vitro büyüme koşulları altında stabildir ve bazıları onkogenik aktiviteye sahiptir. Birincil olanlardan önce "+" - hazırlanması daha kolaydır, gizli virüslerin ve mikrofloranın varlığını önceden kontrol edebilirsiniz; Klonal soylar, virüsün yayılması için birincil soylara göre daha standart koşullar sağlar. Nakledilen hücrelerin çoğu, virüslere karşı ilgili birincil kültürlerden daha geniş bir duyarlılık spektrumuna sahiptir. Ancak malign dejenerasyona eğilimlidirler. 4) Diploid CC'ler, in vitro yetiştirme sırasında stabilize edilen, sınırlı bir ömre sahip, 3 büyüme fazı ile karakterize edilen, pasaj sırasında orijinal dokunun karyotip karakteristiğini koruyan, kirletici maddelerden arınmış ve nakledildiğinde tümörijenik aktiviteye sahip olmayan morfolojik olarak homojen bir hücre popülasyonudur. hamsterlara. Ayrıca birincil hücrelerden de elde edilirler. Buna karşılık, sınırlı geçiş yeteneklerine sahiptirler. Maksimum geçiş sayısı 50 -\+ 10'dur, ardından bölünen hücrelerin sayısı keskin bir şekilde azalır ve ölürler. Nakledilebilir CC'lere göre avantajları - besin ortamını değiştirmeden 10-12 gün boyunca canlı bir durumda olabilirler; besiyerini haftada bir kez değiştirirken 4 hafta boyunca canlı kalırlar; Özellikle virüslerin uzun süreli ekimi için uygundurlar; orijinal dokunun virüslere karşı duyarlılığını korurlar. 5) Süspansiyon CC'leri – süspansiyon halindeki sürekli hücre kültürleri.

SORU No: 49 “PRİMER TRİPSİZE HÜCRE KÜLTÜRLERİ. AVANTAJLARI VE DEZAVANTAJLARI. VIROLOJİK ARAŞTIRMALARDA UYGULAMA".

PTCC, doğrudan vücudun organlarından veya dokularından elde edilen, in vitro olarak tek katmanda büyüyen hücrelerdir. CC hemen hemen her insan veya hayvan organı veya dokusundan elde edilebilir. Bunu embriyonik organlardan yapmak daha iyidir çünkü embriyonik hücrelerin büyüme potansiyeli daha yüksektir. Çoğu zaman böbreklerden, akciğerlerden, deriden, timustan ve testislerden elde edilirler. Sağlıklı bir hayvandan birincil hücrelerin elde edilmesi için, kesimden en geç 2-3 saat sonra ilgili organlar veya dokular alınır, ezilir ve trypsin, pankreatin ve kollajenaz ile tedavi edilir. Enzimler hücreler arası maddeleri yok eder ve ortaya çıkan tek tek hücreler, besin ortamında süspanse edilir ve test tüplerinin veya yatakların iç yüzeyinde 37°C'deki bir termostatta kültürlenir. Hücreler cama yapışır ve bölünmeye başlar. Genellikle 3-5 gün sonra cam üzerinde 1 hücre kalınlığında bir tabaka oluşur. Besin ortamı, hücre atık ürünleriyle kirlendikçe değiştirilir. Tek tabaka 7-21 gün boyunca canlı kalacaktır. CC'de virüs yetiştirirken, antijen ve aşı elde ederken önemli olan yüksek titrede virüs içeren preparatlar elde etmek mümkündür. QC yöntemini kullanarak, virüsün hücre ile etkileşimi, virüsün üreme yeri, antiviral immünizasyon mekanizması hakkında bazı teorik sorular çözüldü. Şu anda QC, virüsleri patojenik materyalden izole etmek, bunların endikasyonunu, tanımlanmasını, bir nötrleştirme reaksiyonunun oluşturulmasını, virüslerin titresinin belirlenmesini, tanısal Ag'lerin ve aşıların hazırlanmasını ve bir nötrleştirme reaksiyonunda test nesneleri olarak kullanılmaktadır.

SORU 50 “VİRİZOLOJİDE KULLANILAN BESLENME ORTAMI VE ÇÖZÜMLER. CC YETİŞTİRİCİLİĞİ İÇİN ALETLER İÇİN GEREKSİNİMLER, İŞLENMESİ.”

CC ile çalışırken en yaygın kullanılan çözeltiler, çeşitli tuzlar ve glikoz ilavesiyle bidistile su kullanılarak hazırlanan Hanks ve Earle çözeltileridir. Bu dengeli tuz çözeltileri tüm kültür ortamlarını hazırlamak için kullanılır çünkü... pH'ın korunmasını, hücrelerdeki ozmotik basıncı ve gerekli inorganik maddelerin uygun konsantrasyonunu sağlarlar. Ayrıca büyüme ortamını, virüs seyreltmelerini vb. temizlemek için de kullanılırlar. Hücreleri kültürlerken, trypsin ve versene'nin dağıtıcı çözeltileri kullanılır. Tripsin çözeltisi, doku parçalarını tek tek hücrelere ayırmak ve hücre katmanını camdan çıkarmak için kullanılır. Versene çözeltisi - hücreleri camdan çıkarmak için kullanılır. Besleyici ortam (bundan sonra NS olarak anılacaktır) - ayırt edin: 1) salin çözeltisi, kan serumu, doku ekstraktı, sığır amniyotik sıvısı vb. karışımından oluşan doğal ortam. Bileşenlerin sayısı değişir. Nadiren kullanılırlar. 2) yapay PS - çeşitli protein ürünlerinin enzimatik hidrolizatları: laktalbümin hidrolizatı, kas enzimatik hidrolizatı, vb. Sentetik ortamlardan en yaygın kullanılanları ortam 199 ve Eagle ortamıdır. Hidrojen iyonlarının konsantrasyonunu belirlemek için tüm kültür ortamlarına ve bazı salin solüsyonlarına fenol kırmızısı göstergesi eklenir. Kullanmadan önce mikroflorayı yok etmek için ortama AB ekleyin: penisilin ve streptomisin, ml başına 100 birim. Tüm PS'ler 2 gruba ayrılır: büyüme – hücrelerin yaşamını ve çoğalmasını sağlar; destekleyici - hücrelerin hayati aktivitesinin sağlanması, ancak üremelerinin sağlanması (kan serumu içermezler). Züccaciye – Züccaciyenin kalitesi, hücrelerin vücut dışında başarılı bir şekilde yetiştirilmesi için önemlidir. Steril olmalı, yağsız olmalı ve toksik etkisi olmamalıdır. Hücre ekimi için test tüpleri, 50, 100, 250, 500, 1000, 1500 ml'lik şilteler, 500, 1000, 2000 ml'lik silindir şişeler, çeşitli pipetler, PS ve çözelti şişeleri ve çeşitli kapasitelerde şişeler kullanılır. Cam eşyaların işlenmesi birkaç aşamadan oluşur: 1) enfekte olmuş cam eşyalar 5-6 saat boyunca% 2-3'lük bir NaOH çözeltisine batırılır; 2) musluk suyunu 3-4 kez değiştirerek durulayın; 3) %0,3-0,5'lik bir toz solüsyona batırın; 4) ılık toz solüsyonda bir fırça ile iyice yıkayın; 5) musluk suyunu birkaç kez değiştirerek durulayın; 6) %0,5 HC1 içeren damıtılmış suyla durulayın; 7) musluk suyuyla 4-5 kez durulayın ve 3 kez damıtılmış su değiştirin; 8) bir kurutma kabininde kurutulur; 9) bir fırına monte edilir ve sterilize edilir veya otoklavlanır.

SORU NO: 51 “HÜCRE KÜLTÜRLERİNİN VİRÜS İÇEREN MALZEMELERLE ENFEKSİYONUNUN PRENSİBİ. HÜCRE KÜLTÜRÜNDE VİRÜSLERİN BELİRTİLMESİ.”

Enfeksiyon için, sürekli hücre tek katmanlı test tüpleri (şilteler) seçilir ve bunları düşük büyütmeli bir mikroskop altında inceler. Büyüme besin ortamı boşaltılır, hücreler, serum antikorlarını ve inhibitörlerini çıkarmak için 1-2 kez Hanks çözeltisiyle yıkanır. Her tüpe 0,1-0,2 ml virüs içeren materyal eklenir ve çalkalanarak hücre tabakası üzerine eşit şekilde dağıtılır. Hücre yüzeyinde virüs adsorpsiyonu için 22-37C'de 1-2 saat bekletin. Virüs içeren malzeme kaplardan çıkarılır ve destekleyici ortam dökülür. Endikasyon için, CC'de virüsün gösterilmesine yönelik aşağıdaki ana yöntemler vardır: sitopatik etki veya sitopatik etki ile; pozitif bir hemadsorpsiyon reaksiyonu ile; plak oluşumu ile; hücre içi kapanımların tespiti için; immünofloresan reaksiyonlarında virüsleri tespit etmek; virüs girişimini tespit etmek için; hücre metabolizmasını baskılamak (renk testi); elektron mikroskobu. Spesifik hücre dejenerasyonunun tespiti (CPD ile) - basit bir işaret, hücrelerdeki dejeneratif değişikliklerdir (CPD'nin tezahürü). Hücredeki gözle görülür değişikliklere sitopatik değişiklikler denir. Enfekte olmuş hücrelerdeki bu değişiklikler, incelenen virüsün dozuna ve biyolojik özelliklerine bağlıdır; CPE'nin ortaya çıkışı ve özellikleri bazen izole edilen virüslerin tanımlanmasına olanak sağlar. KK, orta dozda virüsle enfekte olduğunda, bu değişikliklerin doğası spesifiktir ve gruplar halinde sınıflandırılabilir: fokal ince taneli dejenerasyon, tüm tek tabaka boyunca ince taneli dejenerasyon, odaksal küme şeklinde yuvarlak hücre birikimi, tekdüze granülerlik, hücrelerin dev çok çekirdekli semplastlar ve sinsitia halinde birleşmesi. Dejenerasyonun derecesi 4 noktalı bir sistem kullanılarak değerlendirilir.

Bazen CPD'nin yokluğu da gözlenir ancak bu bir virüsün yokluğu olarak değerlendirilmez ve bu nedenle 2-3 kör geçiş yapılır ve 2-3 geçişte virüsler istenilen özellikleri sergileyebilir.

SORU NO: 52 “VİRİONLARI VE VİRAL İÇERME CİHAZLARINI TESPİT ETME YÖNTEMLERİ, BUNLARIN PRATİK ÖNEMİ.”

Virüs viryonlarını incelemek ve yapılarını elektron mikroskobu kullanarak oluşturmak genellikle mümkündür; bu, boyutu 0,2-0,4 nm'ye kadar olan nesnelerin ayırt edilmesine olanak tanır. Elektron mikroskobu kullanılarak hasta hayvanlardan alınan materyalde viryonların tespiti, bu materyalde virüslerin varlığının kanıtı olarak hizmet edebilir ve bazı durumlarda viral hastalıkların teşhisinde kullanılabilir. Ancak bu yöntem teknik açıdan karmaşık ve pahalıdır ve tespit edilen virüsün doğru bir şekilde tanımlanmasına izin vermez. Işık mikroskobu ile görüş sınırında yalnızca çiçek hastalığı virüslerinin viryonlarını görmek mümkündür. Belirli boyalarla boyanabilme yeteneği, farklı virüslerin oluşturduğu inklüzyon cisimciklerinin boyutu, şekli, yapısı, hücre içindeki konumu aynı olmayıp, her virüse özeldir. Bu nedenle, hasta hayvanlardan alınan materyalde belirli özelliklere sahip hücre içi inklüzyon cisimciklerinin tespiti, bunların ne tür bir virüs oluştuklarına ve dolayısıyla incelenen materyalde bu virüsün varlığına karar vermemize olanak sağlar. İnklüzyon cisimciklerini tespit etmek için, özel boyama yöntemlerine ve ardından mikroskopiye tabi tutulan lekeler veya baskılar (ölümünden sonra veya intravital olarak) hazırlanır. Farklı virüslerin oluşturduğu inklüzyon cisimcikleri için boyama yöntemleri farklıdır. Birçok boyama tarifi geliştirildi. Bunlar arasında hematoksilen-eozin boyamayı içeren evrensel olanlar da vardır.

Viroloji.

İnsanlar için patojen olan diğer mikoplazmalar.

Mikoplazma pnömonisi.

Mikoplazma pnömonisi.

M. pneumoniae, koyun kırmızı kan hücrelerinin b-hemolizi, tetrazolyumun aerobik indirgenmesi ve metilen mavisi varlığında çoğalma yeteneği gibi özelliklerin yanı sıra seroloji açısından da diğer türlerden farklılık gösterir.

M. pneumoniae bakteriyel olmayan pnömoninin en yaygın nedenidir. Bu mikoplazma enfeksiyonu aynı zamanda bronşit veya hafif solunum yolu ateşi şeklini de alabilir.

Asemptomatik enfeksiyonlar yaygındır. Ailesel salgınlar yaygındır ve askeri eğitim merkezlerinde büyük salgınlar meydana gelmiştir. Kuluçka süresi yaklaşık iki haftadır.

M. pneumoniae balgam ve boğaz sürüntü kültürüyle izole edilebilir, ancak tanı genellikle kompleman fiksasyon testi olmak üzere serolojik yöntemlerle daha kolay konur. Mikoplazma pnömonisinin tanısına, birçok hastanın grup 0 insan kırmızı kan hücrelerine soğuk aglütinin oluşturduğuna dair ampirik bulgu yardımcı olur.

Mikoplazmalar normalde erkek ve kadınların üreme yollarının sakinleridir. En sık karşılaşılan tür, bazı vajinal akıntı, üretrit, salpenjit ve pelvik sepsis vakalarından sorumlu olan M. hominis'tir. Doğum sonrası sepsisin en sık nedenidir.

Mikroorganizma doğum sırasında annenin kanına girebilir ve eklemlerde lokalize olabilir. Küçük koloniler oluşturan bir grup mikoplazmanın (ureaplasma) her iki cinsiyette de gonokokal olmayan üretritin olası bir nedeni olduğu düşünülmektedir. Diğer türler ağız boşluğu ve nazofarenksin normal komensalleridir.

Önleme.İnsan vücudunun yüksek düzeyde genel direncini korumakla ilgilidir. ABD'de atipik pnömoninin spesifik olarak önlenmesi için öldürülmüş mikoplazmalardan yapılan bir aşı elde edildi

1. Pyatkin K.D., Krivoshein Yu.S. Mikrobiyoloji. - K: Yüksekokul, 1992. - 432 s.

Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Mikrobiyoloji. - M: Tıp, 1983. - 312 s.

2. Borisov L.B., Kozmin-Sokolov B.N., Freidlin I.S. Tıbbi mikrobiyoloji, viroloji ve immünolojide laboratuvar dersleri kılavuzu / ed. Borisova L.B. – G.: Tıp, 1993. – 232 s.

3. Tıbbi mikrobiyoloji, viroloji ve immünoloji: Ders Kitabı, ed. A.A. – M.: Tıbbi Bilgi Ajansı, 2004. - 691 s.

4. Tıbbi mikrobiyoloji, viroloji, immünoloji / ed. L.B.Borisov, A.M.Smirnova. - M: Tıp, 1994. - 528 s.

Odessa-2009

21 numaralı ders. Tıbbi virolojinin konusu ve görevleri. Virüslerin genel özellikleri

Yeni bir bilim - viroloji, virüs bilimi - çalışmaya başlıyoruz. Viroloji, biyoloji ve tıpta öncü bir konuma sahip olan, modern doğa bilimlerinin bağımsız bir bilimidir ve virolojinin rolü ve önemi giderek artmaktadır. Bunun nedeni bir dizi koşuldur:

1. Viral hastalıklar, insan bulaşıcı patolojisinde önde gelen bir yer tutar. Antibiyotik kullanımı çoğu bakteriyel hastalığın tedavisini etkili bir şekilde çözmeyi mümkün kılarken, viral hastalıkların tedavisi için hala yeterince etkili ve zararsız ilaçlar bulunmamaktadır. Bakteriyel enfeksiyonların görülme sıklığı azaldıkça viral hastalıkların oranı giderek artıyor. Kitlesel viral enfeksiyonlar (solunum ve bağırsak) sorunu akuttur. Örneğin, iyi bilinen grip sıklıkla büyük salgınlar ve hatta dünya nüfusunun önemli bir yüzdesinin hastalandığı pandemik hastalıklar şeklini alır.

2. Tümörlerin ve löseminin kökenine ilişkin viral-genetik teori kabul görmüş ve giderek daha fazla doğrulanmaktadır. Bu nedenle virolojideki gelişmelerin insan patolojisinin en önemli sorunu olan karsinogenez sorununa çözüm getirmesini bekliyoruz.

3. Şu anda yeni viral hastalıklar ortaya çıkıyor veya önceden bilinen viral hastalıklar akut hale geliyor ve bu da viroloji için sürekli yeni zorluklar yaratıyor. Bir örnek HIV enfeksiyonudur.

4. Virüsler moleküler biyoloji ve moleküler genetik araştırmalar için klasik bir model haline geldi. Biyolojideki temel araştırmaların pek çok sorusu virüsler kullanılarak çözülmektedir; virüsler biyoteknolojide yaygın olarak kullanılmaktadır.

5. Viroloji, modern doğa biliminin temel bilimidir; yalnızca diğer bilimleri yeni yöntemler ve yeni fikirlerle zenginleştirdiği için değil, aynı zamanda viroloji çalışmasının konusunun, canlı maddenin - virüslerin niteliksel olarak özel bir organizasyon biçimi olması nedeniyle - Dünyadaki diğer tüm canlılardan radikal biçimde farklıdırlar.

2. VİRÜSOLOJİNİN GELİŞİMİNİN TARİHSEL ÇİZİMİ

Virüslerin keşfi ve temel özelliklerinin tanımlanması Rus bilim adamı Dmitry Iosifovich Ivanovsky'ye (1864-1920) aittir. Ivanovsky'nin araştırmasına St. Petersburg Üniversitesi'nde 3. sınıf öğrencisi olarak, Ukrayna ve Bessarabia'da ders çalışması yaparken başlamış olması ilginçtir. Tütün mozaiği hastalığını inceledi ve bunun bulaşıcı bir bitki hastalığı olduğunu, ancak etken maddesinin o zamanlar bilinen mikroorganizma gruplarından hiçbirine ait olmadığını keşfetti. Daha sonra sertifikalı bir uzman olan Ivanovsky, Nikitsky Botanik Bahçesi'nde (Kırım) araştırmasına devam ediyor ve klasik bir deney gerçekleştiriyor: etkilenen bitkinin yapraklarının suyunu bir bakteri filtresinden filtreliyor ve meyve suyunun bulaşıcı aktivitesinin azaldığını kanıtlıyor. kaybolmamak.

Daha sonra ana virüs grupları keşfedildi. 1898'de F. Leffler ve P. Frosch, şap hastalığına (şap hastalığı virüsü hayvanları ve insanları etkiler) etken maddenin filtrelenebilirliğini kanıtladı; 1911'de P. Raus, şap hastalığının etken maddesinin filtrelenebilirliğini kanıtladı. Tümör hastalığının etken maddesi - tavuk sarkomu, 1915'te F. Twort ve 1917'de Bay D'Herelle fajları - bakteriyel virüsleri keşfetti.

Ana virüs grupları bu şekilde keşfedildi. Şu anda 500'den fazla virüs türü bilinmektedir.

Virolojinin geliştirilmesindeki daha fazla ilerleme, virüs yetiştirme yöntemlerinin geliştirilmesiyle ilişkilidir. İlk başta virüsler yalnızca hassas organizmaları enfekte ettiklerinde incelendi. İleriye doğru atılan önemli bir adım, 1931'de Woodruff ve Goodpasture tarafından tavuk embriyolarında virüslerin yetiştirilmesine yönelik bir yöntemin geliştirilmesiydi. Virolojide bir devrim, J. Enders, T. Weller tarafından tek katmanlı hücre kültürlerinde virüslerin yetiştirilmesine yönelik bir yöntemin geliştirilmesiydi. , F. Robbins ve 1948'de. Sebepsiz değil 1952'de Bu keşif Nobel Ödülü'ne layık görüldü.

Zaten 30'lu yıllarda ilk viroloji laboratuvarları oluşturuldu. Şu anda Ukrayna'da adını taşıyan Odessa Epidemiyoloji ve Viroloji Araştırma Enstitüsü bulunmaktadır. I.I. Mechnikov'a göre, bir dizi epidemiyoloji, mikrobiyoloji ve bulaşıcı hastalıklar araştırma enstitüsünde virolojik laboratuvarlar bulunmaktadır. Pratik sağlık hizmetlerine yönelik, öncelikle viral hastalıkların teşhisiyle ilgilenen virolojik laboratuvarlar bulunmaktadır.

3. Virüslerin altyapısını oluşturun

Öncelikle “virüs” teriminin bilimsel terminolojiye L. Pasteur tarafından kazandırıldığını söylemek gerekir. L. Pasteur, 1885 yılında kuduzu önlemek için aşısını yaptırdı, ancak bu hastalığın etken maddesini keşfetmedi - virüslerin keşfedilmesine hala 7 yıl vardı. L. Pasteur, varsayımsal patojene "kuduz zehiri" anlamına gelen kuduz virüsü adını verdi.

"Virüs" terimi, virüs gelişiminin herhangi bir aşamasını ifade etmek için kullanılır - hem hücre dışı olarak yerleşmiş bulaşıcı parçacıklar hem de hücre içi olarak üreyen virüs. Viral bir partiküle atıfta bulunmak için "terimi" virüs».

İle kimyasal bileşim Virüsler temel olarak diğer mikroorganizmalara benzer; nükleik asitlere, proteinlere ve bazılarında lipitlere ve karbonhidratlara da sahiptirler.

Virüsler yalnızca bir tür nükleik asit içerir; DNA veya RNA. Buna göre DNA genomik ve RNA genomik virüsleri izole edilir. Viriondaki nükleik asit %1 ila %40 arasında içerebilir. Tipik olarak virion genellikle bir halka şeklinde kapalı olan tek bir nükleik asit molekülü içerir. Viral nükleik asitler ökaryotik nükleik asitlerden pek farklı değildir; aynı nükleotidlerden oluşurlar ve aynı yapıya sahiptirler. Doğru, virüsler yalnızca çift sarmallı değil aynı zamanda tek sarmallı DNA da içerebilir. Bazı RNA virüsleri çift sarmallı RNA içerebilir, ancak çoğu tek sarmallı RNA içerir. Virüslerin haberci RNA olarak görev yapabilen artı iplikçikli RNA içerebileceği gibi eksi iplikçikli RNA da içerebileceğine dikkat edilmelidir. Bu tür RNA, genetik işlevini ancak tamamlayıcı artı ipliğin hücrede sentezlenmesinden sonra gerçekleştirebilir. Viral nükleik asitlerin bir başka özelliği de bazı virüslerde nükleik asidin bulaşıcı olmasıdır. Bu, protein katkısı olmayan RNA'nın bir virüsten, örneğin çocuk felci virüsünden izole edilmesi ve bir hücreye verilmesi durumunda, yeni viral parçacıkların oluşmasıyla viral bir enfeksiyonun gelişeceği anlamına gelir.

Proteinler virüslerin içinde %50-90 oranında bulunur; antijenik özelliğe sahiptirler. Proteinler virionun zarf yapılarının bir parçasıdır. Ayrıca nükleik asitle ilişkili dahili proteinler de vardır. Bazı viral proteinler enzimlerdir. Ancak bunlar virüslerin metabolizmasını sağlayan enzimler değildir. Viral enzimler, virüsün hücreye girmesinde, virüsün hücreden çıkışında rol oynar, bazıları viral nükleik asitlerin replikasyonu için gereklidir.

Lipoidler %0 ila %50 arasında, karbonhidratlar ise %0 ila %22 arasında olabilir. Lipitler ve karbonhidratlar, karmaşık virüslerin ikincil kabuğunun bir parçasıdır ve virüse özgü değildir. Virüs tarafından hücreden ödünç alınırlar ve bu nedenle hücreseldirler.

Virüslerin kimyasal bileşimindeki temel bir farklılığa dikkat edelim; yalnızca tek bir tür nükleik asit, DNA veya RNA'nın varlığı.

Virüslerin ultra yapısı- bu viryonların yapısıdır. Viryonların boyutları farklılık gösterir ve nanometre cinsinden ölçülür. 1 nm mikrometrenin binde biridir. En küçük tipik virüslerin (çocuk felci virüsü) çapı yaklaşık 20 nm, en büyüğü (variola virüsü) ise 200-250 nm'dir. Ortalama virüslerin boyutları 60 – 120 nm arasındadır. Küçük virüsler yalnızca elektron mikroskobunda görülebilir; büyük virüsler ise ışık mikroskobunun çözünürlüğünün sınırındadır ve karanlık bir görüş alanında veya parçacıkların boyutunu artıran özel boyamayla görülebilir. Işık mikroskobu altında görülebilen bireysel viral parçacıklara genellikle temel Paschen-Morozov cisimcikleri denir. E. Paschen, özel bir leke kullanarak çiçek çiçeği virüsünü keşfetti ve Morozov, orta büyüklükteki virüsleri bile ışık mikroskobunda görmeyi mümkün kılan bir gümüşleme yöntemi önerdi.

Viryonların şekli farklı olabilir - küresel, küboidal, çubuk şeklinde, sperm benzeri.

Her virion, virüslerde bir "nükleon" oluşturan bir nükleik asitten oluşur. Karşılaştırın - ökaryotlarda çekirdek, nükleoid - prokaryotlarda. Nükleon mutlaka birincil protein kabuğuyla (protein kapsomerlerinden oluşan kapsid) ilişkilidir. Sonuç olarak, bir nükleoprotein oluşur - bir nükleokapsid. Basit virüsler yalnızca bir nükleokapsidden oluşur (çocuk felci virüsleri, tütün mozaik hastalığı virüsü). Karmaşık virüslerin ayrıca ikincil bir kabuğu vardır - proteinlere ek olarak lipitler ve karbonhidratlar da içeren bir süperkapsid.

Viriondaki yapısal elemanların kombinasyonu farklı olabilir. Virüslerin üç tür simetrisi vardır - sarmal, kübik ve karışık. Simetriden bahsederken viral parçacıkların eksene göre simetrisi vurgulanmaktadır.

Şu tarihte: spiral simetri türü Elektron mikroskobunda görülebilen tek tek kapsomerler, nükleik asit sarmalı boyunca, iplik iki kapsomer arasından geçecek ve onu her taraftan kaplayacak şekilde düzenlenmiştir. Sonuç, çubuk şeklindeki tütün mozaik virüsü gibi çubuk şeklinde bir yapıdır. Ancak sarmal simetriye sahip virüslerin mutlaka çubuk şeklinde olması gerekmez. Örneğin influenza virüsü sarmal tipte bir simetriye sahip olmasına rağmen nükleokapsidi belirli bir şekilde katlanır ve bir süperkapsid ile kaplanır. Sonuç olarak influenza virionları genellikle küresel şekillidir.

Şu tarihte: kübik tip simetri, nükleik asit virionun merkezinde belirli bir şekilde katlanır ve kapsomerler nükleik asidin dışını kaplayarak üç boyutlu geometrik bir şekil oluşturur. Çoğu zaman, belirli bir köşe ve yüz sayısına sahip bir çokyüzlü olan bir icosahedron figürü oluşturulur. Örneğin çocuk felci virüsleri bu forma sahiptir. Profilde virion altıgen şeklindedir. Adenovirüsün daha karmaşık bir şekli, aynı zamanda kübik simetri tipi. Uzun iplikler ve lifler polihedronun köşelerinden uzanır ve kalınlaşmayla sonuçlanır.

Karışık tipte bir simetri ile, örneğin bakteriyofajlarda, kübik tipte simetriye sahip kafa, bir ikosahedron şekline sahiptir ve süreç, spiral olarak bükülmüş bir kasılma fibril içerir.

Bazı virüsler daha karmaşık bir yapıya sahiptir. Örneğin, variola virüsü sarmal tipte simetriye sahip büyük bir nükleokapsid içerir ve süperkapsid karmaşıktır ve boru şeklinde yapılardan oluşan bir sistem içerir.

Bu nedenle virüsler oldukça karmaşıktır. Ancak virüslerin hücresel bir organizasyona sahip olmadığını belirtmeliyiz. Virüsler hücresel olmayan canlılardır ve bu onların diğer organizmalardan temel farklarından biridir.

Virüslerin kararlılığı hakkında birkaç söz. Virüslerin çoğu 56 - 60 °C'de 5 - 30 dakika süreyle etkisiz hale gelir. Virüsler oda sıcaklığında soğutmayı iyi tolere eder; çoğu virüs hızla etkisiz hale gelir. Virüs, ultraviyole radyasyona ve iyonlaştırıcı radyasyona bakterilerden daha dayanıklıdır. Virüsler gliserole dayanıklıdır. Antibiyotiklerin virüslere hiçbir etkisi yoktur. Dezenfektanlardan en etkilisi %5 Lysol'dur; çoğu virüs 1-5 dakika içinde ölür.

4. VİRÜS ÜREMESİ

Genellikle "virüslerin üremesi" terimini kullanmıyoruz, bunun yerine "virüslerin üremesi" diyoruz, çünkü virüslerin üreme yöntemi, bildiğimiz tüm organizmaların üreme yönteminden temel olarak farklıdır.

Virüs üreme mekanizmasını daha iyi incelemek için size ders kitaplarında yer almayan ancak bu karmaşık süreci anlamanıza yardımcı olan bir tablo sunuyoruz.

virüs üreme aşamaları

İlk hazırlık dönemi, virüsün hücreye adsorbe edilmesi aşamasıyla başlar. Adsorpsiyon işlemi, virüs bağlanma proteinlerinin hücresel reseptörlerle tamamlayıcı etkileşimi nedeniyle gerçekleştirilir. Hücresel reseptörler glikoprotein, glikolipid, protein ve lipit yapısında olabilir. Her virüs spesifik hücresel reseptörlere ihtiyaç duyar.

Kapsid veya süperkapsidin yüzeyinde yer alan viral bağlanma proteinleri, viral reseptörler olarak görev yapar.

Virüs ve hücre arasındaki etkileşim, virionun hücre zarına spesifik olmayan adsorpsiyonu ile başlar ve ardından tamamlayıcılık ilkesine göre viral ve hücresel reseptörler arasında spesifik etkileşim meydana gelir. Bu nedenle virüsün bir hücreye adsorbe edilmesi süreci spesifik bir süreçtir. Vücudun belirli bir virüs için reseptörleri olan hücreleri yoksa, o zaman böyle bir organizmada bu tür virüslerle enfeksiyon imkansızdır - tür direnci vardır. Öte yandan, virüs ile hücre arasındaki etkileşimin bu ilk aşamasını bloke edebilirsek, viral bir enfeksiyonun gelişmesini çok erken bir aşamada önleyebiliriz.

Aşama 2 - virüsün hücreye nüfuz etmesi - iki ana yolla gerçekleşebilir. Daha önce açıklanan ilkine denir viropeksis. Bu yol fagositoza çok benzer ve reseptör endositozunun bir çeşididir. Viral parçacık hücre zarına adsorbe edilir; reseptörlerin etkileşimi sonucunda zarın durumu değişir ve sanki viral parçacık etrafında akıyormuş gibi istila eder. Merkezinde viral partikülün bulunduğu bir hücre zarı ile sınırlandırılmış bir vakuol oluşur.

Bir virüs içeri girdiğinde membran füzyonu virüs kabuğunun ve hücre zarının elemanlarının karşılıklı nüfuzu meydana gelir. Sonuç olarak viryonun "çekirdeği", enfekte olmuş hücrenin sitoplazmasında sona erer. Bu süreç oldukça hızlı gerçekleştiğinden elektron kırınım modellerine kaydedilmesi zordu.

Deproteinizasyon - viral genomun süperkapsid ve kapsidden salınması. Bu işleme bazen viryonların "soyunması" adı verilir.

Zarflardan salınım genellikle viryonun hücresel reseptörlere bağlanmasından hemen sonra başlar ve hücre sitoplazması içinde devam eder. Bunda lizozomal enzimler rol alır. Her durumda, daha fazla üremenin gerçekleşmesi için viral nükleik asidin deproteinizasyonu gereklidir, çünkü bu olmadan viral genom, enfekte olmuş hücrede yeni viryonların üremesini indükleyemez.

Ortalama üreme süresi isminde gizli, gizlidir, çünkü deproteinizasyondan sonra virüs hücreden "kaybolmuş" gibi göründüğünden, elektron kırınım modellerinde tespit edilemez. Bu dönemde virüsün varlığı ancak konakçı hücrenin metabolizmasındaki değişikliklerle tespit edilir. Hücre, viral genomun, viryonun bileşenlerinin - nükleik asidi ve proteinlerinin - biyosentezi üzerindeki etkisi altında yeniden inşa edilir.

Orta dönemin ilk aşaması, t transkripsiyon viral nükleik asitler, haberci RNA sentezi yoluyla genetik bilginin yeniden yazılması, viral bileşenlerin sentezine başlamak için gerekli bir süreçtir. Nükleik asidin türüne bağlı olarak farklı şekilde ortaya çıkar.

Viral çift sarmallı DNA, DNA'ya bağımlı RNA polimeraz tarafından hücresel DNA ile aynı şekilde kopyalanır. Bu işlem hücre çekirdeğinde (adenovirüslerde) gerçekleştirilirse hücresel polimeraz kullanılır. Sitoplazmadaysa (çiçek virüsü), o zaman virüsün bir parçası olarak hücreye nüfuz eden RNA polimeraz yardımıyla.

RNA eksi iplikçik ise (grip, kızamık, kuduz virüslerinde), bilgi RNA'sı önce viral RNA matrisinde, viryonların bir parçası olan ve hücreye nüfuz eden özel bir enzim - RNA'ya bağımlı RNA polimeraz kullanılarak sentezlenmelidir. viral RNA ile. Aynı enzim çift sarmallı RNA içeren virüslerde (reovirüsler) de bulunur.

Transkripsiyon sürecinin düzenlenmesi, "erken" ve "geç" genlerden gelen bilgilerin sırayla yeniden yazılmasıyla gerçekleştirilir. “Erken” genler, gen transkripsiyonu için gerekli enzimlerin sentezi ve bunların daha sonraki replikasyonu hakkında bilgi içerir. "Geç" olanlarda virüs zarf proteinlerinin sentezine ilişkin bilgiler vardır.

Yayın- viral proteinlerin sentezi. Bu süreç, bilinen protein biyosentezi şemasına tamamen benzerdir. Virüse özgü haberci RNA, hücresel transfer RNA, ribozomlar, mitokondri ve amino asitler rol oynar. İlk olarak, transkripsiyon işlemi için gerekli olan enzim proteinlerinin yanı sıra enfekte hücrenin metabolizmasının kısmen veya tamamen baskılanması için sentezlenir. Bazı virüse özgü proteinler yapısaldır ve viryona dahil edilir (örneğin, RNA polimeraz), diğerleri yapısal değildir, bunlar yalnızca enfekte hücrede bulunur ve viryonun üreme süreçlerinden biri için gereklidir.

Daha sonra viral yapısal proteinlerin (kapsid ve süperkapsid bileşenleri) sentezi başlar.

Viral proteinlerin ribozomlarda sentezinden sonra, bunların translasyon sonrası modifikasyonları meydana gelebilir, bunun sonucunda viral proteinler "olgunlaşır" ve işlevsel olarak aktif hale gelir. Hücresel enzimler viral proteinlerin fosforilasyonunu, sülfonasyonunu, metilasyonunu, asilasyonunu ve diğer biyokimyasal dönüşümlerini gerçekleştirebilir. Viral proteinlerin büyük moleküler öncü proteinlerden proteolitik olarak kesilmesi işlemi esastır.

Çoğaltma viral genom - viral nükleik asit moleküllerinin sentezi, viral genetik bilginin çoğaltılması.

Viral çift sarmallı DNA'nın replikasyonu, hücresel DNA polimerazın yardımıyla, hücresel DNA replikasyonuyla aynı şekilde yarı koruyucu bir şekilde gerçekleşir. Tek sarmallı DNA, bir ara çift sarmallı replikatif form aracılığıyla çoğalır.

Hücrede RNA replikasyonunu gerçekleştirebilecek enzimler yoktur. Bu nedenle, böyle bir işlem her zaman, sentezi hakkında bilgi viral genomda kodlanan virüse özgü enzimler tarafından gerçekleştirilir. Tek iplikçikli RNA genomlarının replikasyonu sırasında, önce viral olanı tamamlayıcı bir RNA ipliği sentezlenir ve daha sonra bu yeni oluşan RNA ipliği, genom kopyalarının sentezi için şablon haline gelir. Ayrıca, çoğunlukla yalnızca nispeten kısa RNA zincirlerinin sentezlendiği transkripsiyon sürecinin aksine, replikasyon sırasında tam bir RNA zinciri hemen oluşturulur. Çift sarmallı RNA, çift sarmallı DNA'ya benzer şekilde çoğalır, ancak buna karşılık gelen enzim - viral kökenli RNA polimerazının yardımıyla.

Viral genom replikasyonu sürecinin bir sonucu olarak, hücrede olgun viryonların oluşumu için gerekli olan viral nükleik asit moleküllerinin fonları birikir.

Böylece viryonun bireysel bileşenlerinin sentezi, farklı hücresel yapılarda ve farklı zamanlarda meydana gelen zaman ve mekanda ayrılır.

İÇİNDE son dönemÜreme sırasında viryonlar toplanır ve virüs hücreyi terk eder.

Viryon düzeneği Farklı şekillerde ortaya çıkabilir, ancak sentez bölgelerinden toplanma bölgelerine taşınan viral bileşenlerin kendi kendine bir araya gelme sürecine dayanır. Viral nükleik asitlerin ve proteinlerin birincil yapısı, moleküllerin konformasyon sırasını belirler. ve birbirleriyle olan bağlantıları. İlk olarak, protein moleküllerinin kapsomerlere ve kapsomerlere nükleik asit ile sıkı bir şekilde yönlendirilmiş bağlanması nedeniyle bir nükleokapsid oluşur. Basit virüsler için derlemenin bittiği yer burasıdır. Karmaşık virüslerin bir süperkapsid ile birleşmesi çok aşamalıdır ve genellikle virionların hücreden ayrılması süreci sırasında sona erer. Bu durumda hücre zarının elemanları virüsün süperkapsidine dahil edilir.

Virüsün hücreden çıkışı iki şekilde gerçekleşebilir. Süperkapsid içermeyen bazı virüsler (adenovirüsler, pikornavirüsler) hücreden “patlayıcı” bir şekilde çıkar. Bu durumda hücre parçalanır ve viryonlar yok edilen hücreden hücreler arası boşluğa çıkar. İnfluenza virüsleri gibi lipoprotein ikincil zarfına sahip diğer virüsler, zarfından tomurcuklanarak hücreyi terk eder. Hücre uzun süre canlı kalabilir.

Virüsün üreme döngüsünün tamamı genellikle birkaç saat sürer. Bir viral nükleik asit molekülünün hücreye girdiği andan itibaren geçen 4 ila 5 saat içinde, komşu hücreleri enfekte edebilecek onlarca ila birkaç yüz yeni viryon oluşturulabilir. Böylece viral enfeksiyonun hücrelerde yayılması çok hızlı bir şekilde gerçekleşir.

Dolayısıyla virüslerin çoğalma şekli, diğer tüm canlıların çoğalma şeklinden temel olarak farklıdır. Tüm hücresel organizmalar bölünerek çoğalır. Virüsler çoğaldığında, virüs bulaşmış hücrenin farklı yerlerinde ve farklı zamanlarda bireysel bileşenler sentezlenir. Bu çoğaltma yöntemine "bağlantısız" veya "ayırıcı" denir.

Virüs ve hücre arasındaki etkileşimin mutlaka açıklanan sonuca yol açmayabileceği söylenmelidir - enfekte olmuş hücrenin erken veya gecikmiş ölümü ve yeni olgun viral partiküllerden oluşan bir kütlenin üretilmesi. Bir hücrede üç olası viral enfeksiyon türü vardır.

Daha önce tartıştığımız ilk seçenek şu durumlarda ortaya çıkar: üretken veya öldürücü enfeksiyonlar.

İkinci seçenek - kalıcı Hücreden salınan yeni viryonların çok yavaş üretiminin olduğu, ancak enfekte olmuş hücrenin uzun süre canlı kaldığı bir hücrede virüs enfeksiyonu.

Son olarak üçüncü seçenek bütünleştirici tip viral nükleik asidin hücresel genoma entegrasyonunun meydana geldiği bir virüs ile bir hücre arasındaki etkileşim. Bu, bir viral nükleik asit molekülünün konakçı hücre kromozomuna fiziksel olarak dahil edilmesini içerir. DNA genomik virüsleri için bu süreç oldukça anlaşılırdır; RNA genomik virüsleri, genomlarını yalnızca bir "provirüs" - ters transkriptaz - RNA'ya bağımlı DNA polimeraz kullanılarak sentezlenen viral RNA'nın bir DNA kopyası - biçiminde entegre edebilir. Viral genomun hücresel genoma entegrasyonu durumunda, viral nükleik asit, hücre bölünmesi sırasında hücresel olanla birlikte çoğalır. Provirüs formundaki bir virüs, sürekli çoğalma nedeniyle bir hücrede uzun süre kalabilir. Bu işleme " denir virojenlik».

5. VİRÜSLERİN BAŞLICA ÖZELLİKLERİ

Bununla birlikte, büyük virüslerin boyutu, klamidya ve küçük riketsiyanın boyutuyla karşılaştırılabilir ve filtrelenebilir bakteri formları tarif edilmiştir. Şu anda, uzun süredir virüsler için yaygın olarak kullanılan "filtrelenebilir virüsler" terimi pratikte kullanılmamaktadır. Dolayısıyla boyutun küçük olması virüsler ile diğer canlılar arasında temel bir fark değildir.

Bu nedenle şu anda virüsler ve diğer mikroorganizmalar arasındaki temel farklar, bu derste tartıştığımız daha önemli biyolojik özelliklere dayanmaktadır.

Analiz ettiğimiz virüslerin özelliklerine ilişkin bilgilerimize dayanarak aşağıdaki 5'i formüle edebiliriz: virüsler arasındaki temel farklar Dünyadaki diğer canlılardan:

1. Hücresel organizasyon eksikliği.

2. Yalnızca bir tür nükleik asidin (DNA veya RNA) varlığı.

3. Bağımsız metabolizma eksikliği. Virüslerdeki metabolizmaya hücrelerin ve organizmaların metabolizması aracılık eder.

4. Benzersiz, ayrık bir üreme yönteminin varlığı.

Böylece virüslere aşağıdaki tanımı verebiliriz.

Virolojinin tarihi, virüslerin doğası ve kökeni

Virüs keşfi

Viroloji genç bir bilimdir ve geçmişi 100 yıldan biraz daha eskiye dayanmaktadır. Yolculuğuna insanlarda, hayvanlarda ve bitkilerde hastalıklara neden olan virüslerin bilimi olarak başlayan viroloji, şu anda virüslerin biyosferin bir parçası olduğu gerçeğinden yola çıkarak modern biyolojinin temel yasalarını moleküler düzeyde inceleme yönünde gelişiyor. ve organik dünyanın evriminde önemli bir faktör.

Virolojinin tarihi alışılmadık bir durumdur, çünkü konularından biri olan viral hastalıklar, virüslerin keşfedilmesinden çok önce incelenmeye başlanmıştır. Viroloji tarihinin başlangıcı, bulaşıcı hastalıklara karşı mücadele ve ancak daha sonra bu hastalıkların kaynaklarının kademeli olarak ortaya çıkarılmasıdır. Bu, Edward Jenner'ın (1749-1823) çiçek hastalığının önlenmesine yönelik çalışması ve Louis Pasteur'un (1822-1895) kuduza neden olan ajanla ilgili çalışmasıyla doğrulanmıştır.

Çiçek hastalığı, çok eski zamanlardan beri binlerce cana mal olan insanlığın belası olmuştur. Çiçek hastalığı enfeksiyonunun tanımları eski Çin ve Hint metinlerinin el yazmalarında bulunur. Avrupa kıtasındaki çiçek hastalığı salgınlarının ilk sözü MS 6. yüzyıla kadar uzanıyor (Mekke'yi kuşatan Etiyopya ordusunun askerleri arasında bir salgın), bundan sonra çiçek hastalığı salgınlarından söz edilmediği açıklanamaz bir dönem yaşandı. Çiçek hastalığı 17. yüzyılda yeniden kıtalara yayılmaya başladı. Örneğin Kuzey Amerika'da (1617-1619) Massachusetts eyaletinde nüfusun 9/10'u öldü, İzlanda'da (1707) çiçek hastalığı salgını sonrasında Eastham şehrinde 57 bin kişiden sadece 17 bini kaldı ( 1763)) 1331 nüfustan 4 kişi kalmıştır. Bu bağlamda çiçek hastalığıyla mücadele sorunu çok ciddiydi.

Çiçek hastalığını aşılama yoluyla önlemek için variolasyon adı verilen bir teknik eski çağlardan beri bilinmektedir. Avrupa'da variolasyon kullanımına ilişkin sözler, Çin, Uzak Doğu ve Türkiye'deki daha önceki deneyimlere atıfta bulunularak 17. yüzyılın ortalarına kadar uzanmaktadır. Variolasyonun özü, hafif bir çiçek hastalığından muzdarip hastalardan gelen püstüllerin içeriğinin, hafif bir hastalığa neden olan ve akut bir formu önleyen insan derisindeki küçük bir yaraya verilmesiydi. Ancak çiçek hastalığının ciddi bir türüne yakalanma riski yüksek olmaya devam etti ve aşılananlar arasındaki ölüm oranı %10'a ulaştı. Jenner çiçek hastalığının önlenmesinde devrim yarattı. Hafif bir hastalık olan sığır çiçeği hastalarının daha sonra hiçbir zaman çiçek hastalığına yakalanmadığını fark eden ilk kişi oydu. 14 Mayıs 1796'da Jenner, sığır çiçeği hastası olan sütçü Sarah Selmes'in püstüllerinden elde edilen sıvıyı, daha önce çiçek hastalığına yakalanmamış olan James Phipps'in yarasına enjekte etti. Yapay enfeksiyon bölgesinde çocukta tipik püstüller gelişti ve bunlar 14 gün sonra ortadan kayboldu. Daha sonra Jenner, çiçek hastası bir hastanın püstüllerinden alınan son derece bulaşıcı materyali çocuğun yarasına soktu. Çocuk hastalanmadı. Aşılama fikri bu şekilde doğdu ve onaylandı (Latince vacca - inek kelimesinden geliyor). Jenner'ın zamanında aşılama, çiçek hastalığını önlemek için bulaşıcı inek çiçeği materyalinin insan vücuduna verilmesi olarak anlaşıldı. Aşı terimi çiçek hastalığına karşı koruma sağlayan bir maddeye uygulandı. 1840 yılından itibaren çiçek aşısı buzağılara bulaştırılarak elde edilmeye başlandı. İnsan çiçek hastalığı virüsü ancak 1904'te keşfedildi. Dolayısıyla çiçek hastalığı, aşının kullanıldığı ilk enfeksiyon, yani aşıyla önlenebilir ilk enfeksiyondur. Çiçek hastalığının aşıyla önlenmesindeki ilerlemeler, çiçek hastalığının dünya çapında ortadan kaldırılmasına yol açmıştır.

Günümüzde aşı ve aşı, aşı ve aşı materyalini ifade eden genel terimler olarak kullanılmaktadır.

Esas olarak kuduzun nedenleri hakkında spesifik bir şey bilmeyen, bulaşıcı doğasının tartışılmaz gerçeği dışında, patojenin zayıflaması (zayıflaması) ilkesini kullandı. Kuduz patojeninin patojenik özelliklerini zayıflatmak için, beynine kuduzdan ölen bir köpeğin beyin dokusunun enjekte edildiği bir tavşan kullanıldı. Tavşanın ölümünden sonra beyin dokusu bir sonraki tavşana enjekte edildi ve patojen tavşanın beyin dokusuna adapte olana kadar yaklaşık 100 geçiş gerçekleştirildi. Köpeğin vücuduna deri altından enjekte edildiğinde yalnızca orta derecede patojenik özellikler sergiledi. Pasteur, yüksek patojenite ile karakterize edilen "vahşi" olanın aksine, böyle bir "yeniden eğitilmiş" patojeni "sabit" olarak adlandırdı. Pasteur daha sonra, sabit bir patojenin giderek artan miktarlarıyla bir dizi enjeksiyondan oluşan, bağışıklık yaratmanın bir yöntemini geliştirdi. Enjeksiyonların tamamını tamamlayan köpeğin enfeksiyona karşı tamamen dirençli olduğu ortaya çıktı. Pasteur, bulaşıcı bir hastalığın gelişim sürecinin esasen mikroplarla vücudun savunması arasındaki bir mücadele olduğu sonucuna vardı. Pasteur, "Her hastalığın kendi patojeni olmalı ve hastanın vücudunda bu hastalığa karşı bağışıklık gelişimini teşvik etmeliyiz" dedi. Vücudun bağışıklığı nasıl ürettiğini henüz anlayamayan Pasteur, ilkelerini kullanıp bu sürecin mekanizmalarını insanların yararına yönlendirebildi. Temmuz 1885'te Pasteur, kuduz bir köpek tarafından ısırılan bir çocuk üzerinde "sabit" kuduz patojeninin özelliklerini test etme fırsatı buldu. Çocuğa, giderek toksik hale gelen bir maddenin bir dizi enjeksiyonu yapıldı; son enjeksiyon, patojenin tamamen patojenik bir formunu içeriyordu. Çocuk sağlıklı kaldı. Kuduz virüsü 1903 yılında Remlanger tarafından keşfedildi.

Ne çiçek hastalığı virüsünün ne de kuduz virüsünün hayvanları ve insanları enfekte ettiği keşfedilen ilk virüsler olmadığını belirtmek gerekir. İlk sırada haklı olarak 1898'de Leffler ve Frosch tarafından keşfedilen şap hastalığı virüsü yer alıyor. Bu araştırmacılar, filtrelenebilir maddenin çoklu seyreltilerini kullanarak, onun toksisitesini gösterdiler ve onun parçacıklı doğası hakkında bir sonuca vardılar.

19. yüzyılın sonuna gelindiğinde kuduz, çiçek hastalığı, grip ve sarı humma gibi bir takım insan hastalıklarının bulaşıcı olduğu ancak etken maddelerinin bakteriyolojik yöntemlerle tespit edilemediği anlaşıldı. Saf bakteri kültürü tekniklerinin kullanılmasına öncülük eden Robert Koch'un (1843-1910) çalışmaları sayesinde bakteriyel ve bakteriyel olmayan hastalıkları ayırt etmek mümkün hale geldi. 1890'da X Hijyenistler Kongresi'nde Koch şunu beyan etmek zorunda kaldı: "... listelenen hastalıklarda bakterilerle değil, tamamen farklı bir mikroorganizma grubuna ait organize patojenlerle uğraşıyoruz." Koch'un bu açıklaması, virüslerin keşfinin tesadüfi bir olay olmadığını gösteriyor. Yalnızca doğası gereği anlaşılmaz olan patojenlerle çalışma deneyimi değil, aynı zamanda olup bitenlerin özünün anlaşılması da, bulaşıcı olmayan bulaşıcı hastalıkların orijinal bir patojen grubunun varlığı fikrinin formüle edilmesine katkıda bulunmuştur. bakteriyel doğa. Varlığını deneysel olarak kanıtlamak için kaldı.

Yeni bir bulaşıcı hastalık patojen grubunun varlığına dair ilk deneysel kanıt, yurttaşımız bitki fizyoloğu Dmitry Iosifovich Ivanovsky (1864-1920) tarafından tütünün mozaik hastalıklarını incelerken elde edildi. Bitkilerde salgın niteliğindeki bulaşıcı hastalıkların sıklıkla gözlenmesi nedeniyle bu şaşırtıcı değildir. 1883-84'e geri dönelim. Hollandalı botanikçi ve genetikçi de Vries, çiçeklerin yeşermesinde bir salgın gözlemledi ve hastalığın bulaşıcı doğasını öne sürdü. 1886 yılında Hollanda'da çalışan Alman bilim adamı Mayer, mozaik hastalığına yakalanan bitkilerin özsuyunun aşılandığında bitkilerde aynı hastalığa neden olduğunu gösterdi. Mayer, hastalığın suçlusunun bir mikroorganizma olduğundan emindi ve onu aradı ancak başarılı olamadı. 19. yüzyılda tütün hastalıkları ülkemizde tarıma büyük zararlar verdi. Bu bağlamda, St. Petersburg Üniversitesi'nde öğrenci olarak D.I.'nin de dahil olduğu tütün hastalıklarını incelemek üzere Ukrayna'ya bir grup araştırmacı gönderildi. Ivanovsky. Mayer'in 1886 yılında tütünün mozaik hastalığı olarak tanımladığı hastalığın incelenmesi sonucunda D.I. Ivanovsky ve V.V. Polovtsev bunun iki farklı hastalığı temsil ettiği sonucuna vardı. Bunlardan biri - "orman tavuğu" - bir mantardan kaynaklanır, diğeri ise bilinmeyen bir kökene sahiptir. Tütün mozaiği hastalığının araştırılması, Akademisyen A.S.'nin önderliğinde Nikitsky Botanik Bahçesi'nde Ivanovsky tarafından sürdürüldü. Famytsina. Ivanovsky, en küçük bakterileri tutan bir Chamberlant mumundan süzülen hastalıklı bir tütün yaprağının suyunu kullanarak, tütün yapraklarında bir hastalığa neden oldu. Enfekte meyve suyunun yapay besin ortamlarında yetiştirilmesi sonuç vermedi ve Ivanovsky, hastalığın etken maddesinin alışılmadık bir yapıya sahip olduğu sonucuna varıyor - bakteriyel filtrelerden filtreleniyor ve yapay besin ortamlarında büyüyemiyor. Meyve suyunun 60 °C'den 70 °C'ye kadar ısıtılması, patojenin canlı doğasını gösteren bulaşıcılıktan yoksun bırakıyordu. Ivanovsky, yeni tip patojene ilk olarak “filtrelenebilir bakteri” adını verdi (Şekil 1). D.I.'nin çalışmalarının sonuçları. Ivanovsky'nin görüşleri, 1888'de sunduğu ve 1892'de "Tütünün İki Hastalığı Üzerine" kitabında yayınlanan tezinin temeli olarak kullanıldı. Bu yıl virüslerin keşfedildiği yıl olarak kabul ediliyor.

A – Karbon ve platin ile eğik biriktirmeden sonraki elektron mikrografı; 65.000'. (Fotoğraf: N. Frank.) B – Model. (Karlson, Kurzes Lehrbuch der Biochemie, Stuttgart, Thieme, 1980).

Şekil 1 – Tütün mozaik virüsü

Bir dönem yabancı yayınlarda virüslerin keşfi, yine tütün mozaiği hastalığı üzerinde çalışan ve deneylerini 1898'de yayınlayan Hollandalı bilim adamı Beijerinck'in (1851-1931) adıyla ilişkilendirildi. Bir agarın yüzeyinde enfekte olmuş bir bitki, inkübe edilir ve yüzeyinde bakteri kolonileri elde edilir. Bundan sonra agarın bakteri kolonilerinin bulunduğu üst tabakası çıkarıldı ve iç tabaka, sağlıklı bir bitkiyi enfekte etmek için kullanıldı. Bitki hasta. Bundan yola çıkan Beijerinck, hastalığın nedeninin bakteri değil, agarın içine nüfuz edebilen bazı sıvı maddeler olduğu sonucuna vardı ve patojeni "sıvı yaşayan bulaşma" olarak adlandırdı. Ivanovsky'nin deneylerini yalnızca ayrıntılı olarak anlatması, ancak patojenin bakteriyel olmayan doğasına gereken ilgiyi göstermemesi nedeniyle durumla ilgili bir yanlış anlaşılma ortaya çıktı. Ivanovsky'nin çalışması ancak Beijerinck'in deneylerini tekrarlayıp genişletmesinden ve Ivanovsky'nin en tipik viral tütün hastalığının etken maddesinin bakteriyel olmayan doğasını kanıtlayan ilk kişi olduğunu vurgulamasından sonra ünlü oldu. Beijerinck, Ivanovsky'nin önceliğini ve D.I. tarafından virüslerin keşfedilmesinin mevcut önceliğini kendisi de kabul etti. Ivanovsky dünya çapında tanınmaktadır.

Kelime VİRÜS zehir demektir. Bu terim Pasteur tarafından bulaşıcı bir prensibi belirtmek için de kullanıldı. 19. yüzyılın başında tüm patojenik ajanlara virüs kelimesi denildiğini belirtmek gerekir. Ancak bakterilerin, zehirlerin ve toksinlerin doğası netleştikten sonra, "ultravirüs" ve ardından basitçe "virüs" terimleri "filtrelenebilir yeni bir patojen türü" anlamına gelmeye başladı. "Virüs" terimi yüzyılımızın 30'lu yıllarında yaygın bir şekilde kök saldı.

Artık virüslerin her yerde bulunma, yani her yerde bulunma ile karakterize edildiği açıktır. Virüsler tüm yaşayan krallıkların temsilcilerine bulaşır: insanlar, omurgalılar ve omurgasızlar, bitkiler, mantarlar, bakteriler.

Bakteriyel virüslerle ilgili ilk rapor 1896 yılında Hankin tarafından yapılmıştır. Pasteur Enstitüsü Chronicle'ında "...Hindistan'ın bazı nehirlerinin sularının bakteri yok edici etkisi vardır..." demiştir ki bu da şüphesiz bununla bağlantılıdır. bakteriyel virüslere. 1915'te Londra'da Twort, bakteri kolonilerinin parçalanmasının nedenlerini incelerken, "lizin" bir dizi nesil boyunca yeni kültürlere aktarılması ilkesini tanımladı. Çalışmaları çoğu zaman olduğu gibi neredeyse hiç fark edilmedi ve iki yıl sonra, 1917'de Kanadalı de Hérelle, bir filtreleme ajanıyla ilişkili bakteriyel lizis olgusunu yeniden keşfetti. Bu ajana bakteriyofaj adını verdi. De Herelle yalnızca bir bakteriyofajın olduğunu varsaydı. Ancak 1924-34'te Melbourne'de çalışan Barnett'in araştırması, bakteriyel virüslerin fiziksel ve biyolojik özellikleri açısından çok çeşitli olduğunu gösterdi. Bakteriyofaj çeşitliliğinin keşfi büyük bilimsel ilgi uyandırdı. 30'lu yılların sonunda, ABD'de çalışan üç araştırmacı - fizikçi Delbrück, bakteriyolog Luria ve Hershey, bakteriyofaj genetiği alanındaki araştırmaları sonuçta yeni bir bilimin doğuşuna yol açan sözde "Faj Grubu" nu yarattılar. - moleküler Biyoloji.

Böcek virüsleri üzerine yapılan çalışmalar, omurgalıların ve insanların virolojisinin önemli ölçüde gerisinde kalmıştır. Artık böcekleri enfekte eden virüslerin 3 gruba ayrılabileceği açıktır: böcek virüslerinin kendisi, böceklerin ara konakçı olduğu hayvan ve insan virüsleri ve aynı zamanda böcekleri de enfekte eden bitki virüsleri.

Tanımlanan ilk böcek virüsü ipekböceği sarılık virüsüydü (ipekböceği polihedroz virüsü, Bollea stilpotiae olarak adlandırılıyor). 1907 gibi erken bir tarihte Provacek, hastalıklı larvaların filtrelenmiş homojenatının sağlıklı ipekböceği larvaları için bulaşıcı olduğunu gösterdi, ancak Alman bilim adamı Bergold'un çubuk şeklindeki viral parçacıkları keşfetmesi 1947 yılına kadar değildi.

Viroloji alanındaki en verimli çalışmalardan biri, Reed'in 1900-1901 yıllarında ABD Ordusu gönüllüleri üzerinde sarıhummanın doğası üzerine yaptığı çalışmadır. Sarıhummanın sivrisinekler ve sivrisinekler tarafından bulaşan filtrelenebilir bir virüsün neden olduğu ikna edici bir şekilde gösterilmiştir. Ayrıca sivrisineklerin bulaşıcı kanı emdikten sonra iki hafta boyunca bulaşıcı olmadıkları da tespit edildi. Böylece hastalığın dış kuluçka süresi (bir böcekte virüsün çoğalması için gereken süre) belirlenmiş ve arbovirüs enfeksiyonlarının (kan emen eklembacaklılardan bulaşan viral enfeksiyonlar) epidemiyolojisinin temel prensipleri oluşturulmuştur.

Bitki virüslerinin vektörleri olan bir böcekte üreme yeteneği 1952'de Maramorosh tarafından kanıtlandı. Araştırmacı, böcek enjeksiyon tekniklerini kullanarak, yıldız sarılığı virüsünün kendi vektörü olan altı benekli ağustos böceğinde çoğalma yeteneğini ikna edici bir şekilde gösterdi.

Virolojinin gelişim aşamaları

Virolojideki başarıların tarihi, araştırmanın metodolojik temelinin geliştirilmesinin başarısıyla doğrudan ilgilidir.

19. yüzyılın sonu - 20. yüzyılın başı. Bu dönemde virüsleri tanımlamanın ana yöntemi, patojenleri bakteri ve bakteri olmayanlara ayırmanın bir yolu olarak kullanılan bakteriyolojik filtreler (Chamberlan mumları) yoluyla filtreleme yöntemiydi. Bakteriyolojik filtreler yoluyla filtrelenebilirlik kullanılarak aşağıdaki virüsler keşfedildi:

– 1892 – tütün mozaik virüsü;

– 1898 – şap hastalığı virüsü;

– 1899 – sığır vebası virüsü;

– 1900 – sarı humma virüsü;

– 1902 – kümes hayvanı ve koyun çiçeği virüsü;

– 1903 – kuduz virüsü ve domuz nezlesi virüsü;

– 1904 – insan çiçek hastalığı virüsü;

– 1905 – köpek gençlik hastalığı virüsü ve aşı virüsü;

– 1907 – dang virüsü;

– 1908 – çiçek hastalığı ve trahom virüsü;

– 1909 – çocuk felci virüsü;

– 1911 – Rous sarkom virüsü;

– 1915 – bakteriyofajlar;

– 1916 – kızamık virüsü;

– 1917 – herpes virüsü;

– 1926 – veziküler stomatit virüsü.

30'lar- virüslerin izolasyonu ve daha ileri tanımlanması için kullanılan ana virolojik yöntem laboratuvar hayvanlarıdır (beyaz fareler - grip virüsleri için, yeni doğmuş fareler - Coxsackie virüsleri için, şempanzeler - hepatit B virüsü için, tavuklar, güvercinler - onkogenik virüsler için, gnotobiyont domuz yavruları) – bağırsak virüsleri vb. için). Laboratuvar hayvanlarını virüs araştırmalarında sistematik olarak kullanan ilk kişi, 1881 yılında kuduz hastalarından alınan materyalin bir tavşanın beynine aşılanması üzerine araştırma yapan Pasteur'du. Bir diğer dönüm noktası ise sarı humma çalışmasıydı; bu çalışma yeni doğmuş farelerin virolojik uygulamalarda kullanılmasıyla sonuçlandı. Bu çalışma döngüsünün doruk noktası, 1948'de Cycles tarafından emziren fareler kullanılarak bir grup salgın miyalji virüsünün izolasyonuydu.

1931 - Grip, çiçek hastalığı, lösemi, tavuk sarkomu ve diğer bazı virüslere karşı oldukça duyarlı olan tavuk embriyoları, virüslerin izolasyonunda deneysel model olarak kullanılmaya başlandı. Ve şu anda tavuk embriyoları grip virüslerini izole etmek için yaygın olarak kullanılıyor.

1932 - İngiliz kimyager Alford, ultrafiltrasyon yönteminin temeli olan yapay ince gözenekli koloidal membranlar yarattı; bu sayede viral parçacıkların boyutunu belirleme ve virüsleri bu temelde ayırt etme mümkün hale geldi.

1935 - santrifüj yönteminin kullanılması tütün mozaik virüsünün kristalleştirilmesini mümkün kıldı. Şu anda virüslerin izolasyonu ve saflaştırılmasında santrifüj ve ultrasantrifüj yöntemleri (tüp tabanındaki hızlanma 200.000 g'ı aşıyor) yaygın olarak kullanılmaktadır.

1939'da virüsleri incelemek için ilk kez 0,2 ila 0,3 nm çözünürlüğe sahip bir elektron mikroskobu kullanıldı. Ultra ince doku bölümlerinin kullanılması ve sulu süspansiyonların negatif kontrast yöntemi, virüslerin hücrelerle etkileşiminin incelenmesini ve viryonların yapısının (mimarisinin) incelenmesini mümkün kılmıştır. Elektron mikroskobu kullanılarak elde edilen bilgiler, virüs kristallerinin ve psödokristallerinin X-ışını kırınım analizi ile önemli ölçüde genişletildi. Elektron mikroskoplarının gelişmesi, üç boyutlu görüntülerin elde edilmesini mümkün kılan taramalı mikroskopların yaratılmasıyla sonuçlandı. Elektron mikroskobu kullanılarak viryonların mimarisi ve bunların konakçı hücreye nüfuz etme özellikleri incelenmiştir.

Bu dönemde virüslerin büyük bir kısmı keşfedildi. Örnekler aşağıdakileri içerir:

– 1931 – domuz gribi virüsü ve at batı ensefalomiyelit virüsü;

– 1933 – insan grip virüsü ve doğu at ensefalomiyelit virüsü;

– 1934 – kabakulak virüsü;

– 1936 – fare meme kanseri virüsü;

– 1937 – kene kaynaklı ensefalit virüsü.

40'lar. 1940 yılında Hoagland ve meslektaşları aşı virüsünün DNA içerdiğini ancak RNA içermediğini keşfettiler. Virüslerin bakterilerden yalnızca boyut ve hücresiz büyüyememe bakımından değil, aynı zamanda yalnızca bir tür nükleik asit (DNA veya RNA) içermeleri bakımından da farklı olduğu ortaya çıktı.

1941 - Amerikalı bilim adamı Hurst, grip virüsünün bir modelini kullanarak hemaglutinasyon (eritrosit yapışması) olgusunu keşfetti. Bu keşif, virüsleri tespit etmeye ve tanımlamaya yönelik yöntemlerin geliştirilmesinin temelini oluşturdu ve virüs-hücre etkileşimlerinin araştırılmasına katkıda bulundu. Hemaglutinasyon ilkesi bir dizi yöntemin temelidir:

HRA - hemaglutinasyon reaksiyonu - virüsleri tespit etmek ve titre etmek için kullanılır;

HAI - hemaglutinasyon inhibisyon reaksiyonu - virüsleri tanımlamak ve titre etmek için kullanılır.

1942 - Hearst, grip virüsünde daha sonra nöraminidaz olarak tanımlanan bir enzimin varlığını keşfetti.

1949 - hayvan doku hücrelerinin yapay koşullar altında kültürlenmesi olasılığının keşfi. 1952'de Enders, Weller ve Robbins, hücre kültürü yöntemini geliştirdikleri için Nobel Ödülü'nü aldı.

Hücre kültürü yönteminin virolojiye girmesi, kültürlü aşıların elde edilmesini mümkün kılan önemli bir olaydı. Zayıflatılmış virüs türleri temelinde oluşturulan ve şu anda yaygın olarak kullanılan kültürel canlı ve öldürülmüş aşılardan çocuk felci, kabakulak, kızamık ve kızamıkçık aşılarına dikkat edilmelidir.

Çocuk felci aşılarının yaratıcıları Amerikalı virologlar Sabin (üç serotipin zayıflatılmış çocuk felci virüsü türlerine dayanan üç değerlikli canlı bir aşı) ve Salk'tır (ölü üç değerlikli aşı). Ülkemizde Sovyet virologları M.P. Chumakov ve A.A. Smorodintsev canlı ve öldürülmüş çocuk felci aşılarının üretimi için bir teknoloji geliştirdi. 1988 yılında Dünya Sağlık Asamblesi, DSÖ'ye vahşi çocuk felci virüsünün dolaşımını tamamen durdurarak çocuk felcini dünya çapında ortadan kaldırma hedefini belirledi. Bugüne kadar bu yönde çok büyük ilerleme kaydedildi. Çocuk felcine karşı küresel aşılamanın "yuvarlak" aşılama şemaları kullanılarak kullanılması, yalnızca görülme sıklığını radikal bir şekilde azaltmakla kalmayıp, aynı zamanda vahşi çocuk felci virüsünün dolaşımından arınmış alanlar yaratmayı da mümkün kıldı.

Keşfedilen virüsler:

– 1945 – Kırım kanamalı ateşi virüsü;

– 1948 – Coxsackie virüsleri.

50'ler. 1952'de Dulbecco, tavuk embriyo hücrelerinin tek katmanındaki plakları titre etmek için virolojiye niceliksel bir yön kazandıran bir yöntem geliştirdi. 1956-62 Watson, Caspar (ABD) ve Klug (İngiltere), viral parçacıkların simetrisine ilişkin genel bir teori geliştirdi. Viral partikülün yapısı, virüs sınıflandırma sistemindeki kriterlerden biri haline gelmiştir.

Bu dönem bakteriyofaj alanında önemli ilerlemelerle karakterize edildi:

- lizojenize edici fajların profajının indüksiyonu sağlandı (Lvov ve diğerleri, 1950);

– enfektivitenin protein kabuğunda değil faj DNA'sında mevcut olduğu kanıtlanmıştır (Hershey, Chase, 1952);

– genel iletim olgusu keşfedildi (Zinder, Lederberg, 1952).

Bulaşıcı tütün mozaik virüsü yeniden yapılandırıldı (Frenkel-Conrad, Williams, Singer, 1955-1957) ve 1955'te çocuk felci virüsü kristal formda elde edildi (Shaffer, Shwerd, 1955).

Keşfedilen virüsler:

– 1951 – fare lösemi virüsleri ve ECHO;

– 1953 – adenovirüsler;

– 1954 – kızamıkçık virüsü;

– 1956 – parainfluenza virüsleri, sitomegalovirüs, solunum sinsityal virüsü;

– 1957 – polyoma virüsü;

– 1959 – Arjantin kanamalı ateş virüsü.

60'lar Moleküler biyolojik araştırma yöntemlerinin gelişmesiyle karakterize edilir. Kimya, fizik, moleküler biyoloji ve genetik alanındaki gelişmeler, yalnızca teknikler düzeyinde değil, aynı zamanda virüslerin yalnızca bir nesne olarak hareket etmediği tüm teknolojiler düzeyinde de kullanılmaya başlanan bilimsel araştırmanın metodolojik temelinin temelini oluşturdu. Araştırmanın yanı sıra bir araç olarak da. Moleküler biyolojide hiçbir keşif viral bir model olmadan tamamlanmış sayılmaz.

1967 - Cates ve McAuslan, vaccinia virionunda DNA'ya bağımlı bir RNA polimerazın varlığını gösterdi. Ertesi yıl, reovirüslerde ve ardından paramikso ve rabdovirüslerde RNA'ya bağımlı RNA polimeraz keşfedildi. 1968'de Jacobson ve Baltimore, poliovirüslerin RNA'ya bağlı bir genomik proteine ​​sahip olduğunu tespit etti; Baltimore ve Boston, poliovirüs genomik RNA'sının bir poliproteine ​​çevrildiğini tespit etti.

Keşfedilen virüsler:

– 1960 – rinovirüsler;

– 1963 – Avustralya antijeni (HBsAg).

70'ler. Baltimore, Temin ve Mizutani ile eş zamanlı olarak, RNA içeren onkogenik virüslerde ters transkriptaz (revertaz) enziminin keşfedildiğini bildirdi. RNA virüslerinin genomunu incelemek mümkün hale geliyor.

Ökaryotik virüslerdeki gen ekspresyonunun incelenmesi, ökaryotların moleküler biyolojisi hakkında temel bilgiler sağladı - mRNA'nın başlık yapısının varlığı ve bunun RNA translasyonundaki rolü, mRNA'nın 3" ucunda bir poliadenilat dizisinin varlığı, birleştirme ve Güçlendiricilerin transkripsiyondaki rolü ilk olarak hayvan virüsleri üzerinde yapılan çalışmalarda tanımlandı.

1972 - Berg, rekombinant DNA molekülünün yaratılmasına ilişkin bir rapor yayınladı. Moleküler biyolojinin yeni bir dalı ortaya çıkıyor: genetik mühendisliği. Rekombinant DNA teknolojisinin kullanılması tıpta önemli olan proteinlerin (insülin, interferon, aşılar) elde edilmesini mümkün kılmaktadır. 1975 - Köhler ve Milstein, monoklonal antikorlar (mAb'ler) üreten ilk hibrit dizilerini üretti. Viral enfeksiyonların teşhisine yönelik en spesifik test sistemleri mAb'lere dayalı olarak geliştirilmektedir. 1976 - Blumberg, HBsAg'nin keşfi nedeniyle Nobel Ödülü'nü aldı. Hepatit A ve hepatit B'nin farklı virüslerden kaynaklandığı tespit edilmiştir.

Keşfedilen virüsler:

– 1970 – hepatit B virüsü;

– 1973 – rotavirüsler, hepatit A virüsü;

– 1977 – hepatit delta virüsü.

80'ler. Yerli bilim adamı L.A. tarafından ortaya konan fikirlerin geliştirilmesi. Zilber'in tümör oluşumunun virüslerle ilişkili olabileceği fikri. Tümörlerin gelişiminden sorumlu olan virüs bileşenlerine onkogenler denir. Viral onkogenlerin, memeli hücrelerinin onkogenetik dönüşüm mekanizmalarının incelenmesine yardımcı olan en iyi model sistemler arasında olduğu kanıtlanmıştır.

– 1985 – Mullis, polimeraz zincir reaksiyonunun (PCR) keşfi nedeniyle Nobel Ödülü'nü aldı. Bu, aynı zamanda rekombinant DNA elde etme teknolojisini geliştirmeyi ve yeni virüsleri keşfetmeyi de mümkün kılan moleküler genetik bir teşhis yöntemidir.

Keşfedilen virüsler:

– 1983 – insan bağışıklık yetersizliği virüsü;

– 1989 – hepatit C virüsü;

– 1995 – Hepatit G virüsü PCR kullanılarak keşfedildi.

İlgili bilgi.

Sinir sisteminin gelişimindeki anomaliler. Kranial fıtık. Spina bifida. Kraniyovertebral anomaliler.

Genital organların gelişimindeki anomaliler. Etiyopatogenez, sınıflandırma, tanı yöntemleri, klinik bulgular, düzeltme yöntemleri.

Modern virolojinin başarıları çok büyüktür. Bilim insanları, bu ultramikroskobik canlıların ince yapısını, biyokimyasal bileşimini ve fizyolojik özelliklerini, doğadaki, insan yaşamındaki, hayvanlardaki ve bitkilerdeki rollerini giderek daha derin ve başarılı bir şekilde anlıyorlar. Onkoviroloji, tümörlerin (kanser) ortaya çıkmasında virüslerin rolünü ısrarla ve başarıyla inceleyerek yüzyılın bu sorununu çözmeye çalışıyor.

21. yüzyılın başlarında birden fazla 6 bin virüs 2.000'den fazla türe, 287 cinse ait, 73 aile ve 3 sipariş. Birçok virüsün yapısı, biyolojisi, kimyasal bileşimi ve replikasyon mekanizmaları incelenmiştir. Yeni virüslerin keşfi ve araştırılması devam ediyor ve çeşitlilikleriyle şaşırtmaya devam ediyorlar. Böylece 2003 yılında bilinen en büyük virüs olan mimivirüs keşfedildi.

Çok sayıda virüsün keşfi gerekli koleksiyonlarını ve müzelerini oluşturmak. Bunların en büyüğü Rusya'da (Moskova'daki D.I. Ivanovsky Viroloji Enstitüsü'nde virüslerin devlet koleksiyonu), ABD (Washington), Çek Cumhuriyeti (Prag), Japonya (Tokyo), Büyük Britanya (Londra), İsviçre (Lozan) ve Almanya (Brunschweig). Viroloji alanındaki bilimsel araştırmaların sonuçları bilimsel dergilerde yayınlanmakta ve her 3 yılda bir düzenlenen (ilk kez 1968'de düzenlenen) uluslararası kongrelerde tartışılmaktadır. 1966 yılında 9. Uluslararası Mikrobiyoloji Kongresi'nde ilk kez Uluslararası Virüs Taksonomisi Komitesi (ICTV) seçildi.

Genel yani moleküler viroloji çerçevesinde virüsler ve hücreler arasındaki etkileşimin temel prensipleri üzerine çalışmalar devam etmektedir. Moleküler biyoloji, viroloji, genetik, biyokimya ve biyoinformatik alanlarındaki ilerlemeler, virüslerin öneminin sadece bulaşıcı hastalıklara neden olmaları ile sınırlı olmadığını göstermiştir.

Bazı virüslerin replikasyon özelliklerinin, virüsün hücresel genleri yakalayıp bunları başka bir hücrenin genomuna aktarmasına yol açtığı gösterilmiştir - genetik bilginin yatay aktarımı, bu hem evrimsel açıdan hem de hücrelerin kötü huylu dejenerasyonu açısından sonuçlar doğurabilir .

İnsanların ve diğer memelilerin genomunu sıralarken, komşu genlerin ekspresyonunu etkileyen düzenleyici diziler içerebilen hatalı viral diziler - retrotranspozonlar (endojen retrovirüsler) olan çok sayıda tekrarlayan nükleotid dizisi tanımlandı. Keşifleri ve çalışmaları, virüslerin tüm organizmaların evrimindeki, özellikle de insanın evrimindeki rolüne ilişkin aktif tartışma ve araştırmalara yol açtı.

Virolojide yeni bir yön virüslerin ekolojisi. Doğadaki virüsleri tespit etmek, tanımlamak ve bolluklarını tahmin etmek oldukça zor bir iştir. Şu anda, doğal örneklerde belirli virüs gruplarının, özellikle bakteriyofajların miktarının tahmin edilmesini ve bunların kaderinin izlenmesini mümkün kılan bazı metodolojik teknikler geliştirilmiştir. Virüslerin çok sayıda biyojeokimyasal süreç üzerinde önemli bir etkiye sahip olduğunu, bakteri ve fitoplanktonun bolluğunu ve tür çeşitliliğini etkili bir şekilde düzenlediğini gösteren ön veriler elde edildi. Ancak virüslerin bu açıdan incelenmesi henüz yeni başlamıştır ve bilimin bu alanında hala çözülmemiş birçok sorun bulunmaktadır.

Genel virolojinin başarıları, uygulama alanlarının gelişimine güçlü bir ivme kazandırmıştır. Viroloji; biyoloji, tıp ve tarım için önemli olan geniş bir bilgi alanı haline geldi.

Virologlar insanlarda ve hayvanlarda viral enfeksiyonları teşhis eder, yayılmalarını inceler ve önleme ve tedavi yöntemleri geliştirir. En büyük başarı çocuk felci, çiçek hastalığı, kuduz, hepatit B, kızamık, sarı humma, ensefalit, grip, kabakulak ve kızamıkçığa karşı aşıların yaratılmasıydı. Bir tür kanser gelişimiyle ilişkili olan papilloma virüsüne karşı bir aşı oluşturuldu. Aşılama sayesinde çiçek hastalığı tamamen ortadan kaldırıldı. Çocuk felci ve kızamığın tamamen ortadan kaldırılmasına yönelik uluslararası programlar uygulanmaktadır. Hepatit ve insan bağışıklık yetersizliğinin (AIDS) önlenmesi ve tedavisine yönelik yöntemler geliştirilmektedir. Antiviral aktiviteye sahip maddelere ilişkin veriler birikmektedir. Onlara dayanarak, AIDS, viral hepatit, grip ve herpes virüsünün neden olduğu hastalıkların tedavisi için bir dizi ilaç oluşturulmuştur.

Bitki virüsleri ve bunların bitki genelinde dağılım özelliklerinin incelenmesi, tarımda yeni bir yönün yaratılmasına yol açmıştır - virüssüz ekim materyali üretimi. Virüssüz bitki yetiştirmeyi mümkün kılan Meristem teknolojileri şu anda patates, birçok meyve ve çiçek bitkisinde kullanılıyor.

Bu aşamada genetik mühendisliğinin gelişimi için virüslerin yapısı ve genomları hakkında biriken bilgi son derece önemlidir. Bunun dikkate değer bir örneği, klonlanmış dizilerden oluşan kütüphaneler üretmek için bakteriyofaj lambdanın kullanılmasıdır. Ek olarak, çeşitli virüslerin genomlarına dayanarak, yabancı genetik bilgiyi hücrelere iletmek için çok sayıda genetiği değiştirilmiş vektör oluşturulmuş ve oluşturulmaya devam etmektedir. Bu vektörler bilimsel araştırmalarda, yabancı proteinlerin özellikle bakteri ve bitkilerde birikmesinde ve gen terapisinde kullanılır. Genetik mühendisliği şu anda ticari olarak üretilen bazı viral enzimleri kullanır.

Küçük boyutlar ve düzenli yapılar oluşturma yeteneği, nanoteknolojide virüslerin yeni biyoinorganik malzemeler üretmek için kullanılması ihtimalini ortaya çıkardı: nanotüpler, nanoiletkenler, nanoelektrotlar, nanokapsidasyonlar, inorganik bileşiklerin kapsüllenmesi için, manyetik nanopartiküller ve sıkı kontrol edilen boyutlarda inorganik nanokristaller. Düzenli olarak organize edilen viral protein yapılarının metal içeren inorganik bileşiklerle etkileşimi yoluyla yeni malzemeler oluşturulabilir. “Küresel” virüsler, ilaçların ve terapötik genlerin hücrelere depolanması ve iletilmesi için nanokaplar olarak hizmet edebilir. Yüzeyi değiştirilmiş bulaşıcı viryonlar ve viral altyapılar nanoaraçlar olarak kullanılabilir (örneğin, biyokataliz veya güvenli aşıların üretimi amacıyla).
17. Bakteriyofaj titresi, belirlenmesi için yöntemler. Hayvan ve bitki virüslerinin tanımlanması.

Bakteriyofaj titresi, incelenen materyalin birim hacmi başına aktif faj parçacıklarının sayısıdır. Bir bakteriyofajın titresini belirlemek için, bakteriyofajlarla çalışırken en yaygın olarak agar katmanı yöntemi kullanılır. , 1936 yılında A. Grazia tarafından önerilmiştir. Bu yöntem, uygulama kolaylığı ve elde edilen sonuçların doğruluğu ile ayırt edilir ve aynı zamanda bakteriyofajların izolasyonunda da başarıyla kullanılır.

Yöntemin özü, bir bakteriyofaj süspansiyonunun hassas bakteri kültürü ile karıştırılması, düşük konsantrasyonlu bir agara ("yumuşak agar") eklenmesi ve bir Petri kabında önceden hazırlanmış %1,5 besinli agarın yüzeyine tabaka halinde yayılmasıdır. Klasik Grazia yönteminde üst katman olarak %0,6 oranında su (“aç”) kullanıldı. - Şu anda %0,7 besinli agar bu amaçlar için en sık kullanılmaktadır. 6-18 saat inkübe edildiğinde bakteriler, agarın üst "yumuşak" tabakası içinde birçok koloni şeklinde çoğalır ve substrat olarak kullanılan %1,5 besinli agarın alt tabakasından besin alır. Üst katmandaki düşük agar konsantrasyonu, viskozitenin azalmasına neden olur, bu da faj parçacıklarının iyi difüzyonunu ve bakteri hücrelerine enfeksiyonunu destekler. Enfekte olmuş bakteriler parçalanmaya maruz kalır ve sonuçta kendilerine yakın olan bakterileri tekrar enfekte eden yavru faj ortaya çıkar. T grubu fajlar için negatif koloni oluşumuna yalnızca bir bakteriyofaj partikülü neden olur ve bu nedenle negatif kolonilerin sayısı, test numunesindeki plak oluşturan birimlerin içeriğinin niceliksel bir göstergesi olarak hizmet eder.

Faj duyarlı bakteri kültürü, sürekli bir bakteri çimi sağlamak için logaritmik büyüme aşamasında minimum miktarda kullanılır. Her bir faj-bakteri sistemi için faj parçacıkları ve bakteri hücrelerinin sayısı (enfeksiyon çokluğu) oranı, bir plaka üzerinde 50-100 negatif koloni oluşturulacak şekilde deneysel olarak seçilir.

Bir bakteriyofajı titre etmek için, besin agarlı bir plakanın yüzeyine bakteri ve bakteriyofaj süspansiyonlarının eklenmesinden ve ardından karışımın bir cam spatula ile dağıtılmasından oluşan tek katmanlı bir yöntem de kullanılabilir. Ancak bu yöntemin doğruluğu agar katmanı yöntemine göre daha düşüktür ve bu nedenle yaygın olarak kullanılmaz.

Bakteriyofajların titrasyonu ve yetiştirilmesi tekniği. Bakteriyofaj titresini belirlemek için, başlangıç ​​faj süspansiyonu sırayla bir tampon çözeltisi veya et suyu içinde seyreltilir (seyreltme adımı 10-1). Her seyreltme için ayrı bir pipet kullanın ve karışım kuvvetlice karıştırın. Süspansiyonun her seyreltilmesinden sonra faj, hassas bakteri E. coli B'den oluşan bir alana "tohumlanır". Bunu yapmak için, seyreltilmiş fajın 1 ml'si, eritilmiş 3 ml "yumuşak agar" içeren bir test tüpüne eklenir ve 48-50°C'ye soğutulduktan sonra her test tüpüne logaritmik büyüme aşamasında hassas bir mikroorganizmanın (E. coli B) 0,1 ml kültürü eklenir. İçerikler, test tüpünü avuç içi arasında döndürerek ve kabarcık oluşumundan kaçınarak karıştırılır. Daha sonra bunu hızlı bir şekilde bir Petri kabındaki agar (%1,5) besin ortamının yüzeyine dökün ve kabı hafifçe sallayarak üzerine eşit şekilde dağıtın. Agar katmanı yöntemini kullanarak titre ederken, aynı faj seyreltmesinden en az iki plaka paralel olarak aşılanmalıdır. Üst katman sertleştikten sonra kaplar ters çevrilerek hassas bakterilerin gelişimi için ideal olan 37°C sıcaklığa sahip bir termostata yerleştirilir. Sonuçlar 18-20 saatlik inkübasyondan sonra kaydedilir.

Negatif kolonilerin sayısı, bakteri kolonilerinin sayılmasıyla aynı şekilde sayılır ve faj titresi aşağıdaki formül kullanılarak belirlenir:

N, test materyalinin 1 ml'sindeki faj parçacıklarının sayısıdır; n, plaka başına ortalama negatif koloni sayısıdır; D - seyreltme numarası; V, aşılanan numunenin hacmidir, ml.

Enfeksiyonun çokluğunun belirlenmesinin gerekli olduğu durumda, 1 ml besin suyu içindeki E. coli B bakterisinin canlı hücrelerinin titresi paralel olarak belirlenir. Bunu yapmak için, bakteri hücrelerinin başlangıç ​​süspansiyonunu 10 -6'ya kadar seyreltin ve bunu (0,1 mi) paralel olarak 2 bardağa aşılayın. 37°C'de 24 saat inkübasyonun ardından Petri kabı üzerinde oluşan kolonilerin sayısı sayılır ve hücre titresi belirlenir.

Virüsleri insanlardan, hayvanlardan ve bitkilerden izole etmek için, incelenen materyal, virüslere duyarlı deney hayvanlarının ve bitkilerin vücuduna sokulur veya hücre (doku) kültürlerini ve organ kültürlerini enfekte eder. Virüsün varlığı, deney hayvanlarında (veya bitkilerde) ve doku kültürlerinde, mikroskobik veya sitokimyasal incelemeyle tanınan sitopatik etki olarak adlandırılan hücrelere verilen hasarla karakteristik hasarla kanıtlanır. V. ve. “plak yöntemi” kullanılır - virüsün biriktiği bölgelerdeki hücrelerin tahribatı veya hasarından kaynaklanan hücre katmanındaki kusurların gözlemlenmesi. Farklı virüsler arasında karakteristik bir yapıya sahip olan viryonlar, elektron mikroskobu ile tespit edilebilmektedir. Virüslerin daha ileri tanımlanması fiziksel, kimyasal ve immünolojik yöntemlerin entegre kullanımına dayanmaktadır. Bu nedenle virüsler, kabuklarındaki lipitlerin varlığı veya yokluğuyla ilişkili olan etere karşı duyarlılık açısından farklılık gösterir. Virüs nükleik asidinin türü (RNA ve DNA) kimyasal veya sitokimyasal yöntemlerle belirlenebilir. Viral proteinleri tanımlamak için, hayvanların karşılık gelen virüslerle aşılanmasıyla elde edilen serumlarla serolojik reaksiyonlar kullanılır. Bu reaksiyonlar sadece virüs türlerini değil aynı zamanda çeşitlerini de tanımayı mümkün kılar. Serolojik araştırma yöntemleri, insanlarda ve yüksek hayvanlarda viral bir enfeksiyonun kandaki antikorların varlığıyla teşhis edilmesini ve aralarındaki virüs dolaşımının incelenmesini mümkün kılar. İnsan, hayvan, bitki ve bakterilerin gizli (gizli) virüslerini tanımlamak için özel araştırma yöntemleri kullanılır.

Belediye devlet eğitim kurumu

"3 Nolu Ortaokul"

Stavropol bölgesi, Stepnovsky bölgesi,
Bogdanovka köyü

MKOU Ortaokulu 3 Nolu, 10. Sınıf Öğrencisi
Bilim danışmanı:

Toboeva Natalya Konstantinovna
coğrafya, biyoloji öğretmeni, MKOU ortaokulu 3 No'lu

BEN .Giriiş

II.Ana bölüm:

1. Virüslerin keşfi

2. Virüslerin kökeni

3. Yapı

4.Hücreye nüfuz

5. Grip

6. Su çiçeği 7. Kene kaynaklı ensefalit 8. Virolojinin geleceği

III.Sonuç

IV. Kaynakça

V.Ek

Çalışmanın amacı:

Hücresel olmayan yaşam formları virüslerdir.

Çalışma konusu:

Virolojinin bugünü ve geleceği.

Çalışmanın amacı:

Virolojinin günümüzdeki önemini öğrenin ve geleceğini belirleyin. Belirlenen hedefe aşağıdaki çözümlerin bir sonucu olarak ulaşılabilir: görevler:

1) hücresel olmayan yaşam formları olarak virüslerin yapısını kapsayan literatürün incelenmesi;

2) viral hastalıkların nedenlerini ve bunların önlenmesini araştırmak.

Bu araştırmamın konusunu belirledi.

BEN. Giriiş.

Virolojinin aksiyon dolu ve büyüleyici tarihi, muzaffer zaferlerle birlikte ne yazık ki yenilgilerle de karakterize edilir. Virolojinin gelişimi moleküler genetiğin parlak başarılarıyla ilişkilidir.

Virüslerin incelenmesi, genlerin ince yapısının anlaşılmasına, genetik kodun çözülmesine ve mutasyon mekanizmalarının belirlenmesine yol açmıştır.

Virüsler genetik mühendisliği ve araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır.

Ancak kurnazlıkları ve uyum sağlama yetenekleri sınır tanımıyor; her durumda davranışları tahmin edilemez. Virüslerin kurbanları çiçek hastalığı, sarı humma, AIDS ve diğer hastalıklardan ölen milyonlarca insandır. Keşfedilecek ve öğrenilecek çok şey var. Yine de virolojideki ana başarılar, belirli hastalıklarla mücadelede elde edildi. Bu nedenle bilim insanları virolojinin üçüncü bin yılda öncü bir yer alacağını söylüyor.

Viroloji, zorlu düşmanı virüse karşı mücadelede insanlığa ne kazandırdı? Yapısı nedir, nerede ve nasıl yaşar, nasıl ürer, başka ne gibi “sürprizler” hazırlar? Bu soruları çalışmamda dikkate aldım.

II.Ana bölüm:

1. Virüslerin keşfi.

Virüs dünyasının kaşifi Rus botanikçi D.I. 1891-1892'de ısrarla tütün mozaiği hastalığının etken maddesini aradı. Bilim adamı, hastalıklı tütün yapraklarının ovulmasıyla elde edilen sıvıyı inceledi. Tek bir bakterinin bile geçmesine izin vermemesi gereken filtrelerden süzdüm. Sabırla, mozaik tütün yapraklarından aldığı litrelerce suyu, uzun mumları andıran ince gözenekli porselenden yapılmış içi boş bakteri filtrelerine pompaladı. Filtrenin duvarları, önceden sterilize edilmiş bir kaba akan şeffaf damlacıklarla terliyordu. Bilim adamı, hafifçe ovalayarak, bu filtrelenmiş meyve suyundan bir damlayı tütün yaprağının yüzeyine uyguladı. 7-10 gün sonra, önceden sağlıklı olan bitkilerde şüphesiz mozaik hastalığı belirtileri görüldü. Enfekte olmuş bir bitkiden süzülmüş bir damla meyve suyu, mozaik hastalığı olan diğer tütün çalılarını etkiledi. İstila, bir sazdan çatıdan diğerine ateş alevi gibi sonsuz bir şekilde bitkiden bitkiye geçebilir.

Daha sonra, en gelişmiş ışık mikroskoplarıyla görülebilen, insanlarda, hayvanlarda ve bitkilerde bulaşıcı hastalıkların diğer birçok viral patojeninin geçebildiğini tespit etmek mümkün oldu. Çeşitli virüslerin parçacıkları yalnızca her şeyi gören bir cihazın (yüzbinlerce kez büyütme sağlayan bir elektron mikroskobu) penceresinden görülebiliyordu.

kendisi Ivanovsky, deneyimini ayrıntılı olarak anlatmasına rağmen bu gerçeğe pek önem vermedi.

Çalışmaları, Hollandalı botanikçi ve mikrobiyolog Martin Beijerinck'in 1899'da D. I. Ivanovsky'nin araştırmasının sonuçlarını doğrulamasıyla ün kazandı. M. Beyerinck, tütün mozaiğinin süzüntüler kullanılarak bir bitkiden diğerine aktarılabileceğini kanıtladı. Bu çalışmalar virüslerle ilgili çalışmaların başlangıcını ve virolojinin bir bilim olarak ortaya çıkışını işaret ediyordu.

2. Virüslerin kökeni.

3. Yapı.

Tamamen ilkel canlılar olan virüsler, canlı organizmaların tüm temel özelliklerine sahiptir. Üreme yöntemleri kendine özgü olmasına ve birçok açıdan diğer canlıların üremesi hakkında bilinenlerden farklı olmasına rağmen, orijinal ebeveyn formlarına benzer yavrular üretirler. Metabolizmaları konakçı hücrelerin metabolizmasıyla yakından ilişkilidir. Tüm canlı organizmaların kalıtım özelliğine sahiptirler. Son olarak, diğer tüm canlılar gibi onlar da değişkenlik ve değişen çevre koşullarına uyum sağlama özellikleriyle karakterize edilir.

En büyük virüsler (örneğin çiçek hastalığı virüsleri) 400-700 nm büyüklüğe ulaşır ve boyut olarak küçük bakterilere yakındır, en küçükleri (çocuk felci, ensefalit, ayak-ağız hastalığının etken maddeleri) yalnızca onlarca nanometre ölçer, yani. büyük protein moleküllerine, özellikle kandaki hemoglobin moleküllerine yakındır.

Virüsler küreselden filamentliye kadar çeşitli şekillerde gelir. Elektron mikroskobu yalnızca virüsleri görmeyi, şekillerini ve boyutlarını belirlemeyi değil, aynı zamanda uzaysal yapılarını - moleküler mimariyi de incelemeyi sağlar.

Nispeten basit bir bileşim, virüsler için tipiktir: nükleik asit (RNA veya DNA), protein; daha karmaşık yapılar, karbonhidratlar ve lipitler içerir ve bazen kendi enzimlerine sahiptir.

Kural olarak, nükleik asit viral partikülün merkezinde bulunur ve bir protein kabuğu - kapsomerler tarafından olumsuz etkilerden korunur. Elektron mikroskobu gözlemleri virüs parçacığının

(veya viryonlar) şekil olarak birkaç temel tipte gelir.

Bazı virüsler (genellikle en basit olanları) düzenli geometrik cisimlere benzer. Protein kabukları neredeyse her zaman eşkenar üçgen yüzleri olan bir ikosahedron (normal yirmi kenarlı yapı) şekline yaklaşır. Bu virionlara kübik denir (çocuk felci virüsü gibi). Böyle bir virüsün nükleik asidi genellikle bir top şeklinde bükülür. Diğer virüslerin parçacıkları dikdörtgen çubuklar şeklindedir. Bu durumda nükleik asitleri silindirik bir kapsid ile çevrilidir. Bu tür virionlara sarmal viryonlar (örneğin tütün mozaik virüsü) adı verilir.

Daha karmaşık yapıya sahip virüsler, ikosahedral veya sarmal kapside ek olarak, çeşitli proteinlerin (çoğu enzim) yanı sıra lipitler ve karbonlardan oluşan bir dış kabuğa da sahiptir.

Dış kabuğun fiziksel yapısı çok çeşitlidir ve kapsidinki kadar kompakt değildir. Örneğin, herpes virüsü zarflı sarmal bir viryondur. Daha da karmaşık yapıya sahip virüsler var. Bu nedenle, çiçek hastalığı virüsünün görünür bir kapsid'i (protein kabuğu) yoktur, ancak nükleik asidi birkaç kabukla çevrilidir.

4.Hücreye nüfuz.

Kural olarak, bir virüsün bir hücrenin sitoplazmasına nüfuz etmesinden önce, hücre yüzeyinde bulunan özel bir reseptör proteinine bağlanması gerçekleşir. Reseptöre bağlanma, viral hücrenin yüzeyinde özel proteinlerin bulunması nedeniyle oluşur. Virüsün hücre yüzeyinde tutunduğu bölge sitoplazmaya daldırılarak vakuole dönüşür. Bir vakuol, diğer vakuoller veya çekirdek ile birleşebilen sitoplazmik bir zardan oluşan bir duvardır. Bu şekilde virüs hücrenin herhangi bir yerine iletilir.

Virüsün hücreye nüfuz etmesine yönelik reseptör mekanizması, bulaşıcı sürecin özgüllüğünü sağlar. Bulaşıcı süreç, hücreye giren virüsler çoğalmaya başladığında başlar; viral genomun çoğaltılması ve kapsidin kendiliğinden birleşmesi meydana gelir. Reduplikasyonun gerçekleşmesi için nükleik asidin kapsidden arındırılması gerekir. Yeni bir nükleik asit molekülünün sentezinden sonra, konakçı hücrenin sitoplazmasında sentezlenen viral proteinlerle kaplanır - bir kapsid oluşur.

Viral partiküllerin birikmesi hücreden eliminasyona yol açar. Bazı virüslerde bu durum, hücrenin bütünlüğünün bozulduğu ve öldüğü bir “patlama” ile gerçekleşir. Diğer virüsler tomurcuklanmayı anımsatan bir şekilde salınır. Bu durumda hücreler canlılıklarını koruyabilirler.

Bakteriyofaj virüslerinin hücrelere girme yöntemi farklıdır. Bakteriyofaj, hücrenin içine dolu bir çubuk sokar ve kafasında bulunan DNA'yı (veya RNA'yı) bunun içinden dışarı iter. Bakteriyofaj genomu girer

Sitoplazma ve kapsid dışarıda kalır. Bakteriyel sitoplazmada bakteriyofaj genomunun çoğaltılması, proteinlerinin sentezi ve kapsid oluşumu başlar. Belirli bir süre sonra bakteri hücresi ölür ve olgun parçacıklar ortama karışır.

5. Grip.

Grip, etken maddesi filtre virüsü olan, genel zehirlenmeye ve üst solunum yolunun mukoza zarında hasara neden olan akut bulaşıcı bir hastalıktır.

İnfluenza virüsünün, antijenik yapıları bakımından farklılık gösteren çeşitli serolojik tiplere sahip olduğu artık tespit edilmiştir.

Aşağıdaki grip virüsü türleri vardır: A, B, C, D. A virüsünün 2 alt türü vardır:A 1 ve A2.

İnfluenza virüsü insan vücudunun dışında kararsızdır ve çabuk ölür. Vakumda kurutulan virüs uzun süre dayanabilir.

Dezenfektanlar virüsü hızla yok eder; ultraviyole radyasyon ve ısının da virüs üzerinde zararlı etkisi vardır.

Bir virüs taşıyıcısından bulaşma olasılığına izin verin. Virüs, hasta bir kişiden sağlıklı bir kişiye havadaki damlacıklar yoluyla bulaşır. Öksürme ve hapşırma enfeksiyonun yayılmasına katkıda bulunur.

Viral influenza salgınları çoğunlukla soğuk mevsimde meydana gelir.

Grip olan bir kişi 5-7 gün boyunca bulaşıcıdır. Grip olmayan herkes bu hastalığa karşı hassastır. Grip geçirdikten sonra bağışıklık 2-3 yıl kadar kalır.

Kuluçka süresi kısadır - birkaç saatten 3 güne kadar. Çoğu zaman 1-2 gün.

Genellikle hiçbir prodrom yoktur ve ani bir başlangıç ​​tipiktir. Titreme, baş ağrısı, genel halsizlik ortaya çıkar ve sıcaklık 39-40 dereceye yükselir. Hastalar gözleri döndürürken ağrı, kas eklemlerinde ağrı, uyku bozukluğu ve terlemeden şikayetçidir. Bütün bunlar, sinir sisteminin sürece dahil olmasıyla genel zehirlenmeyi gösterir.

Merkezi sinir sistemi, klinik olarak şiddetli dinamizm, sinirlilik ve koku ve tat duyusunun azalmasıyla kendini gösteren influenza virüsünün toksik etkilerine karşı özellikle hassastır.

Sindirim sistemi kısmında grip zehirlenmesi olgusu da farklılık gösterir: iştah azalması, dışkı tutma ve bazen küçük çocuklarda daha sık ishal.

Dil kaplanmıştır ve hafifçe şişmiştir, bu da kenarlarda diş izlerinin ortaya çıkmasına neden olur. Sıcaklık 3-5 gün boyunca yüksek kalır ve komplikasyon olmadığında yavaş yavaş normale düşer veya kritik bir şekilde düşer.

1-2 gün sonra burun akıntısı, larenjit ve bronşit ortaya çıkabilir. Burun kanaması yaygındır. Öksürük başlangıçta kuru olup balgamlı öksürüğe dönüşür. Damar bozuklukları; düşük tansiyon, nabız dengesizliği ve ritmindeki bozukluklar şeklinde ifade edilir.

Komplike olmayan grip genellikle 3-5 gün içinde sona erer, ancak tam iyileşme 1-2 hafta sürer.

Her enfeksiyon gibi grip de hafif, şiddetli, hipertoksik ve fulminan formlarda ortaya çıkabilir.

Bununla birlikte viral grip son derece hafif seyredebilir ve bacaklara yayılarak 1-2 gün içinde sona erebilir. Bu grip formlarına silinmiş denir.

Grip enfeksiyonu çeşitli organ sistemlerinde komplikasyonlara neden olabilir. Çoğu zaman çocuklarda grip, ateş, anksiyete ve uyku bozukluklarının eşlik ettiği zatürre, otitis media ile komplike hale gelir.

Periferik sinir sisteminden kaynaklanan komplikasyonlar nevralji, nevrit, radikülit şeklinde ifade edilir.

Tedavi:

Hastaya yatak istirahati ve istirahat sağlanmalıdır. Sıcaklık düştükten sonra bile bir süre yatak istirahatine devam edilmelidir. Odanın sistematik olarak havalandırılması, günlük ılık veya sıcak banyolar, iyi beslenme - tüm bunlar vücudun griple mücadeleye karşı direncini artırır.

Viral influenzanın spesifik tedavisi, A.A. tarafından önerilen anti-influenza çok değerlikli serum kullanılarak gerçekleştirilir. Smorodintsev.

Baş ağrısı, kas ve eklem ağrılarının yanı sıra nörolojik ağrı için semptomatik ilaçlar arasında piramit, fenasetin ve kafeinli aspirin reçete edilir.

Şiddetli toksikoz durumunda intravenöz glikoz reçete edilir. Komplike olmayan gripte antibiyotik kullanılmaz çünkü Artık virüs üzerinde çalışmıyorlar. Kuru öksürük için sodalı sıcak süt veya Borjomi faydalıdır.

Önleme:

Hastalar evde veya hastanelerde izole edilmelidir. Hastanın evde kalması durumunda ayrı bir odaya yerleştirilmesi veya yatağının bir perde veya çarşaf ile ayrılması gerekir. Bakıcılar burun ve ağzı kapatan gazlı bez maskesi takmalıdır.

6. Suçiçeği.

Suçiçeği, bir virüsün neden olduğu, ciltte ve mukoza zarlarında makula veziküler döküntü ile karakterize akut bulaşıcı bir hastalıktır.

Su çiçeği hastalığının etken maddesi bir filtre virüsüdür ve su çiçeği keseciklerinde ve kanda bulunur. Virüs kararsızdır ve çeşitli çevresel etkilere maruz kalır ve hızla ölür.

Enfeksiyonun kaynağı döküntü döneminde ve kuluçka sonunda bulaşıcı olan hastadır. Enfeksiyon havadaki damlacıklar yoluyla yayılır. Hastalık nesneler aracılığıyla bulaşmaz.

Suçiçeği sonrası bağışıklık ömür boyu kalır. Kuluçka süresi 11 ile 21 gün arasında olup ortalama 14 gündür.

Çoğu durumda, hastalık hemen başlar ve yalnızca bazen genel halsizlik semptomlarıyla birlikte sıcaklıkta orta derecede bir artış şeklinde öncüller vardır. Prodromlara kızıl veya kızamığa benzeyen döküntüler eşlik edebilir.

Orta dereceli bir sıcaklık artışıyla birlikte, iğne başından mercimeğe kadar vücudun farklı yerlerinde farklı boyutlarda benekli bir döküntü belirir. Sonraki birkaç saat içinde lekelerin yerinde kırmızı bir çerçeveyle çevrelenmiş şeffaf içerikli bir kabarcık oluşur. Suçiçeği kabarcıkları (veziküller) değişmemiş cilt üzerinde bulunur, yumuşak ve dokunuşa yumuşaktır. Kabarcığın içeriği kısa sürede bulanıklaşır ve kabarcığın kendisi patlar (2-3 gün) ve bir kabuğa dönüşür; bu kabuk 2-3 hafta sonra kaybolur ve genellikle iz bırakmaz. Döküntü ve bunu takip eden kabarcık oluşumu, tüm kafa derisini, gövdeyi ve uzuvları etkileyecek şekilde bol miktarda olabilirken, yüz ve uzuvların uzak kısımlarında daha az miktarda bulunur.

Suçiçeği seyrine genellikle hastanın genel durumunda hafif bir rahatsızlık eşlik eder. Her yeni döküntü, sıcaklığın 38° ve üzerine çıkmasına neden olur. Aynı zamanda iştah da azalır.

Deriye ek olarak, tavuk döküntüsü ağız boşluğu, konjonktiva, cinsel organlar, gırtlak vb. Mukoza zarlarını da etkileyebilir.

Tedavi:

Yatak çarşafları her zaman temiz olmalıdır. Zayıf potasyum permanganat çözeltilerinden ılık banyolar (35°-37°) yapın. Hastanın elleri kısa kesilmiş tırnaklarla temiz olmalıdır.

Bireysel kabarcıklar, iyot veya potasyum çözeltisi,% 1'lik parlak yeşil alkol çözeltisi ile yağlanır.

Sekonder enfeksiyonun neden olduğu cerahatli komplikasyonlar için tedavi antibiyotiklerle (penisilin, streptomisin, biyomisin) gerçekleştirilir.

Önleme:

Su çiçeği bulaşmış bir kişinin evde izole edilmesi gerekir. Dezenfeksiyon yapılmaz, oda havalandırılır ve ıslak temizliğe tabi tutulur.

7. Kene kaynaklı ensefalit.

Beynin ve omuriliğin gri maddesinin hasar görmesi ile karakterize akut viral bir hastalıktır. Enfeksiyon kaynaklarının rezervuarı vahşi hayvanlar (çoğunlukla kemirgenler) ve iksodid kenelerdir. Enfeksiyon sadece kenenin emilmesiyle değil aynı zamanda enfekte keçilerin sütünün tüketilmesiyle de mümkündür. Etken ajan bir arbovirüstür. Enfeksiyonun giriş kapısı deridir (keneler emilirse) veya sindirim sisteminin mukozasıdır (eğer sindirim sistemi enfeksiyonu varsa). Virüs, merkezi sinir sistemine hematojen olarak nüfuz eder ve servikal omuriliğin ön boynuzlarının sinir hücrelerinde ve medulla oblongata'nın çekirdeklerinde en belirgin değişikliklere neden olur.

Kuluçka süresi 8 ila 23 gün arasındadır (genellikle 7-14 gün). Hastalık akut bir şekilde başlar: titreme, şiddetli baş ağrısı ve halsizlik ortaya çıkar. Ensefalit sonrası kalıcı sonuçlar, boyun ve omuz kuşağı kaslarının sarkık felci şeklinde kalabilir.

Tedavi:

Sıkı yatak istirahati:

hafif formlar için - 7-10 gün,

orta dereceli vakalar için - 2-3 hafta,

şiddetli olanlar için - daha da uzun.

Önleme:

Ensefalit için uygun olmayan bir bölgede kene ısırdığında, anti-ensefalit gama globulin verilmesi gerekir. Endikasyonlara göre koruyucu aşılama yapılır.

8. Virolojinin geleceği.

21. yüzyılda virolojinin gelişmesi için beklentiler nelerdir? 20. yüzyılın ikinci yarısında virolojideki ilerleme biyokimya, genetik ve moleküler biyolojideki klasik keşiflerle ilişkilendirildi. Modern viroloji, temel uygulamalı bilimlerin başarılarıyla iç içe geçmiştir, bu nedenle daha da geliştirilmesi, daha önce bilinmeyen yeni patojenlerin (prionlar ve viryonlar) virüslerinin patojenitesinin moleküler temelinin, viryonların doğasının ve mekanizmalarının derinlemesine incelenmesi yolunu izleyecektir. virüslerin kalıcılığı, ekolojisi, yenilerinin geliştirilmesi ve mevcut teşhis yöntemlerinin iyileştirilmesi ve viral hastalıkların spesifik olarak önlenmesi.

Şu anda virolojide enfeksiyonların önlenmesinden daha önemli bir husus yoktur. Virüsler ve viral hastalıklar biliminin 100 yılı aşkın süredir aşılar, Pasteur'ün zamanından bu yana zayıflatılmış ve öldürülmüş aşılardan modern genetiği değiştirilmiş ve sentetik aşı preparatlarına kadar büyük değişiklikler geçirmiştir. Doğumdan sonra mümkün olduğu kadar erken dönemde minimum düzeyde aşılama gerektiren çok değerlikli aşılar oluşturmak amacıyla fizikokimyasal genetik mühendisliği ve sentetik deneylere dayalı olarak bu yön gelişmeye devam edecektir. Virolojide nispeten yeni bir yaklaşım olan kemoterapi gelişecektir. Bu ilaçlar şu ana kadar yalnızca izole vakalarda faydalıdır.

III. Çözüm.

İnsanlık birçok karmaşık ve çözülmemiş virolojik sorunla karşı karşıyadır: gizli viral enfeksiyonlar, virüsler ve tümörler vb. Ancak günümüzde virolojinin gelişme düzeyi öyledir ki, enfeksiyonlarla mücadelenin yolları mutlaka bulunacaktır. Virüslerin yaşayan doğaya yabancı bir unsur olmadığını anlamak çok önemlidir; bunlar biyosferin gerekli bir bileşenidir; bunlar olmasaydı adaptasyon, evrim, bağışıklık savunması ve canlı nesnelerin çevreleriyle diğer etkileşimleri muhtemelen imkansız olurdu. Viral hastalıkları adaptasyon patolojileri olarak anlamak, onlara karşı mücadelenin virüsleri yok etmeyi değil, bağışıklık sisteminin durumunu iyileştirmeyi amaçlaması gerekir.

Çeşitli edebi kaynakların ve istatistiksel verilerin analizi, aşağıdaki sonuçları çıkarmamızı sağladı:

virüsler, hücre dışında gelişemeyen otonom genetik yapı bileşikleridir;

3) çeşitli şekillerde ve basit kompozisyonlarda gelirler.

Kaynakça:

1. Büyük Sovyet Ansiklopedisi: T.8 / Ed. B.A. Vvedensky.

2. Denisov I.N., Ulumbaev E.G. Rehber - pratisyen hekim için bir rehber - M.: Medicine, 1999.

3. Zverev Kimliği. İnsan anatomisi, fizyolojisi ve hijyeni üzerine okunacak bir kitap - M.: Eğitim, 1983.

4. Luria S. ve diğerleri Genel viroloji - M.: Mir, 1981.

6. Pokrovsky V.I. Popüler tıp ansiklopedisi - M .: Onyx, 1998.

7.Tokarık E.N. Viroloji: günümüz ve gelecek // Okulda Biyoloji - 2000. - No. 2-3.